改良DMEM培养基对人芽囊原虫的培养效果观察

目的探讨改良DMEM培养基培养人芽囊原虫(Blastocystis hominis,B.h)的效果。方法选取了329例临床样本分别用改良DMEM培养法与普通DMEM培养法和碘液染色涂片法对B.h的检出率进行比较;普通DMEM培养法与改良DMEM培养法中B.h形态、最低检出限、生长曲线等进行比较。结果329例临床样本中改良DMEM培养B.h检出阳性率为5.17%(17/329),碘液染色涂片法阳性率1.52%(5/329),差异有统计学意义(P<0.01)。B.h在两种培养基中均以空泡型为主,但改良DMEM更易见到颗粒型和二分裂型,生长高峰期为第72 h,达高峰期后维持时间较普通DMEM培养长。结论改良DMEM培养法优于普通DMEM培养法,可用于人芽囊原虫的体外增殖培养。

国产与进口DMEM培养基培养CHO-C28细胞效果比较

目的比较国产与进口DMEM培养基培养CHO-C28细胞的效果。方法采用国产DMEM培养基与进口DMEM培养基培养同批CHO-C28细胞,收集培养上清,检测HBsAg表达水平。采用相同条件纯化培养上清中的HBsAg,比较二者的层析图谱及纯化抗原的电泳图谱。并用其抗原制备疫苗,进行异常毒性和效力试验。结果培养上清中HBsAg表达水平,国产培养基略好于进口培养基,二者纯化图谱和抗原电泳图谱一致。两种培养基制备的疫苗异常毒性试验均合格,小鼠效力试验结果差异无显著意义。结论国产培养基在细胞培养中安全、有效,达到进口培养基水平,可用于规模化生产。

多种生长因子及DMEM培养液对植入脂肪成活率影响的研究

目的:初步探索多种生长因子、DMEM 培养液对植入脂肪成活率的影响,为临床应用提供参考。方法:将同条件获取的脂肪颗粒 40ml 纯化后,等量分 5 组,分别于生理盐水(对照组)、DMEM 液、含 20ng/ml bFGF 的生理盐水、含 20ng/ml IGF-1 的生理盐水、含 20ng/ml VEGF 的生理盐水(以上四组为实验组)中浸润 1h。浸润后去杂质,注射于裸鼠背部皮下,每组注射 5 只裸鼠,每只注射 6 点,每点 0.2ml,15 周后,取出移植物,测残留体积和重量,并送病理学检查。方差分析检验比较各实验组与对照组移植物残留体积和重量的差异。结果:DMEM 组的移植物残留体积和重量明显较对照组多(P<0.05),其他实验组移植物残留体积和重量与对照组无明显差异(P>0.05),各组移植物组织病理学特性无明显差异。结论:DMEM 可促进植入脂肪的组织量维持,bFGF、IGF-1、VEGF 等生长因子在本实验条件下显示出促进植入脂肪成活的作用。

DMEM培养结肠小袋虫的正交试验

利用L9(34)正交试验设计,研究了淀粉量、小牛血清比例和培养基初始pH 3个因素对结肠小袋虫在DMEM培养基中所获得的最高种群密度的影响。方差分析表明,初始pH影响最大,其次为淀粉量,血清比例影响最小。最佳培养基组成为淀粉40 mg/安瓿、血清150 mL/L(DMEM培养液2.55 mL+0.45 mL小牛血清),最适宜的DMEM培养基初始pH为7.0。

人芽囊原虫在DMEM单相培养基中体外培养方法的建立

目的建立人芽囊原虫（Blastocystis hominis，B．h）在DMEM单相培养基中的体外连续培养方法，为进一步研究其诊断、生活史、致病机制奠定基础。方法比较不同pH值、血清种类、血清浓度及接种量等条件下虫体生长繁殖情况及影响因素。结果使用DMEM培养基、接种量大于10^5/管、pH7．0～8．0、10％～30％小牛血清（或人、马血清），青、链霉素及二性霉素B，于37℃条件下厌氧培养，每三、六或五天转种一次，可达到体外长期培养B．h的目的。结论使用DMEM单相培养基可用于人芽囊原虫的诊断及体外长期培养。

