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探讨姜黄素通过NF-κB对鼻咽癌CNE-2Z细胞的生长抑制作用、诱导凋亡作用及其机制研究
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作者 程忠强 袁润生 +2 位作者 蒋成义 王伟 强化龙 《山西中医药大学学报》 2024年第3期256-260,共5页
目的:探讨姜黄素通过NF-κB对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响。方法:MTT法测定姜黄素对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响,采用流式细胞仪测定姜黄素不同浓度下的CNE-2Z细胞凋亡情况,Western Blot测定NF-κB蛋白的表达。结果:姜黄素能影响CNE-2Z... 目的:探讨姜黄素通过NF-κB对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响。方法:MTT法测定姜黄素对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响,采用流式细胞仪测定姜黄素不同浓度下的CNE-2Z细胞凋亡情况,Western Blot测定NF-κB蛋白的表达。结果:姜黄素能影响CNE-2Z细胞的NF-κB蛋白表达,使NF-κB蛋白表达水平降低,说明姜黄素对CNE-2Z的增殖和转移有一定的影响。姜黄素对CNE-2Z的作用效果受作用时间和浓度影响,其对CNE-2Z细胞24 h的IC50数值为(43.514~45.435)μmol/L,48 h的IC50数值为(8.366~13.11)μmol/L,72 h的IC50数值为(5.658~8.469)μmol/L。结论:姜黄素能够通过NF-κB蛋白的表达,来抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖与侵袭。姜黄素浓度越高,作用时间越长,CNE-2Z细胞增殖抑制效果越好。 展开更多
关键词 姜黄素 NF-ΚB 鼻咽癌 cne-2z细胞 生长 凋亡
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The MORC2 p.S87L mutation reduces proliferation of pluripotent stem cells derived from a patient with the spinal muscular atrophy-like phenotype by inhibiting proliferation-related signaling pathways 被引量:1
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作者 Sen Zeng Honglan Yang +8 位作者 Binghao Wang Yongzhi Xie Ke Xu Lei Liu Wanqian Cao Xionghao Liu Beisha Tang Mujun Liu Ruxu Zhang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2024年第1期205-211,共7页
Mutations in the microrchidia CW-type zinc finger protein 2(MORC2)gene are the causative agent of Charcot-Marie-Tooth disease type 2Z(CMT2Z),and the hotspot mutation p.S87L is associated with a more seve re spinal mus... Mutations in the microrchidia CW-type zinc finger protein 2(MORC2)gene are the causative agent of Charcot-Marie-Tooth disease type 2Z(CMT2Z),and the hotspot mutation p.S87L is associated with a more seve re spinal muscular atrophy-like clinical phenotype.The aims of this study were to determine the mechanism of the severe phenotype caused by the MORC2 p.S87L mutation and to explore potential treatment strategies.Epithelial cells were isolated from urine samples from a spinal muscular atrophy(SMA)-like patient[MORC2 p.S87L),a CMT2Z patient[MORC2 p.Q400R),and a healthy control and induced to generate pluripotent stem cells,which were then differentiated into motor neuron precursor cells.Next-generation RNA sequencing followed by KEGG pathway enrichment analysis revealed that differentially expressed genes involved in the PI3K/Akt and MAP K/ERK