6-Gingerol, asarinin, and deoxyschizandrin improve bronchial epithelium functions in an interleukin-13einduced BEAS-2B cell model

Objective:To explore the effects of 6-gingerol,asarinin,and deoxyschizandrindthe main components of Zingiber officinale(Willd.)Rosc.(Gan Jiang),Asarum heterotropoides f.var.mandshuricum(Maxim.)(Xi Xin),and Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.(Wu Wei Zi),respectivelydon an interleukin(IL)-13einduced BEAS-2B cell model in vitro.Methods:The BEAS-2B cell model was established using 25 ng/mL IL-13 combined with 1%fetal bovine serum(FBS)in vitro.Mitoquinone mesylate(Mito-Q)treatment was used as a positive control group,and different concentrations of 6-gingerol,asarinin,and deoxyschizandrin were used to treat the models.The level of reactive oxygen species(ROS)production was detected by flow cytometry.The expression levels of LC3B,Beclin1,adenosine 50-monophosphate(AMP)eactivated protein kinase(AMPK),phosphory-lated-AMPeactivated protein kinase(P-AMPK),dynamin-related protein 1(DRP1),and mitochondrial fusion protein 2(MFN2)were detected by Western blot.Mitochondrial membrane potential(MMP)assay kit with JC-1 was utilized to detect the level of MMP.Results:The BEAS-2B cells exposed to 25 ng/mL IL-13 with 1%FBS showed an increased ROS level and a decreased MMP.6-Gingerol,asarinin,and deoxyschizandrin were able to downregulate ROS level and upregulate the MMP in the BEAS-2B model.Asarinin and deoxyschizandrin reduced the expression of autophagy protein LC3B,while deoxyschizandrin significantly increased the expression of DRP1 in the BEAS-2B model.Conclusion:6-Gingerol,asarinin,and deoxyschizandrin can reduce ROS generation and increase MMP,but have different regulatory effects on the expression of autophagy protein and mitochondrial mitotic protein.The three components have both synergistic and complementary effects in classic medicine compatibility.This study may provide an innovative strategy to reduce the lung inflammation related to IL-13.

Preparative separation and purification of deoxyschizandrin from Schisandrae Sphenantherae Fructus by high-speed counter-current chromatography

A high-speed counter-current chromatography(HSCCC)method was successfully developed for the preparative separation and purification of deoxyschizandrin from Schisandrae Sphenantherae Fructus in one step.The purity of deoxyschizandrin was 98.5%,and the structure was identified by MS,UV and NMR.This method was simple,fast,convenient and appropriate to prepare pure compound as reference substances for related research on Schisandrae Sphenantherae Fructus.

A new synthesis method of (±) -deoxyschizandrin

DEOXYSCHIZANDRIN 10,isolated from Schizandra chinensis baill,exhibits anti-hepatitisvirus activity.Recently considerable interest in the synthesis of 10 has arisen from its bioactiv-ities.In this note a new highly efficient route to synthesize（±）-deoxyschizandrin is re-ported.Our synthetic strategy（outlined in scheme 1）started from gallic acid 1 in 10 stepswith the overall yield of 12%,and employed I2/NaOEt oxidative coupling reaction as a

五味子甲素对炎性肠病小鼠结肠NF-κB/COX-2信号通路的影响

目的:考察五味子甲素对三硝基苯磺酸所致炎性肠病小鼠核转录因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/环氧合酶2(cyclooxygenase,COX-2)通路的抑制作用。方法:采用三硝基苯磺酸灌肠诱导小鼠炎性肠病,采用ELISA、免疫组化、WB法测定小鼠体内NF-κB及COX-2表达,采用RT-PCR法测定小鼠结肠组织NF-κB及COX-2 mRNA表达,观察小鼠体质量、腹泻症状和疾病活动指数。结果:炎性肠病小鼠体内NF-κB、COX-2含量、蛋白及其mRNA表达增多,五味子甲素可抑制NF-κB、COX-2 mRNA和蛋白表达,抑制炎性肠病小鼠体质量减轻和疾病活动指数,改善小鼠腹泻情况。结论:五味子甲素可通过抑制NF-κB/COX-2通路的激活而抑制炎症反应,对三硝基苯磺酸诱导的炎性肠病小鼠具有治疗作用。

