大肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达及其意义

目的 探讨大肠癌患者外周血CK2 0mRNA的表达及其意义。方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测 4 2例大肠癌患者术前、术后外周血及 2 0例大肠癌患者新鲜癌组织标本中CK2 0mRNA的表达 ,另以 2 0例健康成年自愿者作对照。结果 4 2例大肠癌患者外周血CK2 0mRNA呈阳性表达者术前为 19例(45 .2 4 % ) ,术后为 14例 (33.33% ) ;2 0例大肠癌患者新鲜癌组织中CK2 0mRNA表达均为阳性。而正常对照组2 0例外周血CK2 0mRNA表达均为阴性。且大肠癌外周血CK2 0mRNA阳性表达与组织学类型无关 (P >0 .0 5 ) ,但与有无淋巴结转移、肝转移及Dukes分期有关 (P<0 .0 5 )。结论 检测外周血中CK2 0mRNA表达将有助于大肠癌的早期诊断、预后的判断及治疗方案的制定。

CK19、CK20 mRNA在上皮性恶性肿瘤患者外周血中的表达及其意义

目的 :分析上皮性恶性肿瘤患者外周血中CK19、CK2 0mRNA的表达水平 ,探讨其临床病理意义。方法 :随机选择和收集 5 3例上皮性恶性肿瘤患者的外周血 ,应用巢式RT PCR法联合检测其CK19、CK2 0mRNA表达情况。另取 15例上皮性肿瘤组织为阳性对照 ,15例非肿瘤患者外周血为阴性对照。结果 :5 3例肿瘤患者外周血中CK19阳性率为 3 5 .8% (19/5 3 ) ,CK2 0阳性率 41.5 % (2 2 /5 3 ) ,两者至少 1项阳性者 69.8% (3 1/5 3 )。 15例肿瘤组织中CK2 0阳性率为 10 0 % (15 /15 ) ,CK19阳性率 86% (13 /15 ) ;15例阴性对照CK19阳性 2例 ,CK2 0阳性 1例。结合肿瘤的临床病理资料分析 ,肿瘤患者外周血CK19、CK2 0mRNA阳性表达与肿瘤浸润深度、临床分期及淋巴结转移间存在明显的相关性 ,而与肿瘤患者的年龄、性别、肿瘤分化程度无明显相关。结论 :CK19、CK2 0mRNA可作为检测上皮性肿瘤外周血微转移的靶基因。联合检测肿瘤患者外周血CK19、CK2 0mRNA可增加外周血循环癌细胞的检测率。

RT-PCR检测膀胱移行细胞癌患者尿CK20 mRNA表达的研究

目的 探讨膀胱移行细胞癌 (TCCB)患者尿细胞角蛋白 2 0 (CK2 0 )mRNA表达及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 6 1例TCCB患者、19例非肿瘤患者及 11例健康志愿者尿脱落细胞CK2 0mRNA。结果 6 1例TCCB患者中 5 2例尿脱落细胞CK2 0阳性表达 ,阳性率为 85 .3% ,对照组 30例中 2例表达 ,阳性率为 6 .7%。各分期尿CK2 0mRNA阳性率T1为 83.9% (2 6 / 31) ,T2 4期 86 .7% (2 6 / 30 ) ,两者差异无统计学意义 ;分级G1为 82 .8% (2 4 / 2 9) ,G2 85 .0 % (17/ 2 0 ) ,G3 91.7% (11/ 12 ) ,三者之间差异无统计学意义。行保留膀胱手术患者 5 1例 ,其中 4 2例术前尿CK2 0mRNA表达阳性 ,术后36例阴性 ,术后转阴率 85 .7%。 5 1例中有 2 9例 (术后尿脱落细胞CK2 0阳性表达 4例 )随访 6个月 ,4例CK2 0阳性表达者有2例 (5 0 % )复发 ,2 5例CK2 0阴性表达有 1例 (4 % )复发 ,两者复发率比较有统计学差异 (P <0 .0 0 5 )。结论 RT PCR检测尿脱落细胞CK2 0mRNA表达是诊断TCCB一种简便方法 ,其敏感性为 85 .3% ,特异性为 93.3% ,有助于膀胱TCCB的早期诊断和预后观察 。

