实时定量PCR在乙型肝炎(HBV)诊断中的应用

随着对乙型肝炎治疗的深入研究 ,对乙型肝炎病毒 (HBV DNA)数量的确诊显得尤其重要。本文采用RealTimeQuantitativePCR(简称RQ PCR)方法 ,对 2 84例经ELISA检定的乙型肝炎患者血清标本进行HBV DNA定量检测。结果有 96例HBsAg(+ ) HBeAg(+ ) HBcAb(+ )的血清标本RQ PCR阳性率为 10 0 % ,病毒平均量 5 0 2× 10 5拷贝 μl;87例HBsAg(+ ) HBeAb(+ ) HBcAb(+ )的血清标本RQ PCR阳性率为 4 4% (38例 ) ,病毒平均量 1 0 2× 10 3 拷贝 μl,5 3例HBsAg(+ ) HBcAb(+ )的血清标本RQ PCR阳性率为 5 8% (31例 ) ,病毒平均量 6 6 9× 10 4拷贝 μl;而 4 6例正常对照组经检测全为阴性。可见RQ PCR的检测结果反映了不同患者的病情 ,对乙型肝炎的诊断、治疗具有临床指导价值。

高复制型慢性乙型肝炎血清HBV复制指标与肝脏病变关系的探讨

本文报道５５例高复制型慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶ复制指标与肝脏病变的关系。５５例均为血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及抗－ＨＢｃ阳性，部分病例血清ＨＢｃＡｇ、ＤＮＡＰ、ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，均作肝穿活检，病理报告ＣＡＨ５例、ＣＬＨ９例、ＣＰＨ４１例，前二者组成Ａ组，代表病变活动组；ＣＰＨ称Ｂ组，代表病变稳定组。结果显示Ａ组各项肝脏病变在ＨＢＶ复制情况下检出率普遍高于Ｂ组；ＡＬＴ异常时肝脏各项病变检出率达８０％以上者Ａ组也多于Ｂ组，而且Ａ组出现４例碎片状坏死、Ｂ组则无，显示乙肝病毒复制程度与肝脏病变活动性、广泛程度、肝功能受损等情况密切相关，因而提示抗病毒治疗的必要性。

畲药对慢性乙型肝炎生化指标及HBeAg HBV-DNA的影响

目的:探索畲药对慢性乙型肝炎的疗效。方法:选择慢性乙型肝炎129例随机分为观察组和对照组,2组在西药常规治疗的基础上,观察组加用畲药乙肝方治疗,3个月后观察症状体征,肝功能,HBeAg,HBV-DNA的变化情况。结果:2组在肝功能指标,HBeAg,HBV-DNA阴转及疗效等方面比较差异均有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:畲药乙肝方对慢性乙型肝炎有改善症状体征和肝功能作用,对HBV的复制有一定抑制作用。

乙型肝炎病人血清HBV DNA水平与血清标志物的关系

目的 研究乙型肝炎病人血清标志物与HBVDNA的关系。方法 血清HBVDNA定量检测应用FQPCR法 ,抗原、抗体检测应用ELISA法。抗原、抗体分别与DNA定量进行相关性分析。结果 HBeAg的OD值与DNA定量呈正相关(P <0 .0 0 1) ,HBsAg的OD值与HBVDNA定量不相关 (P >0 .2 ) ,抗 -HBe与DNA定量呈负相关 (P <0 .0 0 1)。 结论 血清HBeAg的OD值可很好反映体内HBV的复制程度 ,HBsAg的OD值与病毒复制程度无关。HBeAg转化为抗 -HBe后病毒复制水平下降。

