基于Fas/FasL介导的凋亡信号通路研究通管方对输卵管炎性不孕模型大鼠的作用机制

目的:探讨通管方对输卵管炎性不孕(SI)模型大鼠输卵管组织中Fas/FasL通路的影响。方法:采用经阴道内接种混合菌液的方法,建立输卵管炎性不孕大鼠模型。造模后,77只SD雌性大鼠随机分成空白组、假手术组、模型组、妇可靖胶囊组(0.29 g·kg^(-1)·d^(-1))、通管方低剂量组(7.515 g·kg^(-1)·d^(-1))、通管方中剂量组(15.03 g·kg^(-1)·d^(-1))、通管方高剂量组(30.06 g·kg^(-1)·d^(-1)),各组大鼠分别灌胃给药28 d后处死并取材。采用蛋白免疫印迹法(WB)检测SI模型大鼠输卵管组织中Fas、FasL蛋白及Caspase-1的表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测SI模型大鼠血清IL-4、IL-10、Caspase-1的表达变化。结果:与空白组比较,模型组血清中IL-4和IL-10的水平均明显降低,血清和输卵管组织中的Caspase-1水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,通管方各剂量组和妇可靖胶囊组降低了血清和输卵管组织中的Caspase-1的表达(P<0.01),上调了血清中IL-4和IL-10水平、输卵管组织中Fas和FasL蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。其中,通管方高剂量组的作用均明显优于其他剂量组和妇可靖胶囊组(P<0.05,P<0.01)。结论:通管方可能通过调控Fas/FasL凋亡信号通路而消除SI模型大鼠输卵管炎症。

穿心莲内酯通过抑制Fas/FasL信号轴降低子宫内膜癌Ishikawa/DPP细胞对顺铂的耐药性

目的:探讨穿心莲内酯(Andro)调节脂肪酸合成酶(Fas)/脂肪酸合成酶配体(FasL)信号轴对子宫内膜癌Ishikawa细胞顺铂(DDP)耐药性的影响。方法:采用0、5、10、20μg/mL DDP分别处理Ishikawa细胞和顺铂耐药的Ishikawa/DPP细胞,0、5、10、25、50μmol/L Andro处理Ishikawa/DDP细胞,MTT法检测细胞增殖情况并为后续实验选择合适的给药剂量。将Ishikawa/DDP细胞随机分为对照组、DDP组(DDP干预)、Andro组(DDP、Andro干预)、pcDNA3.1-NC组(转染pcDNA3.1+DDP、Andro干预)、pcDNA3.1-Fas/FasL组(转染pcDNA3.1-Fas/FasL+DDP、Andro干预),24 h后,采用qPCR法检测Fas、FasL mRNA的表达,平板克隆形成实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞克隆能力、细胞迁移与侵袭和细胞凋亡,WB法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、BAX、Bcl-2、MMP-2、PD-L1、多药耐药蛋白-1(MDR-1)及Fas、FasL蛋白表达。结果:DDP以剂量依赖的方式抑制Ishikawa和Ishikawa/DPP细胞增殖,并且与Ishikawa细胞比较,Ishikawa/DPP细胞对DDP的敏感性更低(均P<0.05);Andro以剂量依赖性的方式抑制Ishikawa/DPP细胞的增殖(均P<0.05)。Ishikawa/DPP细胞中Fas、FasL的表达水平均高于Ishikawa细胞(均P<0.05)。选取20μg/mL DDP和25μmol/L Andro为干预剂量,干预时间24h。与对照组比较,DDP组Ishikawa/DPP细胞中PD-L1、MDR-1、Fas、FasL mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而克隆形成率、迁移与侵袭细胞数、凋亡率差异均无统计学意义(均P>0.05);与DDP组比较,Andro组Ishikawa/DPP细胞中Fas、FasL mRNA表达水平、细胞克隆形成率、迁移与侵袭细胞数、PCNA、Bcl-2、MMP-2、PD-L1、MDR-1、Fas、FasL蛋白表达水平显著降低,BAX蛋白表达水平及凋亡率显著升高(P<0.05或P<0.01),pcDNA3.1-NC组与Andro组类似;与pcDNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1-Fas/FasL组Ishikawa/DPP细胞上述指标变化均被逆转(P<0.05)。结论:Andro可能通过抑制Fas/FasL信号轴来抑制Ishikawa/DPP细胞增殖、迁移与侵袭,促进凋亡,从而降低细胞对DDP的耐药性。

