毒鼠强中毒大鼠脑GABA及GABA_AR-α1的表达

目的探讨毒鼠强中毒大鼠脑GABA及GABAAR-α1表达的变化及可能机制。方法健康Sprague-Dawley(SD)大鼠60只,随机分为正常对照组、空白对照组、高剂量中毒组和低剂量中毒组,每组5只。高剂量中毒组每只以1.0mg/kg的剂量用毒鼠强悬浊液灌胃,低剂量中毒组每只以0.1mg/kg的剂量用毒鼠强溶液灌胃制作中毒模型。应用免疫组化技术和图像分析仪对GABA及GABAAR-α1的表达情况和变化规律进行研究。结果(1)正常大鼠脑组织内GABA及GABAAR-α1表达较为广泛,维持在中等水平;(2)高剂量中毒组脑内GABA及GABAAR-α1表达均下降;(3)低剂量中毒组脑内GABA表达先下降,于中毒后6h降至最低,后表达开始增加,3d时接近对照组水平,5～7d达高峰,10d时仍高于对照组;(4)低剂量中毒组脑内GABAAR-α1表达先下降,于中毒后6～12h降至最低,后表达开始增加,7～10d时接近对照组水平。结论(1)高剂量毒鼠强中毒情况下,GABA及GABAAR-α1表达均下降;(2)大鼠脑GABA及GABAAR-α1表达改变与毒鼠强中毒的发生机制密切相关。

海藻酸诱导复杂部分发作癫痫大鼠海马GABA_A受体α_1亚单位的表达

目的:研究海藻酸(KA)致痫大鼠海马GABAA受体α1亚单位的动态表达水平以及加巴喷丁(GBP)干预对它们的影响,探讨复杂部分发作癫痫(CPS)的发生机制,为开发针对GABA受体亚单位水平的新型抗癫痫药物(AEDs)提供理论依据。方法:成年雄性Wistar大鼠海马CA3区注射2μgKA建立复杂部分发作模型,采用免疫组化SABC法检测癫痫大鼠海马各区GABAA受体α1亚单位(GABAARα1)的动态表达水平,并用GBP干预癫痫的发作观察GBP对GABAARα1表达的影响。结果:KA致痫后海马CA1区、CA3区GABAARα1表达呈先升后降趋势,齿状回(DG)表达水平则逐渐增加。GBP对癫痫早期GABAARα1表达无直接影响。结论:在KA诱导的CPS模型中,GABAARα1表达减少和由此所引起的抑制功能减弱,可能是癫痫发生的一种分子机制。

NMDAR1和GABA_A受体的α_1及α_3亚单位在成年猴小脑的定位分布

目的 :探讨NMDAR1和GABAA 受体的α1及α3 亚单位在成年恒河猴小脑皮质及小脑核的定位分布。方法 :用免疫组织化学染色技术及尼氏染色技术。结果 :NMDAR1免疫反应产物主要分布在Purkinje细胞胞质和分子层的树突 ,分子层的星形细胞以及颗粒细胞层的颗粒细胞呈免疫反应产物弱阳性 ,胶质细胞呈中等强度的染色 ,小脑核的神经元胞质和部分突起染色明显。GABAA 受体的α1亚单位免疫反应产物主要分布在Purkinje细胞胞质和树突 ,分子层的星形细胞和胶质细胞呈中等强度的染色 ,小脑核的神经元染色明显。GABAA 受体的α3 亚单位免疫反应产物主要分布在Purkinje细胞胞质和树突 ,胶质细胞及小脑核神经元染色明显。在Purkinje细胞层NMDAR1,GABAA 受体α1及α3 亚单位免疫阳性神经元分别占总Purkinje细胞数的 (90 .0± 2 .1) % ,(83.0± 2 .3) % ,及 (78.0± 1.8) %。结论 :NMDAR1,GABAA 受体的α1及α3 亚单位在成年恒河猴小脑具有广泛的分布。

