丹参对缺氧/复氧心肌的保护作用涉及百日咳毒素敏感的G蛋白

目的 研究丹参注射液对缺氧 /复氧心肌细胞的保护作用及其机制。方法 采用酶解分离成年大鼠心室肌细胞化学缺氧模型 ,用视频跟踪计算机系统、细胞内双波长钙荧光系统和光学法分别观察心肌细胞收缩力学、细胞内钙和乳酸脱氢酶(LDH)释放等指标。结果 丹参 (3g/L)处理后降低心肌细胞最大收缩和舒张速率、收缩幅度以及电刺激诱导的钙瞬态幅度。缺氧导致细胞收缩力和钙瞬态幅度降低、舒张末细胞长度缩短、舒张末钙水平增高 ,复氧后各指标有所回复。缺氧 /复氧引起LDH释放增多。用 3g/L的丹参处理后 ,缺氧 /复氧引起的心肌细胞最大收缩和舒张速率、收缩幅度和电刺激诱导的钙瞬态幅度高于单纯缺氧组 ,舒张末钙水平低于单纯缺氧组 ,LDH释放减少。预先用百日咳毒素处理 ,丹参引起的心肌保护作用被减弱。结论 丹参可能通过百日咳毒素敏感的G蛋白发挥对缺氧

肾性和自发性高血压大鼠心肌肥大前后心肌Gαq/11含量的变化

目的 :探讨Gαq/11在不同原因所致心肌肥大中的变化。方法 :两肾一夹肾性高血压大鼠 (RHR)和自发性高血压大鼠(SHR)模型 ,测定动脉血压和心肌肥大指数 ,放免法测定心肌血管紧张素II(AngII)含量 ,免疫印迹法测定心肌Gαq/11含量。 结果 :RHR术后 1周动脉血压、心肌肥大指数及Gαq/11含量与假手术组无差异 ,心肌AngII含量显著升高 (P <0 .0 1) ;术后 8周上述各指标均较假手术组升高。 12周龄SHR动脉血压、心肌肥大指数和AngⅡ含量均较同龄WKY升高 (P均 <0 .0 1) ,但心肌Gαq/11含量却无明显变化 ;4周龄时上述各指标与同龄对照相比均无明显差异。 结论 :Gαq/11在肾性和自发性高血压心肌肥大中有不同变化。

GPER-ERK通路在DES影响小鼠睾丸引带发育中的作用

目的:检测G蛋白偶联雌激素受体(GPER)在小鼠睾丸引带上的存在情况,并进一步探讨已烯雌酚(DES)影响小鼠睾丸引带细胞的非基因效应,从睾丸外因素初步了解外源性雌激素影响雄性生殖系统的可能机制。方法:应用免疫组织化学方法了解GPER在不同发育时期(孕17、19 d,生后0、3、7、14和21 d)小鼠睾丸引带上的表达分布情况,并利用免疫电镜进行亚细胞水平的定位。将培养传代的小鼠睾丸引带细胞随机分为3组:实验组(DES组),经典雌激素核受体阻断剂亦是GPER激动剂ICI 182780干预组(ICI 182780-DES组)和GPER阻断剂G15干预组(G15-DES组)。利用Western Blot方法检测不同组别中DES对其ERK通路的影响。结果:GPER存在于不同发育时期的小鼠睾丸引带内层疏松间叶组织区,主要表达于引带细胞的细胞膜及细胞浆上;免疫电镜显示GPER颗粒主要锚定在小鼠睾丸引带细胞的粗面内质网上,表达量少。Western blot方法发现DES对ERK通路上p-ERK1/2的抑制作用可被GPER阻断剂G15阻断,但预先加入ER阻断剂ICI 182780后没有得到类似的反转现象。结论:GPER持续存在小鼠睾丸引带的各个发育阶段,表达于引带细胞的膜性结构上;DES对小鼠睾丸引带的快速非基因效应至少部分是通过GPER介导的。以睾丸引带为研究对象,探讨DES影响雄性生殖系统发育的可能机制,可为其他迫切需要进行效应评价研究的环境雌激素提供一个新的实验参考系统。