signaling pathways were enriched in the p.S87L SMA-like patient group and were significantly downregulated in induced pluripotent stem cells.Reduced proliferation was observed in the induced pluripotent stem cells and motor neuron precursor cells derived from the p.S87L SMA-like patient group compared with the CMT2Z patient group and the healthy control.G0/G1 phase cell cycle arrest was observed in induced pluripotent stem cells derived from the p.S87L SMA-like patient.MORC2 p.S87Lspecific antisense oligonucleotides(p.S87L-ASO-targeting)showed significant efficacy in improving cell prolife ration and activating the PI3K/Akt and MAP K/ERK pathways in induced pluripotent stem cells.Howeve r,p.S87L-ASO-ta rgeting did not rescue prolife ration of motor neuron precursor cells.These findings suggest that downregulation of the PI3K/Akt and MAP K/ERK signaling pathways leading to reduced cell proliferation and G0/G1 phase cell cycle arrest in induced pluripotent stem cells might be the underlying mechanism of the severe p.S87L SMA-like phenotype.p.S87L-ASO-targeting treatment can alleviate disordered cell proliferation in the early stage of pluripotent stem cell induction. 展开更多
关键词 antisense oligonucleotides cell cycle arrest Charcot-Marie-Tooth disease 2z induced pluripotent stem cells MAPK/ERK PI3K/Akt PROLIFERATION spinal muscular atrophy-like
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Regulation of Protein Kinase C on Proliferation and Telomerase Activity of Nasopharyngeal Carcinoma Cell Line CNE-2Z
3
作者 Bo BAO Pei-Chun HUANG Chuan-Ren DONG(Department of Pathophysiology, Guangdong Medical College, Zhanjiang 524023,China) 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第S1期59-60,共2页
关键词 CNE cell Regulation of Protein Kinase C on Proliferation and Telomerase Activity of Nasopharyngeal Carcinoma cell Line cne-2z ACTIVITY
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土贝母苷甲诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡 被引量:18
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作者 翁昔阳 马润娣 于立坚 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第8期806-811,共6页
背景和目的:土贝母犤Bolbostemmapaniculatum(Maxim.)Franquet犦是一种传统中药,我们以前的研究结果已证实从中药土贝母块茎中分离得到的土贝母苷甲(下称苷甲)有强抗肿瘤效果。本研究旨在探讨苷甲对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的影响... 背景和目的:土贝母犤Bolbostemmapaniculatum(Maxim.)Franquet犦是一种传统中药,我们以前的研究结果已证实从中药土贝母块茎中分离得到的土贝母苷甲(下称苷甲)有强抗肿瘤效果。本研究旨在探讨苷甲对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的影响。方法:MTT法检测苷甲对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期,荧光显微镜和电子显微镜观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳检测DNA电泳图谱的变化,蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl-2和bax表达的变化。