异种器官移植用血管内皮细胞特异表达人DAF重组基因载体的构建

PCR插入法将人 ICAM-2启动子、人 DAF-intron1和 DAFc DNA克隆到 p GEM-7zf质粒中 ,进行序列测定及分析 .成功构建异种器官移植用血管内皮细胞特异表达人 DAF重组基因 .提供了人 DAF重组基因用于转基因动物的研究 .

使用人粘附分子-2启动子的衰变加速因子重组基因表达载体的构建及意义

目的 :构建含人粘附分子 -2(ICAM -2)启动子的人衰变因子 (DAF)重组基因的真核细胞表达载体 ,运用于转基因动物克服异种器官排斥的研究。方法:双酶切本室已构建质粒pGEM -7Zf-DAF ,得到含人ICAM -2启动子及DAFcDNA序列的插入片段 (3.7Kb) ;双酶切pcDNA3真核表达载体 ,得到不含病毒启动子、含筛选基因Neo的一段DNA作为载体序列 (4.4Kb) ;两段DNA进行连接反应后转化细菌 ;阳性转化菌落质粒抽提及酶切鉴定。根据人的ICAM -2启动子、DAFcDNA序列 ,设计引物行PCR特异扩增检验。结果:特异性3组酶切重组表达载体 ,产生符合设计的相应条带 ;PCR扩增出特异的318bp及1.7Kb的DNA片段 ,符合设计要求。结论 :含人ICAM