哮喘豚鼠肺组织中G蛋白的表达及胸腺素对其的影响

目的：研究哮喘豚鼠肺组织Ｇ蛋白α亚基含量的表达变化及胸腺素对其的影响。方法：用卵蛋白雾化吸入致敏的方法复制豚鼠哮喘模型，并用胸腺素治疗，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交分析法测定Ｇα含量。结果：哮喘组豚鼠肺组织Ｇｉα（１２６％ ±１１％ ）、Ｇｑα（１２２％ ±１２％ ）较正常对照组显著升高（Ｐ均＜ ０．０５）；而胸腺素组Ｇｉα、Ｇｑα（分别为９７％ ±９％ 和９８％ ±１１％ ）较哮喘组显著降低（Ｐ均＜ ０．０５）；胸腺素组Ｇｓα（１０７％ ±６％ 和１０４％ ±５％ ）无显著变化（Ｐ均＞ ０．０５）。结论：哮喘肺组织Ｇｉα、Ｇｑα表达增加在哮喘发病中可能占有一定地位，而胸腺素通过降低Ｇｉα、Ｇｑα在哮喘豚鼠肺组织的表达变化达到了治疗或缓解哮喘的目的。

益肺逐积方诱导人肺腺癌A549细胞凋亡机制

目的：通过体外实验观察益肺逐积方对人肺腺癌A549细胞活性、细胞凋亡以及表皮生长因子受体（EGFR）,G蛋白偶联受体30（GPR30）蛋白表达的影响,探讨中药复方益肺逐积方抑制肺癌细胞活性,诱导肺癌细胞凋亡的作用机制。方法：将人肺腺癌A549细胞培养至对数生长期,益肺逐积方高、低质量浓度组分别加入2,1.5 g·L^（-1）益肺逐积方培养液,5-氟尿密啶（5-FU）组加入2.5 g·L^（-1）5-FU培养液,溶剂组加入含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液,分别作用24,48 h后,采用噻唑蓝（MTT）比色法检测益肺逐积方对人肺腺癌A549细胞活性的影响;吖啶橙/溴乙啶（AO/EB）荧光染色观察益肺逐积方作用不同时间后人肺腺癌A549细胞的凋亡形态学变化;流式细胞术（FCM）测定益肺逐积方作用下人肺腺癌A549细胞的凋亡率;利用倒置显微镜观察益肺逐积方作用24,48 h后A549细胞的形态学改变,蛋白质免疫印迹法（Western blot）测定人肺腺癌A549凋亡细胞EGFR,GPR30蛋白的表达。结果：与溶剂组比较,1.5,2 g·L^（-1）益肺逐积方均能抑制人肺腺癌A549细胞活性（P〈0.05）,诱导A549细胞发生不同程度的凋亡形态学改变;流式细胞术检测显示,益肺逐积方作用24,48 h后,可使人肺腺癌A549细胞其发生晚期凋亡（P〈0.05）;Western blot结果显示,益肺逐积方可以不同程度地下调人肺腺癌A549细胞GPR30,EGFR蛋白的表达（P〈0.05）。结论：益肺逐积方可抑制人肺腺癌A549细胞活性、诱导其发生晚期凋亡,并使其发生凋亡形态学改变,这可能与下调EGFR,GPR30蛋白表达有关。

溶血磷脂酸及其受体与脑血管病

溶血磷脂酸（LPA）是一类结构最简单的天然磷脂，为正常细胞膜成分和脂质代谢中间体。最近的研究表明，LPA是一种重要的细胞内外信号分子，与特异性受体结合后发挥作用，与神经发生、髓鞘形成、血管发生、创伤愈合、肿瘤演进等重要生物学过程有关。文章就LPA及其受体与脑血管病关系的研究进展做了综述。