五味子甲素对去卵巢骨质疏松大鼠SDF-1/CXCR4信号通路的影响

目的探究五味子甲素对去卵巢骨质疏松症大鼠的治疗作用以及对基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)信号通路的影响。方法采用去卵巢法构建骨质疏松症大鼠模型,将建模成功的60只大鼠随机分为模型组、五味子甲素低(20 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组、阿仑膦酸钠(1 mg/kg)组、五味子甲素高剂量+SDF-1/CXCR4通路抑制剂(AMD3100)(40 mg/kg+5 mg/kg)组,每组12只。另取12只大鼠作为假手术组(手术过程中仅暴露卵巢不切除)。建模结束后,各组给予对应药物干预,每天1次,连续12周。采用双能X射线骨密度仪检测大鼠左、右股骨骨密度(BMD);酶联免疫吸附法检测大鼠血清中Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(CTX-Ⅰ)、骨钙素(OC)水平;HE染色观察大鼠股骨组织病理学变化;荧光定量PCR法检测大鼠股骨组织中SDF-1、CXCR4信使RNA(mRNA)水平;蛋白印迹法检测大鼠股骨组织中SDF-1、CXCR4蛋白水平。结果假手术组大鼠股骨组织骨小梁结构正常,排列规则;与假手术组相比,模型组大鼠股骨组织骨小梁稀疏断裂,数量减少,排列紊乱,左、右股骨BMD、血清中OC、CTX-Ⅰ水平、股骨组织中SDF-1、CXCR4 mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,五味子甲素低、高剂量组大鼠股骨组织病变程度依次减轻,左、右股骨BMD、血清中OC、CTX-Ⅰ水平、股骨组织中SDF-1、CXCR4 mRNA和蛋白水平依次升高(P<0.05);阿仑膦酸钠组和五味子甲素高剂量组大鼠股骨组织病理学变化及各项指标差异比较均无统计学意义(P>0.05);AMD3100可逆转高剂量五味子甲素对骨质疏松症大鼠上述指标的改善效果(P<0.05)。结论五味子甲素可抑制骨质疏松症大鼠BMD的下降,减轻大鼠股骨组织病变,改善大鼠骨质疏松,其机制可能与激活SDF-1/CXCR4信号通路有关。

HPLC法测定更年安片中五味子甲素和五味子乙素的含量

目的 测定更年安中五味子甲素和五味子乙素的含量。方法 样品用环己烷超声提取 ,过滤 ,蒸干。残渣用乙腈 -甲醇 (1∶ 1)溶解后 ,经 HPL C仪测定。色谱柱 :Phenomenex C1 8柱 (5μm,2 5 0 mm× 4.6 m m) ,柱温 2 2℃ ,流动相 :乙腈 -甲醇 -水 (15∶ 15∶ 10 ) ,检测波长 :2 5 4nm。结果 更年安中五味子甲素和五味子乙素与其它成分分离良好 ,保留时间分别约为 14.6和 19.1min。五味子甲素对照品线性浓度范围 1.0～ 80μg/ m L ,r=0 .9996 ,平均回收率为 96 .5 % ,RSD为 3.2 8% (n=5 )。五味子乙素对照品线性浓度范围 1.0～ 80 μg/ m L,r=0 .9998,平均回收率为 94.7% ,RSD为 3.49% (n=5 )。结论 本法灵敏度高、操作简便、结果准确 。

HPLC测定柏子养心丸中五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的含量

目的:建立用 RP-HPLC 法测定柏子养心丸中五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素的含量。方法:样品用甲醇超声提取,过滤,取续滤液,采用 RP-HPLC 法直接测定,用十八烷基键合相,甲醇-水-冰醋酸(71:29:0.1)为流动相,流速1.0mL·min^(-1),检测波长220 nm。结果:五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素分别在0.0046～0.460 μg(r=1.000);0.0054～0.540 μg(r=1.000);0.0055～0.553 μg(r=0.9998)范围内,质量与峰面积具有良好的线性关系。平均加样回收率(n=6)分别为94.2%～102.4%,99.1%～106.8%,98.3%～105.6%;RSD 分别为2.2%～3.8%,2.7%～4.1%,1.9%～4.0%。方法用于柏子养心丸中五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素含量的测定,RSD(n=6)分别为2.3%～4.0%,1.8%～3.5%,1.5%～4.2%。结论:方法具有灵敏度高、准确、快速和简便的特点,能用于柏子养心丸中五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素含量的测定。