乙型肝炎病毒外膜大蛋白检测与HBV—DNA及血清标志物的相关性分析

目的探讨乙型肝炎病毒外膜大蛋白（LHBs）与乙肝病毒血清标志物及HBV—DNA之间的相关性及临床意义。方法采用酶联免疫吸咐试验（ELISA）和实时荧光定量PCR法分别检测396例慢性乙型肝炎患者血清中LHBs，HBv-M和HBV—DNA并进行相关性分析。结果在HBeAg阳性的143例患者中HBV—DNA和LHBs的检出率分别为93．0％和96．5％；抗HBe阳性的191倒中，分别为63．9％和59．2％；在HBsAg阳性、抗HBc阳性的62例中分别为50．9％和38．6％；慢性乙型肝炎轻度193例，中度119例，重度84例，其乙肝病毒包膜大蛋白阳性率分别为57．2％，63．9％和59．5％，三组之间比较差异无统计学显著性意义（P〉0．05）。结论血清LHBs水平能够反映HBV感染者体内HBV—DNA复制程度，其灵敏度高于HBV—DNA，可作为病毒复制观察的新的血清学指标。

胎儿HBV宫内感染及其血清标志物模式

目的探讨孕妇乙型肝炎病毒携带状况与胎儿HBV宫内感染的关系以及胎儿乙型肝炎血清标志物模式及其临床意义.方法检测76例HBsAg阳性的孕妇血清及其所生婴儿脐血的乙肝血清标志物及HBV-DNA,将孕妇血清与胎儿脐血的结果进行分析.结果HBV-DNA阳性孕妇组40例,其胎儿HBV宫内感染率为50%(20/40);HBV-DNA阴性孕妇组36例,其胎儿HBV宫内感染率为19.4%(7/36),两组比较差异有显著性意义(p<0.01).HBsAg阳性孕妇组44例,其胎儿HBV宫内感染率18.2%(8/44);HBsAg、HBeAg阳性组32例,其胎儿脐血HBV宫内感染率53.1%(17/32),两组比较差异有显著性意义(p<0.005).76例胎儿乙肝血清标志物模式有8种:抗-HBe、抗-HBc阳性36例(47.4%);HBeAg、抗-HBc阳性13例(17.1%);抗-HBc阳性11例(14.5%);HBsAg、抗-HBc阳性5例(6.6%);HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性4例(5.3%);HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性3例(3.9%);抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性2例(2.6%);抗-HBe阳性2例(2.6%).结论孕妇HBeAg和HBV-DNA阳性是胎儿HBV宫内感染的高危因素;HBsAg阳性的孕妇所生婴儿脐血的乙肝血清标志物模式具有多样性.

HBV-M阳性肺结核患者抗结核化疗的探讨

探讨ＨＢＶ－Ｍ阳性肺结核患者抗结核化疗对肝功能的影响。方法：采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法检测１７８例肺结核患者ＨＢＶ－Ｍ、观察执结核化疗中肝功能变化与ＨＢＶ－Ｍ的关系。结果：１７８例肺结核患者中ＨＢＶ－Ｍ阳性９２例（５１．７％）、阴性８６例（４８．３％）、化疗期间肝功能异常分别为３４．８％和９．４％（Ｐ＜０．００１）。单阳祖、双阳组和三阳组肝功能异常分别为２３．１％，４４．４％和５７．７％，三阳组显著高于单阳组和双阳组（Ｐ＜０．０５）、结论ＨＢＶ－Ｍ阳性肺结核患者可用含ＩＮＨ、ＲＦＰ和Ｐ２Ａ方案，但应并用保肝药。ＨＢＳＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）、ＨＢＣＡｂ（＋）模式最好不用Ｐ２Ａ。