异丙酚对大鼠海马CA1区锥体神经元GABA_A受体的作用

目的 :研究异丙酚对大鼠海马CA1区锥体神经元γ 氨基丁酸A型 (GABAA)受体的作用。方法 :采用膜片钳全细胞记录技术。结果 :临床血药浓度异丙酚 (3～ 12 μg ml)对海马脑片CA1区锥体神经元电压门控性钠、钾、钙离子通道的开放、失活、最大电流幅值没有影响。海马脑片CA1区锥体神经元自发抑制性突触后电位 (sIP SC)可被GABAA 受体特异性阻断剂荷包牡丹碱 (Bic)所阻断。异丙酚对海马脑片CA1区锥体神经元sIPSC具有增频作用 ,但对其幅度没有影响 ,且其增频作用可被Bic阻断。结论 :临床浓度的异丙酚对海马脑片CA1区锥体神经元的sIPSC具有增频作用 。

复方氯胺酮口服液对大鼠海马CA1 CA3区NMDA受体1 GABA_A受体mRNA表达的影响

目的通过观察小儿麻醉前用药复方氯胺酮口服液(CKOS)对大鼠海马CA1、CA3区的γ氨基丁酸A受体(GABAAR)和氮甲基天冬氨酸受体1(NMDAR1)分布及其表达影响,探讨其镇静作用的机制。方法选健康SD大鼠50只,随机分为10组,每组5只,分别在给药后0,5,10,15,30,60,90,120,240,360min处死。0min点为对照组,经灌胃器灌注2μL/g生理盐水,其它各组灌注2μL/gCKOS。采用免疫组化和原位杂交技术检测各组NMDAR1、GABAARmRNA在海马CA1、CA3区的表达和分布。结果用药后海马CA1、CA3区的GABAARmRNA的表达逐渐增强,30～90min时受体表达最强,360min逐渐恢复用药前水平。NMDAR1在CA1、CA3区表达呈抑制状态。结论CKOS能增强海马CA1、CA3区的GABAA受体的mRNA表达和抑制NMDAR1的表达,从而产生镇静作用,最终达到消除恐惧的目的。

癫痫持续状态NKCC1、GABA_ARα 1蛋白在大鼠海马的表达及脑源性神经营养因子对其的影响

目的观察大鼠癫痫持续状态（SE）后72 h内海马组织中NKCC1及GABAARαl表达的动态变化,以及使用anti-BDNF干预后其表达的变化,探讨NKCC1与GABAARαl在SE中的可能机制及其之间的关系,以及BDNF在SE发生过程中对NKCC1和GABAARαl表达的影响。方法健康成年雄性SD大鼠90只,随机分为生理盐水对照组（10只）、SE组（40只）和干预组（40只）。制作Li Cl-PILO癫痫模型（SE组）和造模前3~4 h侧脑室注射anti-BDNF（干预组）,选取SE后2、6、24和72 h为时间点。观察大鼠在SE诱发过程中的行为学差异、海马NKCC1及GABAARαl蛋白的表达改变、海马各区NKCC1及GABAARαl蛋白的时空分布等特点。结果干预组SE诱发成功率较SE组低,SE诱发成功后生存状态好、死亡率低。SE组NKCC1蛋白在SE后均高于对照组,干预组NKCC1蛋白表达在2 h显著增加,6 h达最高,24 h后开始明显恢复,72 h时接近正常。两组在海马不同亚区,SE后2 h开始,NKCC1在CΑ1及CΑ3区均显著增高。SE组GABAARαl蛋白在SE后2~6 h表达显著下调,24 h降至最低,至72 h突然增高。干预组GΑBAARαl蛋白表达在SE后2 h达最低值,6 h后上调,72 h达最高值,SE组与干预组GABAARαl在CA1、CA3区的表达呈进行性下调,但干预组变化幅度较小。结论 NKCC1蛋白表达在SE后的上调可能是SE后GABAAR介导的兴奋性作用产生的重要机制之一;Αnti-BDNF干预可通过抑制BDNF的表达,延缓癫痫发生并减弱癫痫发作的严重程度。