结果:苷甲抑制CNE-2Z细胞的生长,其24、48、72h的IC50分别为32.5、20.7、16.7μmol/L。苷甲诱导CNE-2Z细胞发生程序性死亡:流式细胞分析发现Sub-G1峰,50μmol/L苷甲作用CNE-2Z细胞12h,凋亡指数为72.8%;CNE-2Z细胞经苷甲作用(10μmol/L,24、48、72h;30、40、50、60μmol/L,12h)后,其DNA电泳图中出现典型的梯形条带。苷甲诱导bcl-2表达下调且磷酸化,并伴有bax高表达。结论:苷甲诱导CNE-2Z细胞发生形态学和生化学上典型的程序性死亡,其诱导的CNE-2Z细胞凋亡与bcl-2失活和bax激活有关。 展开更多
关键词 土贝母苷甲 诱导 鼻咽癌 癌细胞 cne-2z凋亡
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脂质体介导bcl-x_L反义寡核苷酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞株凋亡的影响 被引量:7
5
作者 何桂蓉 周克元 +3 位作者 蔡康荣 梁统 何承伟 张月飞 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期11-15,共5页
背景与目的:实验证明bcl-xL在鼻咽癌CNE-2Z细胞中存在高表达,它可能在鼻咽癌的发生发展中发挥着重要的作用。本研究以脂质体(lipofectin)为载体,将人工合成的bcl-xL反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)片段导入CNE-2Z细... 背景与目的:实验证明bcl-xL在鼻咽癌CNE-2Z细胞中存在高表达,它可能在鼻咽癌的发生发展中发挥着重要的作用。本研究以脂质体(lipofectin)为载体,将人工合成的bcl-xL反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)片段导入CNE-2Z细胞,拟探讨ASODN对CNE-2Z细胞的影响。方法:以bcl-xL的编码区为靶点,人工合成20个碱基全硫代修饰的反义寡核苷酸,脂质体转染反义寡核苷酸进入CNE-2Z细胞后,用MTT法检测细胞成活率;用琼脂糖凝胶电泳、荧光染色、流式细胞术等方法检测细胞凋亡。结果:MTT结果发现,ASODN在Lip介导下即可显著抑制CNE-2Z细胞株细胞增殖(P<0.01),ASODN对细胞增殖的抑制作用随其浓度增加而增强;ASODN作用细胞36h后,经Hoechst33258/PI双染在荧光显微镜下可见细胞缩小、染色质固缩、核断裂;流式细胞仪分析发现在G1峰前出现一个亚二倍体峰即凋亡峰;琼脂糖凝胶电泳分析可见ASODN/Lip处理组出现明显的“梯状”外观等凋亡特征性改变。结论:ASODN脂质体转染CNE-2Z细胞后可促进CNE-2Z的细胞凋亡;在肿瘤研究中,bcl-xL可作为一个有用的靶基因,为开发鼻咽癌基因治疗药物提供实验依据。 展开更多
关键词 脂质体介导 BCL-XL 反义寡核苷酸 鼻咽癌 cne-2z细胞株 细胞凋亡
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三氧化二砷诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡及其作用机制的初步研究 被引量:15
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作者 陈扬超 张月飞 周克元 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1061-1064,共4页
目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人鼻咽癌CNE2Z细胞的生物学效应及其作用机制。方法:台盼蓝计数法计算As2O3的IC50;CNE-2Z细胞经As2O3处理后,通过流式细胞仪、荧光染色及DNA电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪测定bcl2和bax阳性细胞百分率;罗丹... 目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人鼻咽癌CNE2Z细胞的生物学效应及其作用机制。方法:台盼蓝计数法计算As2O3的IC50;CNE-2Z细胞经As2O3处理后,通过流式细胞仪、荧光染色及DNA电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪测定bcl2和bax阳性细胞百分率;罗丹明123染色后进行线粒体膜电位分析。结果:As2O3在一定浓度范围内以浓度依赖的方式抑制CNE2Z细胞生长,其IC50为(1.35±0.30)μmol/L;0.5~2.0μmol/LAs2O3处理CNE2Z细胞后,流式细胞仪检测出凋亡峰,荧光显微镜下可见明显的细胞凋亡形态特征,琼脂糖凝胶电泳出现DNA梯形条带;As2O3对bcl2的表达没有影响(P>0.05),但能显著增加bax的表达(P<0.01)及降低线粒体膜电位(P<0.01)。结论:As2O3在体外可诱导鼻咽癌CNE2Z细胞凋亡,其机制可能与上调bax表达和降低线粒体膜电位有关。 展开更多
关键词 三氧化二砷 鼻咽肿瘤 细胞凋亡 cne-2z细胞
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橙皮苷提取物对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和细胞周期的影响 被引量:7