高复制型慢性乙型肝炎患者肝内HBV复制指标与肝脏病变的关系

33例均为HBsAg、HBeAg及抗HBc三项阳性(部分伴HBcAg、DNA P或HBV DNA阳性)。病理报告慢性小叶性肝炎6例,慢性持续性肝炎27例.应用Southern Blot法共查肝内HBV DNA25例,其中阳性13例(52％),包括游离型9例,游离十整合型2例,整合型2例,应用双桥PAP法共查HBsAg及HBcAg23例,其中HBsAg阳性15例(65.2％),HBcAg阳性11例(43.8％)。提示肝内HBV DNA及HBcAg阳性组各项旰脏病变检出率在50％以上,项目(7项)比阴性组(5项)为高,并与血中DNAP、HBV DNA复制指标及ALT异常率相一致,肝内HBV DNA游离型及游离十整合型各项肝脏病变检出率也比整合型为高。因而,慢乙肝肝脏病变持续存在,与乙肝病毒复制有关,抗病毒治疗应予重视。

HBV核酸光敏生物素探针的制备

利用设计合成的特异性引物,通过PCR扩增获得乙肝病毒的S区621个bp DNA片段。该扩增产物经EcoRI与BamHI双酶切后直接克隆进入PSK载体进行表达,再通过扩增重组菌株,以获得大量的S区DNA片段,对它们进行光敏生物素标记,制成探针,对乙肝病毒进行检测灵敏度高,特异性强,其灵敏度可达到4pg水平。

乙肝病毒标志阴性慢性病毒性肝炎患者HBV-DNA及肝组织中HBsAg、HBcAg检测的临床意义

目的:探讨HDVM阴性慢性肝炎患者血清HBV-DNA及组织中HBsAg、HBcAg检测的临床意义。方法:对24例原因不明的慢性肝炎患者应用酶联免疫,吸附试验(ELISA法)检测血清HBV-M(HBsAG、抗HBS、HBcAg、抗HBc、抗HBc),抗HAV-IGM,抗HCV-IgMI、gG,抗HDV-IgMI、GG,抗HEV-IGMI、GG,抗EBV-IGM,抗CMV-IgM,抗TTV-IgM:应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对患者进行血清中乙型肝炎病毒基因(HBVDNA)定量检测;应用免疫组化法,通过肝组织活检测定患者肝组织中HBsAg、HBcAg的表达情况。结果:24例HBVM阴性肝病患者中,6例可检测到HBV-DNA,其中5例肝组织中HBsAG、HBcAg同时阳性,1例HBsAg(+)、HBcAg(-);18例血清HBV-DNA阴性患者中用肝组织活检者3例,其中1例肝组织中HBsAg、HBcAg同时阳性。结论:HBVM阴性不能排除乙型肝炎病毒感染,应结合血清HBV-DNA测定及肝组织中HBcAg、HBcAg的检测,以防漏诊、误诊。

乙型肝炎患者HBV—M与HBV—DNA检测结果分析

目的了解分析各型乙型肝炎患者血清的标志物HBV-M(HBsAg、抗—HBs、HBeAg、抗—HBe、抗—HBc)与从基因水平测得的HBV—DNA的关系。方法采用ELISA法检测HBV—M,FQ—PCR法检测HBV—DNA。结果各种HBV—M模式都有一定的HBV—DNA检出率。HBsAg、HBeAg、抗—HBe阳性和HBsAg、HbsAg阳性这两种模式HBV—DNA阳性率最高,分别为91.5%、90.6%。其次为HbsAg、抗—HBc阳性;HbsAg阳性;HbsAg、抗—HBe、抗—HBc阳性,HBV—DNA阳性率分别为50.0%、28.6%和23.4%。在HBsAg阴性的模式中,HBV-DNA阳性率可达8.1%(15/105),单项抗—HBc阳性患者血清HBV—DNA阳性率为8.3%,抗—HBs阳性的病例中亦可检出HBV—DNA阳性(6.0%)。HBeAg组的HBV—DNA阳性率为91.4%与抗HBe组的HBV—DNA阳性率(21.1%)比较,有显著差异(P<0.01)。结论HBeAg与HBV—DNA关系密切,乙型肝炎患者血清学标志物HBV—M无论何种模式,都应检测HBV—DNA,以此确证HBV感染后在体内的复制情况并追踪预后。