水飞蓟宾抑制Fas/FasL信号通路对肺结核大鼠炎症损伤及巨噬细胞凋亡的影响

目的:探究水飞蓟宾对肺结核(TB)大鼠肺部炎症损伤、巨噬细胞凋亡的影响,及对死亡受体Fas及其配体FasL的调控作用。方法:采用尾静脉注射结核分枝杆菌(Mtb)法制备TB大鼠模型,并随机分为模型组、水飞蓟宾组、Fas过表达重组蛋白(pcDNA-Fas)组、pcDNA-Fas阴性对照(pcDNA-NC)组、水飞蓟宾+pcDNA-Fas组,每组15只,另取15只大鼠为正常对照组。抗酸染色检测肺组织感染情况;HE染色观察肺组织病理变化;ELISA法检测肺组织TNF-α、IL-6表达;Annexin VFITC/PI双染结合流式细胞术检测肺泡巨噬细胞凋亡率;Western blot检测Fas、FasL、caspase8、caspase3、巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠肺组织炎症因子表达、肺泡巨噬细胞凋亡率升高,肺组织Mtb感染及干酪样坏死严重,Fas/FasL介导的caspase8/3凋亡途径活化(P<0.05)。与模型组相比,水飞蓟宾组大鼠肺组织炎症因子表达、肺泡巨噬细胞凋亡率降低,肺组织Mtb感染及干酪样坏死缓解,Fas/FasL介导的caspase8/3凋亡途径活性降低(P<0.05)。pc-DNA-Fas可进一步激活Fas/FasL介导的caspase8/3凋亡途径活化,加重肺组织Mtb感染及干酪样坏死,促进肺组织炎症损伤及巨噬细胞凋亡,并减弱水飞蓟宾发挥的抗Fas/FasL活化、抗炎及抗巨噬细胞凋亡作用(P<0.05)。结论:水飞蓟宾可能通过抑制Fas/FasL信号通路发挥抗Mtb感染、抗肺组织巨噬细胞凋亡及抗肺部炎症损伤作用。

Fas/FasL传导通路研究电针对慢性萎缩性胃炎小鼠的作用机制

目的探讨电针合募配穴对慢性萎缩性胃炎小鼠Fas/FasL传导通路的影响,揭示电针治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制。方法制备慢性萎缩性胃炎小鼠模型。将已成模的慢性萎缩性胃炎小鼠分为模型组10只、普通针刺组、电针组各20只,并另设10只为对照组。对照组、模型组不进行操作;普通针刺组予合募配穴(中脘-足三里)普通针刺治疗;电针组予合募配穴(中脘-足三里)电针治疗,采用免疫组化法检测各组小鼠胃组织中Fas和FasL的表达水平。结果治疗前普通针刺组、电针组、模型组的体质量都显著低于对照组(P<0.05),治疗14 d后普通针刺组、电针组的体质量高于模型组(P<0.05),电针组治疗14 d后的体质量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前普通针刺组、电针组、模型组的血清IL-6、IL-1β含量都高于对照组(P<0.05),治疗14 d后普通针刺组、电针组的血清IL-6、IL-1β含量低于模型组(P<0.05),电针组治疗14 d后的血清IL-6、IL-1β含量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗14 d后普通针刺组、电针组、对照组的胃黏膜组织病理形态评分与黏膜组织Fas蛋白、FasL蛋白相对表达水平都低于模型组(P<0.05),电针组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针在慢性萎缩性胃炎小鼠的应用能介导Fas/FasL传导通路的表达,抑制血清IL-6、IL-1β的表达,促进恢复小鼠的体质量,能改善小鼠的胃黏膜病理状况。