7
作者 罗晓婷 熊亮 +2 位作者 李思思 董明华 李舒梅 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期2202-2204,共3页
目的探讨赣南脐橙果皮提取物橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和细胞周期的作用及其机制。方法 MTT法检测橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响;流式细胞术检测橙皮苷处理CNE-2Z细胞后细胞周期的变化。结果不同浓度橙皮苷分别处理CNE-2... 目的探讨赣南脐橙果皮提取物橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和细胞周期的作用及其机制。方法 MTT法检测橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响;流式细胞术检测橙皮苷处理CNE-2Z细胞后细胞周期的变化。结果不同浓度橙皮苷分别处理CNE-2Z细胞24,48,72 h后,均能抑制CNE-2Z细胞体外增殖;不同时间对CNE-2Z细胞增殖具有高度显著性差异(F=1898.865,P<0.001),不同药物浓度对CNE-2Z细胞增殖具有高度显著性差异(F=5454.040,P<0.001),时间和药物浓度两个因素对CNE-2Z细胞增殖有交互作用(F=118.909,P<0.001)。在1~100μmol/L浓度范围内,随着药物浓度的增加,其抑制率逐渐增大,且随着时间的延长,抑制率也逐渐升高。当浓度大于100μmol/L后,其抑制作用不再随药物浓度增加而进一步增强(P>0.05)。100μmol/L橙皮苷作用CNE-2Z细胞24,48,72 h,随着时间延长G0/G1期细胞比例下降(P<0.01),S期细胞比例增加(P<0.01),G2/M期细胞为0,细胞阻滞于S期。结论橙皮苷能有效动员人鼻咽癌CNE-2Z细胞从细胞周期的G0/G1期进入S期,干扰细胞从S期进入G2期,导致大量细胞堆积于S期解旋复制,阻滞了细胞周期,从而抑制细胞的分裂增殖,诱导细胞周期特异性的细胞凋亡。 展开更多
关键词 橙皮苷 人鼻咽癌cne-2z细胞 细胞增殖 细胞周期
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土贝母皂苷诱导人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的研究 被引量:13
8
作者 翁昔阳 于立坚 马润娣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期181-181,共1页
目的 研究土贝母皂苷 (下称皂苷 )对人鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞凋亡的影响。方法 MTT法检测皂苷对CNE 2Z细胞生长的影响 ;形态学方法 (荧光显微镜和透射电镜 )、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在皂苷作用下CNE 2Z细胞形态、... 目的 研究土贝母皂苷 (下称皂苷 )对人鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞凋亡的影响。方法 MTT法检测皂苷对CNE 2Z细胞生长的影响 ;形态学方法 (荧光显微镜和透射电镜 )、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在皂苷作用下CNE 2Z细胞形态、DNA含量的变化和DNA断裂的情况 ;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl 2、bax和cas pase 3表达的变化。 结果 皂苷抑制CNE 2Z细胞的生长 ,其效果与皂苷的浓度和作用时间相关 ;诱导CNE 2Z细胞发生典型程序性死亡 ;凋亡抑制基因bcl 2表达逐渐减少 ;而凋亡诱导基因bax和caspase 3在 1、3、5h表达增高。 结论 诱导细胞凋亡是皂苷发挥抗瘤效果的一种重要机制 ;皂苷诱导的CNE 2Z细胞凋亡与bcl 2、bax和caspase 展开更多
关键词 土贝母皂苷 细胞凋亡 凋亡相关基因 鼻咽癌细胞株 cne-2z
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翡翠贻贝糖胺聚糖体外抑制CNE-2Z肿瘤细胞生长作用的研究 被引量:4
9
作者 李瑞 吴红棉 +1 位作者 范秀萍 胡雪琼 《现代食品科技》 EI CAS 2010年第5期437-440,共4页
以南海贝类翡翠贻贝全脏器为原料提取得到糖胺聚糖粗品,经蛋白质等电点沉淀法处理后得到糖胺聚糖精制品(RG),糖胺聚糖含量52.3%。应用MTT法检测糖胺聚糖精制品对人鼻咽癌细胞CNE-2Z体外抗肿瘤活性。结果显示:RG不同剂量在作用不同时间... 以南海贝类翡翠贻贝全脏器为原料提取得到糖胺聚糖粗品,经蛋白质等电点沉淀法处理后得到糖胺聚糖精制品(RG),糖胺聚糖含量52.3%。应用MTT法检测糖胺聚糖精制品对人鼻咽癌细胞CNE-2Z体外抗肿瘤活性。结果显示:RG不同剂量在作用不同时间后的抑瘤效果不同,其中200μg/mL的RG作用72h抑瘤率达到最高值为29.3%。RG与5-Fu合用的抑瘤效果,随着药物作用时间的延长,两者由协同作用变为单纯相加作用。 展开更多
关键词 翡翠贻贝 糖胺聚糖 cne-2z 抑瘤率
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芹菜素对人鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性的增强作用 被引量:13
10