高效液相色谱法同时测定护肝片中五味子甲素和五味子乙素的含量

目的:建立护肝片中五味子甲素和五味子乙素的含量测定方法。方法:样品用甲醇超声,提取液滤过,采用RP-HPLc法,DiamonsilTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm)分析柱,乙腈-水-冰醋酸(70:30:0.1)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长为254 nm。结果:五味子甲素和五味子乙素的保留时间分别约为19 min和26 min,并与其邻近峰的分离度均大于1.5。五味子甲素和五味子乙素的线性范围分别为0.02-0.12μg(r=0.9999)和0.048-0.288μg(r=0.9999),最低检测限分别为0.291 ng和0.806 ng,平均回收率和RSD分别为97.25%,2.6%和97.07%,1.9%。结论:方法简便、快速,结果准确可靠,可作为护肝片的含量测定方法。

五味子甲素和五味子醇甲对四氯化碳所致肝脏损伤的保护作用

目的 研究五味子甲素 (Deoxyschizandrin)和五味子醇甲 (Schizandrin)对血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶 (AST)、血清白蛋白 (ALB)和总蛋白 (TP)的影响。方法 复制小鼠CCl4 肝损伤模型 ,用五味子甲素和五味子醇甲防治 ,用生化方法测定血清ALT、AST、ALB和TP。结果 与CCl4 组相比 ,五味子醇甲组和五味子甲素组ALT、AST均显著降低(P <0 0 1) ,ALB和TP无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;五味子醇甲组和五味子甲素组之间各项指标均无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 五味子甲素和五味子醇甲均对CCl4 所致肝损伤具有一定的保护作用 。

五味子甲素对脑胶质瘤C6细胞生长的抑制作用及其机制

目的:探讨五味子甲素对脑胶质瘤C6细胞生长的抑制作用,阐明其作用机制。方法:培养大鼠脑胶质瘤C6细胞,将其分为对照组及50、100和200mg·L-1五味子甲素组,采用MTT法检测C6细胞增殖率,流式细胞术分析细胞周期百分率,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养上清中CyclinD1、Bax、Bcl-2和Casepase-3蛋白表达水平。结果:与对照组比较,24和48h时50、100和200mg·L-1五味子甲素组细胞增殖率均明显降低(P<0.01),72h时100和200 mg·L-1五味子甲素组细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,200mg·L-1五味子甲素组SubG1期细胞百分率升高(P<0.05),S期细胞百分率降低(P<0.05)。与对照组比较,100和200mg·L-1五味子甲素组细胞CyclinD1蛋白表达水平降低(P<0.01),不同浓度五味子甲素组Bax蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),200mg·L-1五味子甲素组Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.01),不同浓度五味子甲素组Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.01),200mg·L-1五味子甲素组Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.01)。结论:五味子甲素通过下调CyclinD1蛋白表达水平、上调促凋亡因子Bax和Bcl-2表达水平而抑制C6细胞的生长。

HPLC法测定南北五味子中五味子甲素和五味子酯甲的含量

目的建立HPLC法同时测定南北五味子中五味子甲素和五味子酯甲的含量。方法十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-水(77∶23)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长230nm。结果五味子甲素和五味子酯甲的线性范围分别为0.125～1.25μg和0.08～0.8μg,r分别为0.9990和0.9986,平均加样回收率分别为100.1%、100.0%(RSD为0.15%、0.28%。南五味子)和99.7%、101.2%(RSD为0.32%、0.67%。北五味子)(n=5)。结论该方法简便、专属、重现性好,可用于测定五味子中五味子甲素和五味子酯甲的含量。

不同产地五味子的木脂素类成分的含量测定

目的 用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法同时测定五味子中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素及五味子乙素的含量,对不同产地五味子的木脂素类成分进行研究.方法 采用Venusil XBP C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为甲醇（A）-水（B）,梯度洗脱（0～25 min,A 为72%;26～50 min,A 为77%）,流速1 mL·min-1,柱温25 ℃,检测波长250 nm.结果 五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素及五味子乙素分别在1.27～10.17 μg（r＝0.999 6）,0.27～2.13 μg（r＝0.999 0）,0.32～2.52 μg（r＝0.999 5）,0.89～7.19 μg（r＝0.999 4）范围内呈良好的线性关系;平均回收率分别为100.51%,101.19%,102.05%,99.73%,RSD分别为2.09%,1.83%,1.99%,1.34%.结论 该方法准确、简便、分离好,无干扰,可为完善五味子质量评价提供依据.

