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表达Strep-tag II的重组塞内卡病毒的构建与鉴定
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作者 史家宝 蒙靓 +4 位作者 肖培宇 范峻豪 安同庆 王海伟 于力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期140-146,共7页
为构建表达Strep-tag II的重组塞内卡病毒(SVA),本研究在感染性cDNA克隆p SVA-I212V/S460L的基础上,采用重叠延伸PCR扩增Strep-tag II并采用无缝克隆法将其插入SVA VP1基因C端,构建感染性cDNA克隆,命名为p SVA-Strep,并采用双酶切和测... 为构建表达Strep-tag II的重组塞内卡病毒(SVA),本研究在感染性cDNA克隆p SVA-I212V/S460L的基础上,采用重叠延伸PCR扩增Strep-tag II并采用无缝克隆法将其插入SVA VP1基因C端,构建感染性cDNA克隆,命名为p SVA-Strep,并采用双酶切和测序鉴定正确后,将p SVA-Strep转染BHK-21细胞拯救重组病毒,收集病变细胞上清,并将含有病毒的细胞上清和野生型SVA(SVA-WT)分别感染BHK-21细胞,以未感染病毒的BHK-21细胞作为阴性对照,感染后24 h分别以鼠源SVA VP2蛋白单克隆抗体(MAb)5D10(1∶1000)、鼠源Strep-tag II MAb(1∶2000)作为一抗,以FITC标记的山羊抗小鼠Ig G(1∶2000)为二抗,采用间接免疫荧光试验(IFA)对重组病毒鉴定。IFA结果显示,以鼠源SVA VP2蛋白MAb 5D10为一抗,SVA-WT和重组病毒感染的细胞均出现绿色荧光,以Strep-tag II MAb作为一抗时,仅有重组病毒感染的细胞出现绿色荧光,经SVA-WT感染的BHK-21细胞及阴性对照细胞均无绿色荧光,表明拯救了Strep-tag II标记的重组病毒,并将其命名为r SVA-Strep。将r SVA-Strep在BHK-21细胞中连续传10代,每隔2代采用引物VP1-F/R经PCR鉴定并对第10代重组病毒的VP1基因测序以鉴定r SVA-Strep的遗传稳定性。结果显示,每隔两代的重组病毒经PCR扩增后均出现约780 bp的目的条带,第10代重组病毒扩增的VP1基因测序结果显示Strep-tag II基因仍在重组病毒中,且无基因突变,表明r SVA-Strep的遗传稳定性较强;将SVA-WT和r SVA-Strep分别以MOI 0.01感染BHK-21细胞,在感染后4 h、8 h、12 h、24 h、36 h、48 h和72 h收获病毒测定病毒滴度并绘制生长曲线,结果显示在病毒感染36 h内r SVA-Strep和SVA-WT生长动力学基本一致,表明Strep-tag II的引入在病毒感染36 h内对SVA的复制基本无影响。采用0.2%甲醛充分灭活r SVA-Strep,并利用Strep-TactinRXT Purification纯化试剂盒纯化该灭活病毒,将r SVA-Strep灭活病毒上清加至Strep-Tactin亲和层析柱,分别用不同体积洗脱缓冲液依次洗脱病毒并通过western blot鉴定病毒的纯化效果。对纯化过程中不同洗脱液洗脱病毒的western blot结果显示,不同体积的洗脱液中E1、E2和E3均出现VP0和VP2两条带,且E1和E2的条带最明显,表明洗脱缓冲液的最佳洗脱体积约为2.2 CV;以上结果表明r SVA-Strep可通过Strep-Tactin亲和层析柱一步法纯化。本研究在SVA中插入Strep-tag II标签,为SVA灭活疫苗的快速纯化提供技术手段,也为其他病原的快速纯化方法的建立提供参考。 展开更多
关键词 塞内卡病毒 Strep-tag ii 感染性克隆 抗原纯化
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Effect of Herpes Simplex Virus-2 Infection in Vitro on the Expression of HLA Class II Antigen of Monocytes
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作者 敖俊红 周礼义 +2 位作者 陈兴平 杨蓉娅 宋克敏 《Chinese Journal of Sexually Transmitted Infections》 2004年第1期25-27,63,共4页
Objectives: In order to investigate the role of mono-cytes and human leukocyte antigen (HLA) class II an-tigen in herpes simplex virus-2 (HSV-2) infection, westudied the effect of HSV-2 infection in vitro on theexpres... Objectives: In order to investigate the role of mono-cytes and human leukocyte antigen (HLA) class II an-tigen in herpes simplex virus-2 (HSV-2) infection, westudied the effect of HSV-2 infection