作者 李明勇 黄培春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期88-92,共5页
目的观察芹菜素(AP)能否增强人鼻咽癌CNE-2Z细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法采用MTT法对CNE-2Z细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术和PI/Ho-echst33258荧光双染法检测细胞凋亡;RT-... 目的观察芹菜素(AP)能否增强人鼻咽癌CNE-2Z细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法采用MTT法对CNE-2Z细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术和PI/Ho-echst33258荧光双染法检测细胞凋亡;RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2、bax mRNA表达的改变。结果 AP、DDP单用及合用均明显抑制CNE-2Z细胞的生长,且呈剂量依赖性关系,两药合用时在中、高浓度呈协同效应;流式细胞术和荧光双染法结果表明低浓度AP联合DDP更能明显促进肿瘤细胞的凋亡;与单独用药组比较,RT-PCR结果显示联合用药组bcl-2 mRNA表达明显降低,而bax mRNA表达明显增高。结论芹菜素可增强顺铂对CNE-2Z细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能与上调bax和下调bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax比值下降有关。 展开更多
关键词 芹菜素 顺铂 鼻咽癌 中效原理 增殖 凋亡 cne-2z细胞
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白藜芦醇诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡过程中caspase-6的活化 被引量:5
11
作者 唐旭东 周克元 +1 位作者 陈小文 陈素珍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期100-103,共4页
目的:探讨白藜芦醇(Res)诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡过程中是否有caspase-6的活化。方法:用Western-blot分析caspase-6酶原的裂解,半定量RT-PCR检测caspase-6mRNA表达的改变,比色法测定caspase-6活性的变化。结果:用Res 0(对照)、25、50、... 目的:探讨白藜芦醇(Res)诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡过程中是否有caspase-6的活化。方法:用Western-blot分析caspase-6酶原的裂解,半定量RT-PCR检测caspase-6mRNA表达的改变,比色法测定caspase-6活性的变化。结果:用Res 0(对照)、25、50、100、200μmol/L处理细胞24小时,caspase-6酶原的表达随药物浓度的增加而减少,100 μmol/L时开始出现活性裂解片段P20(20 kD),200μmol/L时P20增加;caspase-6 mRNA的表达呈浓度依赖性的增加(P<0.01);caspase-6活性呈浓度和时间依赖性的升高(P<0.01)。结论:Res诱导CNE-2Z细胞凋亡过程中有caspase-6的活化。 展开更多
关键词 鼻咽癌 cne-2z细胞 细胞凋亡 白藜芦醇 CASPASE-6 活性变化 基因表达 浓度依赖性 时间依赖性
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PKC-α、PKA-Ⅰ反义核酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞生长增殖的影响 被引量:4
12
作者 祝葆华 黄培春 +1 位作者 鲍波 陈锦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期494-498,共5页
目的 :探讨PKC -α和PKA -Ⅰ反义核酸 (asODN)对鼻咽癌CNE - 2Z细胞生长增殖的影响。方法 :分别用脂质体 (lipofectin ,LP)介导asODN转染鼻咽癌CNE - 2Z细胞。实验组 :① 0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKC -αasODN ;②0 0 1- 1 0 0 μmol/LPK... 目的 :探讨PKC -α和PKA -Ⅰ反义核酸 (asODN)对鼻咽癌CNE - 2Z细胞生长增殖的影响。方法 :分别用脂质体 (lipofectin ,LP)介导asODN转染鼻咽癌CNE - 2Z细胞。实验组 :① 0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKC -αasODN ;②0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKA -ⅠasODN ;③ 0 5 0 μmol/LPKC -αasODN +0 5 0 μmol/LPKA -ⅠasODN。对照组 :相应浓度的随机序列 (rODN)。用免疫组化法检测CNE - 2Z细胞PKC -α和PKA -Ⅰ的表达 ,MTT法检测其生长指数 (growthin dex ,GI) ,软琼脂克隆形成率检测其体外增殖能力。