移植肾AR时病理诊断与细胞凋亡和Fas/FasL的表达

目的:探讨移植肾急性排斥(AR)时细胞凋亡与Fas和Fas配体(FasL)表达的作用及其临床意义。方法:分别用原位末端标记技术(TUNEL法)和免疫组织化学方法检测26例移植肾AR标本中细胞凋亡和Fas/FasL表达情况。结果:细胞凋亡和Fas/FasL表达主要在AR移植肾小管上皮发生,且凋亡指数和Fas/FasL表达与肾组织病理损伤程度平行,与正常肾对照组和移植肾功能稳定组比较差异显著。结论:肾小管上皮细胞凋亡在AR所致的移植肾损伤中起重要作用,Fas/FasL系统可能参与移植肾AR,是造成肾小管上皮细胞凋亡的重要因素。TUNEL法检测细胞凋亡可作为判断移植肾病理变化和预后的重要指标。

补肾活血汤对大鼠腰椎间盘退行性变模型Fas/FasL信号通路的影响

目的 探索补肾活血汤对大鼠腰椎间盘退行性变模型脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, Fas)/脂肪酸合成酶配体(fatty acid synthase ligand, FasL)信号通路的影响。方法 50只大鼠随机分成空白组、假手术组、补肾活血汤组、腰痹通组、模型组,每组10只。空白组、假手术组、模型组每日10 mL/kg生理盐水灌胃;补肾活血汤组每日28.98 g/kg补肾活血汤灌胃;腰痹通组每日0.34 g/kg腰痹通灌胃,各组均干预4周。干预结束后,取腰椎间盘组织,番红固绿、Masson染色观察病理学变化,免疫组织化学法计算积分光密度(integral optical density, IOD)值,Western bolt检测Fas、FasL蛋白表达水平,RT-PCR检测Fas、FasL mRNA表达水平。结果 空白组、假手术组细胞形态基本正常,细胞核清晰可见;模型组纤维环碎裂明显,纤维环与髓核间中断,结构不清晰,且染色较深;补肾活血汤组纤维环轻度破裂,髓核细胞及空泡数量略有减少,髓核中基质轻度凝结。与空白组比较,模型组Fas、FasL IOD值均明显升高(P<0.01),Fas、FasL蛋白和mRNA表达水平均明显降低(P<0.01)。假手术组与空白组间Fas、FasL IOD值、蛋白和mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,补肾活血汤组、腰痹通组Fas、FasL IOD值均明显降低(P<0.01),Fas、FasL蛋白和m RNA表达水平均明显升高(P<0.01)。与腰痹通组比较,补肾活血汤组Fas、FasL IOD值均明显降低(P<0.01),Fas、FasL蛋白和m RNA表达水平均明显升高(P<0.01)。结论 补肾活血汤能够有效治疗因腰椎退行性变对髓核及纤维环造成的损伤,促进相关蛋白的表达,可能与其调控Fas/FasL信号通路相关。

12-去氧佛波醇-13-棕榈酸酯通过Fas/FasL通路调控K562细胞凋亡

目的探讨12-去氧佛波醇-13-棕榈酸酯(DP)诱导人白血病K562细胞凋亡及可能的分子机制。方法Hoechst33342/PI染色后,荧光显微镜下观察不同浓度DP作用后的K562细胞形态学变化;DNA琼脂糖凝胶电泳法检测DP作用后的细胞DNA“梯带”;分光光度法检测半胱氨酸蛋白酶(caspase)3酶的活性;实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测caspase3、Fas、FasL mRNA表达;Western印迹检测procaspase3、Fas、FasL蛋白表达。结果荧光显微镜下可见:DP作用的K562细胞形态学变化明显;DNA琼脂糖凝胶电泳可见清晰的梯带,随剂量的增加片段化更加明显;与control组比较,DP的作用使caspase3酶活明显增加(P<0.05,P<0.01);DP的作用使caspase3、Fas、FasL mRNA表达明显增加(P<0.05,P<0.01);DP能明显下调procaspase3蛋白表达,明显上调Fas、FasL蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论Fas/FasL通路参与DP诱导K562细胞凋亡的调控。