毒鼠强中毒大鼠脑神经元GABA_A α1受体的检测

目的探讨GABAAα1受体在毒鼠强中毒大鼠脑组织中的变化及其机制。方法选择健康Sprague-Daw-ley大白鼠30只,分成5组,每组6只;分别以2.0 LD50、1.0 LD50、1/2 LD50、1/10 LD50毒鼠强量,采用灌胃染毒方法制作毒鼠强中毒模型,并以健康大鼠灌服生理盐水为对照;断颈处死大鼠,提取脑皮质、海马及脑干脑桥等脑组织进行免疫组织化学染色,观察GABAAα1受体阳性染色神经元的变化。结果不同LD50量染毒大鼠的皮层、海马及脑干,其GABAAα1受体免疫组化阳性染色神经元较对照组组减少,其中以1.0 LD50、1/2LD50组减少最为显著;相同染毒剂量,以脑干组织减少最多。结论GABAAα1受体表达下降与毒鼠强中毒机制相关。

安神补脑液对失眠大鼠模型海马组织内GABA_ARα1、GABA_ARγ2、NKCC1表达的影响

目的观察安神补脑液(ASBN)对失眠大鼠海马体γ-氨基丁酸受体(GABA)、钠-钾-氯协同转运蛋白表达的影响及其催眠作用机制。方法采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)复制大鼠失眠模型,将复制成功的失眠模型大鼠随机分为氟西汀(Fluoxetine)组,模型组,ASBN高、中、低剂量(ASBN-H、M、L)组,另取15只正常大鼠作为正常组。各给药组连续7 d给予相应药物口服灌胃,模型组和正常组连续灌胃7 d 0.9%生理盐水,观察各组大鼠的一般活动状态。采用qPCR检测海马体中GABA_ARγ2和Na+-K+-Cl-协同转运蛋白(NKCC1)的表达,采用免疫组化染色(IHC)-P检测大鼠海马体中GABA_ARα1的表达。结果ASBN可提高海马体中GABA_ARα1、GABA_ARγ2表达,降低NKCC1表达。结论ASBN可以通过调节失眠大鼠海马体中GABA_ARα1、GABA_ARγ2和NKCC1表达量来改善大鼠的睡眠状态。

氧化槐定碱镇痛作用及其对小鼠中枢GABA_ARα1表达的影响

目的研究氧化槐定碱(oxysophoridine,OSR)的镇痛作用及其对小鼠全脑和脊髓GABAA受体表达的影响。方法采用温浴法测定小鼠痛阈,观察OSR(iv)对小鼠热甩尾潜伏期的影响;采用蛋白印迹实验技术(Western blot)检测OSR对小鼠脊髓和脑GABAARα1蛋白表达的影响;采用荧光实时定量PCR方法检测OSR对小鼠脊髓和脑GABAARα1 mRNA表达的影响。结果 OSR(500.0,250.0 mg.kg-1,iv)可明显延长小鼠温浴热甩尾潜伏期(P<0.05,P<0.01),药效可持续60 min以上,最大痛阈提高率可达59.82%。OSR(500.0 mg.kg-1,iv)可使福尔马林致痛小鼠脊髓和脑GABAARα1 mRNA和蛋白表达量均明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论 OSR具有明显的镇痛作用,脊髓和脑GABAARα1参与了OSR的镇痛机制。

弓状核损毁模型大鼠海马组织中GABA_A受体、NMDAR_1受体、c-fos蛋白、NGF受体的表达

目的 :探讨谷氨酸钠造成的下丘脑弓状核损毁模型鼠海马组织中γ -氨基丁酸 (GABAA)受体、N -甲基-D -天冬氨酸受体 (NMDAR1 )、c -fos蛋白、神经生长因子 (NGF)受体的表达。方法 :皮下注射谷氨酸钠建立SD新生大鼠弓状核损毁模型。正常组注射等量生理盐水作对照。GABAA 受体、NMDAR1 受体、c -fos蛋白、NGF受体的表达以免疫组化染色显示。结果 :造模组大鼠海马组织中GABAA 受体、NMDAR1 受体的表达均明显低于正常组 ,P<0 .0 5 ,NGF受体的表达明显高于正常组 ,P <0 .0 5 ,c-fos蛋白表达略高于正常组 ,但差异无统计学意义 ,P >0 .1。结论 :谷氨酸钠损毁弓状核对大鼠海马组织中GABAA 受体、NMDAR1 受体、NGF受体的表达有明显影响。