in vitro on theexpression of HLA class II antigen on monocytes.Methods: Monocytes were infected with HSV-2(Strain 333). Culture cells were collected 1, 3, 5 and 7days after infection. The levels of expression of HLAclass II antigen were measured by using alkaline phos-phatase antialkaline phosphatase method (APAAP).Results: The levels of the expression of HLA class IIantigen on monocytes significantly decreased on thefirst day of post-infection, and then gradually returnedto levels found in the controls by the 7th day post-infection.Conclusion: HLA class II antigen expression onmonocytes was inhibited with HSV-2 infection, whichmight be one means of virus escape at an early phase.The expression of HLA class II antigen may play animportant role in herpes simplex viurs-2 pathogenic-ity and immunity. 展开更多
关键词 HSV-2 MONOCYTE HLA class ii antigen
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HLA-II类抗原基因分型PCR-SSP方法在ALLo-HSCT中的应用
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作者 魏彩霞 杨绵本 +4 位作者 李玛琳 景强 黎承萍 杨弘 肖敏 《昆明医学院学报》 2002年第1期48-51,共4页
准确的HLA配型是异基因造血干细胞移植 (Allo -HSCT)成功的关键之一 ,经典的血清学方法用于HLA -II类抗原的配型因存在诸多不足可导致漏配或错配 ,为了克服血清学方法的种种不足 ,我们建立了HLA -II类聚合酶链反应 -序列特异性引物 (PCR... 准确的HLA配型是异基因造血干细胞移植 (Allo -HSCT)成功的关键之一 ,经典的血清学方法用于HLA -II类抗原的配型因存在诸多不足可导致漏配或错配 ,为了克服血清学方法的种种不足 ,我们建立了HLA -II类聚合酶链反应 -序列特异性引物 (PCR -SSP)基因配型方法 .此方法可避开血清学方法的种种干扰 ,直接从基因水平检测HLA的个体遗传学差异 .结果表明 :PCR -SSP方法具有重复性好、特异性强、灵敏度高、实验结果易于判断等特点 ,对于Allo -HSCT选择理想供者 ,减少或减轻Allo -HSCT时GVHD的发生 ,有着至关重要的意义 .可满足Allo -HSCT对HLA配型准确性高的要求 ,为在同胞兄弟姐妹间和无血缘关系供 展开更多
关键词 异基因造血干细胞移植 聚合酶链反应-序列特异性引物 hla-Ⅱ类抗原 基因分型 血清学 PCR-SSP 恶性血液病 ALL0-HSCT
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肺癌患者肺泡巨噬细胞上HLA-Ⅱ类抗原的表达 被引量:2
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作者 白明 金阳 +2 位作者 陶晓南 李元桂 辛建保 《同济医科大学学报》 CSCD 1998年第6期481-483,共3页
通过检测肺癌患者肺泡巨噬细胞(AM)上人主要组织相容性抗原Ⅱ类(HLA-Ⅱ类)抗原的表达来探究肺癌患者局部的免疫情况。经支气管肺泡灌洗获取肺癌患者(n=18)病变累及处及对照组(n=15)的AM,利用SABC法检测两组人AM上的HLA-DR和HLA... 通过检测肺癌患者肺泡巨噬细胞(AM)上人主要组织相容性抗原Ⅱ类(HLA-Ⅱ类)抗原的表达来探究肺癌患者局部的免疫情况。经支气管肺泡灌洗获取肺癌患者(n=18)病变累及处及对照组(n=15)的AM,利用SABC法检测两组人AM上的HLA-DR和HLA-DQ抗原的表达。结果显示肺癌患者AM上的这两种HLA-Ⅱ类抗原的表达均较对照组明显减少(HLA-DR的表达分别为72.9%和81.3%,P<0.01;HLA-DQ的表达分别为 42.7%和 60.4%, P<0.001),其中 HLA-DQ抗原减少更明显。提示肺癌患者病变局部AM的抗原识别和提呈能力是下降的,这对肺癌的免疫是不利的,AM上HLA-Ⅱ类抗原表达的减低可能影响到肺癌患者的预后。 展开更多
关键词 肺肿瘤 肺癌 肺泡巨噬细胞 hla-
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HLA-DRB1,-DQB1,-DPB1等位基因及单体型多态性与北方汉族急性髓系白血病(非M3型)的关联性研究 被引量:2