RPMI1640,DMEM及不同生长因子对大鼠颌下腺细胞生长作用的观察

目的 观察RPMI 16 4 0、DMEM及不同生长因子对大鼠颌下腺细胞增殖能力的影响 ,探讨最有利于大鼠颌下腺细胞的培养方法。方法 在RPMI 16 4 0或DMEM培养基中分别加入一定浓度的FBS(胎牛血清 )、EGF(表皮生长因子 )、HC(氢化可地松 )、INS(胰岛素 ) ,观察纤维细胞和腺细胞在不同培养基中的增殖能力。结果 在含5 %FBS、10ng/mlEGF、5 μg/mlHC、5 μg/mlINS的DMEM培养基中 ,上皮细胞生长良好 ,在只含血清的RPMI 16 4 0培养基中 ,纤维细胞生长旺盛 ,上皮样细胞生长不良 ,在不含血清的培养基中所有细胞均生长缓慢。结论 含有 5 %血清、10ng/mlEGF、5 μg/mlHC及 5

应用国产改良型DMEM培养基培养CHO-C28细胞

目的 解决CHO-C28细胞在大规模培养过程中易增厚、脱落和不易维持的难题。方法 试验组用国产改良型DMEM培养基连续培养CHO-C28细胞2个月,对照组用进口和国产DMEM培养基,观察细胞贴壁、增殖、维持和分泌HBsAg情况。结果 试验组细胞贴壁和长满单层时间明显快于对照组,维持2个月细胞未出现增厚和脱落,分泌HBsAg量明显高于对照组。结论 使用国产改良型DMEM培养基培养CHO-C28细胞效果显著优于现用进口和国产DMEM培养基。

Neurobasal^(TM)-A和DMEM/F12培养液对大鼠胎儿神经干细胞生长的影响

用带有 3 [H]的胸苷对分裂细胞进行标记 ,通过细胞计数仪测定细胞数量的方法 ,对比了大鼠胎儿神经干细胞在添加相同成分的 Neurobasal TM-A和 DMEM/F1 2培养液中的生长情况 .结果表明 Neurobasal TM-A在有 EGF和 b

两种DMEM培养基培养CHO-C28细胞的研究

在同一实验条件下,比较了赛尔生物化工厂的DMEM培养基(国产DMEM)和Gibco公司的DMEM培养基(进口DMEM),在基因工程乙肝疫苗生产过程中,对细胞的生长状况、HBsAg的分泌、及纯化收率的影响。结果显示:国产DMEM更有利于重组(CHO)乙肝疫苗的大规模生产。

营养物失衡是维持癌细胞恶性生长的因素之一──DMEM培养基使黑色素瘤B16细胞的恶性生长抑制

对小鼠黑色素瘤B1 6细胞在DMEM和RPMI1 640两种培养基中培养产生的活细胞数和黑色素量进行了检测 .结果显示 ,该癌细胞在DMEM培养基中培养产生的活细胞数比在RPMI1 640培养基中培养产生的活细胞数平均减少 87.9% ,而黑色素量平均增加795 % .以“黑色素量 /活细胞数”计算分化指数 ,再以“DMEM中的分化指数 / 1 640中的分化指数”计算DMEM相对于 1 640的对B1 6细胞的分化指数 ,显示DMEM中的分化指数平均是 1 640中的分化指数的 67.8倍 .

自制DMEM/F12培养基对奶牛乳腺上皮细胞生物学功能的影响

验证自制DMEM/F12培养基与商品化DMEM/F12培养基相比是否会对奶牛乳腺上皮细胞生物学功能造成负面影响,为进一步研究氨基酸对乳蛋白合成影响及其机理奠定基础。从对奶牛乳腺上皮细胞增殖能力、泌乳相关基因表达和酪蛋白合成这几个方面比较自制DMEM/F12培养基与DMEM/F12培养基的差别。结果显示,自制DMEM/F12培养基对乳腺上皮细胞的增殖活力要显著高于DMEM/F12培养基(P<0.0001);自制DMME/F12培养基与商品化DMEM/F12培养基相比乳腺上皮细胞CSN1S1、CSN3基因表达显著上调(P<0.05),上调量分别达到了3.57倍和3.27倍,CSN1S2、CSN2基因表达量差异不显著(P>0.05);自制DMEM/F12培养基与商品化DMEM/F12培养基相比,对乳腺上皮细胞αS酪蛋白及β-酪蛋白的合成的影响差异并不显著(P>0.05)。由此得出,与商品化DMEM/F12培养基相比,自制DMEM/F12培养基在奶牛乳腺上皮细胞增殖、泌乳相关基因表达和酪蛋白合成方无负面影响。