五味子甲素在人肝星状细胞中的抗纤维化作用

目的:研究五味子甲素对人肝星状细胞系LX-2细胞的增殖、纤维化指标及凋亡相关蛋白的影响。方法:采用不同浓度的五味子甲素与肝星状细胞LX-2共孵育,MTT法检测五味子甲素对细胞的抑制作用,RT-PCR法和Western blot法测定纤维化指标I型胶原α亚基1(collagen type I alpha 1,collagen I-1)和α-平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达量,并检测五味子甲素对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达量的影响。结果:五味子甲素在不同浓度时可抑制人肝星状细胞系LX-2细胞的增殖,可降低collagenⅠ和α-SMA的mRNA水平和蛋白表达量(P<0.05),并能降低Bcl-2的mRNA水平和蛋白表达量以及Bcl-2/Bax的比值(P<0.05)。结论:五味子甲素可能通过抑制细胞增殖、降低纤维化指标的表达,从而发挥抗肝纤维化的作用。

兴山五味子中五味子甲素的提取及测定

Deoxyschizandrin was extracted from Schisandra incarnata by methanol reflux. The extraction processand RP-HPLC separation conditions were optimized. The optimal extraction conditions were as follows: nine volumes of80% methanol reflux 120min, for two times. A C18 column was used with the mobile phase of methanol-water(85∶15)atthe detection wavelength of 220nm. The column temperature was 30℃ with the flow rate of 1ml/min. The average contentof deoxyschizandrin in Schisandra incarnata was 0.22%.

五味子甲素对大鼠成骨细胞增殖分化的影响

目的 探讨五味子甲素体外对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响。方法 用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,五味子甲素以不同浓度加入细胞培养体系 ,作用不同时间后 ,用MTT法检测成骨细胞的增殖情况 ;用对硝基苯二钠基质动力学法 (PNPP)测定细胞内碱性磷酸酶的活性 ,用改良的Lowry法测蛋白含量。 结果 五味子甲素在 0 75× 10 -5mol/L及 0 75× 10 -9mol/L浓度范围内 2 4h ,72h ,0 75× 10 -4 ～ 0 75× 10 -7mol/L 48h促进成骨细胞增殖 ,在 0 75× 10 -5～ 0 75× 10 -6mol/L浓度范围内 48h提高成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。结论 五味子甲素体外能促进成骨细胞的增殖与分化。

五味子甲素研究进展

五味子甲素为五味子木脂素类有效成分。该文对近年来关于五味子甲素的研究情况作一系统综述,包括其药理作用、提取工艺、测定方法,为进一步研究、开发和合理应用五味子甲素提供参考。

北五味子及其不同炮制品中五味子甲素和乙素的含量测定

目的：测定北五味子及其不同炮制品中五味子甲素、五味子乙素的含量。方法：采用高效液相色谱法。Spherisorb 10 ODS1（4、6mm×250mm，10μm），以甲醇-水（70：30）为流动相，检测波长为254nm。线性范围0．1-0．5μg，相关系数为O．995．平均回收率为100．3％和100．4％，RSD=0．87％和2．85％（n=5）。结果：五味子甲素和乙素在生品、醋炙、炒制、酒炙、蒸炙、蜜炙品中的平均含量分别为0．13％，0．064％，0．052％，0．064％，0．11％，0．13％和O．21％，0．298％，0．238％，0．302％，0．216％，0．214％。结论：方法准确，快速，重现性好，可用于五味子各种炮制品的质量评价。

毛细管电泳法测定五味子中五味子甲素

采用毛细管电泳法,以15 mmol·L^(-1)磷酸氢二钠、15 mmol·L^(-1)硼砂和20%乙醇的缓冲溶液作为运行电解质溶液,获得了五味子甲素与五味子中其余成分的有效分离,且峰形较好。测得五味子甲素线性回归方程为y=-0.72+24.9x,相关系数为0.998;线性范围为0.03～0.37 g·L^(-1)。测得的五味子中五味子甲素质量分数为1.18%,相对标准偏差为2.63%(n=6);平均回收率为99.6%。