结果 :PKC -αasODN或 /和PKA -ⅠasODN均可阻断其相应PKC-α或PKA -Ⅰ的表达 (P <0 0 5 )。PKC -αasODN或PKA -ⅠasODN均能显著降低CNE - 2Z细胞GI和软琼脂克隆形成率 (P <0 0 5 ) ,且具有量效依赖关系。PKC -αasODN +PKA -ⅠasODN共同作用可使其GI和软琼脂克隆形成率非常显著降低 (P <0 0 1) ,无明显量效依赖关系 ,两者对CNE - 2Z生长抑制作用强于PKC -αasODN或PKA -Ⅰa sODN(P <0 0 5 ) ,对其软琼脂克隆形成率的抑制作用与PKC -αasODN或PKA -ⅠasODN无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :PKC -αasODN和PKA -ⅠasODN均可抑制CNE - 2Z细胞体外生长和增殖 ,两者具有协同作用。 展开更多
关键词 PKC-Α PKA-I 反义核酸 鼻咽癌 cne-2z细胞 蛋白激酶C 免疫组化法
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塞来昔布对鼻咽癌细胞株CNE-2Z作用的研究 被引量:7
13
作者 向银洲 魏莲枝 李洁 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第11期1154-1157,1161,共5页
目的:探讨塞来昔布对鼻咽癌细胞株CNE-2Z的生长抑制作用及可能机制。方法:以人鼻咽癌细胞株CNE-2Z为研究对象,体外药物敏感试验(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞的生长抑制作用;免疫细胞化学染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)... 目的:探讨塞来昔布对鼻咽癌细胞株CNE-2Z的生长抑制作用及可能机制。方法:以人鼻咽癌细胞株CNE-2Z为研究对象,体外药物敏感试验(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞的生长抑制作用;免疫细胞化学染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)和环氧化酶-2(COX-2)的表达;流式细胞术(FCM)检测药物作用后细胞周期分布。结果:MTT试验显示塞来昔布对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z增殖有抑制作用,其抑制效应具有时间及浓度依赖的特点;流式细胞术表明塞来昔布可引起CNE-2Z细胞G0/G1期阻滞;免疫组织化学检测显示塞来昔布下调PCNA、COX-2蛋白表达。结论:CNE-2Z细胞中存在COX-2表达,塞来昔布可抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖,可能成为鼻咽癌化疗的有效药物。 展开更多
关键词 塞来昔布 鼻咽癌细胞株cne-2z 生长抑制
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抗端粒酶核酶质粒的构建筛选及其对CNE-2Z细胞增殖与凋亡的影响 被引量:7
14
作者 赵颖海 陈小毅 John R.Arrand 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第1期50-55,共6页
背景与目的:已证实端粒酶(telomerase,TLMA)对肿瘤的进展和肿瘤细胞的无限增殖起着重要的决定作用。核酶是具有特殊核酸内切酶活性的反义RNA,可序列特异性地与靶RNA分子配对并切割靶基因RNA。有报道人低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞端粒酶阳性... 背景与目的:已证实端粒酶(telomerase,TLMA)对肿瘤的进展和肿瘤细胞的无限增殖起着重要的决定作用。核酶是具有特殊核酸内切酶活性的反义RNA,可序列特异性地与靶RNA分子配对并切割靶基因RNA。有报道人低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞端粒酶阳性,本实验目的是构建抗端粒酶RNA模板区特异性核酶的真核表达载体并用电穿孔法将其导入人低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞,研究该核酶对CNE-2Z细胞增殖、凋亡的影响。方法:设计合成针对端粒酶RNA模板区的锤头状核酶基因teloRZ作为端粒酶抑制剂,构建3种带有绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)报道基因和嘌呤霉素(puromycin)抗性基因的teloRZ真核表达质粒pGFPuro-teloRZ2.1、pGFPuro-teloRZ7.1、pGFPuro-teloRZ7.7,这3种质粒的不同点在于teloRZ基因和puromycin抗性基因按3种不同方向设计,然后将上述3种质粒及载体质粒pPAT-GFP电转染CNE-2Z细胞,用荧光显微镜检测GFP表达情况;用流式细胞仪、荧光染色法检测细胞增殖指数及凋亡等指标。结果:CNE-2ZGTR7.1细胞(转染目的基因质粒pGFPuro-teloRZ7.1的CNE-2Z细胞)增殖指数(25.100±0.141)%明显低于CNE-2Z细胞(未转染质粒的细胞)的(53.663±16.981)%、CNE-2ZG细胞(转染空载质粒pPAT-GFP的CNE-2Z细胞)的(61.575±5.166)%、CNE-2ZGTR2. 展开更多
关键词 抗端粒酶核酶质粒 构建筛选 cne-2z 细胞增殖 凋亡 鼻咽癌
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熊果酸诱导鼻咽癌细胞株CNE-2Z凋亡的实验研究 被引量:3