结肠癌患者外周血VEGF-C和CK20 mRNA的表达与淋巴转移的关系

目的探讨结肠癌患者外周血VEGF-C mRNA和CK20 mRNA的表达与淋巴转移的关系。方法应用RT-PCR检测80例结肠癌患者、30例结肠良性肿瘤患者、30例健康人外周血VEGF-C mRNA和CK20 mRNA的表达。结果 VEGF-C mRNA在结肠癌患者外周血的阳性表达率为52.5%,在结肠良性肿瘤、健康人的表达率分别为10.0%、0,其中有淋巴结转移的结肠癌患者的阳性表达明显高于无淋巴结转移的阳性表达(P<0.05)。CK20 mRNA在结肠癌患者外周血的阳性表达率为60.0%,在结肠良性肿瘤、健康人的表达率均为0,其中有淋巴结转移的结肠癌患者的阳性表达明显高于无淋巴结转移的阳性表达(P<0.05)。结论结肠癌患者外周血VEGF-C mRNA和CK20 mRNA的表达与淋巴转移相关。

大肠癌患者外周血CK20 mRNA的表达

临床上根据转移瘤和原发瘤形态结构近似的这一生物学特性对诊断转移瘤十分有帮助,通常采用免疫组织化学技术显示特殊成分 CK 及其单克隆抗体以识别上皮性肿瘤.近年来,一些学者应用靶向 CK20 mRNA 的逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测结直肠癌患者外周血中的肿瘤细胞.我们采用巢式逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法,以 CK20 mRNA为靶基因,检测32例大肠癌患者外周血中 CK20 mRNA 表达,CK20 mRNA 阳性表达可作为癌细胞血行播散的临床指标,结果如下.1 材料和方法1.1 材料大肠癌患者32例均为本院普外科住院病例,男19例,女13例.年龄27岁～74岁,平均55.7岁.32例均行手术治疗,其中大肠癌根治术21例,非根治性切除术组11例(姑息性切除术者8例,剖腹探查者3例),均经病理组织学证实.癌细胞分化程度:高分化者3例,中分化者17例,低分化者12例.Dukes 分期:A 期12例,B 期6例,C 期7例,D 期7例.有淋巴结转移者13例(40.6%),有远处转移者7例(21.8%).治愈出院者27例(84.4%),病情无明显变化者5例(15.6%).对照组10例(直肠息肉3例,胆囊结石3例,其他4例),分别于术前、术后48 h,7 d～14 d 抽取患者的外周血标本,采用 RT-PCR 法检测.另外还检测了3例原发性肝细胞肝癌患者外周血标本.1.2 方法从外周静脉中抽取血液4mL,置于肝素化的试管内立即混匀送实验室.有核细胞的制备采用密度梯度离心法.提取细胞总 RNA,采用 Trizal 抽提法.合成 cDNA,应用

结直肠癌血液CK20 mRNA检测对血液微转移诊断的意义

目的 研究结直肠癌患者血液中CK2 0mRNA对血液微转移的价值。方法 采用RT PCR技术对 5 0例结直肠癌患者的血液进行检测。结果 CK2 0mRNA阳性率 6 8% ( 34/5 0 ) ,阳性率与肿瘤Ducks分期之间相差显著 ,而与肿瘤病理类型相差不显著。10例结直肠良性病变均为阴性。结论 结直肠癌患者手术前、后检测血液中的CK2 0mRNA对于预测预后和指导治疗有重要的参考价值。

