MWCNTs改进QuEChERS结合HPLC-MS/MS检测柑橘类水果中16种农药残留

建立了多壁碳纳米管(MWCNTs)改进的QuEChERS方法、结合高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-MS/MS)技术,建立柑橘类水果中16种农药的多残留分析方法。样品前处理采用QuEChERS(quick,easy,cheap,effective,rugged,safe)方法,用乙腈提取,经混合净化剂(100 mg PSA+10 mg MWCNTs)分散固相净化,过膜后进行HPLC-MS/MS检测,外标法定量。结果显示16种农药在2.5~250μg/L范围内有着良好的线性关系,相关系数0.9962~0.9999,16种农药的回收率为70.00%~111.55%,RSDs为1.26%~14.58%,定量限为0.023~5.365μg/kg。应用该方法对75个样品进行检测,多残留农药的检出率为61.3%,单份样品中最多检出8种农药。苯醚甲环唑的检出率最高(42.7%),丙溴磷的最大残留浓度最高(95.31μg/kg),但75份柑橘全果样品中检出的农药残留量均未超过其最大残留限量。

HPLC-MS/MS法测定西咪替丁片中11种N-亚硝胺类基因毒性杂质

目的:建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定西咪替丁片中11种N-亚硝胺类基因毒性杂质(N-亚硝基二甲胺、N-甲基-N-亚硝苯胺、N-亚硝基二乙醇胺、(2S)-N-亚硝基降烟碱、N-亚硝基二正丙胺、N-亚硝基吗啉、N-亚硝基哌啶、N-亚硝基二正丁胺、N-亚硝基二异丙胺、N-亚硝基-N-乙基异丙胺、N-亚硝基二乙胺)。方法采用ACE EXCEL 3 C18-AR色谱柱(4.6 mm×150 mm,3μm),以0.1%甲酸溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1),离子源为APCI离子源,以正离子模式采集。结果:11种N-亚硝胺类基因毒性在1 ng·mL^(-1)~500 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好,回收率在80.81%~105.13%,RSD均小于4.0%。结论:该方法操作简单、灵敏度高、重现性好,可用于西咪替丁片中11种N-亚硝胺类基因毒性杂质的质量控制。

UHPLC-MS/MS法测定盐酸普萘洛尔缓释片中基因毒性杂质N-亚硝基普萘洛尔

目的建立盐酸普萘洛尔缓释片中基因毒性杂质N-亚硝基普萘洛尔的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)检测方法。方法Waters ACQUITY UPLC CSH TM C 18色谱柱(3.0 mm×150 mm,1.7μm),10 mmol·L^(-1)甲酸铵的水溶液(含0.1%甲酸)作为流动相A,乙腈溶液(含0.1%甲酸)作为流动相B,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^(-1),柱温为50℃,进样器温度为5℃,进样体积为10μL,采用多反应监测(MRM)模式,对盐酸普萘洛尔缓释片中的N-亚硝基普萘洛尔进行定量检测。结果N-亚硝基普萘洛尔在1~20 ng·mL^(-1)范围内具有良好的线性关系。低、中、高3个浓度的加样回收率(n=3)在98.4%~103.2%之间,RSD≤2.7%。检测限和定量限分别为0.09 ng·mL^(-1)和0.3 ng·mL^(-1)。检出盐酸普萘洛尔缓释片中基因毒性杂质N-亚硝基普萘洛尔含量为1.8μg·g^(-1)。结论该方法灵敏度高、专属性强,可用于测定盐酸普萘洛尔缓释片中的N-亚硝基普萘洛尔,为盐酸普萘洛尔缓释片的质量控制提供参考。

HPLC-MS/MS法同时测定微量血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦、拉莫三嗪浓度及其临床应用

