阿片类药物诱导瘙痒的机制研究进展

瘙痒是临床使用阿片类药物镇痛的患者普遍存在的严重不良反应之一。大量研究已经阐明阿片类药物的镇痛机制,但阿片类药物诱导瘙痒的机制尚不明确,瘙痒与镇痛之间的关系也模糊不清。目前的研究发现,阿片类药物作用于μ、κ及δ阿片受体后,直接或间接影响瘙痒关键受体——胃泌素释放肽受体的功能,进而影响瘙痒信息传递。神经介素B、神经肽Y、B型利钠肽等神经肽,以及其他受体如瞬时受体电位香草素1受体、N-甲基-D-天冬氨酸受体、5-羟色胺受体等,在吗啡诱导的瘙痒中也具有重要作用。 此外,阿片类药物所致瘙痒的预防和治疗也是围手术期吗啡镇痛的难点和热点之一。因此,明确瘙痒的具体发生机制,对寻找新的研究思路及预防和治疗阿片类药物诱导的瘙痒具有重要意义。

Gastrin as an autocrine growth factor in colorectal carcinoma:implications for therapy

Ｔｈｅｒｅｉｓｎｏｗｃｏｎｓｉｄｅｒａｂｌｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｓｕｐｐｏｒｔｆｏｒｔｈｅｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓｔｈａｔｐｒｏｇａｓｔｒｉｎｄｅｒｉｖｅｄｐｅｐｔｉｄｅｓｓｔｉｍｕｌａｔｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｌｏｎ...

新型胃泌素释放肽受体靶向PET分子探针应用于肿瘤显像的研究进展

胃泌素释放肽受体(GRPR)是一种属于铃蟾肽受体家族的G蛋白偶联受体,主要分布于整个胃肠道和中枢神经系统,通过与其配体胃泌素释放肽结合发挥生物学作用。近年研究发现,GRPR在许多恶性肿瘤中过度表达并参与恶性肿瘤的发生发展,如乳腺癌、前列腺癌、肺癌、胰腺癌和多形性胶质母细胞瘤等。正电子发射计算机断层扫描(PET)是一种通过检测放射性标记物质在人体内部的分布和浓度来提供图像的医学成像技术,能够提供更全面、准确的诊断信息。已有研究表明靶向GRPR的PET显像在多种恶性肿瘤的诊断、治疗监测和预后评估等方面发挥重大作用,因此,开发特异性强、亲和性高的GRPR探针对肿瘤的诊断与治疗意义重大。本文针对已报道的新型GRPR靶向PET分子探针的种类及肿瘤显像的应用展开综述,以期为GRPR靶向PET分子探针的研发及临床转化提供新思路和新方向。

枳实提取物对功能性消化不良大鼠的促消化作用研究

目的 探讨枳实提取物对功能性消化不良(FD)大鼠的促消化作用。方法 大鼠随机分为总黄酮高、中、低剂量组,生物碱高、中、低剂量组,阳性对照组,模型对照组和空白对照组。除空白对照组外,其余组均造成FD模型,连续给予7天受试物后,测定胃残留率和小肠推进率,分离血清测定胃动素(MTL)、胃泌素(Gas)、血管活性肠肽(VIP)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟色胺受体4(5-HTR4)含量。结果 给予总黄酮或高剂量生物碱后的FD大鼠小肠推进率均高于模型对照组(P<0.05);总黄酮组的胃残留率低于模型对照组(P<0.05)。给予总黄酮或高、中剂量生物碱后,FD大鼠VIP含量显著低于模型对照组(P<0.05);总黄酮组的MTL含量显著高于模型对照组(P<0.05)。另外,给予高、中剂量总黄酮后,FD大鼠的5-HT含量和5-HTR4含量均显著高于模型对照组(P<0.05)。结论 枳实生物碱能抑制FD大鼠的VIP分泌,从而促进小肠蠕动;而枳实总黄酮能够通过促进FD大鼠分泌MTL,抑制VIP分泌,改善FD大鼠的胃排空和小肠蠕动功能,还能促进5-HT分泌,加强其与小肠中的5-HTR4受体的结合来增强FD大鼠胃肠动力。