大鼠三叉神经中脑核内囊泡膜谷氨酸转运体样和GAD样阳性末梢与GABA_A受体α1亚单位样阳性神经元的联系

最近已在哺乳类动物脑内克隆出两种新的脑内特殊的Na+依赖的无机磷酸转运体 ,它们均属于囊泡膜谷氨酸转运体 ,被分别命名为VGluT1(Vesicularglutamatetransporteroftype1)和DNPI (differentiation associatedNa+ dependentinorganicphosphatecotransporter)。本研究应用免疫荧光组织化学三重染色技术 ,在激光共聚焦显微镜下观察了大鼠三叉神经中脑核 (Vme)内VGluT1样和DNPI样以及谷氨酸脱羧酶 (GAD)样阳性末梢与GABAA受体α1亚单位 (GABAARα1)样阳性神经元之间的联系。结果显示 :①几乎所有的Vme神经元均呈GABAA受体α1亚单位样免疫阳性 ,吻尾方向在其全长出现 ,这些神经元绝大多数为大的假单极神经元 (直径为 2 5～ 5 0μm) ,但也有小部分为直径小于 2 5 μm的神经元。②大量的VGluT1样和DNPI样免疫阳性的神经纤维和末梢广泛分布于Vme内 ,其中DNPI样阳性纤维和末梢的分布密度高于VGluT1;同时还观察到GAD样阳性纤维和末梢也密集分布于Vme内。③VGluT1样、DNPI样和GAD样免疫阳性终扣分别包绕在GABAA受体α1亚单位样阳性Vme神经元胞体周围 ,并与之形成密切接触。以上结果提示 :Vme神经元在介导面口部本体感觉信息的传递中 ,可能同时接受中枢其他来源的谷氨酸能和GABA能末梢的调控 ,其中GABA能的投射末梢?

NMDAR1和GABA_A受体的α_1及α_3亚单位在成年猫小脑的定位分布

用免疫组织化学反应及 Nissl染色探讨了 NMDAR1及 GABAA受体α1 和α3亚单位在成年猫小脑皮质及小脑核的定位分布。结果表明 ,NMDAR1免疫反应产物主要分布在 Purkinje细胞胞质和分子层的树突 ,分子层的星形细胞和篮细胞以及颗粒细胞层的颗粒细胞和胶质细胞呈中等强度的阳性反应 ,小脑核的神经元胞质和部分突起着色明显。 GABAA受体的α1 亚单位免疫反应产物主要分布在 Purkinje细胞胞质和树突 ,分子层的星形细胞和胶质细胞呈弱阳性 ,小脑核的神经元阳性反应明显。GABAA 受体的α3亚单位免疫反应产物主要分布在 Purkinje细胞胞质和树突 ,分子层的星形细胞和篮细胞着色明显 ,胶质细胞呈免疫反应弱阳性 ,小脑核神经元及纤维着色明显。在 Purkinje细胞层 NMDAR1、GABAA受体α1 及α3亚单位免疫阳性神经元分别占 Purkinje细胞总数的 80 % ,61% ,88%。结论 :NMDAR1、GABAA受体的α1 及α3亚单位在成年猫小脑具有广泛的分布。这些受体在介导小脑的复杂功能中可能发挥重要的作用。

NMDA受体NR1亚单位与GABA_A受体在精神分裂症小鼠海马齿状回颗粒细胞层的表达

目的:明确NMDA受体NR1亚单位、GABAA受体与精神分裂症(SP)小鼠海马齿状回颗粒细胞层新生颗粒细胞的共存模式;阐明NR1、GABAA受体在SP小鼠海马中的表达。方法:实验组小鼠腹腔注射MK-801(每日0.6 mg/kg),对照组注射等量的生理盐水,连续注射14 d后对两组动物分别进行BrdU标记,断头并进行如下处理:(1)免疫荧光染色,观察海马DG区中NR1和GABAA的表达以及与BrdU标记的新生颗粒细胞的共存模式;(2)利用RT-PCR技术,检测海马GABAA及NR1 mRNA表达水平的改变。结果:(1)停药后实验组与对照组比较,海马神经细胞的增殖率下降了23.1%(P<0.05),GABAA、NR1两种神经细胞增殖数无差异性改变(P>0.05);(2)实验组小鼠海马GABAAmRNA的表达量较对照组显著下降(P<0.05),而NR1 mRNA的表达量较对照组明显增高(P<0.05)。结论:(1)小鼠精神分裂症后可引起海马齿状回神经细胞增殖的降低;(2)小鼠精神分裂症后,在mRNA水平上,海马GABAA的表达降低,NR1的表达升高。

