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应用胶体金免疫层析法快速检测恶性疟原虫中HRPⅡ抗原研究 被引量:7
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作者 徐劲 陆家海 +1 位作者 方建民 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期26-27,共2页
目的建立一种简易快速、适用于基层的胶体金免疫层析法 (ICT)用于检测恶性疟原虫中HRPⅡ抗原 ,判定是否现症感染。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记HRPⅡ单克隆抗体 ,制成免疫测试条。血中HRPⅡ抗原与测试条上金标记单克... 目的建立一种简易快速、适用于基层的胶体金免疫层析法 (ICT)用于检测恶性疟原虫中HRPⅡ抗原 ,判定是否现症感染。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记HRPⅡ单克隆抗体 ,制成免疫测试条。血中HRPⅡ抗原与测试条上金标记单克隆抗体结合后沿着硝酸醋酸纤维素膜移动 ,与膜上的固相特异性单克隆抗体结合形成肉眼可见的褐红色线。结果 ICT测试条只与HRPⅡ抗原有特异性反应 ,与间日疟无交叉反应。与显微镜检比较特异性为 10 0 %。用该法检测体外培养的恶性疟原虫HRPⅡ抗原 ,其灵敏度在体外培养实验中 ,当红细胞感染虫体为 1%时使用 5 μl血稀释 10 0倍仍能检测出来。该法检测 30份用病原学确诊的恶性疟原虫和 2 0份间日疟标本 ,检出率为 10 0 % ,与间日疟无交叉反应。结论 ICT检测血中恶性疟原虫中HRPⅡ抗原特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 hrp抗原 胶体金免疫层析法
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恶性疟原虫HRPⅡ基因的克隆与表达 被引量:2
2
作者 肖建华 李明 +2 位作者 毕惠祥 王萍 李英杰 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 1999年第1期18-23,共6页
采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫云南株(PFD-3/YN)富含组氨酸蛋白Ⅱ基因,经基因序列测定后克隆于pWR450-1融合蛋白表达载体,并转化大肠杆菌TG1。在不同菌体浓度及不同剂量IPTG诱导下检测HRPⅡ融合蛋... 采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫云南株(PFD-3/YN)富含组氨酸蛋白Ⅱ基因,经基因序列测定后克隆于pWR450-1融合蛋白表达载体,并转化大肠杆菌TG1。在不同菌体浓度及不同剂量IPTG诱导下检测HRPⅡ融合蛋白的表达。采用Dot-ELISA及Western-blot分析对表达产物进行鉴定。结果显示HRPⅡ基因与pWR450-1重组后在大肠杆菌TG1中表达一68KDa的融合蛋白,当工程菌OD590为1.0~1.2时,加入终浓度1mmol/LIPTG进行诱导,表达量较高。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 基因表达 hrp
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恶性疟原虫FCC—1/HN株EBA—175和HRP─Ⅱ基因片段的体外扩增与克隆 被引量:3
3
作者 陈海峰 余新炳 +3 位作者 吕芳丽 刘彦文 方建民 罗树红 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第3期13-15,共3页
目的构建恶性疟原虫FCC—1/HN株红细胞结合抗原(EBA—175)和富组氨酸蛋白Ⅱ(HRP─Ⅱ)抗原的重组质粒并进行初步鉴定。方法通过聚合酶链反应(PCR)对恶性疟原虫FCC—1/HN株的EBA─175和HRP─Ⅱ基因进行体外扩增,用HindⅢ/BamHI... 目的构建恶性疟原虫FCC—1/HN株红细胞结合抗原(EBA—175)和富组氨酸蛋白Ⅱ(HRP─Ⅱ)抗原的重组质粒并进行初步鉴定。方法通过聚合酶链反应(PCR)对恶性疟原虫FCC—1/HN株的EBA─175和HRP─Ⅱ基因进行体外扩增,用HindⅢ/BamHI和BamHI/EcoRI分别消化扩增产物,定向克隆pcDNA3载体,转化至感受态大肠杆菌TG1,经抗性筛选和快速凝胶电泳鉴定,再经PCR和酶切鉴定。结果从恶性疟原虫FCC—1/HN株基因组DNA中扩增出EBA—175和HRP─Ⅱ两基因片段并定向插入PCDNA3载体构建重组质粒。结论所获重组克隆含有编码恶性疟原虫FCC—1/HN株EBA—175和HRP—Ⅱ的基因片断。 展开更多
关键词 恶性 疟原虫 EBA-175 hrp- 克隆