CK20 mRNA在腹腔镜结直肠癌根治术后对肿瘤细胞血循环微转移的影响

目的:探讨血清CK20mRNA与结直肠癌组织学、TNM分期的关系以及腹腔镜结直肠癌根治术后对肿瘤细胞血循环微转移的影响及其临床意义.方法:应用FQ-PCR方法检测20例健康成人(对照组)及55例结直肠癌患者(实验组),不同术式、手术前、后外周静脉血CK20mRNA的表达;分析血清CK20mRNA与肿瘤组织分化、TNM分期的关系.比较24例腹腔镜辅助下行结直肠癌根治术患者和31例传统开腹根治术患者外周静脉血CK20mRNA的表达.结果:对照组外周静脉血CK20mRNA阳性表达率为0;CK20mRNA阳性率(0.75)明显高于高、中分化腺癌组(0.23)(P<0.05).TNM分期Ⅲ期结直肠癌组外周静脉血CK20mRNA阳性表达率(0.43)显著高于Ⅰ期+Ⅱ期患者(0.22)(P<0.05).腹腔镜辅助下行结直肠癌根治术患者CK20mRNA阳性率术前(0.29),术后(0.38),与开腹组相比较差异均无统计学意义.结论:结直肠癌患者外周静脉血CK20mRNA水平与肿瘤分化、TNM分期有关;腹腔镜辅助下行结直肠癌根治术与传统开腹手术一样,并不增加外周静脉血CK20mRNA的阳性率和术后肿瘤血循环微转移的危险性.

CK20 mRNA和hTERT mRNA表达与大肠癌患者外周血微转移的临床研究

目的:检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA和人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标.方法:采用RT-PCR技术检测大肠癌32例、肠道良性病变11例和健康体检者20例的外周血中CK20mRNA和hTERT mRNA的定性和半定量表达.以人胃腺癌细胞株SGC-7901作阳性对照.实验数据采用SPSS13.0forWindows软件包统计分析.结果:①CK20mRNA和hTERT mRNA在大肠癌患者外周血中的阳性表达率分别为50.0%和56.2%,相对系数分别为0.89±0.17和0.88±0.17;在肠道良性病变患者外周血中阳性表达率分别为9.1%和0%,相对系数分别为0.11和0;在健康体检者外周血中阳性表达率及相对系数均为0.大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20mRNA和hTERTmRNA的表达均有统计学差异(P<0.05).②CK20mRNA和hTERT mRNA阳性表达率和相对系数与临床分期、远处转移均有关(P<0.05);其阳性表达率与浸润深度、淋巴结转移无关,但相对系数与之均有关(P<0.05).阳性表达者生存率低于阴性者(P<0.05).结论:大肠癌患者外周血中存在CK20mRNA和hTERT mRNA的表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示CK20mRNA和hTERTmRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后.

人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型及其血中CK20 mRNA表达的研究

目的 :建立人结肠癌裸鼠肝转移模型 ,检测血中 CK2 0 m RNA表达 ,应用于结肠癌肝转移的防治研究。方法 :BAL B/ C裸鼠 12只 ,腹腔内注射戊巴比妥钠麻醉 ,经脾脏注入指数生长期的人结肠癌低分化腺癌细胞悬液( L S174 t) 0 .1m l,含细胞数 1× 10 6 个 ,切除脾脏 ,喂养 2 0天后 ,建立人结肠癌裸鼠肝转移模型。随后 ,心脏采血检测血中 CK2 0 m RNA表达 ,处死裸鼠观察腹腔内肿瘤生长和肝转移癌灶数目及大小 ,作病理组织学检查。采用巢式逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)法 ,检测裸鼠血中 CK2 0 m RNA表达。结果 :12只裸鼠均建立人结肠癌裸鼠肝转移模型 ,无1只死亡。初期活跃如常体形无改变 ,10天后裸鼠出现消瘦、精神差 ,摄食量减少。裸鼠尸解肝脏表面均有灰白色转移癌结节形成 ,其它脏器未发现转移癌灶。病理组织学示肝转移癌灶具有人结肠癌低分化腺癌特征。血中 CK2 0 m RNA均阳性表达。结论 :经脾脏注入 L S174 t细胞悬液可建立人结肠癌裸鼠肝转移模型 ,裸鼠血中 CK2 0 m RNA阳性表达 ,证实血中存在着结肠癌细胞 ,是形成肝转移灶的条件。