骨形成肽1和聚多巴胺复合涂层修饰提高聚醚醚酮表面活性

背景:聚醚醚酮具有与人体皮质骨相近的弹性模量及良好的射线透射性、化学稳定性和生物相容性等优点,有望应用于口腔种植领域,然而其具有生物惰性,难以与周围组织形成骨结合,因此如何提高聚醚醚酮的表面活性是目前的主要问题。目的:分析聚醚醚酮表面骨形成肽1和聚多巴胺复合涂层的促成骨和成血管作用。方法:将聚醚醚酮片浸泡于多巴胺溶液中24 h,制备聚醚醚酮-聚多巴胺材料;将聚醚醚酮-聚多巴胺材料浸泡于骨形成肽1溶液中24 h,制备聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料,表征材料的微观形貌、亲水性与元素组成。将骨髓间充质干细胞分别接种于聚醚醚酮、聚醚醚酮-聚多巴胺、聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料表面,通过活死细胞染色和细胞骨架染色评估细胞活性与黏附状态,茜素红和骨钙素免疫荧光染色检测细胞成骨分化能力。将人脐静脉内皮细胞分别接种于3组材料表面,通过活死细胞染色和细胞骨架/血管内皮生长因子免疫荧光染色评估细胞活性及成血管水平。结果与结论:①扫描电镜下可见聚醚醚酮材料表面光滑,聚醚醚酮-聚多巴胺材料表面出现凹凸不平的沉积物,聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料表面有小颗粒突起;接触角测试结果显示,聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料的亲水性优于其他两种材料;X射线光电子能谱测试结果显示,骨形成肽1成功修饰于聚醚醚酮材料表面;②活死细胞染色和细胞骨架染色显示,相较于其他两种材料,聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料可提高骨髓间充质干细胞的活性与黏附;茜素红和骨钙素免疫荧光染色显示,相较于其他两种材料,聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料可促进骨髓间充质干细胞的成骨分化;③活死细胞染色和免疫荧光染色显示,相较于其他两种材料,聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料可提高人脐静脉内皮细胞的活性与黏附及血管内皮生长因子蛋白的表达;④结果表明,骨形成肽1和聚多巴胺复合涂层可提高聚醚醚酮表面的促成骨和成血管活性。

蠲痹汤含药血清调控线粒体自噬抑制白细胞介素1β诱导的关节软骨细胞损伤

背景:软骨细胞线粒体自噬的缺陷会引起细胞凋亡和基质消失等软骨细胞退行性病变的变化。目的:探讨蠲痹汤含药血清对白细胞介素1β诱导的大鼠膝关节软骨细胞炎症反应和凋亡的影响及可能作用机制。方法:50只雄性SD大鼠随机给予生理盐水、蠲痹汤低、中、高剂量(1.24,2.48,4.96 g/kg)、塞来昔布(阳性药物),连续灌胃2周后获得含药血清。①分离软骨细胞,将其随机分为对照组、白细胞介素1β组、蠲痹汤低、中、高剂量含药血清组及阳性药物血清组。CCK-8法检测细胞存活率、免疫荧光双染检测线粒体自噬水平、免疫荧光检测磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶水平、Western blot检测PTEN诱导激酶1/Parkin通路相关蛋白和裂解的半胱氨酸蛋白酶蛋白3表达、ELISA检测炎症因子水平;②分别采用PTEN诱导激酶1 siRNA和Compound C进行干预,探究AMPK/PTEN诱导激酶1/Parkin通路在蠲痹汤含药血清调控线粒体自噬中的作用。结果与结论:①与对照组比较,白细胞介素1β组软骨细胞存活率、Ⅱ型胶原蛋白表达、磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶、PTEN诱导激酶1、Parkin和微管相关蛋白1轻链3蛋白水平以及线粒体自噬水平明显降低(P<0.05),而裂解的半胱氨酸蛋白酶蛋白3蛋白水平、白细胞介素6、白细胞介素8和肿瘤坏死因子α水平显著升高(P<0.05);与白细胞介素1β组比较,蠲痹汤各剂量含药血清组和阳性药物血清组上述各项指标呈现相反的变化(P<0.05);②PTEN诱导激酶1 siRNA可显著抑制蠲痹汤含药血清对白细胞介素1β处理软骨细胞线粒体自噬的影响,降低蠲痹汤含药血清对白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎症与凋亡的保护作用;Compound C逆转了蠲痹汤含药血清对白细胞介素1β处理软骨细胞中PTEN诱导激酶1/Parkin信号通路的影响。结论:蠲痹汤含药血清通过影响线粒体自噬水平来抑制软骨细胞炎症和凋亡,从而减轻白细胞介素1β诱导的软骨细胞退化,其机制可能与调控AMPK/PTEN诱导激酶1/Parkin通路有关。