目的 建立HPLC-MS/MS法测定微量血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦和拉莫三嗪的浓度,同时应用于儿童治疗药物监测。方法 取含药血浆10μl,用蛋白沉淀法对样本进行前处理。色谱柱为Agilent C18(50 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸水和甲醇,梯度洗脱;流速为0.4 ml/min。采用电喷雾离子源正离子模式,监测甲氨蝶呤m/z 455.1→308.2,甲氨蝶呤-D3 m/z 458.1→311.1(内标);左乙拉西坦m/z 171.1.4→126.2,左乙拉西坦-D6 m/z177.2→132.2(内标);拉莫三嗪m/z 256.1→211,拉莫三嗪-13C3-D3 m/z 262.1→217.1(内标)。结果 甲氨蝶呤在25~1 500 ng/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=0.251 6X+0.003 4(r=0.998 9),定量下限为25 ng/ml;左乙拉西坦在1~50μg/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=16.687 6X+0.000 2(r=0.991 1),定量下限为1μg/ml;拉莫三嗪在0.5~25.0μg/ml线性关系良好,标准曲线方程:Y=46.369 5X-0.059 9(r=0.999 1),定量下限为0.5μg/ml。样本批内、批间准确度和精密度符合要求、基质效应符合规定。本方法验证后成功用于1 348例临床患儿样本的检测。结论 本方法操作简便、专属性强、灵敏度高,可用于人血浆中甲氨蝶呤、左乙拉西坦及拉莫三嗪的分析,适用于儿童治疗药物监测。

QuEChERS/HPLC-MS/MS法测定渔用饲料及饵料中地西泮及其代谢物

研究建立了一种同时测定渔用饲料及饵料中地西泮及其代谢物的分散型固相萃取(QuEChERS)/高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)的方法。样品采用乙酸乙酯提取,提取液经50 mg C18和PSA分散固相萃取净化,40℃下氮吹浓缩近干,加入80%乙腈1.0 mL复溶,过滤后采用HPLC-MS/MS法进行测定。目标物采用飞诺美Kinetex C18系列色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm)分离,以0.1%体积比甲酸水溶液和乙腈为流动相梯度洗脱。电喷雾离子源(ESI+)、选择反应监测(SRM)模式下进行测定,基质匹配内标法定性定量。结果显示,该方法在0.5~50.0μg/kg范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限和定量下限分别为0.5μg/kg和1.0μg/kg。在3个不同的添加水平下,地西泮及其代谢物的平均回收率为82.3%~109.4%,相对标准偏差为3.62%~6.33%。研究表明,该方法具有快速、准确度高与灵敏度高的优点,可满足渔用饲料及饵料中地西泮及其代谢物的残留检测需求。

HPLC-MS-MS法测定人血清中氟西汀、文拉法辛及其代谢产物与应用

建立可同时快速测定人血清中氟西汀(Fluoxetine, FXT)、文拉法辛(Venlafaxine, VEN)及其活性代谢产物N-去甲氟西汀(Norfluoxetine,N-FXT)、O-去甲文拉法辛(O-Desmethylvenlafaxine,O-VEN)浓度的方法,并应用于临床,监测相关药物在人体中的代谢情况。临床样本,以甲醇-甲酸混合溶剂作蛋白沉淀剂,处理后,离心后取上清,进样高效液相色谱-串联质谱系统(HPLC-MS/MS),使用Phenomenex Kinetex Biphenyl色谱柱(2.1 mm×50 mm, 2.6μm),流动相为含0.1%甲酸和1 mmol/L甲酸铵的水和甲醇,流速0.4 mL·min^(-1),柱温45℃,进样量5μL,采用电喷雾正离子多反应监测模式检测。检测方法特异性和选择性较好,血药质量浓度分别在10~1 000,32~3 200,18~1 800,18~1 800 ng/mL范围内线性良好,回收率在85%~115%之间,批内批间精密度RSD均小于15%,临床样本在室温放置24 h、反复冻融、长期冻存保存下,检测准确度在85%~115%之间,相对基质效应均在20%以内,临床检测患者血药浓度,VEN加O-VEN,结果平均(263.89±176.67) ng/mL;FXT加N-FXT结果平均(139.12±121.3) ng/mL。方法样品用量少,处理简便,准确度高,特异性强,稳定性好,适用于同时快速测定人血清中FXT、VEN及其活性代谢产物的浓度,为精准个性化用药提供可靠的方法学支持。