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作者 齐珺 王天菊 +7 位作者 陈乐 王满妮 王小芳 杜丹 尚利侠 武君华 房婕 李恒新 《中国输血杂志》 CAS 2021年第2期101-106,共6页
目的探讨HLAⅡ类(-DRB1,-DQB1,-DPB1)等位基因及单体型多态性与北方汉族急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)的易感相关性。方法以824名正常非亲缘造血干细胞捐献者(2016年1月—2019年9月)为对照,应用聚合酶链反应-测序分型(PC... 目的探讨HLAⅡ类(-DRB1,-DQB1,-DPB1)等位基因及单体型多态性与北方汉族急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)的易感相关性。方法以824名正常非亲缘造血干细胞捐献者(2016年1月—2019年9月)为对照,应用聚合酶链反应-测序分型(PCR-SBT)、下一代测序(NGS-ION S5TM)技术、基于LABScan? 3D平台的聚合酶链反应-序列特异寡核苷酸探针技术(PCR-SSO)等方法对308例AML(非M3型)患者进行HLAⅡ类(-DRB1,-DQB1,-DPB1)基因高分辨分型,用Arlequin 3.5.2.2软件计算HLA基因频率和单体型频率,计算疾病优势比(odds ratio,OR)进行病例对照研究。结果经χ^(2)检验、连续校正显示非M3型AML患者的HLA-DRB1*07∶01(14.61%vs 9.53%,P<0.01)、HLA-DQB1*02∶02(12.82%vs 8.31%,P<0.01)、HLA-DQB1*06∶02(11.53%vs 8.74%,P<0.05)和HLA-DPB1*17∶01(5.84%vs 3.16%,P<0.01)基因频率显著高于对照组,经Bonferroni校正后HLA-DRB1*07∶01(Pc<0.05)、HLA-DQB1*02∶02(Pc<0.05)和HLA-DPB1*17∶01(Pc<0.05)频率仍高于对照组,与AML呈强相关,OR分别为1.62(95%CI=1.23~2.14)、1.62(95%CI=1.21~2.18)和1.91(95%CI=1.23~2.94);AML患者的2座位单体型HLA-DRB1*07∶01-DQB1*02∶02频率经Bonferroni校正后仍高于对照组(12.66%vs 8.19%,Pc<0.05);3座位单体型HLA-DRB1*07∶01-DQB1*02∶02-DPB1*17∶01频率高于对照组,与AML呈强相关,是AML的易感单体型。结论本研究首次获得HLAⅡ(-DRB1,-DQB1,-DPB1)基因及单体型多态性与北方汉族AML相关性的资料,HLA-DRB1*07∶01、HLA-DQB1*02∶02、HLA-DPB1*17∶01及单体型HLA-DRB1*07∶01-DQB1*02∶02-DPB1*17∶01是北方汉族发生AML的风险基因及易感单体型,基于HLA单体型的风险预测可能比基于单个等位基因的风险计算更为精确。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 人类白细胞抗原 HLAⅡ类 单体型 基因频率
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血清肿瘤坏死因子-α、胃蛋白酶原Ⅰ、胃蛋白酶原Ⅱ、肿瘤标志物联合检测对胃癌的诊断价值分析
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作者 黄中超 黄婷婷 +1 位作者 卢雪明 史晓娜 《中外医药研究》 2024年第17期129-131,共3页
目的:探讨血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原72-4(CA72-4)联合检测对胃癌的诊断价值。方法:选取2020年3月—2023年3月中山大学附属第六医院收治的胃癌患者80例作为研究组... 目的:探讨血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原72-4(CA72-4)联合检测对胃癌的诊断价值。方法:选取2020年3月—2023年3月中山大学附属第六医院收治的胃癌患者80例作为研究组,慢性萎缩性胃炎患者40例作为对照组。比较不同组别、胃癌病情进展者血清TNF-α、PGⅠ、PGⅡ、CEA、CA72-4水平。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析各血清指标水平对胃癌的诊断价值。结果:研究组血清TNF-α、PGⅡ、CEA、CA72-4水平高于对照组,PGⅠ水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。进展期胃癌患者血清TNF-α、PGⅡ、CEA、CA72-4水平高于早期胃癌患者,PGⅠ水平低于早期胃癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。以研究组80例患者为阳性样本,以对照组40例患者为阴性样本,五项联合诊断胃癌的ROC曲线下面积大于单项诊断,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌患者血清TNF-α、PGⅡ、CEA、CA72-4呈高表达,而PGⅠ呈低表达,且与胃癌进展密切相关,联合检测其水平有助于提高胃癌诊断价值。 展开更多
关键词 胃癌 肿瘤坏死因子-α 胃蛋白酶原Ⅰ 胃蛋白酶原Ⅱ 癌胚抗原 糖类抗原72-4