国产和进口DMEM培养基培养CHO-C_(28)工程细胞的质量评价

我们用10L转瓶培养能高效表达HBsAg的重组中国仓鼠卵巢细胞(CHO-C_(28)细胞株),在相同的培养条件下比较国产和进口DMEM培养基的质量。结果表明,两种DMEM培养的细胞之生长及分泌的HBsAg之滴度没有显著改变,国产DMEM培养的细胞收液的沉淀收率略高于进口DMEM的,前者的最后收率也不低于后者。两种DMEM培养的细胞收液经纯化后,HBsAg的各项指标都符合基因工程乙肝疫苗制造及检定规程的标准,从试验结果可以看出,用国产DMEM培养基替代进口DMEM培养基是完全有可能的。

国产与进口DMEM培养ST细胞及应用效果比较

为比较国产与进口达尔伯克改良伊格尔培养基(dulbecco's modified eagle's medium,DMEM)培养猪睾丸(swine testis,ST)贴壁细胞和培养猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)和猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的效果,本试验采用国产与进口DMEM培养同批ST细胞,连续传代10代,并分别接种培养PPV、PRV和TGEV。结果显示,用国产DMEM培养ST细胞72 h后,连续10代细胞的密度均达到1.25×10^(6)个/mL以上,细胞增殖达5倍以上,与进口DMEM培养结果相似,两者无显著差异(P>0.05);两种培养基培养同一病毒的滴度相近,两者无显著差异(P>0.05)。试验表明,国产DMEM能达到进口培养基的培养水平,为国产DMEM替代进口DMEM来大规模培养PRV、PPV和TGEV等提供了科学依据。

α-MEM培养基和高糖DMEM培养基对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响

目的比较α-MEM和高糖DMEM两种培养基对小鼠破骨细胞前体细胞系RAW264.7细胞分化的影响。方法 (1)根据培养基和是否添加核因子κB受体激活蛋白配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)将细胞分为4组:α-MEM培养基组、添加RANKL的α-MEM培养基组、高糖DMEM培养基组、添加RANKL的高糖DMEM培养基组;(2)于培养第3天收集细胞,分别通过q PCR、免疫印迹实验观察分化相关标记物抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)、活化的T细胞核因子(nuclear factor of activated T-cells 1,NFATc1)、核因子κB受体活化因子(receptor activator for nuclear factor-κB,RANK)和组织蛋白酶(Cathepsin)K的mRNA及蛋白表达水平,并做TRAP染色观察各组成熟破骨细胞的形成情况,探讨添加RANKL后α-MEM培养基和高糖DMEM培养基对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响。结果 (1)与添加RANKL的高糖DMEM培养基相比,添加RANKL的α-MEM培养基使RAW264.7细胞的分化相关标记物TRAP、NFATc1、RANK及cathepsin K的mRNA表达水平增加,TRAP、NFATc1及cathepsin K的蛋白表达水平增加;(2)在α-MEM培养基或高糖DMEM培养基中添加RANKL均可使RAW264.7细胞分化为成熟破骨细胞,但添加RANKL的α-MEM培养基处理的细胞组中形成的成熟破骨细胞更多。结论添加RANKL的α-MEM培养基有利于RAW264.7细胞向破骨细胞分化。

用含10%胎牛血清的DMEM培养肠出血性大肠杆菌O157∶H7可增强其对HeLa细胞的黏附/擦拭损伤

目的:研究生长在不同培养基中的肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7对宿主细胞造成的黏附/擦拭损伤是否存在差异。方法:分别用LB、DMEM、DMEM(含10%胎牛血清)、DMEM(含终浓度为25mmol/L的HEPES)等4种培养基培养O157∶H7,然后感染HeLa细胞,利用Giemsa染色观察细菌黏附差异,进行肌动蛋白荧光染色实验并观察宿主细胞肌动蛋白聚集差异。结果:在含10%胎牛血清的DMEM培养基中培养EHECO157∶H7,其黏附力增加,聚集细胞骨架肌动蛋白的能力明显增强。结论:为进一步研究EHECO157∶H7的致病性,探索O157∶H7新的致病因子奠定了基础。