特发性肺纤维化患者支气管/肺泡上皮细胞凋亡和Fas/FasL基因表达

目的:检测细胞凋亡、Fas/FasL mRNA及其蛋白在特发性肺纤维化患者肺泡/支气管上皮细胞的表达,探讨细胞凋亡和促凋亡信号在此疾病中的意义。方法:应用末端原位杂交(TUNEL)、原位杂交、免疫组化技术,对12例特发性肺纤维化患者的肺活检组织(IPF组)及10例正常肺组织(对照组)检测了细胞凋亡、Fas/FasL mRNA及其蛋白表达的变化。结果:特发性肺纤维化组肺泡/支气管上皮细胞凋亡指数上调,明显高于对照组(P<0.01);IPF组肺泡/支气管上皮细胞中Fas/FasL mRNA及其蛋白表达上调,高于对照组(P<0.01);IPF组肺泡/支气管上皮细胞凋亡指数与其Fas/FasL mRNA及蛋白表达之间均无明显相关(P>0.05)。结论:肺纤维化时肺泡/支气管上皮细胞凋亡上调,Fas/FasL mRNA及其蛋白表达增强,在肺纤维化发生、发展中起重要作用。

Fas/FasL与恶性黑色素瘤的关系

Fas／FasL系统在恶性黑色素瘤的演变过程中有重要作用。近年来，在黑色素瘤研究领域出现了许多关于Fas／FasL系统的新发现和观点．探索了以Fas／FasL系统为靶点治疗恶性黑色素瘤的新途径．为今后恶性黑色素瘤的治疗研究指明了方向。现就Fas／Fasl与人类恶性黑色素瘤的关系综述如下。

复方丹参滴丸对培养的乳鼠心肌细胞缺氧及缺氧/复氧时Fas/FasL蛋白表达的影响

探讨复方丹参滴丸 (DanShenPill,DSP)对培养的乳鼠心肌细胞缺氧及缺氧 /复氧时凋亡相关基因Fas/FasL蛋白表达的影响。方法 :按常规培养新生 4d乳鼠心肌细胞 ,于培养 2 4h后进行缺氧及缺氧 /复氧实验 ,以免疫组织化学方法检测心肌细胞Fas/FasL蛋白表达的变化。结果 :缺氧 4 5h及 10 5h后 ,心肌细胞Fas/FasL蛋白的阳性表达指数 (positiveexpressionindex ,PEI %)均显著高于对照。 10 5h组与 4 5h组无明显差异。复方丹参滴丸组PEI明显低于缺氧组 (P <0 0 5 )。缺氧 30min后再给氧 4h与 10h ,心肌细胞Fas/FasL蛋白的PEI显著高于对照 ,复氧 10h组与 4h组无明显差异 ,复方丹参滴丸组PEI低于缺氧复氧组 (P <0 0 5 )。结论 :缺氧及缺氧 /复氧时均有凋亡相关基因Fas及其配体FasL蛋白表达的增强 ,复方丹参滴丸可通过下调Fas/FasL蛋白表达以减少凋亡从而减轻缺氧损伤及缺氧 /复氧损伤。

三七总皂甙对肺缺血再灌注损伤时细胞凋亡及Fas/FasL的影响

目的:探讨细胞凋亡与肺缺血再灌注损伤的关系以及三七总皂甙的作用及机制。方法:健康日本大耳白兔84只,随机分为对照组、肺缺血再灌注1、3、5h组和三七总皂甙干预1、3和5h组。复制肺缺血再灌注损伤模型。采用原位缺口末端标记(TUNEL)法观测肺组织细胞凋亡指数,免疫组化和原位杂交技术检测肺组织细胞Fas/FasL系统蛋白和基因表达的变化。结果:肺缺血再灌注组肺组织细胞凋亡指数和Fas/FasL蛋白及基因表达均显著高于对照组(均P<0.01)。三七总皂甙干预组Fas/FasLmRNA及其蛋白质的表达显著低于缺血再灌注组(P<0.01),肺组织细胞凋亡指数也显著低于缺血再灌注组(P<0.01)。肺组织细胞凋亡指数分别与Fas/FasL蛋白和Fas/FasLmRNA之间均呈显著正相关(r分别=0.540,0.658,0.668,0.686;均P<0.01)。结论:Fas/FasL系统活化启动的肺组织细胞凋亡可能参与了肺缺血再灌注损伤的发生。三七总皂甙可能通过抑制Fas/FasL系统的激活,阻遏肺组织细胞凋亡,从而减轻肺缺血再灌注损伤。