组蛋白脱乙酰酶1基因抑制人脐静脉内皮细胞焦亡并减轻动脉粥样硬化及炎性反应

背景:细胞焦亡作为炎症细胞死亡的一种独特形式,在动脉粥样硬化病变的不稳定性中发挥重要作用。目的:探究重组B细胞淋巴瘤2相关蛋白A1(B-cell lymphoma 2-related protein A1,BCL2A1)在动脉粥样硬化中的作用机制。方法:①使用200μg/mL氧化低密度脂蛋白处理人脐静脉内皮细胞24 h以诱导内皮损伤。随后,分别使用50 nmol/L BCL2A1干扰质粒(sh-BCL2A1)和1.5μg/mL组蛋白脱乙酰酶1基因(histone deacetylase 1 gene,HDAC1)过表达载体(pcDNA-HDAC1)转染人脐静脉内皮细胞,或同时转染pcDNA-HDAC1和BCL2A1过表达载体(pcDNA-BCL2A1)。转染后培养48 h检测BCL2A1和HDAC1的表达水平、细胞活力、细胞焦亡水平以及BCL2A1乙酰化水平。②通过高脂喂养APOE-/-小鼠构建动脉粥样硬化小鼠模型进行体内验证。将500μL BCL2A1和HDAC1慢病毒过表达载体分别或同时尾静脉注射到小鼠体内,检测BCL2A1和HDAC1的表达水平以及小鼠动脉组织损伤情况。结果与结论:氧化低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞中BCL2A1上调,干扰BCL2A1可改善细胞活力并抑制细胞焦亡和炎症反应。此外,氧化低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞中HDAC1下调,通过促进BCL2A1去乙酰化提高了细胞活力及抑制了细胞焦亡和炎症反应。体内实验表明,BCL2A1在高脂喂养的小鼠动脉组织中高表达,而HDAC1低表达。此外,HDAC1通过促进BCL2A1去乙酰化减轻了高脂喂养诱导的ApoE-/-小鼠动脉组织病变。结果表明,HDAC1可能通过BCL2A1去乙酰化来抑制人脐静脉内皮细胞焦亡进而减轻动脉粥样硬化和炎症反应。

大鼠下丘脑室旁核GABA_A Rα1阳性神经元参与内毒素诱导的免疫应激反应

为探讨下丘脑室旁核(PVN)内GABAA受体α1亚单位(GABAARα1)阳性神经元是否参与内毒素(LPS)诱导的免疫应激反应,本研究采用腹腔注射LPS建立免疫应激模型,对照组注射等量的生理盐水,应用免疫荧光双标记与激光共聚焦显微镜技术,观察两组大鼠下丘脑PVN内Fos和GABAARα1阳性神经元的形态、分布和数量的变化以及Fos和GABAARα1阳性神经元之间的关系。结果显示:LPS可使大鼠PVN内Fos阳性神经元数量显著增高,GABAARα1阳性神经元的染色增强,且其中的部分神经元同时表达Fos和GABAARα1;经计数Fos/GABAARα1双标阳性神经元的比例占Fos阳性神经元的27%,占GABAARα1阳性神经元的32%。本实验结果提示PVN内的部分GABAARα1阳性神经元参与了由LPS诱导的免疫应激反应,说明GABA可能通过GABAA受体在免疫应激反应中发挥作用。上述结果为阐明免疫应激反应时GABAAR在下丘脑-垂体-肾上腺轴中的作用提供了形态学基础。