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血清sHLAG、PGⅠ、PGⅡ与早期胃癌的关系及与窄带成像技术的联合诊断价值
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作者 史琦玉 《徐州医科大学学报》 CAS 2024年第3期208-213,共6页
目的 探讨血清可溶性人白细胞抗原-G(sHLAG)、胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)与早期胃癌的关系及与窄带成像技术(NBI)的联合诊断价值。方法 选取2019年3月-2023年4月于沧州市人民医院诊治的182例胃黏膜病变患者作为研究对象,... 目的 探讨血清可溶性人白细胞抗原-G(sHLAG)、胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)与早期胃癌的关系及与窄带成像技术(NBI)的联合诊断价值。方法 选取2019年3月-2023年4月于沧州市人民医院诊治的182例胃黏膜病变患者作为研究对象,经组织病理检查确诊为胃癌80例,胃良性病变102例。在病理确诊前行血清sHLAG、PGⅠ、PGⅡ和NBI检查。结果 胃癌组血清sHLAG、PGⅡ高于胃良性病变组,而PGⅠ低于胃良性病变组(P<0.05)。不同TNM、分化程度、肿瘤直径、浸润程度胃癌患者的sHLAG、PGⅠ、PGⅡ比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Kendall′s tau-b相关性分析显示,sHLAG、PGⅡ与TNM、分化程度、肿瘤直径、浸润程度呈正相关(P<0.05);PGⅠ与TNM、分化程度、肿瘤直径、浸润程度呈负相关(P<0.05)。4项联合诊断准确率、敏感度分别高于sHLAG、PGⅠ、PGⅡ、NBI单独诊断(P<0.05)。结论 血清sHLAG、PGⅠ、PGⅡ在早期胃癌患者中呈异常表达,且与NBI联合有利于提高早期胃癌的诊断效能。 展开更多
关键词 可溶性人白细胞抗原-G 胃蛋白酶原Ⅰ 胃蛋白酶原Ⅱ 早期胃癌 窄带成像技术
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托法替布联合醋酸泼尼松对间质性肺疾病的应用效果及对动脉血气指标、肺功能、肺泡灌洗液中KL-6、SP-A水平的影响
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作者 方婷 陈坤 +2 位作者 黄映晖 吴永煜 纪秋红 《中外医疗》 2024年第13期5-8,17,共5页
目的探讨托法替布联合醋酸泼尼松对间质性肺疾病的应用效果及对动脉血气指标、肺功能及肺泡灌洗液中人Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(Human TypeⅡAlveolar Cell Surface Antigen,KL-6)、人肺表面活性物质相关蛋白A(Human Pulmonary Surfactant ... 目的探讨托法替布联合醋酸泼尼松对间质性肺疾病的应用效果及对动脉血气指标、肺功能及肺泡灌洗液中人Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(Human TypeⅡAlveolar Cell Surface Antigen,KL-6)、人肺表面活性物质相关蛋白A(Human Pulmonary Surfactant Associated Protein A,SP-A)水平的影响。方法前瞻性随机选取2021年1月—2023年7月南平市第一医院收治的100例间质性肺疾病患者作为研究对象,根据治疗方法不同分为两组,各50例。所有患者均进行常规对症治疗,对照组采取醋酸泼尼松治疗,观察组采取托法替布联合醋酸泼尼松治疗,对比两组疗效、血气指标、肺功能及肺泡灌洗液中KL-6、SP-A水平。结果观察组总有效率为96.00%,高于对照组的80.00%,差异有统计学意义(χ^(2)=6.061,P<0.05)。治疗后,观察组血氧分压高于对照组,动脉血二氧化碳分压低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。治疗后,观察组第1秒用力呼气容积、用力肺活量及第1秒用力呼气容积/用力肺活量高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。治疗后,观察组肺泡灌洗液中KL-6、SP-A水平低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论托法替布联合醋酸泼尼松对间质性肺疾病疗效显著,可改善患者动脉血气指标,提升肺功能,降低肺泡灌洗液中KL-6、SP-A表达水平。 展开更多
关键词 托法替布 醋酸泼尼松 间质性肺疾病 人Ⅱ型肺泡细胞表面抗原 人肺表面活性物质相关蛋白A
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癌胚抗原、组织多肽抗原、糖类抗原19-9、维生素K缺乏或拮抗剂-Ⅱ诱导蛋白、甲胎蛋白联合检测对原发性肝癌的诊断价值 被引量:2
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作者 张琳倩 彭艳芝 +1 位作者 王佳宁 宁文君 《癌症进展》 2023年第14期1602-1605,共4页