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基于Windows NT的HRPS-Ⅱ设备的控制系统设计 被引量:1
4
作者 郭斌 史玉升 黄树槐 《华中科技大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期16-17,26,共3页
介绍了华中科技大学开发的HRPS Ⅱ型选择性激光烧结设备的体系结构 ,根据选择性激光烧结的工作原理并结合该系统的硬件结构开发了基于NT操作系统下的控制软件 .该控制软件是一种分层的结构 ,各个不同优先级的任务在不同的层面上运行 ,... 介绍了华中科技大学开发的HRPS Ⅱ型选择性激光烧结设备的体系结构 ,根据选择性激光烧结的工作原理并结合该系统的硬件结构开发了基于NT操作系统下的控制软件 .该控制软件是一种分层的结构 ,各个不同优先级的任务在不同的层面上运行 ,实时性强的部分运行在硬件中断级别上 ,对控制软件的关键性技术进行了描述 .通过试验运行 ,该设备成功地加工出了复杂的原型件 。 展开更多
关键词 hrpS- NT 优先级 中断
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抗恶性疟原虫重组HRP-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:1
5
作者 郝文波 李明 +7 位作者 罗树红 方建民 董文其 王萍 毕惠祥 肖建华 胡旭初 李英杰 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2000年第3期165-167,共3页
采用恶性疟原虫重组富组氨酸蛋白 (HRP- )融合表达蛋白免疫 BAL B/ c小鼠 ,取脾细胞与 SP2 / 0细胞融合 ,经 3次 EL ISA筛选 ,共获得 6株分泌抗恶性疟原虫重组 HRP- 单克隆抗体的杂交瘤细胞株 (1B11、1D10、2 E7、3A3、3F9、4G5 ) ,... 采用恶性疟原虫重组富组氨酸蛋白 (HRP- )融合表达蛋白免疫 BAL B/ c小鼠 ,取脾细胞与 SP2 / 0细胞融合 ,经 3次 EL ISA筛选 ,共获得 6株分泌抗恶性疟原虫重组 HRP- 单克隆抗体的杂交瘤细胞株 (1B11、1D10、2 E7、3A3、3F9、4G5 ) ,用有限稀释法进行克隆、亚克隆及扩大培养 ,并用杂交瘤细胞经腹腔接种 BAL B/ c小鼠制备腹水。 6株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体 (Mc Ab)经琼脂双扩散鉴定均为 Ig G1亚类 ,Dot- EL ISA及 Western blot分析显示 6株 Mc Ab都能与重组 HRP- 抗原发生特异性反应 ,但其中只有 2 E7和 3A3在 Dipstick免疫胶体金反应中能与恶性疟原虫培养上清中的天然 HRP- 展开更多
关键词 恶性疟原虫 富组氨酸蛋白(hrp-) 单克隆抗体
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恶性疟原虫反义HRPⅡ基因荧光真核表达重组质粒的构建
6
作者 方建民 余新炳 +3 位作者 叶苓 徐劲 吴忠道 李学荣 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第3期9-11,共3页
目的 构建恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ (Histidine richproteinⅡ ,HRPⅡ )反义真核表达载体 ,为研究HRPⅡ反义核酸的抗疟作用奠定基础。方法 应用基因重组技术 ,将我们已经克隆的恶性疟原虫HRPⅡ基因从HRPⅡ /pUC19反向亚克隆入荧光... 目的 构建恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ (Histidine richproteinⅡ ,HRPⅡ )反义真核表达载体 ,为研究HRPⅡ反义核酸的抗疟作用奠定基础。方法 应用基因重组技术 ,将我们已经克隆的恶性疟原虫HRPⅡ基因从HRPⅡ /pUC19反向亚克隆入荧光真核表达载体pEGFP N3,用含卡那霉素LB培养基平板筛选转化菌 ,阳性重组子经HindⅢ和SacⅠ双酶切分析、PCR鉴定。结果 恶性疟原虫HRPⅡ基因从HRPⅡ /pUC19重组质粒中 ,成功地亚克隆至真核表达载体pEGFP N3,获得了反义HRPⅡ /pUC19重组质粒。结论 恶性疟原虫HRPⅡ基因以反方向亚克隆入pEGFP N3质粒 ,成功构建反义HRPⅡ /pEGFP N3荧光真核表达载体 ,解决了HRPⅡ反义核酸来源问题 ,为下一步研究反义HPRⅡ的抗疟作用奠定了基础。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 荧光真核 反义hrp基因 重组质粒