大鼠实验性肾缺血/再灌注引起肾小管上皮细胞凋亡及其与Bcl-2,Fas/FasL表达变化的关系

目的 :探讨大鼠实验性肾缺血再灌注引起肾脏损伤、肾小管上皮细胞凋亡情况及其与Bcl 2 ,Fas/FasL表达变化的关系 .方法 :建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型 ,在不同时间点处死动物取肾组织石蜡包埋切片 ,HE染色分析肾组织病理损伤程度 ,用TUNEL法标记检测肾小管上皮细胞凋亡的变化 ,SABC免疫组化方法检测Bcl 2 ,Fas与FasL蛋白表达的变化 .结果 :缺血再灌注后肾组织的病理损伤主要发生在肾小管 ,肾小管上皮细胞凋亡指数增加 ,且随缺血再灌注时间延长而进一步上升 ,4 8h达高峰 (P <0 0 5 ) .Bcl 2蛋白在对照组呈弱阳性表达 ,缺血 3 0min ,60min后再灌注 0h有少量表达 ,再灌注 2 4 ,4 8及 72h呈阳性表达 ,4 8h达高峰 (P <0 0 5 ) ,并以远曲小管为主 .Fas,FasL蛋白在对照组呈阴性表达 ,缺血 3 0 ,60min后再灌注 0h有少量表达 ,再灌注 2 4 ,4 8及 72h呈阳性表达 ,以 72h时达高峰 (P <0 0 5 ) ,多表达在远曲小管 .HE染色可见肾缺血再灌注后各组均有不同程度的肾小管上皮组织片状坏死灶 ,以近曲小管为主 ,坏死灶周围有炎性细胞浸润 .结论 :肾缺血再灌注可诱导肾小管上皮细胞凋亡 ,Bcl 2 。

犬急性心肌梗死晚期再灌注对心肌Fas/FasL系统的影响及其可能的氧化应激机制

目的:探讨急性心肌梗死晚期再灌注对心肌细胞凋亡基因Fas/FasL表达的影响及其可能的氧化应激机制。方法:18条健康成年杂种犬,按随机方法分为3组,每组6条。晚期再灌注组:结扎冠状动脉前降支6 h后再灌注6 h;持续缺血组:开胸后6 h,结扎冠状动脉前降支6 h,不行再灌注处理;对照组:冠状动脉前降支只穿线不结扎持续12 h。免疫组化法检测梗死边缘区心肌Fas和FasL蛋白表达,TUNEL法测心肌细胞凋亡指数(AI),比色法测定心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原性谷胱甘肽酶(GR)活性、丙二醛(MDA)含量等。结果:心肌Fas和FasL蛋白表达以及细胞凋亡指数在持续缺血组和晚期再灌注组明显高于对照组(分别为P<0.05,P<0.01),而且晚期再灌注组明显高于持续缺血组(P<0.05)。持续缺血组和晚期再灌注组的心肌细胞SOD活性和GR活性明显低于对照组(分别为P<0.05,P<0.01),而MDA含量均明显高于对照组(P<0.05),并且两组之间亦有显著差别(P<0.05)。结论:AM I晚期再灌注使梗死边缘区心肌细胞Fas/FasL蛋白表达以及细胞凋亡指数增加,提示晚期再灌注仍然存在再灌注损伤,其机制可能与氧化应激有关。