胃癌患者外周血中CK20 mRNA的检测及其临床意义

目的:检测胃癌患者外周血中CK20 mRNA的表达情况,并探讨其存在的临床意义。方法:应用逆转录聚合酶链反应,检测66例胃癌、良性胃病患者38例及对照组40例外周血中的表达。结果:对照组40例及良性胃病组38例外周血中CK20 mRNA均为阴性表达。胃癌组外周血中阳性表达率为34.8%,胃癌患者外周血中的阳性表达率与肿瘤组织学类型、TNM分期具有相关性(P<0.05),与肿瘤的部位、病人性别无明显相关性(P>0.05)。手术后复查阳性表达率上升为60%,系手术操作所致。结论:胃癌患者外周血中的阳性表达可作为肿瘤细胞血行播散的标志,有助于胃癌预后的判断。手术操作可促使肿瘤细胞释放入血,胃癌手术中应采用“不接触肿瘤的游离技术”以减少癌细胞的播散。

荧光定量RT-PCR检测肺癌外周血CK19、CK20 mRNA表达

目的应用荧光定量RT-PCR(Fluorogenic quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肺癌外周血中微转移情况。方法用荧光定量RT-PGR方法检测103例肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA表达。结果103例肺癌患者外周血中CK19mRNA检测阳性35例,阳性率33.98%;CK20mRNA检测阳性17例,阳性率16.50%,其中6例患者CK19、CK20mRNA均阳性。统计结果显示外周血CK19、CK20mRNA的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关,与性别、年龄、病理类别无关。结论用荧光定量RT-PCR法检测肺癌患者外周血CK19mRNA和CK20mRNA具有较高的灵敏度和特异性,有助于早期筛选亚临床转移。

结直肠癌患者门静脉血CK20 mRNA检测的临床意义

目的:检测结直肠癌患者门静脉血CK20 mRNA的表达情况,探讨其临床意义。方法:用实时定量荧光逆转录聚合酶链(FQ-PCR)方法,检测了72例结直肠癌患者门静脉及周围静脉血CK20 mRNA的表达。结果:结直肠癌患者门静脉血CK20 mRNA表达的阳性率72%(52/72)高于周围静脉血43%(31/72)(P<0.001),结直肠癌DukesC、D期门静脉血CK20 mRNA高于A、B期(P<0.001)。结论:门静脉血CK20 mRNA表达的检测比周围静脉血检测更准确、敏感,是判断体内隐性播散和愈后的可靠方法。

CK20 mRNA在大肠癌患者外周血微转移中的表达

目的检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标。方法采用RT-PCR技术检测32例大肠癌患者、11例肠道良性病变患者和20例健康体检者外周血中CK20 mRNA定性和半定量表达。结果(1)CK20 mRNA在大肠癌患者中的阳性率为50.00%,相对系数为(0.89±0.17);在肠道良性病变患者中阳性率为9.09%,相对系数为0.11;在健康体检者中阳性率及相对系数均为0。大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20 mRNA明显增高(P<0.05)。(2)CK20 mRNA阳性率和相对系数在不同临床分期、远处转移中差异有统计学意义(P<0.05);其阳性率在浸润深度、淋巴结转移中无统计学意义,但相对系数有统计学意义(P<0.05)。阳性者生存率低于阴性者(P<0.05)。(3)CK20 mRNA与癌胚抗原(CEA)、糖链抗原199(CA199)表达呈正相关(P<0.05)。结论CK20mRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后。