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A Study of Monocyte Excretion of TNF- α and IL-6 and Monocyte Expression of HLA Class Ⅱ Antigen In Genital Herpes
7
作者 敖俊红 杨蓉娅 +2 位作者 宋克敏 周礼义 陈兴平 《Chinese Journal of Sexually Transmitted Infections》 2004年第2期86-88,i002,共4页
Objective: To study the role of monocytes in the pathogenesis of genital herpes. Methods: TNF- α and IL-6 levels in 27 cases of genital herpes were detected by enzyme linked immunosorbant assay (ELISA). HLA class Ⅱ ... Objective: To study the role of monocytes in the pathogenesis of genital herpes. Methods: TNF- α and IL-6 levels in 27 cases of genital herpes were detected by enzyme linked immunosorbant assay (ELISA). HLA class Ⅱ antigen expression on monocytes were detected by an alkaline phosphatase anti-alkaline phosphatase method. Results: Compared with normal controls, levels of TNF- a and IL - 6 secreted by monocytes responding to LPS mitogen in vitro were significantly decreased [(3.13 ± 0.44ng/ml) vs (4.68 ± 0.54ng/ml), P<0.05 and (3.32 ± 1.06ng/ml) vs (6.46 ± 1.94ng/ ml), P<0.05, respectively]. HLA class Ⅱ antigen expression on monocytes in the genital herpes group was also significantly decreased [HLA-DR (67.48% ± 1.51%) vs (81.03% ± 1.32%), P<0.01 and HLA-DQ (29.54% ± 1.15%) vs (37.63% ± 1.79%), P <0.01 respectively]. Conclusion: These findings suggest that the decreased monocyte function may contribute to the pathogenesis of genital herpes. Augmenting or inducing monocyte function may be important in the prevention, treatment, and reduction of genital herpes cases. 展开更多
关键词 Genital herpes MONOCYTE Tumor necrosis factor- α INTERLEUKIN-6 ULA class antigen
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恶性疟原虫FCC-1/HN株pcDNA3-EBA175/HRPⅡ重组质粒直接注射小鼠骨骼肌的体内表达
8
作者 吕芳丽 余新炳 +3 位作者 陈海峰 方建民 罗树红 方政 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2000年第3期161-164,共4页
为观察恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株 pc DNA3- EBA175 / HRP 重组质粒经肌肉途径接种后在宿主体内的表达。BAL B/ c小鼠分为 3组 ,1组 (实验组 )经后腿股四头肌注射重组质粒 pc DNA3- EBA175 / HRP 10 0 μg;2组 (实验对照组 )注射空白质粒 ... 为观察恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株 pc DNA3- EBA175 / HRP 重组质粒经肌肉途径接种后在宿主体内的表达。BAL B/ c小鼠分为 3组 ,1组 (实验组 )经后腿股四头肌注射重组质粒 pc DNA3- EBA175 / HRP 10 0 μg;2组 (实验对照组 )注射空白质粒 pc DNA3 10 0 μg;3组 (正常对照组 )注射 PBS(p H7.4) 10 0 μl。