15
作者 李洁 魏莲枝 向银洲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第1期37-40,共4页
目的:探讨熊果酸诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡的作用机制。方法:用不同浓度的熊果酸处理CNE-2Z细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色检测熊果酸对CNE-2Z细胞的增殖抑制效应;流式细胞术分析细胞周期和凋亡率;应用免疫组织化学SP法检测凋亡相... 目的:探讨熊果酸诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡的作用机制。方法:用不同浓度的熊果酸处理CNE-2Z细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色检测熊果酸对CNE-2Z细胞的增殖抑制效应;流式细胞术分析细胞周期和凋亡率;应用免疫组织化学SP法检测凋亡相关基因bcl-2,bax和cox-2表达的变化;Western blot检测CNE-2Z细胞内caspase 3的表达。结果:熊果酸对CNE-2Z细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,并呈浓度依赖性;流式细胞术分析表明S期细胞数减少,细胞主要阻滞在G0/G1期;免疫组织化学检测显示在凋亡过程中bax表达上调,bcl-2、cox-2表达下调;Western blot检测CNE-2Z细胞中caspase 3表达增强。结论:熊果酸在体外对CNE-2Z细胞有诱导凋亡的作用,其作用机制可能是通过促进caspase 3的活化和bax的表达上调、bcl-2、cox-2的表达下调来实现。 展开更多
关键词 熊果酸 鼻咽癌细胞 cne-2z 凋亡
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反义c-fos、c-jun对CNE-2Z细胞增殖及PKC-α表达的影响 被引量:2
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作者 何志巍 陈南岳 +2 位作者 蔡康荣 鲍波 张梦妮 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1998年第3期175-179,共5页
为探讨反义c-fos、c-jun对CNE-2Z细胞生长的影响及与PKC-α表达的关系.本研究联合应用反义c-fos和c-jun寡核苷酸作用于CNE-2Z细胞,MTT法检测细胞生长指数,流式细胞仪(FCM)检测细胞PKC-α表达.结果显示,c-fos、c-jun反义寡核苷酸在Lipofe... 为探讨反义c-fos、c-jun对CNE-2Z细胞生长的影响及与PKC-α表达的关系.本研究联合应用反义c-fos和c-jun寡核苷酸作用于CNE-2Z细胞,MTT法检测细胞生长指数,流式细胞仪(FCM)检测细胞PKC-α表达.结果显示,c-fos、c-jun反义寡核苷酸在Lipofectin(LP)最低有效浓度为1.7×10^(-6)μg/ml作用下,对CNE-2Z细胞抑制作用随浓度增大而增强,最低有效浓度为1.7×10^(-5)μg/ml;在一定时间内,对细胞生长的抑制作用,随作用时间延长而增强,最大抑制作用时间为20小时,其生长指数为63.9±5.0,较对照组明显降低(P<0.01).在以上浓度的LP和反义寡核苷酸作用于细胞20小时后,FCM检测发现PKC-α荧光强度明显低于各对照组,阳性细胞数百分比为10.40±5.23,较对照组29.87±7.41及其它各组均显著降低(P<0.01).结果表明,反义c-fos、c-jun寡核苷酸可抑制CNE-2Z细胞生长增殖,并呈明显的浓度和时间效应依赖关系,且明显抑制PKC-α蛋白的表达. 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 cne-2z细胞 蛋白激酶C-Α
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蛋白激酶C对鼻咽癌CNE-2Z细胞端粒酶活性的影响 被引量:2
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作者 鲍波 黄培春 +1 位作者 董传仁 陈锦 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期148-149,152,共3页
为进一步探讨蛋白激酶 C(PKC)调控人低分化鼻咽癌 CNE- 2 Z细胞生长的机制 ,观察了 PKC对 CNE- 2 Z端粒酶活性的影响。结果显示 :CNE- 2 Z细胞有较高的端粒酶活性 ;PKC的抑制剂 Staurosporine显著降低细胞端粒酶活性 (P<0 .0 0 1)。... 为进一步探讨蛋白激酶 C(PKC)调控人低分化鼻咽癌 CNE- 2 Z细胞生长的机制 ,观察了 PKC对 CNE- 2 Z端粒酶活性的影响。结果显示 :CNE- 2 Z细胞有较高的端粒酶活性 ;PKC的抑制剂 Staurosporine显著降低细胞端粒酶活性 (P<0 .0 0 1)。提示抑制 PKC可以抑制 CNE- 2 Z细胞的端粒酶活性 ,PKC可能通过调控端粒酶活性从而影响 CNE- 2 展开更多
关键词 蛋白激酶C 鼻咽癌 端粒酶 cne-2z细胞
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白细胞介素24对鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖的影响 被引量:3