定量RT-PCR法检测CK20 mRNA、CEAmRNA在胃肠道肿瘤外周血中的表达

目的检测胃癌、大肠癌、健康人外周血CK20 mRNA、CEA mRNA的表达,探讨其临床意义。方法用定量RT-PCR法检测外周血白细胞中CK20mRNA、CEA mRNA的含量,肿瘤组30人,健康对照组23人。结果试验结果显示肿瘤组CEA mRNA、CK20 mRNA表达水平明显高于健康对照组(P=0.000、P=0.000)。分组比较中IV期CK20 mRNA明显高于I～III期,P为0.000,差异显著;IV期与I～III期CEA mRNA没有差别。肿瘤组其中之一阳性28人,阳性率93.75%;两指标同时阳性22人,阳性率73.33%。结论本试验胃癌、大肠癌外周血检测CEA mRNA敏感性和特异性高于CK20 mRNA,但CEA mRNA数值高低与分期无关,CK20 mRNA的表达量与肿瘤分期有关。两指标联合检测未提高阳性率。

子宫内膜癌患者外周血CK20 mRNA的表达及临床意义

目的探讨子宫内膜癌患者外周血CK20mRNA的表达对子宫内膜癌微转移诊断的价值。方法采用RT-PCR方法对40例子宫内膜癌患者及20例子宫良性病变患者外周血CK20mRNA的表达进行检测。并以子宫内膜癌组织和健康女性外周血为对照。结果子宫良性病变患者及健康女性外周血中均无CK20mRNA表达;子宫内膜癌组织均有CK20mRNA表达。40例子宫内膜癌患者术前外周血中,11例检出CK20mRNA阳性表达,阳性率27.5%。CK20mRNA阳性检出与临床分期存在显著性相关(P<0.05),随着临床分期的进展,CK20mRNA阳性率明显增加。CK20mRNA阳性表达与病理分级无关(P>0.05)。结论子宫内膜癌早期可能已出现微量癌细胞的血行播散,CK20可作为子宫内膜癌血行转移的分子标志之一,检测子宫内膜癌患者外周血癌细胞可能成为改进分期、评估预后、提供治疗的参考指标。

腹腔渗液CK20 mRNA检测对指导结直肠癌腹腔化疗的意义

目的 研究腹腔渗液CK2 0mRNA的表达对指导结直肠癌腹腔转移化疗意义。方法 采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,对 5 0例结直肠癌进行腹腔渗液CK2 0mRNA测定。结果腹腔渗液CK2 0mRNA阳性表达与腹腔转移之间存在着显著相关性。结论 检测腹腔渗液中的CK2

直肠癌手术前后门静脉血CK20 mRNA检测的临床意义

目的 :研究直肠癌门静脉血 CK2 0 m RNA表达及临床意义。方法 :采用 RT- PCR法对 4 0例直肠癌根治术前后门静脉血 CK2 0 m RNA进行检测。结果 :4 0例直肠癌 2 5例 CK2 0 m RNA阳性表达 ,阳性率 6 2 .5 % ;Dukes分期与门静脉血中 CK2 0 m RNA阳性表达率无关 ,淋巴结转移阳性门静脉血中 CK2 0 m RNA阳性率高于阴性者 (P<0 .0 1) ;随访发现 ,门静脉血 CK2 0 m RNA阳性者远处转移率高 (P<0 .0 5 )。结论 :门静脉血中 CK2 0 m RNA检测有助于预后判断 ,区域淋巴结转移和 (或 )门静脉血 CK2 0 m