每隔 2 0 d加强注射 ,于第 1次接种后 2 0 d和第 2次接种后 10 d取小鼠双侧股四头肌免疫组化染色 ,于第 3次接种后 40 d取小鼠各组织作聚合酶链反应 (PCR)检测目的基因。结果显示 ,(1) 1组经重组质粒免疫小鼠血清、恶性疟原虫抗原免疫小鼠血清、恶性疟原虫人工合成九肽 HRP 单克隆抗体及抗恶性疟原虫全虫抗原单克隆抗体作用 ,免疫组化染色后 ,在注射部位肌肉组织的肌膜、肌间隙处见到褐色分泌颗粒 ;1组未注射侧肌肉组织、2组及 3组均未见褐色颗粒。 (2 )采用PCR从 1组肌肉、心脏、肝脏、肺脏和肾脏组织扩增出目的基因 EBA175和 HRP ,2组及 3组相应组织均未扩增出目的基因片段。本研究为疟疾多基因 展开更多
关键词 恶性疟原虫FCC-1/HN株 pcDNA3-EBA175/hrp
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恶性疟原虫HRPⅡ基因多态性分析
9
作者 肖建华 杨慧龄 《衡阳医学院学报》 1999年第1期7-10,共4页
采用PCR方法扩增恶性疟原虫云南株(PFD-3/YN)与海南株(FCC-1/HN)富含组氨酸蛋白Ⅱ部分基因序列,对扩增片段进行了限制性内切酶分析及部分基因序列测定,用PCGENE软件对恶性疟原虫PFD-3/YN、7G... 采用PCR方法扩增恶性疟原虫云南株(PFD-3/YN)与海南株(FCC-1/HN)富含组氨酸蛋白Ⅱ部分基因序列,对扩增片段进行了限制性内切酶分析及部分基因序列测定,用PCGENE软件对恶性疟原虫PFD-3/YN、7G8及D103个虫株部分HRPⅡ基因序列进行了比较分析。结果显示HRPⅡ在3个虫株间存在不同程度的差异,我国疟原虫虫株无HRPⅡ基因缺失突变现象。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 基因多态性 hrp
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Human leukocyte antigen class-Ⅱ DRB1 alleles and Giardia lamblia infection in children: A case-control study 被引量:1
10
作者 Samar N.El-Beshbishi Ayat A.ElBlihy +2 位作者 Raefa A.Atia Ahmed Megahed Fatma A.Auf 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2020年第2期56-61,共6页
Objective:To compare the genotype frequencies of HLA class-ⅡDRB1 alleles in Giardia(G.)lamblia-infected children.Methods:A total of 490 Egyptian children aged 2-16 years were subjected to microscopic stool examinatio... Objective:To compare the genotype frequencies of HLA class-ⅡDRB1 alleles in Giardia(G.)lamblia-infected children.Methods:A total of 490 Egyptian children aged 2-16 years were subjected to microscopic stool examination to detect G.lamblia infection,and to exclude other intestinal pathogens.On the basis of their microscopic findings,a group of 80 children were chosen as giardiasis cases,another 80 children were confirmed as Giardia free control group by immunochromatographic test,and the remaining children were excluded.Both giardiasis and control groups were then subjected to blood examination to identify their genetic type of HLA-DRB1 alleles.Results:HLA class-ⅡDRB1*03:01 and DRB1*13:01 alleles were significantly associated with G.lamblia infection(P<0.001 for each variable).On the other hand,HLA