产气荚膜梭菌α-β融合基因的高效表达

用PCR从含产气荚膜梭菌α毒素基因的质粒pXETA1中扩增出α毒素基因 ,用NcoI和BamHI双酶切该α毒素基因 ,回收 0 .95kb的α毒素基因片段 ,再用NcoI和BamHI双酶切含产气荚膜梭菌 β毒素基因质粒pXCPAB2 ,与上述回收的α毒素基因片段连接 ,转化至受体菌BL2 1(DE3)中。经NcoI、BamHI、NcoI酶切反应鉴定和核苷酸序列分析证实 ,获得了理想重组质粒pXCPAB2 ,该重组质粒含有α β融合基因。重组菌株BL2 1(DE3) (pXCPAB2 )经IPTG诱导后 ,其表达产物经ELISA检测和SDS_PAGE分析 ,结果表明重组菌株可以高效表达α β融合蛋白 ,该融合蛋白占菌体总蛋白的 2 2 .14%。