HPLC-MS/MS法测定儿童微量血浆中白消安和甲氨蝶呤的浓度

目的建立高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定血浆中白消安和甲氨蝶呤的浓度,并用于儿童血液病患者的治疗药物监测。方法血浆样本经甲醇沉淀蛋白前处理,采用Phenomenex Kinetex EVO C18色谱柱分离,流动相为水(含2 mmol·L^(-1)乙酸铵+0.07%甲酸)和甲醇,梯度洗脱;流速为0.5 mL·min^(-1)。质谱检测方式为电喷雾离子源正离子模式,多反应监测(MRM)扫描,监测离子对:白消安m/z 264.1→151.0、内标白消安-D8 m/z 272.0→159.0;甲氨蝶呤m/z 455.1→m/z 308.2、甲氨蝶呤-D3(内标)m/z 458.1→m/z 311.1。结果白消安在62.50~4000 ng·mL^(-1)内与峰面积线性关系良好(r=0.9984),甲氨蝶呤在15.63~1000 ng·mL^(-1)与峰面积线性关系良好(r=0.9990)。准确度、精密度、基质效应和稳定性均符合要求。结论本方法操作简便、快速准确、专属性强且稳定性好,适用于血浆中白消安和甲氨蝶呤的快速分析,可用于儿童血液肿瘤患者的临床治疗药物监测。

HPLC-MS/MS法同时测定患者全血中他克莫司和五酯胶囊4种主要成分的浓度

建立HPLC-MS/MS法同时测定人全血中他克莫司和五酯胶囊4种主要成分五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲的浓度,并用于免疫抑制剂他克莫司联用保肝中药五酯胶囊临床药物浓度监测的研究中。采用了WatersAcquity UPLC■BEH C18色谱柱(50×2.1mm,1.7μm),以5mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸水溶液为水相,乙腈为有机相,流速为0.3mL/min,柱温60℃。各成分均采用他克莫司同位素化合物(13C,2H4)作为内标(IS),全血样本首先经硫酸锌处理,再加入含内标的乙腈沉淀蛋白,最后离心后取上清液进样,质谱采用电喷雾离子源,以多反应离子监测(MRM)、正离子扫描模式检测。建立的HPLC-MS/MS法在1~100ng/m L范围内,他克莫司和五酯胶囊的4种主要成分色谱响应与浓度相关性良好,定量下限均为1ng/m L;他克莫司、五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲以及内标的保留时间分别为2.54、2.33、2.65、1.14、1.56、2.54min;准确度、回收率和经内标校准后的基质效应及稳定性数据均符合相关要求。方法灵敏、专属性强、准确性好,适用于人全血中他克莫司、五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲的浓度测定。

HPLC-MS/MS指纹图谱模式识别结合化学计量学对文王一支笔特征标志物的差异分析

文王一支笔为蛇菰科植物筒鞘蛇菰(Balanophora involucrate Hook.f.)的干燥全草,是鄂西地区特色民族珍稀药材。本研究首先利用HPLC-MS/MS技术建立了鄂西十堰地区5个产地10个批次文王一支笔的根茎、花茎和花序3个部位的化学指纹图谱,标定了其中29个共有峰,并推断了27个色谱峰的化学结构,包括13个酚酸类和8个黄酮类成分。聚类分析(CA)及主成分分析(PCA)结果显示,文王一支笔地下(根茎)与地上(花茎、花序)部位化学成分差异较大,花茎与花序间化学成分差异较小。正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)中VIP值分析结果表明,峰12、8、2、3、17、21、9和22是引起文王一支笔不同药用部位化学成分差异的潜在标志性成分(Q-marker),可作为其质量控制的依据。

HPLC-MS/MS法测定盐酸拉贝洛尔中潜在基因毒性杂质

为了更好地控制盐酸拉贝洛尔中潜在的基因毒性杂质,保证用药安全,建立了高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)法检测盐酸拉贝洛尔中潜在遗传毒性杂质N-亚硝基拉贝洛尔。液相色谱条件:以Waters ACQUITY UPLC CSH C_(18)(150 mm×3.0 mm,1.7μm)为色谱柱,流动相A为0.01 mol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液,流动相B为乙腈溶液,梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,柱温为50℃,进样体积为10μL。以电喷雾电离源为离子源,负离子模式,采用多反应监测,建立质谱条件,对盐酸拉贝洛尔中N-亚硝基拉贝洛尔进行定量检测。结果表明:N-亚硝基拉贝洛尔质量浓度在1.01~100.60 ng/mL范围内有良好的线性关系;低、中、高3个浓度的加样回收率(n=3)为96.84%~99.53%;检测限和定量限分别为0.01 ng/mL和0.03 ng/mL;6批盐酸拉贝洛尔样品中N-亚硝基拉贝洛尔的含量为0.37~0.79 ng/mL。所提出的方法灵敏度高、专属性强,可用于测定盐酸拉贝洛尔中的N-亚硝基拉贝洛尔,为盐酸拉贝洛尔的质量控制提供参考。