猪分离卵泡体外培养过程中Fas/FasL对颗粒细胞凋亡的作用

从猪卵巢分离完整有腔卵泡,按质量分为3类:健康卵泡、早期闭锁卵泡和晚期闭锁卵泡。猪分离卵泡经眼观检查后再行石蜡切片和HE染色,形态学研究表明,眼观检查对于健康卵泡的判定准确率为92%。取健康卵泡按直径大小分为3组:直径>5mm大卵泡组、3～5mm中卵泡组和<3mm小卵泡组。卵泡培养8、16和24h,以Annexin-VFITC/PI双染流式细胞仪检测壁层颗粒细胞凋亡情况,结果发现培养卵泡颗粒细胞的总凋亡率(早期凋亡+晚期凋亡)在8h时就已达到70%以上,至24h则为81.1%～94.6%。收集无血清培养0、8、16、24、48和72h的卵泡颗粒细胞,用realtimePCRSYBRgreen法检测各组卵泡颗粒细胞FasL和FasmRNA相对表达量。各级卵泡颗粒细胞中FasLmRNA水平随培养时间显著增加,培养至24h达最大值(P<0.05);小卵泡颗粒细胞FasLmRNA水平均高于大、中卵泡组。各级卵泡颗粒细胞FasmRNA相对表达量在培养前(0h)差异不显著,8h时显著增加,48h达最大值。该实验表明,所用无血清卵泡培养体系可有效诱导卵泡颗粒细胞的凋亡,细胞凋亡是卵泡闭锁的主要诱因,但卵泡闭锁程度可因卵泡大小而异,小卵泡似乎更容易发生闭锁。

参附注射液对心肌细胞缺氧及缺氧/复氧时Fas/FasL表达的影响

目的探讨参附注射液(SF)对培养的乳鼠心肌细胞缺氧及缺氧/复氧时凋亡相关基因Fas/FasL蛋白表达的影响。方法按常规培养新生4 d乳鼠心肌细胞,于培养24 h后进行缺氧及缺氧/复氧实验,以免疫组织化学方法检测心肌细胞Fas/FasL蛋白表达的变化。结果缺氧4.5 h及10.5 h后,心肌细胞Fas/FasL蛋白的阳性表达指数(positive expression index,PEI)均显著高于对照。10.5 h组与4.5 h组无明显差异。参附注射液组PEI明显低于缺氧组(P<0.05)。缺氧30 min后再给氧4 h与10 h,心肌细胞Fas/FasL蛋白的PEI显著高于对照,复氧10 h组与4 h组无明显差异,参附注射液组PEI低于无SF组(P<0.05)。结论缺氧及缺氧/复氧时均有凋亡相关基因Fas及其配体FasL蛋白表达的增强,参附注射液可通过下调Fas/FasL蛋白表达,减少凋亡从而减轻缺氧损伤及缺氧/复氧损伤。

黄芪皂苷钠治疗后烫伤鼠肺组织细胞凋亡及Fas/FasL的表达

目的 探讨黄芪皂苷治疗后烫伤鼠肺组织细胞凋亡及基因调控变化机制 ,为进一步阐明烫伤鼠肺组织细胞凋亡机制和在细胞凋亡水平防治烧伤后脏器损伤提供理论依据。方法 采用Tunel法及免疫组化技术观察黄芪皂苷治疗后烫伤鼠肺组织细胞凋亡 ,同时测定肺组织Fas/FasL的表达的变化。结果 鼠烫伤后肺组织细胞凋亡明显增加 ,表现为肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡增加 (P <0 0 5 ) ;Fas抗原、FasL在烫伤鼠肺组织表达明显上调 (P <0 0 1) ,Fas抗原、FasL表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系 ;用黄芪皂苷治疗后凋亡明显减少 ,Fas抗原、FasL表达减弱。结论 黄芪皂苷治疗后可在一定程度上防治烫伤鼠肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡 。

丹龙醒脑片对大鼠脑缺血再灌注后海马区AI及Fas/FasL、TNF-α表达的影响

目的探讨丹龙醒脑片对大鼠脑缺血再灌注海马区细胞凋亡指数(AI)、Fas/FasL、TNF-α表达的影响。方法运用大脑中动脉栓塞再通法建立脑缺血再灌注模型,将动物随机分为假手术组、模型组、丹龙醒脑片组、尼莫地平组,采用原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡神经细胞。采用免疫组织化学法,观察海马区Fas/FasL、TNF-α的表达。结果丹龙醒脑片能显著减轻神经细胞的损伤;假手术组有一定量的Fas/FasL、TNF-α表达,缺血后Fas/FasL、TNF-α迅速增加,丹龙醒脑片组显著抑制Fas/FasL、TNF-α的表达,模型组和丹龙醒脑片组、尼莫地平组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论抑制由缺血再灌注损伤诱导的Fas/FasL、TNF-α表达可能是丹龙醒脑片具有脑保护作用的机制之一。