class-ⅡDRB1*04:02,DRB1*10:01,DRB1*14:01 and DRB1*15:01 alleles were significantly demonstrated in Giardia free children.However,other HLA-DRB1 alleles did not show any significant association with giardiasis.Conclusions:HLA class-ⅡDRB1*03,DRB1*13,DRB1*04,DRB1*10,DRB1*14 and DRB1*15 alleles may be involved in the establishment of host immune response to G.lamblia infection. 展开更多
关键词 Giardia LAMBLIA GIARDIASIS Human leukocyte antigen HLA class-DRB1 alleles CHILDREN
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ACT001通过STAT1/CIITA/MHC-Ⅱ通路发挥抗炎抗氧化活性治疗脓毒症引起的急性肺损伤 被引量:2
11
作者 盛磊 周杰诗 +3 位作者 韩旭 李伊楠 刘慧娟 孙涛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2231-2239,共9页
目的评价含笑内酯衍生物ACT001对脓毒症进程中急性肺损伤的治疗作用并探究其药理机制。方法动物水平上,小鼠腹腔注射LPS建立急性肺损伤模型,腹腔注射ACT001进行治疗,从小鼠个体存活状况、肺部炎症损伤及水肿情况等方面评价ACT001的药效... 目的评价含笑内酯衍生物ACT001对脓毒症进程中急性肺损伤的治疗作用并探究其药理机制。方法动物水平上,小鼠腹腔注射LPS建立急性肺损伤模型,腹腔注射ACT001进行治疗,从小鼠个体存活状况、肺部炎症损伤及水肿情况等方面评价ACT001的药效;细胞水平上,以LPS刺激RAW264.7细胞构建模型,通过检测炎症反应和氧化应激水平探究其药理机制,并通过蛋白质组学结果分析其相关分子机制。结果动物水平上,ACT001可改善急性肺损伤小鼠生存率、减轻肺部炎症、降低血清中炎症因子水平;细胞水平上,ACT001通过抑制MHC-Ⅱ相关通路,促进RAW264.7细胞向抗炎表型极化,抑制NO和相关炎症因子产生的同时提高SOD含量并清除ROS。结论ACT001通过抑制STAT1/CIITA/MHC-Ⅱ通路,发挥抗炎和抗氧化作用治疗急性肺损伤,有望开发为治疗脓毒症引起的急性肺损伤的新药。 展开更多
关键词 ACT001 LPS 脓毒症 急性肺损伤 MHC- 抗原处理与呈递
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胶体金层析法检测恶性疟原虫HRPII抗原的应用研究 被引量:3
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作者 吕刚 谢协驹 +3 位作者 余新柄 陆家海 林琼莲 莫燕娜 《海南医学院学报》 CAS 2000年第2期72-74,共3页
目的 :建立一种简易快速 ,适于基层或流行病学调查的自测式胶体金免疫层析法 (GICA)用于检测恶性疟原虫中 H RPII抗原 ,判定是否现症感染。方法 :用 GICA测试条检测全血及滤纸血样中的 H RPII抗原。结果 :40例恶性疟全血及滤纸血 H RPI... 目的 :建立一种简易快速 ,适于基层或流行病学调查的自测式胶体金免疫层析法 (GICA)用于检测恶性疟原虫中 H RPII抗原 ,判定是否现症感染。方法 :用 GICA测试条检测全血及滤纸血样中的 H RPII抗原。结果 :40例恶性疟全血及滤纸血 H RPII抗原阳性检出率均为 1 0 0 ,与镜检结果相符合 ;2 5例间日疟均为阴性。结论 :GICA检测血中恶性疟原虫 H RPII抗原特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,滤纸血的应用使样本的采集、保存和运输更为便利 ,适合大规模流行病学调查和基层使用 ,有广泛应用价值。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 hrp抗原 胶体金层析法
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Ⅱ类人白细胞抗原等位基因与晚期肝脾型日本血吸虫病的相关性研究 被引量:3
13
作者 章俊华 刘文琪 +1 位作者 李雍龙 龙小纯 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期6-9,共4页