目的 探讨血清癌胚抗原(CEA)、组织多肽抗原(TPA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、维生素K缺乏或拮抗剂-Ⅱ诱导蛋白(PIVKA-Ⅱ)、甲胎蛋白(AFP)联合检测对原发性肝癌的诊断价值。方法 选取83例疑似原发性肝癌患者,以手术病理结果作为金标准,分... 目的 探讨血清癌胚抗原(CEA)、组织多肽抗原(TPA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、维生素K缺乏或拮抗剂-Ⅱ诱导蛋白(PIVKA-Ⅱ)、甲胎蛋白(AFP)联合检测对原发性肝癌的诊断价值。方法 选取83例疑似原发性肝癌患者,以手术病理结果作为金标准,分析血清CEA、TPA、CA19-9、PIVKA-Ⅱ、AFP单独及联合检测对原发性肝癌的诊断效能,比较不同临床分期原发性肝癌患者的血清CEA、TPA、CA19-9、PIVKA-Ⅱ、AFP水平,采用Pearson相关分析法分析血清CEA、TPA、CA19-9、PIVKA-Ⅱ、AFP水平与原发性肝癌患者临床分期的相关性。结果 血清CEA、TPA、CA19-9、PIVKA-Ⅱ、AFP联合检测诊断原发性肝癌的灵敏度、特异度、准确度及约登指数分别为95.95%、88.89%、95.18%、0.85,均高于各指标单独检测。不同临床分期原发性肝癌患者的血清CEA、TPA、CA19-9、PIVKA-Ⅱ、AFP水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01);随着临床分期的升高,原发性肝癌患者的血清CEA、TPA、CA19-9、PIVKA-Ⅱ、AFP水平均逐渐升高。相关性分析结果显示,血清CEA、TPA、CA19-9、PIVKA-Ⅱ、AFP水平与原发性肝癌患者的临床分期均呈正相关(P﹤0.05)。结论 血清CEA、TPA、CA19-9、PIVKA-Ⅱ、AFP可作为临床诊断原发性肝癌和监测病情进展的客观实验室指标,单独检测的诊断效能一般,联合检测可提高诊断效能,更有利于原发性肝癌的早期检出。 展开更多
关键词 癌胚抗原 组织多肽抗原 糖类抗原19-9 维生素K缺乏或拮抗剂-Ⅱ诱导蛋白 甲胎蛋白 原发性肝癌
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碱性橙Ⅱ的酶联免疫检测方法的研究 被引量:7
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作者 贡东军 赵志磊 +2 位作者 王庭欣 李小亭 吴广臣 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2013年第10期80-82,共3页
建立碱性橙Ⅱ的酶联免疫分析方法。采用戊二醛偶联法将半抗原碱性橙Ⅱ与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)制备免疫抗原碱性橙Ⅱ-BSA和包被抗原碱性橙Ⅱ-OVA。经紫外可见吸收光谱鉴定和大白兔免疫实验证实人工抗原成功合成,并制备... 建立碱性橙Ⅱ的酶联免疫分析方法。采用戊二醛偶联法将半抗原碱性橙Ⅱ与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)制备免疫抗原碱性橙Ⅱ-BSA和包被抗原碱性橙Ⅱ-OVA。经紫外可见吸收光谱鉴定和大白兔免疫实验证实人工抗原成功合成,并制备抗碱性橙Ⅱ的多克隆抗体,该抗体可检测快速定量食品中的碱性橙Ⅱ,最低检测限为10 pg。该检测方法具有高灵敏度和特异性,可应用于食品中碱性橙Ⅱ检测试剂盒的研制。 展开更多
关键词 碱性橙Ⅱ 人工抗原 酶联免疫检测
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鸡恒定链协助抗原肽结合MHCⅡ类分子并进入细胞内吞体 被引量:5
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作者 陈芳芳 张旭 +2 位作者 谭红黎 桂亚萍 余为一 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期398-405,共8页
为探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)的胞质区/跨膜区[Ii(Cyt/Tra)]作为载体是否可携带抗原肽在细胞内结合MHCⅡ类分子和进入转运途径的细胞器(内吞体),构建4个基因目的片段[Ii、Ii(Cyt/Tra)、F2(新城疫病毒F蛋白片段)和Ii(Cyt/Tra)/F2]... 为探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)的胞质区/跨膜区[Ii(Cyt/Tra)]作为载体是否可携带抗原肽在细胞内结合MHCⅡ类分子和进入转运途径的细胞器(内吞体),构建4个基因目的片段[Ii、Ii(Cyt/Tra)、F2(新城疫病毒F蛋白片段)和Ii(Cyt/Tra)/F2],分别将它们插入原核表达载体pET-32a和真核表达载体pmCherry-C1/N1中,构建8个重组质粒,再转入工程菌(E.coli)和人肾细胞系(293T),并应用拉下法(pull-down)检测目的蛋白与MHCⅡβ的结合,应用激光共聚焦确定它们在真核细胞与MHCⅡβ的共定位以及在内吞体的定位。结果表明,构建的重组质粒均能相应地原核或真核表达相应目的蛋白;Ii、Ii(Cyt/Tra)和Ii(Cyt/Tra)/F2不仅能够与MHCⅡβ结合,还能进入细胞内吞体;但是F2既不能与MHCⅡβ结合,也不能进入内吞体。Ii活性片段Cyt/Tra不仅本身具有结合MHCⅡβ的作用,而且还可以携带抗原肽与之结合并一起转入细胞内吞体而进入抗原递呈途径。该结果为进一步研究Ii载体转运抗原提供了理论依据。 展开更多