DMEM与Ham's F-10培养基对牛骨骼肌卫星细胞增殖分化影响比较研究

本研究旨在比较DMEM与Ham’s F-10两种培养基对牛骨骼肌卫星细胞体外培养过程中增殖与分化的影响。采用胶原酶和胰酶联用的方法分离骨骼肌卫星细胞后平均分为两组,分别采用DMEM和Ham’s F-10培养基对两组细胞进行培养,采用RT-PCR和免疫荧光方法对细胞进行鉴定,并观察比较两种培养基对牛骨骼肌卫星细胞增殖分化的影响。结论:本实验采用DMEM培养基培养7d后的牛骨骼肌卫星细胞不经过诱导分化能自行发生分化成肌管,而用Ham’s F-10培养基培养7d后的牛骨骼肌卫星细胞90%以上处于增殖状态,仅有少量细胞发生分化融合成肌管。本研究结果表明,Ham’s F-10比DMEM更有利于牛骨骼肌卫星细胞的增殖,抑制其分化。

DMEM和F-12K对肝癌细胞系HepG-2的影响

背景:HepG-2人肝肿瘤细胞株在遗传毒理学、细胞毒性等方向有广泛的研究。DMEM和F-12K是两种非常常见的培养基,然而在不同培养基中关于肝癌细胞系HepG-2生长状况的研究和文献资料十分罕见。目的:对比10%胎牛血清1%双抗的DMEM培养基和10%胎牛血清1%双抗的F-12K培养基培养的HepG-2细胞的状态。方法:分别用高糖DMEM和F-12K培养基培养HepG-2细胞,在细胞生长的阶段中用倒置显微镜观察并记录细胞生长状态。结果与结论:在DMEM中培养状态良好的HepG-2细胞不能或无法以正常的形态在F-12K培养基中生长,因此与HepG-2细胞有关的细胞培养需要用DMEM培养基培养。

DMEM体外培养结肠小袋纤毛虫的研究

目的建立结肠小袋纤毛虫DMEM培养方法,为进一步研究其生活史及致病机制奠定基础。方法用DMEM培养基培养结肠小袋纤毛虫,观察不同淀粉量、不同血清量、不同初始pH值及不同接种量下的培养效果。结果用DMEM培养基培养结肠小袋纤毛虫,最适淀粉含量为20 mg/安瓿,最适血清含量20%,最适pH值为7.0;种群自然增长率和种群所达到的最大种群密度随接种量的不同而明显改变。结论DMEM培养基可用于结肠小袋纤毛虫的体外培养。

RPMI-1640和DMEM/F12培养基对大鼠颈环上皮细胞培养的比较研究

目的:比较大鼠颈环上皮细胞在不同培养基中的生长状况。方法:分离培养大鼠颈环上皮细胞,分别采用RPMI-1640和DMEM/F12两种培养基培养,用倒置显微镜观察细胞的生长状态,MTT比色法检测细胞增殖活性。结果:倒置显微镜下,两组细胞在接种24 h后细胞大量贴壁并伸展,14 d时RPMI-1640组细胞呈现明显的凋亡现象,DMEM/F12组细胞生长状态良好。两种方法培养的颈环上皮细胞增殖活性差异有显著性意义(P﹤0.05)。结论:DMEM/F12培养基较RPMI-1640更适合颈环上皮细胞的贴壁及增殖。

DMEM培养基体外培养阴道毛滴虫效果的实验观察

目的研究阴道毛滴虫在不同浓度胎牛血清DMEM培养基中的生长效果,比较阴道毛滴虫在DMEM培养基与15%肝浸汤培养基中的生长情况。方法调节DMEM培养基中胎牛血清终浓度分别为10%、20%、50%,接种密度为15×104/ml的阴道毛滴虫,置37℃恒温箱培养,每24小时取样一次,光镜观察虫体形态,利用血球计数板计数阴道毛滴虫增殖密度并计算增殖倍数。接种密度为1. 8×104/ml的阴道毛滴虫分别至DMEM、15%肝浸汤培养基中,比较阴道毛滴虫生长时间、增殖倍数及形态。结果接种密度为15×104/ml的阴道毛滴虫在终浓度为10%、20%、50%胎牛血清的DMEM培养基内分别培养48 h、24 h、72 h达增殖高峰。接种密度为1. 8×104/ml的阴道毛滴虫在DMEM培养基中120 h增殖倍数达高峰,为32. 63倍,虫体形态大而圆;在15%肝浸汤培养基中96 h增殖倍数达高峰,为59. 40倍,虫体形态多呈梨形;虫体在DMEM培养、肝浸汤培养基中生存时间最长分别为14 d、5 d。结论阴道毛滴虫在DMEM培养基中增殖率低于在肝浸汤培养基中,但虫体在DMEM培养基中存活时间更长,其形态大而圆,因此DMEM培养基适合阴道毛滴虫的体外生长,保种,染色,及形态观察。