813例门诊首诊患者的HBV标志检测及其阳性模式分析

采用 ELISA 法对813例门诊首诊患者进行了非选择性的 HBV 五项标志检测,总检出率为41.57％。对 HBV 五项标志在血清中出现的常见阳性模式进行了粗略分析。HBV 感染以隐性感染居多,HBsAg 携带者虽可无任何主观的肝病症状,但肝脏的潜移性损害多有存在,且部分病例具有传染性。因此,建议将 HBV 五项标志的检测作为一般性医院门诊的常规项目进行,以利对 HBV 感染的个体能予及早发现,合理管理及恰当治疗。

聚合酶链反应检测HBV－DNA的意义探讨

对肝功能试验正常的１４９例ＨＢＶ感染者用ＰＣＲ技术检测血清ＨＢＶ─ＤＮＡ，结果ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｓ、抗ＨＢｃ均阳性者，ＨＢＶ─ＤＮＡ全部阳性，ＨＢｓＡｓ、ＨＢｅＡｓ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃ或抗ＨＢｓ单项或合并其它项阳性者，ＨＢＶ─ＤＮＡ阳性率分别为７９．４％、９４．６％、５０％、８１％和８．７％。这些结果与文献报告的相类似。

秦皇岛地区健康体检人群24853例乙肝五项检测结果分析

目的了解秦皇岛地区健康体检人群中HBV感染情况。方法收集24853例体检者血样采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行乙肝病毒血清学检测;对乙肝的感染模式,以及不同性别和不同年龄段的结果进行分析。结果 HBsAg阳性557例(2.24%),其中男性343例(2.50%),女性214例(1.92%);HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性为主要感染模式,共435例(1.75%);HBsAb阳性16002例(64.40%),10岁以下年龄段HBsAg阳性率最低,HBsAb阳性率最高,50岁以上年龄段HBsAg阳性率最高,HBsAb阳性率最低。结论提高乙肝防护的宣传,尤其加强新生儿、孕妇及老年人的防护,制定合理的接种方案,以最大程度减少乙肝病毒的传播。

口服干扰素治疗慢性乙型肝炎的研究

本文报道40例慢性乙型肝炎患者口服干扰素随机双盲对照治疗一年,结果表明肝功能改善治疗组为50％,对照组为10％;HBSAg滴度下降,eAg转阴同时伴eAb转阳治疗组为30％,对照组为10％。其机理及扩大临床应用有待进一步研究。

中国延边和韩国京畿道农村地区乙型肝炎病毒感染危险因素的比较

目的 比较中国延边和韩国京畿道农村地区乙型肝炎病毒 (HBV)感染状况及其危险因素 ,为乙型肝炎病毒感染的防制提供依据。方法 1996年 9月至 1997年 9月 ,以居住在中国延边农村地区朝、汉族人群和居住在韩国京畿道农村地区的韩民族人群作为研究对象 ,检测 HBV的血清学指标 ,并进行其危险因素的调查。结果 延边地区汉族 HBV标准化感染率为 6 0 .7% ;延边地区朝鲜族为 77.0 % ;韩国韩民族为 78.6 %。延边地区朝鲜族和韩国韩民族 HBV感染率均高于汉族 (P <0 .0 5 )。多因素分析表明 ,HBV感染的危险因素 ,延边地区汉族为文化程度、乙肝个人史及家族史、针灸史 ;朝鲜族为文化程度、乙肝个人史及家族史、针灸史、医疗机构就诊史 ;韩国韩民族为吸烟史。结论 不同地区、民族