补骨脂素加长波紫外线诱导NB4细胞凋亡及对Fas/FasL基因表达影响的研究

目的探讨自中药补骨脂中提取的补骨脂素(psoralen,PSO)加长波紫外线(ultraviolet A,UVA)诱导人白血病细胞NB4凋亡及对Fas/FasL基因表达的影响。方法以NB4细胞为研究对象,采用流式细胞术、透射电镜、定量PCR等方法观察不同浓度的PSO,在不同时间的波长为360 nm的UVA照射下,细胞凋亡率、细胞超微结构以及细胞Fas/FasL基因、蛋白表达水平的变化。结果(1)补骨脂素加长波紫外线(PUVA)可诱导NB4细胞凋亡,当PSO浓度为10、20、40、80μg/mL时,UVA照射5 min的细胞凋亡率分别为(26.57±0.42)%、(30.67±0.11)%、(34.90±0.30)%、(24.63±0.38)%,凋亡率呈剂量-时间依赖性,两因素间有交互作用。(2)电镜下观察经PUVA处理后的NB4细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变特征。(3)PUVA可上调NB4细胞Fas基因、蛋白的表达水平,并呈剂量-时间依赖性,在基因水平两因素间有交互作用,在蛋白水平两因素无交互作用。(4)PUVA可下调NB4细胞FasL基因、蛋白的表达水平,并呈剂量-时间依赖性,且两因素间有交互作用。结论PUVA可诱导白血病细胞NB4发生凋亡,Fas/FasL系统是PUVA诱导NB4细胞发生凋亡的作用途径之一。

肝细胞癌中Fas/FasL表达的意义

目的研究肝细胞癌组织及其癌旁非癌肝组织中Fas/FasL(Fas ligand)的表达情况及其与临床病理的关系。方法应用免疫组化Envision和RT-PCR双重方法检测30例原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者的癌组织及其癌旁非癌肝组织的Fas蛋白和FasL的mRNA及其蛋白的表达情况。结果 12例(12/30,40.0％)HCC表达Fas蛋白,明显低于癌旁组织(21/30,70.0％,P<0.05).21例(21/30,70.0%)HCC的FasL蛋白为阳性,略高于癌旁组织(17/30,56.7%),两者无显著性差别,但HCC的FasL mRNA水平较癌旁组织为高(70.1/32.2,P<0.05),且同一癌组织多呈Fas FasL’表型(16/30,53.3％),癌组织Fas与FasL表达显著相关。HCC中Fas蛋白的表达与其组织学分级、癌周侵袭程度及肿瘤包膜有关(1/3/7/1,4/12,1/4/7,P<0.05).而FasL蛋白的表达与其临床病理指标无明显关系(0/2/16/3,7/21,5/13/3,P>0.05).结论肝癌可能通过下调Fas、增强FasL的表达实现免疫逃避;而Fas的表达对辅助判断肝癌的侵袭转移乃至预后可能有重要意义。

肝癌细胞通过Fas/FasL途径触发T淋巴细胞的凋亡

目的 :研究肝癌细胞表面 Fas/ Fas L系统的变化及对其逃避机体免疫监控的影响。 方法 :采用流式细胞术和RT- PCR检测肝癌细胞株 Hep G2、Hep3B和 PL C/ PRF/ 5 Fas和 Fas L的表达 ;观察化疗药物争光霉素诱导肝癌细胞 Fas L表达及 Fas L表达上调后的肝癌细胞触发淋巴细胞株 Jurkat细胞凋亡的作用。结果 :Hep G2、Hep3B和 PL C/ PRF/ 5肝癌细胞株Fas表达均阴性 ;Hep G2 Fas L m RNA的表达为阴性 ,而 Hep3B和 PL C/ PRF/ 5 Fas L m RNA的表达均阳性。经争光霉素(0 .6 mg/ m l)诱导后 ,上述肝癌细胞 Fas的表达无明显变化 ,而其 Fas L的表达却增加 ,与 Jurkat细胞混合孵育则触发后者发生显著性凋亡。结论 :肝癌细胞可能一方面降低或不表达 Fas而对 Fas介导的凋亡耐受 ,另一方面又增强自身 Fas L的表达以诱发与之接触的 T淋巴细胞凋亡 ,在完成免疫逃避的同时 ,可对周围的