关键词 ii 活性片段 免疫载体 内吞体 抗原递呈
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病毒性心肌炎脾脏淋巴细胞的活化与凋亡 被引量:3
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作者 成建定 陈玉川 +2 位作者 竞花兰 郭薇 刘水平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期361-362,共2页
目的 :探索病毒性心肌炎 (VMC)发病的脾脏机制。方法 :运用DNA缺口末端标记法、免疫组化技术检测实验组 (VMC猝死者 ,8例 )及对照组 (非心性死亡者 ,4例 )脾组织中细胞凋亡及主要组织相容性复合物 (MHC)Ⅱ类抗原的表达情况。结果 :实验... 目的 :探索病毒性心肌炎 (VMC)发病的脾脏机制。方法 :运用DNA缺口末端标记法、免疫组化技术检测实验组 (VMC猝死者 ,8例 )及对照组 (非心性死亡者 ,4例 )脾组织中细胞凋亡及主要组织相容性复合物 (MHC)Ⅱ类抗原的表达情况。结果 :实验组脾组织内可见大量的凋亡细胞 ,脾组织MHCⅡ类抗原高表达 ,动脉周围淋巴鞘MHCⅡ类抗原阳性细胞显著多于对照组 ;对照组脾组织内罕见凋亡细胞 ,MHCⅡ类抗原阳性细胞较少 ,主要位于动脉周围淋巴鞘外围。结论 :VMC患者脾脏免疫细胞的活化与凋亡相伴存在 。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 脾脏淋巴细胞 细胞活化 细胞凋亡
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Q热贝氏柯克斯体间接ELISA检测方法的建立 被引量:4
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作者 武文君 贾广乐 +4 位作者 廖娟红 梅琳 韩雪清 林祥梅 张映 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期95-101,共7页
本研究以Q热贝氏柯克斯体弱毒株Ⅱ相全菌为包被抗原建立Q热贝氏柯克斯体间接ELISA检测方法,通过方阵滴定法对抗原包被浓度和二抗反应浓度的确定及各项反应条件的优化,确定其阴阳性临界值为0.44。用本方法与IDEXX Q热抗体检测试剂盒对39... 本研究以Q热贝氏柯克斯体弱毒株Ⅱ相全菌为包被抗原建立Q热贝氏柯克斯体间接ELISA检测方法,通过方阵滴定法对抗原包被浓度和二抗反应浓度的确定及各项反应条件的优化,确定其阴阳性临界值为0.44。用本方法与IDEXX Q热抗体检测试剂盒对393份牛临床血清进行检测,检出的血清阳性率分别为11.45%和6.10%,符合率为94.66%。结果表明,本试验建立的检测Q热贝氏柯克斯体的间接ELISA法具有较好的特异性及较强的敏感性,可初步应用于Q热贝氏柯克斯体抗体的临床检测。 展开更多
关键词 Q热 贝氏柯克斯体 间接ELISA Ⅱ相抗原
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早期血液滤过对脓毒血症患者血浆IL-10和单核细胞人白细胞抗原-DR表达的影响 被引量:20
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作者 孟强 董伟 屈峰 《中国医学创新》 CAS 2014年第7期6-8,共3页
目的:探讨持续血液滤过开始时间对脓毒血症患者血浆IL-10和人白细胞抗原-DR表达的影响,评价血液滤过治疗效果。方法:选择本院ICU住院的40例脓毒血症患者,并按随机数字表法分为A组(早期血液滤过)和B组(晚期血液滤过)。在床旁持续血液滤... 目的:探讨持续血液滤过开始时间对脓毒血症患者血浆IL-10和人白细胞抗原-DR表达的影响,评价血液滤过治疗效果。方法:选择本院ICU住院的40例脓毒血症患者,并按随机数字表法分为A组(早期血液滤过)和B组(晚期血液滤过)。在床旁持续血液滤过治疗开始后0 h、12 h、24 h、48 h、7 d分别采集血液标本并检测细胞因子IL-10和单核细胞人白细胞抗原-DR(HLA-DR)的表达。结果:血液滤过治疗后,血液中细胞因子IL-10较治疗前均有下降,HLA-DR的表达也有所提高,与治疗前相比差异有统计学意义(P<0.05)。但是A组与B组相比较,A组疗效优于B组(P<0.05)。经治疗后,A组患者APACHEⅡ评分较B组明显降低。结论:血液滤过治疗能显著减少血浆中的抗炎细胞因子IL-10的表达,早期进行血液滤过治疗,能更好的改善预后,减轻患者的危重程度,这可能与患者血浆中HLA-DR表达上调有关。 展开更多
关键词 脓毒血症 血液滤过 白细胞介素-10 APACHEⅡ评分 IL-10 APACHEⅡ
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血清CEA、PGR、G-17检测在胃癌诊断中的价值分析 被引量:20
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作者 李迎今 苏军燕 徐长妍 《中国实验诊断学》 2017年第9期1498-1501,共4页