兰索拉唑对乙醇诱导大鼠胃黏膜损伤的保护作用及其机制

目的 研究兰索拉唑 (LP)对乙醇诱导大鼠胃黏膜损伤的保护作用 ,探讨胃泌素受体和环氧化酶 2 (COX 2 )表达在此过程中的作用。方法 大鼠ig给予LP 0 5、5、5 0mg·kg-1·d-1,或ig联合给予LP 5 0mg·kg-1·d-1和胃泌素受体拮抗剂AG 0 4 1R 3、10、30mg·kg-1·d-1,对照组ig给予羧甲基纤维素 (CMC) 2 5mg·kg-1·d-1,连续 14d。末次给药后 8h各组大鼠ig给予无水乙醇 1ml,观察胃损伤指数 (LI)及光镜下的胃黏膜病理学改变。酶免疫方法测定胃黏膜前列腺素E2 (PGE2 )水平 ,WesternBlot和免疫组化检测胃黏膜COX 2表达。评价特异性COX 2抑制剂NS 398对LP诱导的PGE2 合成及胃黏膜保护作用的影响。结果 在 0 5、5、5 0mg·kg-1LP组 ,LI分别为 (2 5 3± 0 33) %、(1 84±0 2 9) %和 (0 83± 0 12 ) % ,小于对照组 (3 6 5± 0 19) % (P<0 0 5 ) ;胃黏膜PGE2 含量分别为 (42 7± 32 ) ,(483± 12 1)和 (6 14± 82 ) pg·g-1wwt ,高于对照组 (2 6 6± 81) pg·g-1wwt(P <0 0 5 )。LP剂量依赖性地增加大鼠胃黏膜COX 2表达。然而 ,同时给予AG 0 4 1R阻断了LP诱导的胃黏膜保护作用、COX 2表达和PGE2 合成。NS 398抑制LP诱导的PGE2 合成及胃黏膜保护作用。

姜黄对胃泌素受体影响的研究

本文采用受体结合方法,研究中药姜黄、郁金中的活性成分对胃泌素受体的影响。结果显示:姜黄可能含有胃泌素受体激动剂或桔抗剂。其抑制活性强度有如下大致规律:乙酸乙酯部分>甲醇部分>乙醚部分>挥发油部分;块根>根茎。

加味四逆散对慢性身心应激模型大鼠胃粘膜超微结构及脑肠轴的影响

目的建立大鼠慢性身心应激模型,探讨加味四逆散对模型大鼠胃粘膜超微结构、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT)含量、胃组织胃泌素受体(GASR)、空肠组织血管活性肠肽Ⅱ型受体(VIPR2)mRNA表达的影响,阐明加味四逆散干预应激性胃肠功能障碍的机制。方法大鼠随机分为正常组,模型组,加味四逆散大、中、小剂量组,奥美拉唑组,采用慢性身心应激方法建立大鼠应激模型,经加味四逆散等干预后透射电镜法观察腺胃区胃粘膜组织细胞及细胞间连接的超微结构改变,放免法测定血浆ACTH和血清CORT的变化,并用RT-PCR法检测胃组织GASR、空肠组织VIPR2 mRNA表达变化。结果电镜观察显示正常组大鼠胃粘膜上皮细胞形态及大小正常;模型组大鼠胃粘膜上皮细胞细胞器及胞核受损严重;其余治疗组均较模型组不同程度好转。与模型组比较,加味四逆散方各给药组、奥美拉唑组大鼠血中ACTH和CORT含量不同程度降低;而胃组织GASR mRNA表达均升高,空肠组织VIPR2 mRNA表达则降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论加味四逆散可显著改善慢性身心应激模型大鼠胃粘膜组织细胞的微观病理形态,调节脑肠轴状态并可改善胃组织GASR、空肠组织VIPR2 mRNA表达。

“脾虚”大鼠胃壁细胞胃泌素受体变化及补中益气汤的作用

目的 :研究“脾虚”和经补中益气汤治疗后的大鼠胃壁细胞胃泌素受体的变化。方法 :放射配基受体结合分析法。结果 :虽然“脾虚”大鼠胃壁细胞胃泌素受体的结合位点数低于正常大鼠 ,但其亲和力高于正常大鼠。经补中益气汤治疗后对其具有复健作用。结论 :胃泌素受体的结合位点数显著减少 ,可能导致脾虚大鼠胃黏膜的防御性下降 ;而亲和力显著增高可能是黏膜对攻击因子的敏感性增强的机制之一。补中益气汤通过调节胃泌素受体对脾虚具有复健作用。

胃泌素受体在脾虚大鼠的异常表达与中药调控作用研究

目的 :观察脾虚大鼠胃粘膜胃泌素受体的变化规律与益气健脾中药黄芪的调控作用。方法 :应用受体结合法检测胃泌素受体结合位点数。结果 :大黄和利血平脾虚模型大鼠胃粘膜胃泌素受体结合位点数均有明显减少。黄芪在纠正脾虚证的部分病理证候的同时 ,对脾虚大鼠胃粘膜胃泌素受体结合位点数有显著上调作用 ,而对血清胃泌素水平却有一定降低作用趋势。高浓度黄芪注射液在体外可显著促进胃泌素受体结合。结论 :胃泌素受体参与了脾虚证的病理过程 ,黄芪健脾药理可能不是直接作用于胃泌素受体的内源性配基的结合部位 ,而有可能是一种类似酶别构效应机制的 型受体激动剂。