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作者 李栋才 邱书奇 +2 位作者 赵海亮 杨贵 姚春燕 《医学综述》 2011年第12期1880-1882,共3页
目的探讨白细胞介素24(IL-24)对鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖的影响。方法取鼻咽癌CNE-2Z细胞株,进行细胞培养;用细胞计数、四甲基偶氮唑蓝(MTT)抑制试验,以IL-240 pg/L为对照组,检测不同浓度、不同时间的IL-24对鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖的影... 目的探讨白细胞介素24(IL-24)对鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖的影响。方法取鼻咽癌CNE-2Z细胞株,进行细胞培养;用细胞计数、四甲基偶氮唑蓝(MTT)抑制试验,以IL-240 pg/L为对照组,检测不同浓度、不同时间的IL-24对鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖的影响。结果细胞计数及MTT比色法检测得出:体外培养的鼻咽癌CNE-2Z细胞株在培养的48 h增殖状况最差,并且随着IL-24浓度的增加,其活细胞数也随着减少,当IL-24为50 pg/L时,其增殖状况最差;当IL-24为100 pg/L时,其增殖状况反而好转。结论 IL-24可呈时间和剂量依赖性地抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖。 展开更多
关键词 白细胞介素24 鼻咽癌 cne-2z细胞株 增殖
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PKC-α反义核酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖及c-myc和c-fos表达的影响 被引量:2
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作者 祝葆华 黄培春 +1 位作者 鲍波 陈锦 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2003年第1期68-71,共4页
为探讨PKC α反义核酸对CNE 2Z细胞增殖及c myc、c fos表达的影响 ,采用脂质体 (LP)介导法 ,用 0 0 1~1 0 0 μmol/L各浓度PKC α反义核酸 (asODN)转染CNE 2Z ;MTT法及软琼脂克隆形成法分别检测CNE 2Z生长指数(growthindex ,GI)及其... 为探讨PKC α反义核酸对CNE 2Z细胞增殖及c myc、c fos表达的影响 ,采用脂质体 (LP)介导法 ,用 0 0 1~1 0 0 μmol/L各浓度PKC α反义核酸 (asODN)转染CNE 2Z ;MTT法及软琼脂克隆形成法分别检测CNE 2Z生长指数(growthindex ,GI)及其体外增殖能力 ;免疫组化法检测PKC α、及c myc、c fos的表达。结果表明 :PKC αasODN 0 0 5~ 1 0 0 μmol/L各浓度组CNE 2ZGI显著降低 (P <0 0 5 ) ,且呈量效依耐关系 ;其中 1 0 0 μmol/L和 0 5 0 μmol/LPKC αasODN对CNE 2Z生长有非常显著抑制作用 (P <0 0 1) ;0 5 0 μmol/LPKC αasODN组CNE 2Z软琼脂克隆形成率均低于对照组 (P <0 0 5 ) ,并可下调其PKC α、c Myc、c Fos的表达 (P <0 0 5 )。结果提示 :LP介导PKC αasODN转染CNE 2Z细胞 ,可有效阻断CNE 2ZPKC α的表达 ,抑制其体外增殖能力 ,下调c myc、c fos蛋白表达 ;PKC αasODN可能通过下调c myc、c 展开更多
关键词 蛋白激酶C 反义寡核苷酸 cne-2z C-MYC c-fos 鼻咽癌
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蝎毒抗癌多肽对CNE-2Z细胞膜电位的影响 被引量:3
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作者 孔天翰 董伟华 +2 位作者 王永奎 韩雪飞 陈华艳 《河南医科大学学报》 北大核心 2001年第6期635-655,共21页
目的 :观察蝎毒多肽 (APBMV)对鼻咽癌CNE 2Z细胞株细胞膜电位的影响。方法 :细胞经培养传代 ,分组处理。空白对照组加生理盐水 ,其他 3组分别加入浓度为 8,12和 16mg/L的APBMV。采用玻璃微电极细胞内记录法测定CNE 2Z细胞膜电位 ,MTT法... 目的 :观察蝎毒多肽 (APBMV)对鼻咽癌CNE 2Z细胞株细胞膜电位的影响。方法 :细胞经培养传代 ,分组处理。空白对照组加生理盐水 ,其他 3组分别加入浓度为 8,12和 16mg/L的APBMV。采用玻璃微电极细胞内记录法测定CNE 2Z细胞膜电位 ,MTT法观察APBMV对CNE 2Z细胞的毒性作用。结果 :CNE 2Z细胞经APBMV处理48h后 ,细胞膜负电位 (13 0 0± 3.5 8)mV明显小于空白对照组 (2 3 0 0± 8.2 1)mV ,P <0 .0 1,细胞膜呈去极化状态 ;CNE 2Z细胞代谢MTT的能力下降 ,显示明显的毒性反应。结论 :APBMV可能具有膜毒素的作用 ,通过降低CNE 2Z细胞膜电位 。 展开更多
关键词 蝎毒抗癌多肽 鼻咽癌 细胞膜电位 cne-2z细胞 APBMV
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