CK20 mRNA在大肠癌患者外周血中阳性表达的临床意义

目的 :研究大肠癌患者外周血中 CK2 0 m RNA的阳性表达可作为肿瘤细胞血行播散的标志 ,探讨CK2 0 m RNA阳性表达与肿瘤病理指标的关系 ,观察大肠癌患者手术前、后外周血中 CK2 0 m RNA表达的变化情况。方法 :采用巢式逆转录多聚酶链反应 ( RT- PCR)的方法 ,对大肠癌 4 2例、原发性肝细胞肝癌 5例、对照组 (非癌肿 ) 10例患者手术前、后不同时间外周血中肿瘤细胞的靶基因 CK2 0 m RNA表达进行检测。结果 :对照组 (非癌肿 ) 10例及原发性肝细胞肝癌 5例手术前、后外周血中 CK2 0 m RNA均为阴性表达。大肠癌组 4 2例 ,手术前外周血中 CK2 0 m RNA阳性表达率为 5 0 .0 % ( 2 1/ 4 2 ) ,手术后 4 8h外周血中 CK2 0 m RNA阳性表达率为 5 9.5 % ( 2 5 / 4 2 )。大肠癌患者外周血中 CK2 0 m RNA的阳性表达率与肿瘤细胞病理分化程度无关 ,与 Dukes分期、淋巴结转移、远处转移有关。结论 :大肠癌患者外周血中 CK2 0 m RNA的阳性表达可作为肿瘤细胞血行播散的标志 ,有助于判断大肠癌的预后及鉴别原发性肝细胞肝癌和大肠癌肝转移。手术操作会促使肿瘤细胞向血液中播散 ,手术过程中应加强预防措施以减少癌细胞的播散。

尿Cox-2蛋白与CK20 mRNA诊断膀胱移行细胞癌的临床价值

目的:评价尿环氧化酶-2(Cox-2)蛋白、CK20 mRNA诊断膀胱移行细胞癌的临床价值。方法:选择78例膀胱移行细胞癌和30例非膀胱肿瘤患者,同时行尿Cox-2蛋白、CK20 mRNA和尿脱落细胞学检查,比较各种方法的敏感性、特异性和Youden指数。结果:尿Cox-2蛋白、CK20mRNA和尿脱落细胞学的敏感性分别为89.7%,66.7%,26.9%;特异性分别为93.3%、86.7%和100%;Youden指数分别为83.1%、53.4%和26.9%。尿Cox-2蛋白和CK20 mRNA的敏感性和Youden指数均高于尿脱落细胞学(P<0.05),同时尿Cox-2蛋白的敏感性和Youden指数高于CK20 mRNA(P<0.05)。结论:尿Cox-2蛋白和CK20mRNA检测的高敏感性、高特异性为膀胱癌提供了一个简单无创的检测方法,非常适合于复发率很高的膀胱癌的诊断与随访。

CK20 mRNA联合组织切片检测直肠癌系膜内转移的临床研究

目的通过检测直肠癌系膜组织中CK20 mRNA的表达水平,研究直肠癌系膜转移与临床病理特征的关系,探讨直肠癌系膜转移规律,为切除直肠系膜的合理范围提供依据。方法取行直肠癌手术切除的直肠癌和直肠系膜组织标本40例,良性肠道疾病的正常直肠系膜组织10例。剪取肿瘤组织和距肿瘤下缘1、2、3、4、5 cm的直肠系膜组织,分别进行:①各段系膜组织分别HE染色切片检查;②各段系膜组织中CK20 mRNA表达水平检测(RT-PCR法),并结合临床病理资料进行分析。结果40例直肠系膜标本HE染色切片中,距肿瘤下缘1、2、3、4、5 cm的阳性率分别为:37.5%(15/40)、15.0%(6/40)、0%(0/40)、0%(0/40)、0%(0/40);40例直肠系膜标本中,距肿瘤下缘1、2、3、4、5 cm的系膜组织CK20 mRNA阳性表达率分别为:47.5%(19/40)、27.5%(11/40)、12.5%(5/40)、0%(0/40)、0%(0/40)。CK20 mRNA在正常直肠系膜组织中不表达,系膜中CK20 mRNA的表达与肿瘤分期、肿瘤形态及分化程度有关(P<0.05)。结论①检测直肠系膜组织中CK20 mRNA的表达(肿瘤微转移)较常规病理组织学检查方法更为敏感;②对于直肠癌,一个相对比较安全的远端直肠系膜切除长度为4 cm,但对于TNM分期偏晚、浸润型、低分化直肠癌病例,范围应适当增大。