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和布洛芬

目的建立一种可以同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和布洛芬的液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)。方法选用对乙酰氨基酚-d_(3)和布洛芬-d_(3)为内标,采用甲醇蛋白沉淀法处理血浆样品。色谱柱采用ZORBAX Extend C_(18)(4.6×150 mm,3.5μm),选用梯度洗脱方式,流动相A为5 mM乙酸铵水溶液,流动相B为甲醇;采用电喷雾离子化多反应监测模式:0~3.50 min,以正离子检测对乙酰氨基酚和对乙酰氨基酚-d_(3),3.5~5.5 min,以负离子检测布洛芬和布洛芬-d_(3)。结果对乙酰氨基酚和布洛芬分别在0.0400~10.0μg·mL^(-1)、0.100~25.0μg·mL^(-1)内线性关系良好,且精密度、回收率、稳定性等考察均符合要求。结论该方法快速简便,灵敏、准确且选择性好,适用于对乙酰氨基酚和布洛芬的临床药代动力学研究。

HPLC-MS/MS法测定注射用盐酸头孢甲肟中7种N-亚硝胺类杂质

目的建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定注射用盐酸头孢甲肟中7种N-亚硝胺类基因毒性杂质(N-亚硝基二甲胺、N-亚硝基二乙胺、N-亚硝基二乙醇胺、N-亚硝基-N-甲基苯胺、N-亚硝基-N-乙基苯胺、N-亚硝基二异丙胺、N-亚硝基二正丁胺)。方法色谱柱为ACE EXCEL 3 C18-AR(3μm,100 mm×4.6 mm),流动相为0.1%甲酸甲醇溶液(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱,流速0.6 mL·min^(-1),采用APCI离子源,以正离子、多重反应监测(MRM)模式进行检测。结果7种N-亚硝胺类基因毒性杂质在1~20ng·mL^(-1)与峰面积线性关系良好。回收率在78.9%~89.6%,RSD均小于6.1%。检测限低于1.5ng·g^(-1)。样品中各杂质均未检出。结论该方法灵敏度高、专属性强,可用于注射用盐酸头孢甲肟中7种N-亚硝胺类基因毒性杂质的质量控制。

HPLC-MS/MS法同时测定月季花配方颗粒中10种成分的含量

目的建立HPLC-MS/MS法同时测定月季花配方颗粒中金丝桃苷、异槲皮苷、没食子酸、鞣花酸、槲皮苷、芦丁、阿福豆苷、萹蓄苷、槲皮素-3-O-6-反式-香豆酰基-β-D-葡萄糖苷、槲皮素3-O-2″-没食子酰基-β-D-葡萄糖苷的含量。方法分析采用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱(1.8μm,2.1 mm×150 mm);流动相甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃;电喷雾离子源;负离子扫描;多反应监测模式。结果10种成分在各自范围线性关系良好(r>0.9958),平均加样回收率97.3%~99.6%,RSD 0.8%~2.7%。结论该方法简便快速,灵敏度高,专属性强,可用于月季花配方颗粒的质量控制。

HPLC-MS/MS直接进样法测定环境水体中阿特拉津和甲萘威

采用HPLC-MS/MS直接进样方式,建立了一种适用于生活饮用水及其水源水等环境水体中甲萘威和阿特拉津的快速测定方法。本方法与现行环境保护标准相比,具有灵敏度高、操作简便、出峰时间快等优势。实验结果表明:甲萘威和阿特拉津的检出限分别为0.07μg/L和0.08μg/L,甲萘威相关系数达0.999 7,阿特拉津相关系数达0.999 6,方法精密度在2.72%~10.32%之间,加标回收率结果在87.5%~120.5%之间。该方法线性相关系数高、方法检出限低、精密度和准确度均满足环境水体中特定项目分析要求,方法准确可靠,且只需将样品过滤及稀释后即可上机测定,免去了液液萃取或固相萃取等浓缩步骤,极大地缩短了样品预处理和分析测试时间,快速简便。