大鼠胃壁细胞胃泌素受体的放射配基结合法

目的 建立大鼠胃壁细胞胃泌素受体放射配基结合实验方法。方法 以12 5I [Leu15] gastrin17 I为标记配基 ,以大鼠胃壁细胞悬液为受体制备 ,反应体系总体积为 2 0 0 μl,37℃恒温水浴振荡孵育 30min ,以 49型玻璃纤维滤膜分离结合和游离配基。结果 胃泌素受体结合符合简单单位点结合模型 ,Scatchard作图求出胃泌素受体结合参数Bmax=4 46 0 4× 10 -12 mol·L-1,Kd=1 2 49× 10 -10 mol·L-1。单点法求出特异结合位点数 70 3 2sites·cell-1。细胞浓度在0 2 5× 10 9～ 2× 10 9cells·L-1范围内 ,与标记配基特异性结合容量成正比。同一样品特异结合测定方法变异系数为7 0 4%。竞争抑制实验证明12 5I Gastin与大鼠胃壁细胞结合特异性良好。

加味四逆散对身心应激模型大鼠胃肠功能及胃组织中GASR和空肠组织中VIPR2 mRNA表达的影响

目的:建立大鼠慢性身心应激模型,探讨加味四逆散(JWSNS)对模型大鼠胃排空率及小肠推进比、大鼠下丘脑环核苷酸系统(cAMP、cGMP)、胃组织中胃泌素受体(GASR)与空肠组织中血管活性肠肽Ⅱ型受体(VIPR2)mRNA表达的影响,阐明JWSNS干预应激性胃肠功能障碍的机制。方法:60只大鼠随机分为正常组,模型组,小、中、大剂量JWSNS组和西沙比利组,每组10只。采用慢性心理性应激方法建立大鼠应激模型,经JWSNS等干预后检测胃肠动力,放射免疫法检测大鼠下丘脑中cAMP和cGMP含量,RT-PCR法检测胃组织中GASR及空肠组织中VIPR2mRNA表达变化。结果:与模型组比较,各治疗组大鼠下丘脑中cAMP和cGMP含量显著降低(P<0.05或P<0.01);与西沙比利组比较,大剂量JWSNS组大鼠下丘脑cAMP和cGMP含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各治疗组胃排空率及小肠推进比均明显升高(P<0.05或P<0.01);与西沙比利组比较,大剂量JWSNS组胃排空率升高不明显(P>0.05),而小肠推进比明显升高(P<0.05)。各治疗组大鼠胃组织中GASR mRNA表达水平均高于模型组,空肠组织中VIPR2mRNA表达水平则降低(P<0.05或P<0.01);中和大剂量JWSNS组大鼠胃组织中GASR mRNA表达水平均高于西沙比利组(P<0.05或P<0.01);大剂量JWSNS组大鼠空肠组织中VIPR2mRNA表达水平低于西沙比利组(P<0.01)。结论:环核苷酸系统(cAMP、cGMP)异常可影响胃肠功能,JWSNS可通过影响环核苷酸系统对慢性心理应激反应进行调控,进而改善胃肠功能,并可改善胃组织中GASR和空肠组织中VIPR2mRNA的表达。

大鼠胃粘膜胃泌素受体的放射配基结合法

目的 建立高效、敏感的大鼠胃粘膜胃泌素受体结合模型。方法 用大鼠胃粘膜粗膜标本为组织受体，［１２５Ｉ］１５ＬｅｕＧ１７为标记配基进行受体结合反应，检测胃泌素受体结合参数。结果 胃泌素受体结合符合简单单位点受体结合模型，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析求出的胃泌素受体结合参数Ｂｍａｘ＝７－４０４×１０－１２ｍｏｌ·Ｌ－１（３－７０２ｐｍｏｌ·ｇ－１Ｐｒｏ），Ｋｄ＝１－６８６×１０－１０ｍｏｌ·Ｌ－１。单点法求出的特异结合量Ｒｓ＝２－７３４ｐｍｏｌ·ｇ－１Ｐｒｏ。粗膜标本蛋白浓度在４～１２ｇ·Ｌ－１范围内，与标记胃泌素特异性结合容量成正比。同一样本大鼠胃粘膜粗膜标本［１２５Ｉ］ＧＡＳ特异结合量测定方法变异系数为７－８０％，竞争抑制实验证明［１２５Ｉ］ＧＡＳ与大鼠胃粘膜粗膜标本结合特异性良好。结论 大鼠胃粘膜胃泌素受体的放射配基结合法符合受体结合实验方法学要求。