孕妇携带乙肝病毒对产后母乳的影响

目的:探讨孕妇携带乙肝病毒(HBV)在产后母乳、新生儿血内HBV的携带情况。方法:符合研究标准的61例HBV携带的孕妇,分为两组。在妊娠28周、32周、36周各注射乙型肝炎免疫球蛋白(HBIC)200个国际单位,孕期接受治疗的31例产妇为研究组。未接受治疗的30例产妇为对照组。采用套式PCR方法。监测产后72h内母乳、新生儿血内HBV携带情况并对两组进行比较。结果:携带HBV61例中,研究组31例注射HBIC检测母乳HBV-DNA阳性的14例占45.16%(14/31),检测新生儿血HBV-DNA阴性,产生抗-HBsAg16例占51.61%(16/31);对照组30例未注射HBlC检测母乳HBV-DNA阳性的24例占(24/30),检测新生儿血HBV-DNA阴性,产生抗-HBsAg7例占23.33%(7/30);另有携带HBsAg2例占3.28%(2/30)。两组进行比较有统计学意义,P<0.05。结论:孕期HBV携带与母乳HBV携带关系密切。证明在孕期注射HBIC可以增加新生儿对HBV的免疫力,同时降低母乳、新生儿血中HBV含量。孕期没有进行HBIC治疗的新生儿对HBV免疫力较差。在孕期进行HBIC治疗是预防HBV母儿传播的有效措施。

脐血乙肝指标与预防接种失败的关系

目的探讨新生儿脐血血清学、病毒学指标与乙肝预防接种失败的关系。方法应用ELISA法检测HBV慢性感染产妇所产新生儿脐血的HBV血清学标志物,应用FQPCR法检测HBVDNA。结果“大三阳”产妇婴儿脐血中HBVDNA阳性率较“小三阳”产妇高(χ2=5.52,P<0.025)。脐血HBsAg(+)、抗-HBcIgM(+)、HBeAg(+)、HBVDNA(+)是影响新生儿常规预防接种失败的危险因素(OR值分别为10、45、15.56、51.6和95%CI分别为2.64～37.93、7.69～263.21、4.45～54.40和14.72～180.83)。结论对脐血中HBsAg阳性、抗-HBcIgM阳性、HBeAg(+)或HBVDNA阳性的新生儿应进一步采取更积极有效的干预措施。对HBV慢性感染产妇脐血进行HBVm及HBVDNA筛查有实际意义。

乙肝病毒外膜大蛋白检测在诊断乙型病毒性肝炎中的临床意义

目的通过检测乙肝患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)、HBV、DNA、以及乙肝两对半(HBVM),探讨HBV-LP与HBVDNA浓度的相关性。方法共检测354例乙肝患者血清标本,HBV-LP、乙肝前S1蛋白(Pre-SlAg)以及乙肝两对半采用酶联免疫方法进行检测,采用实时荧光定量PCR方法检测HBVDNA。结果(1)在290份HBVDNA阳性标本中HBV-LP的阳性率(88.62%)明显高于乙肝病毒前S1的阳性率(48.97%),两者之间差异有显著性(P<0.05);(2)HBV-LP吸光度值与HBVDNA拷贝数呈正相关性,相关系数r=0.939;(3)在HBeAg阳性和阴性标本中,Pre-SlAg的检出率则明显低于HBV-LP和HBVDNA。结论本研究结果显示HBV-LP与HBVDNA有良好的正相关性,HBV-LP检出与HBVDNA的符合率高于Pre-SlAg,HBV-LP检测可以用于反映乙肝患者病毒复制的血清免疫学指标。

新生儿接种小剂量乙肝疫苗后3-5年随访观察

本文对９３８例初生婴儿接种小剂量（１０ｕｇ×３）乙肝疫苗后３－５年的预防效果进行了随访观察，并以２５３例初生儿未接种疫苗者作为对照，结果表明，接种组３－５年后抗－ＨＢｓ阳性率显著高于对照组，ＨＢｓＡｇ阳性率则较对照组显著为低。感染保护率８６．７％。结果还表明，接种乙肝疫苗３年后加强１次，比不加强者Ｐ／Ｎ均值显著增高。文章认为初生儿接种小剂量乙肝疫苗有长期免疫效果；接种后３年加强接种１次，可保持较高免疫力。