化痰祛瘀汤对脑小血管病大鼠认知功能及脑组织GABA、VILIP-1表达的影响

目的观察化痰祛瘀汤对脑小血管病大鼠认知功能及脑组织γ-氨基丁酸(GABA)和视锥蛋白样蛋白1(VILIP-1)表达的影响,探讨其治疗脑小血管病的作用机制。方法48只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、中药低剂量组和中药高剂量组,每组12只。除空白组外,采用同种系微栓子体外注入法制备脑小血管病大鼠模型,中药低、高剂量组分别予化痰祛瘀汤1.25、2.5 g/kg灌胃,空白组及模型组灌胃等量蒸馏水,连续28 d。给药1、7、14、28 d行Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆能力,HE染色观察海马组织病理变化,免疫组化染色检测脑组织GABA、VILIP-1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠Morris水迷宫实验逃避潜伏期明显延长(P<0.05),穿越平台次数明显减少(P<0.05),海马组织细胞排列杂乱、间隙增宽,细胞核萎缩、坏死,脑组织GABA表达明显降低(P<0.05),VILIP-1表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,中药低、高剂量组大鼠给药7、14、28 d逃避潜伏期明显缩短(P<0.05),穿越平台次数明显增多(P<0.05),脑组织GABA表达明显升高(P<0.05),VILIP-1表达明显降低(P<0.05);与中药低剂量组比较,中药高剂量组大鼠各时点逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加,海马组织病理损伤减轻,脑组织GABA表达升高,VILIP-1表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论化痰祛瘀汤可提高海马组织GABA表达、抑制VILIP-1表达,从而改善脑小血管病大鼠认知功能。

咪唑安定对大鼠海马CA1区锥体神经元GABA_A受体的作用

目的 :研究咪唑安定 (midazolam ,MZ)对急性分离大鼠海马CA1区锥体神经元γ 氨基丁酸受体A型(GABAA)的作用。方法 :采用制霉菌素穿孔膜片钳技术。结果 :无GABA时 ,MZ不能单独诱发内向电流 ;GABA能诱发可被GABAA 受体拮抗剂荷包牡丹碱 (bicuculline,BIC)阻断的电流IGABA,0 0 1～ 30 μmol/L能增强IGABA,使GABA浓度效应曲线平行左移 ,但不改变IGABA的最大反应值 ,用标准细胞外液洗脱后 ,电流可恢复至给药前水平。结论 :MZ不能直接激活GABAA 受体 ,但能通过增强GABA的作用调控该受体 ;海马CA1区的GABAA

复方氯胺酮口服液对大鼠胃NMDAR_1、GABA_A R表达的影响

目的通过动物实验,观察复方氯胺酮口服液(Compound ketamine oral solution,CKOS)对大鼠胃NMDAR1、GABAA受体的影响,探讨其对胃肠动力的调节机制,并进一步评价其临床应用的安全性。方法选择雄性、健康SD大鼠50只,随机分10个时间点,每个时间点5只大鼠。0点为对照组,经灌胃器注2μL/g生理盐水,其他各点将CKOS[含氯胺酮(Ketamine,KET)100mg/kg,咪达唑仑(Midazulum,MID)10mg/kg]灌入胃内。采用免疫组化和原位杂交的方法,观察服药后10个点大鼠胃NMDAR1、GABAA受体的变化。显微(荧光)图像分析系统对切片进行采集分析。结果用CKOS后10min,NMDAR1表达开始减少,15～120min NMDAR1明显减少,240min时开始恢复,但仍然低于对照组。360min时仍未恢复到正常水平。用CKOS后30min,GABAA R表达开始增加,60～90min GABAA R表达明显增加,240min时开始恢复,360min时恢复到正常水平。结论CKOS抑制胃排空可能与其能够抑制胃NMDAR1受体的表达、增强GABAA受体的表达有关。