促胃液素促大肠癌生长调节的机制

目的研究促胃液素（Ｇａｓ）促进大肠癌生长的调节方式．方法采用免疫组化及放射性配体结合试验，检测７０例大肠癌其癌组织，癌近旁粘膜和癌远旁粘膜的Ｇａｓ表达及促胃液素受体（ＧａｓＲ）状况，用放射免疫法测定其手术前后血清促胃液素（ＳＧａｓ）水平．结果大肠癌癌组织２８５％（２０／７０）有不同程度的Ｇａｓ表达，癌近旁粘膜仅２８％（２／７０）呈Ｇａｓ弱阳性反应．癌远旁粘膜未见Ｇａｓ阳性细胞．癌组织ＧａｓＲ量及其最大结合量较癌近，远旁粘膜明显升高（Ｐ＜００５）．大肠癌Ｇａｓ表达阳性组和阴性组术前ＳＧａｓ值与正常对照组比较，前者明显升高（Ｐ＜００５），后者升高不明显（Ｐ＞００５）．在Ｇａｓ表达阳性组中，只有强阳性者ＳＧａｓ较对照组极明显升高（Ｐ＜００１），而弱阳性和阳性者虽有一定程度升高，但差异不明显（Ｐ＞００５）．

军演应激状态对官兵部分生理生化指标的影响

目的探讨军事演习应激状态下官兵部分生理生化指标的变化。方法选择陆军官兵133人为研究对象,分别在军演前1天和军演结束后1天用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清可溶性肿瘤坏死因子受体-1(sTNFR-1)和血清可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)水平,放射免疫法(RIA)测定血清胃泌素(G)和睾酮(T)水平,生化法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并探讨这些指标变化与心理应激的关系。结果参加军演后的官兵血清sTNFR-1、sICAM-1、T、MDA水平均升高,G、SOD水平均降低,与军演前比较有显著性差异(P<0.05);与70名曾参加过军演的官兵比较,63名未参加过军演者的血清sTNFR-1、sICAM-1、MDA水平升高更为明显(P<0.05),血清SOD水平降低亦更为明显(P<0.05),而G、T的变化则无明显差异(P>0.05)。结论军演时官兵处于较强的生理应激状态,导致机体在免疫、抗氧化能力、胃肠激素、性激素等方面出现一系列变化;加强平时军事训练可以提高部队指战员应对军事应激的能力。

胃泌素干预影响人结肠癌细胞P190RhoGAP磷酸化的机制

目的:研究胃泌素对人结肠癌细胞P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平的影响。方法:使用胆囊收缩素2受体(CCK2R)的真核表达载体pCR3.1/CCK2R转染人结肠癌细胞株Colo320,上调胃泌素表达;使用胃泌素拮抗剂下调胃泌素表达。使用相同浓度的胃泌素(1×10-7mol/L)按时间梯度刺激细胞;采用蛋白质印迹法检测总FAK、酪氨酸磷酸化的FAK的表达情况,并确定FAK最大磷酸化时间点;以免疫沉淀和蛋白质印迹法检测FAK最大磷酸化时间点的P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平。结果:胃泌素引起FAK最大酪氨酸磷酸化作用时间点为12 h,胃泌素刺激12 h较0 h、胃泌素拮抗剂+胃泌素刺激12 h后P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平明显增加。结论:P190RhoGAP为FAK的下游信号分子,酪氨酸磷酸化的P190RhoGAP在胃泌素-CCK2R-FAK信号通路引起肿瘤细胞的侵袭、浸润、转移过程中发挥重要作用。

补脾方药对脾虚大鼠壁细胞胃泌素受体及细胞内[Ca^(2+)]i作用的观察

目的:观察脾虚模型大鼠壁细胞胃泌素受体及受体后信号细胞内钙离子的变化,并观察补脾方药党参、白术、补中益气汤对其的影响。方法:大鼠壁细胞采用EDTA-Pronase酶法消化而来。胃泌素受体检测采用放射配基结合实验,壁细胞内[Ca2+]i变化测定采用双波长荧光法。结果:大黄脾虚模型大鼠壁细胞胃泌素受体结合位点数有显著降低,经补脾方药治疗后有所恢复;同时脾虚模型壁细胞内静息钙离子浓度明显低于正常组,经胃泌素刺激后壁细胞内[Ca2+]i有所升高,且脾虚模型升高幅度明显高于正常组,经治疗后此状态有所恢复,但无统计学意义。结论:脾虚证可能与胃泌素受体低表达相关,且壁细胞内钙离子处于低代谢状态,但对于胃泌素刺激的反应性增强,进而可能导致酸分泌敏感性相对增高,胃黏膜易损性增强。补脾方药对其有一定的调节作用。