目的观察和分析血清癌胚抗原(CEA)、胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ比值(PGR)、促胃液素17(G-17)检测在胃癌诊断中的价值。方法选取200例胃癌患者作为病例组,选取100例胃黏膜正常或轻度非萎缩性胃炎患者作为对照组。对两组患者的血清CEA、PG... 目的观察和分析血清癌胚抗原(CEA)、胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ比值(PGR)、促胃液素17(G-17)检测在胃癌诊断中的价值。方法选取200例胃癌患者作为病例组,选取100例胃黏膜正常或轻度非萎缩性胃炎患者作为对照组。对两组患者的血清CEA、PGR、G-17水平进行检测和比较。结果病例组患者的血清CEA水平和G-17水平显著高于对照组,PGR水平显著低于对照组,两组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。进展期胃癌患者的血清CEA、G-17水平显著高于早期胃癌患者或对照组研究对象,PGR显著低于早期胃癌患者或对照组研究对象,早期胃癌患者的血清G-17水平显著高于对照组研究对象,差异均有统计学意义(P<0.05)。胃窦癌患者的血清PGR水平显著高于胃体癌患者,胃体癌患者的血清PGR水平显著高于近端胃癌患者,胃体癌患者的血清G-17水平显著高于近端胃癌患者,近端胃癌患者的血清G-17水平显著高于胃窦癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者表现为血清CEA、G-17水平的上升和PGR水平的下降,三种血清学标志物对于胃癌的诊断具有辅助价值,而且血清G-17和PGR检测还可用于辅助胃癌的早期诊断和病变部位诊断。 展开更多
关键词 血清 癌胚抗原 胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ比值 促胃液素17 胃癌 诊断
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乳腺浸润性导管癌磁共振扩散加权成像表观扩散系数与预后因子表达的关联性分析 被引量:26
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作者 谢宗玉 程流泉 杨镇 《中国医学影像学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第3期183-187,共5页
目的探讨乳腺浸润性导管癌磁共振扩散加权成像表观扩散系数(DWI-ADC)与乳腺浸润性导管癌预后指标之间的相关性。资料与方法经手术病理确诊的103例乳腺浸润性导管癌患者行DWI扫描(b=1000 s/mm2),测定病灶的最小ADC值。病灶切除后取相应标... 目的探讨乳腺浸润性导管癌磁共振扩散加权成像表观扩散系数(DWI-ADC)与乳腺浸润性导管癌预后指标之间的相关性。资料与方法经手术病理确诊的103例乳腺浸润性导管癌患者行DWI扫描(b=1000 s/mm2),测定病灶的最小ADC值。病灶切除后取相应标本,记录肿瘤传统预后因子(肿瘤大小、淋巴结转移状态、病理分级)及生物学预后因子(Ki-67、To Po-IIα、P53和Cyclin D1)的表达情况,并与病灶的ADC值进行相关性分析。结果所有患者传统预后因子和生物学预后因子病灶的平均ADC值组内差异均无统计学意义(P>0.05)。所有患者病灶内平均ADC值与传统预后因子和生物学预后因子的表达均无相关性(P>0.05)。肿瘤病理分级与生物学预后因子Ki-67、To Po-IIα表达水平呈正相关(P<0.05)。结论乳腺浸润性导管癌的ADC值尚不能指导其预后的评估,然而生物学预后因子Ki-67和To PoIIα在乳腺癌中的表达水平对评估患者预后和指导临床治疗有重要意义。 展开更多
关键词 导管 乳腺 磁共振成像 弥散 扩散加权成像 表观扩散系数 预后 KI-67抗原 DNA拓扑异构酶类 ii
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急性呼吸窘迫综合征患者血清KL-6、sTM水平与病情及预后的关系研究 被引量:9
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作者 宋然 祁红辉 +3 位作者 李雪 王晓君 郭瑞霞 刘健 《疑难病杂志》 CAS 2021年第7期670-675,共6页
目的分析急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清Ⅱ型肺泡细胞表面抗原-6(KL-6)、可溶性血栓调节蛋白(sTM)水平及其与ARDS患者病情和预后的关系。方法选取2016年5月—2019年3月河北省邯郸市第一医院呼吸与危重症医学科二病区收治ARDS患者105... 目的分析急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血清Ⅱ型肺泡细胞表面抗原-6(KL-6)、可溶性血栓调节蛋白(sTM)水平及其与ARDS患者病情和预后的关系。方法选取2016年5月—2019年3月河北省邯郸市第一医院呼吸与危重症医学科二病区收治ARDS患者105例,根据氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))分为轻度组(n=33)、中度组(n=42)、重度组(n=30);根据住院28 d内死亡情况将其分为死亡亚组(n=39)和存活亚组(n=66)。检测各组血清KL-6、sTM水平,并采用Logistic方法分析其与ARDS患者病情严重程度和预后的关系,受试者工作特征曲线(ROC)分析血清KL-6、sTM预测ARDS患者预后的价值。