HPLC-MS法同时测定大鼠血浆中那格列奈及其主要代谢物M1

目的建立同时测定那格列奈及其主要代谢物M1的HPLC-MS方法。方法血浆样品经过乙酸乙酯萃取,以非那西丁为内标。色谱采用岛津C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm)分离,流动相为0.1%甲酸溶液与乙腈,梯度洗脱,流速0.2 mL/min。质谱采用选择性离子监测(SIM)阳离子模式,检测对象[M+H]^(+)为:那格列奈318.2,代谢物M1334.1,非那西丁180.1。结果标准曲线线性范围为0.0625~8μg/mL那格列奈,M1为0.0313~4μg/mL。日内及日间准确度和精密度变异均<10%,血浆样品稳定性良好,提取回收率均>96%,基质效应<5%。结论本方法稳定性好、灵敏度高、重现性好,可应用于各类生物样本中那格列奈及其代谢物M1的生物等效性与药物代谢动力学研究。

HPLC-MS法同时检测鱼肉中32种兽药残留

用PLS-A固相萃取小柱处理鱼肉样品,采用高效液相色谱-串联质谱法对鱼肉中的32种兽药残留进行测定。实验优化了样品提取方法、色谱条件,并研究了方法的线性范围、准确度、精密度以及基质效应。结果表明,32种兽药的回收率在75.3%~114.7%,检出限为1.0μg·kg^(-1),相对标准偏差均小于15%(n=6),32种兽残在1~100 ng·mL^(-1)线性关系良好,相关系数均高于0.991。该方法准确度高、精密度好,可为鱼肉中32种兽药残留的检测提供技术支撑。

QuEChERS-HPLC-MS/MS法测定中药中4种交链孢霉毒素

样品用1%甲酸-乙腈溶液提取,经N-丙基乙二胺(PSA)净化,采用BEH-C_(18)色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,采用电喷雾离子源负离子模式扫描,多反应模式(MRM)监测目标物,内标法定量。4种交链孢霉毒素在0.200~200 ng/mL的范围内呈现良好的线性关系(R^(2)≥0.999),并以西洋参为例做方法学验证。该方法还可应用在铁皮石斛、薏仁、陈皮、莲子和橄榄这五种基质中。该方法操作简单快捷,可用于中药中4种交链孢霉毒素的检测。

HPLC-MS/MS测定果蔬中生长调节剂

目的:建立一种高效液相色谱-串联质谱的检测方法,用于同时测定果蔬中的多种生长调节剂。方法:通过优化样品提取和净化条件,提高目标化合物的检测灵敏度和准确性,采用乙腈联合QuEChERS提取法进行样品前处理,并通过C18固相萃取柱进行净化。质谱仪采用电喷雾离子源,优化母离子和子离子的扫描范围和碰撞能量。结果:优化后的提取和净化条件能够提高生长剂的提取率,校准曲线R^(2)≥0.996。结论:该方法能有效提高检测灵敏度,操作简单,适用于果蔬中生长调节剂的残留分析。

HPLC-MS/MS快速测定蜂蜜中五氯酚残留

文章建立了应用HPLC-MS/MS快速测定蜂蜜中五氯酚残留的分析方法。样品经氨化乙酸乙酯(9∶1,V∶V)涡旋超声提取,提取液经氮气吹干,液相色谱串联质谱测定,内标法定量。在五氯酚添加浓度为0.5、2.0、10.0μg·kg^(-1)时,回收率为93.5%~101.3%,相对标准偏差(RSD)为4.30%~6.82%,其检出限和定量限分别为0.2μg·kg^(-1)和0.5μg·kg^(-1)。结果表明,此方法操作简单快捷、灵敏度高、重复性好、环保可靠,完全适用于蜂蜜中五氯酚残留量的测定。

QuEChERS-HPLC-MS/MS快速测定花生中4种黄曲霉素含量的研究

建立QuEChERS-高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)快速测定花生中4种黄曲霉毒素的含量。方法样品用乙腈提取之后,使用分散固相萃取纯化管(CNW dSPE)净化,选择ACQUITYBEN C18色谱柱(1.7μM,2.1MM×100MM)分离,采集模式为多反应监测(MRM),外标法定量。结果 4种待测物在范围内线性关系良好,相关系数(R)在0.995~0.999,检出限(LOD)为0.01~0.05mg/kg定量限(LOQ)为0.02~0.5mg/kg,低、中、高3个添加水平的回收率为74.50%~109.00%,相对标准偏差(RSD)为0.25%~3.55%。结论该方法净化效果良好,具有前处理操作简便、快速、高效、准确等优点,可适用于花生中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检测。