胃泌素及其受体拮抗剂对原代培养胃癌细胞的作用研究

目的研究胃泌素及其受体拮抗剂对原代培养胃癌细胞的作用,探讨胃癌患者非细胞毒内分泌治疗的可行性。方法从新鲜胃癌切除标本中分离胃癌细胞进行体外培养,应用MTT比色分析法和流式细胞仪观察胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺对细胞增殖、周期分布的影响。结果胃泌素可明显促进部分胃癌细胞的增殖,使细胞从G0/G1期向S期和G2/M期转化,与对照组比较有显著差异(P<0.01),丙谷胺可阻断胃泌素的作用。对胃泌素敏感的胃癌原发部位多在胃体部(13/34)和贲门部(15/34),胃窦部较少(6/34);以低分化或未分化腺癌为主(77.1%),多为中晚期。结论胃泌素可促进部分胃癌患者肿瘤细胞的增殖和细胞内DNA合成,以胃体、贲门癌为著,胃泌素受体拮抗剂可望成为胃癌非细胞毒内分泌治疗新途径。

健脾活血中药对胃溃疡大鼠H^+,K^+-ATP酶及壁细胞胃泌素受体作用的影响

目的观察健脾活血中药对胃溃疡大鼠H+,K+-ATP酶及壁细胞胃泌素受体作用的影响。方法采用放射配基受体结合测定技术分别检测各组壁细胞胃泌素受体结合位点数,同时分别检测各组大鼠H+,K+-ATP酶活性及胃液总酸度。结果健脾活血组壁细胞胃泌素受体结合位点数低于正常大鼠(P<0.05),胃液总酸度及H+,K+-ATP酶活性升高(P<0.05);奥美拉唑组壁细胞胃泌素受体结合位点数明显高于正常大鼠(P<0.05),胃液总酸度及H+,K+-ATP酶活性明显降低(P<0.05);中西药组壁细胞胃泌素受体结合位点数、胃液总酸度及H+,K+-ATP酶活性与正常大鼠比较无显著性差异(P>0.05)。结论健脾活血中药平缓地抑制胃壁细胞的H+,K+-ATP酶活性,降低胃酸的分泌;同时,不影响胃泌素受体结合位点数,防止停药后反跳性过多泌酸。

结直肠癌胃泌素水平及其受体表达的研究

目的 探讨结直肠癌组织和血清胃泌素 (gastrin ,GAS)变化及其受体 (gastrinreceptor ,GR)表达的意义。方法 运用放射免疫和免疫组化法检测大肠癌患者术前和术后血清、癌组织、癌旁和正常组织中GAS含量的变化及其GR的表达。结果 大肠癌患者血清GAS高于对照组 ,术后降低 ,均以Duke’sC、D期明显 (P <0 .0 5 )。癌组织中GAS含量显著高于癌旁和正常组织 (P <0 .0 1) ;癌组织和癌旁组织中的GR阳性表达率明显高于正常组织 (P <0 .0 5 ) ,而前两者之间无差异 (P >0 .0 5 )。结论 结直肠癌细胞能分泌GAS并具有GR ;术后GAS变化可作为判断结直肠癌患者手术疗效和预后的指标 ;癌旁组织中GR阳性率高 。

胃泌素对人结肠癌细胞NF-κB信号通路的影响

目的探讨胃泌素对人结肠癌细胞Colo320WT中核转录因子NF-κB通路的影响。方法实验分为4组:对照组(C)、胃泌素组(G17)、胃泌素+L365,260组(G17+L365,260)及L365,260组。胃泌素组用胃泌素干预Colo320WT细胞12h,胃泌素加L365,260组是先用胃泌素受体拮抗剂L365,260预干预Colo320WT细胞30min,再用胃泌素干预12h,L365,260组是L365,260干预Colo320WT细胞30min。用EMSA测定NF-κB活性,用RT-PCR测定uPA的mRNA表达,免疫印迹方法测定uPA蛋白的表达。结果胃泌素干预Colo320WT细胞后NF-κB的活性明显增加,uPA蛋白和mRNA表达明显增加。L365,260阻断后,细胞NF-κB活性下降、uPA蛋白和mRNA表达降低。结论胃泌素可活化Colo320WT细胞中NF-κB的信号通路。