结果3组ARDS患者血清KL-6、sTM水平随着病情的加重而升高(F/P=35.261/0.000、49.251/0.000),死亡亚组入院24 h内APACHEⅡ评分、入院24 h内SOFA评分、潮气量、平均气道压力、FiO_(2)、血清KL-6、sTM水平高于存活亚组(t/P=10.038/0.000、7.869/0.000、4.785/0.000、8.204/0.000、12.333/0.000、39.265/0.000、42.491/0.000),机械通气时间≥3 d占比、ICU住院时间≥10 d占比多于存活亚组(t/P=4.654/0.031、4.686/0.030),PaO_(2)、PaO_(2)/FiO_(2)低于存活亚组(t/P=8.863/0.000、5.914/0.000)。入院24 h内SOFA评分、PaO_(2)、FiO_(2)、PaO_(2)/FiO_(2)、血清KL-6、sTM均是ARDS不良预后的危险因素(P<0.05)。血清KL-6、sTM及二者联合预测ARDS不良预后的曲线下面积(AUC)分别为0.812(95%CI 0.720~0.904)、0.752(95%CI 0.654~0.850)、0.904(95%CI 0.830~0.979),敏感度分别为0.795、0.821、0.872,特异度分别为0.803、0.758、0.894,约登指数分别为0.598、0.578、0.766。结论ARDS患者血清KL-6、sTM水平升高与病情严重程度和不良预后有关,可作为ARDS患者病情评估和预后评估的辅助指标。 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 Ⅱ型肺泡细胞表面抗原-6 可溶性血栓调节蛋白 氧合指数 危险分层 预后
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部分凝血分子标志物在糖尿病微血管并发症中的临床意义 被引量:6
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作者 冯香梅 刘运德 +2 位作者 王蓉 王国庆 李雪 《天津医科大学学报》 2010年第1期171-173,共3页
目的:探讨糖尿病微血管病患者凝血功能的变化及临床意义。方法:将99例2型糖尿病患者分为2组,糖尿病无血管并发症组47例,糖尿病微血管并发症组52例,入院时即采集静脉血,进行vWF:Ag、P-selectin、AT-Ⅲ:A检测,并设32例正常对照。结果:(1)... 目的:探讨糖尿病微血管病患者凝血功能的变化及临床意义。方法:将99例2型糖尿病患者分为2组,糖尿病无血管并发症组47例,糖尿病微血管并发症组52例,入院时即采集静脉血,进行vWF:Ag、P-selectin、AT-Ⅲ:A检测,并设32例正常对照。结果:(1)2型糖尿病无血管并发症组患者血浆vWF:Ag含量、P-selectin活性较正常对照组增高(P<0.01),糖尿病微血管并发症组患者血浆vWF:Ag含量、P-selectin活性较糖尿病无血管并发症组及正常对照组有显著性差异(P<0.01)。(2)2型糖尿病无血管并发症组患者血浆AT-Ⅲ活性与正常对照组比较,差异无显著性(P>0.05),糖尿病微血管并发症组患者血浆AT-Ⅲ活性较糖尿病无血管并发症组及正常对照组有显著性差异(P<0.01)。结论:血浆vWF:Ag、P-selectin、AT-Ⅲ:A的异常与糖尿病微血管并发症的发生、发展有密切关系,观察其变化对糖尿病微血管并发症的预防和治疗有重要意义。 展开更多
关键词 血管性血友病因子抗原 P-选择素:抗凝血酶Ⅲ 2型糖尿病 微血管病变
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髓细胞白血病患者单核细胞抗原提呈能力及HLA—Ⅱ类抗原表达的改变 被引量:4
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作者 龚非力 H.Grosse-Wilde 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第5期286-288,共3页
以与患者HLA全相同的同胞为对照组,通过测定单核细胞提呈纯蛋白衍化物引起的T细胞增殖反应等,分析急、慢性髓细胞白血病患者单核细胞抗原提呈能力的改变,结果表明此能力明显增强。
关键词 白血病 单核细胞 抗原 提呈能力
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慢性乙型肝炎病毒感染者肝细胞膜HLA—Ⅱ类抗原表达与病毒复制 被引量:1
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作者 侯金林 骆抗先 章廉 《第一军医大学学报》 CSCD 1991年第2期127-130,共4页
用免疫组织化学法观察49例慢性乙型肝炎病毒(HBY)感染者肝细胞膜HLA—Ⅱ类抗原表达。发现血清HBeAg(+)者23例中13例,抗HDe(+)者26例中仅4例肝细胞膜表达HLA-Ⅱ类抗原(P<0.01):肝内HBcAZ(+)者17例中有11例,肝内HBcAg(-)者32例中仅6例... 用免疫组织化学法观察49例慢性乙型肝炎病毒(HBY)感染者肝细胞膜HLA—Ⅱ类抗原表达。发现血清HBeAg(+)者23例中13例,抗HDe(+)者26例中仅4例肝细胞膜表达HLA-Ⅱ类抗原(P<0.01):肝内HBcAZ(+)者17例中有11例,肝内HBcAg(-)者32例中仅6例肝细胞膜表达HLA-Ⅱ类抗原(P<0.05)。说明慢性HBV感染者肝细胞膜HLA-Ⅱ类抗原表达与病毒复制有关,与肝病变活动性无关。 展开更多
关键词 乙型肝炎 病毒 肝细胞膜 抗原
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