角膜基质细胞-PGA生物支架复合物体外培养研究

目的 研究角膜基质细胞与ＰＧＡ亲和力，为组织工程技术构建角膜提供重要的理论依据和参数。方法体外分离获得角膜基质细胞，经培养扩增后接种于ＰＧＡ，并对细胞－生物材料复合物进行体外培养，观察细胞生长代谢。应用ＭＴＴ技术测定角膜基质细胞与ＰＧＡ的黏附率。结果 角膜基质细胞能够在ＰＧＡ中黏附、伸展和分泌基质，ＭＴＴ测得细胞黏附率为 ７１．４０％。结论 角膜基质细胞与 ＰＧＡ具有较好的亲和力，ＰＧＡ可以作为构建角膜的生物材料。

组织工程技术构建角膜基质层的实验研究

目的 探索组织工程技术构建角膜的可行性 ,并为其提供构建角膜的理论依据和参数。方法 应用组织工程方法构建角膜基质层。对兔角膜组织行体外分离获得角膜基质细胞 ,经培养扩增后接种于聚羟基乙酸生物支架上 ,然后将角膜基质细胞 生物材料复合物植入裸鼠皮下 ,6周后将植入物取出 ,行免疫组织化学染色及胶原纤维图像分析。结果 光镜下 ,角膜基质细胞 生物材料复合物在裸鼠皮下所形成的新生组织呈网状板层结构。免疫组化染色 :新生组织Ⅰ型胶原表达阳性 ;胶原纤维图像分析 ,新生组织胶原纤维直径 (2 7 7± 6 2 0 )nm与正常角膜胶原纤维直径 (2 8 5± 3 5 2 )nm基质层相近。结论 组织工程方法所构建的角膜基质组织已具备角膜基质层的组织学特征。