目的 探讨Ⅱ类人白细胞抗原 (HLA Ⅱ )基因多态性与晚期肝脾型日本血吸虫病的相关性。 方法 用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)技术对 46例晚期肝脾型日本血吸虫病患者 (实验组 )和 43例慢性日本血吸虫病患者 (对照组 )HLA D... 目的 探讨Ⅱ类人白细胞抗原 (HLA Ⅱ )基因多态性与晚期肝脾型日本血吸虫病的相关性。 方法 用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)技术对 46例晚期肝脾型日本血吸虫病患者 (实验组 )和 43例慢性日本血吸虫病患者 (对照组 )HLA DRB1、DPA1、DQA1和DQB14个基因位点的等位基因进行分型。对两组间等位基因频率的差异进行 χ2 检验。 结果 实验组HLA DRB1 0 4、DPA1 0 10 3、DQA1 0 60 1和DQB1 0 2 0 1等位基因频率明显高于对照组 ,而HLA DQA1 0 5 0 1和DQB1 0 60 1等位基因频率明显低于对照组。 结论 HLA DRB1 0 4、DPA1 0 10 3、DQA1 0 60 1和DQB1 0 2 0 1等位基因 ,因其与晚期肝脾型日本血吸虫病呈显著的正相关 (P <0 0 5 )而可能是该病的遗传易感基因 ,而HLA DQA1 0 5 0 1和DQB1 0 60 1等位基因与对该病存在抵抗性有关。 展开更多
关键词 DQB1 DQA1 肝脾 日本血吸虫病 晚期 等位基因频率 人白细胞抗原 果实 基因位点 抵抗性
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两种方法检测富组蛋白Ⅱ诊断恶性疟的比较 被引量:5
14
作者 祝卫东 汤林华 +4 位作者 郑香 罗曼珍 顾政诚 钱会霖 瞿靖琦 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1999年第1期9-11,共3页
在海南疟区门诊对检测HRP-Ⅱ诊断恶性疟的ParaSight-F及ICT两种方法进行了比较。ParaSight-F方法的敏感度和特异度分别为100%和87.1%,ICT则为94.7%和90.3%;两种方法均比显微镜检... 在海南疟区门诊对检测HRP-Ⅱ诊断恶性疟的ParaSight-F及ICT两种方法进行了比较。ParaSight-F方法的敏感度和特异度分别为100%和87.1%,ICT则为94.7%和90.3%;两种方法均比显微镜检查简单易学,快速方便。但HRP-Ⅱ仅存在于恶性疟。 展开更多
关键词 富组蛋白 ParaSight-F 疟疾 诊断 ICT
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川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖中CaN活性及增殖细胞核抗原表达水平的影响 被引量:10
15
作者 郑红花 李映红 +1 位作者 罗德生 屈伸 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1545-1548,共4页
目的:观察川芎嗪对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)中钙调神经磷酸酶(CaN)活性及增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平的影响。方法:建立AngⅡ诱导VSMCs增殖模型,应用免疫细胞化学法观察血管平滑肌细胞PCNA表达;并用酶促反应... 目的:观察川芎嗪对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)中钙调神经磷酸酶(CaN)活性及增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平的影响。方法:建立AngⅡ诱导VSMCs增殖模型,应用免疫细胞化学法观察血管平滑肌细胞PCNA表达;并用酶促反应定磷法测定CaN活性。结果:AngⅡ组能够明显刺激VSMCs增殖,VSMCs细胞数目和细胞增殖活度明显高于正常对照组(P<0.01);CaN活性和PCNA表达量(A值)显著高于正常对照组(P<0.01)。同时加川芎嗪处理,各组CaN活性和PCNA表达水平均显著低于AngⅡ组(P<0.01)。结论:川芎嗪对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖有显著抑制作用,其机制与抑制CaN介导的信号转导进而抑制PCNA的表达有关。 展开更多
关键词 川芎嗪 平滑 血管 钙神经素 增殖细胞核抗原 血管紧张素
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自制免疫层析试剂盒检测恶性疟原虫HRP-II抗原的评价 被引量:2
16
作者 郝文波 王萍 +4 位作者 李宏斌 陈白虹 高洋 王声亮 李明 《热带医学杂志》 CAS 2006年第7期755-757,共3页
目的对自制免疫层析试剂盒检测恶性疟原虫富组氨酸蛋白II(HRP-II)的敏感性、特异性、稳定性等技术参数进行评价,为试剂盒的临床应用提供科学依据。方法对试剂盒的敏感性、特异性、灵敏度、精密度、稳定性等性能指标进行测定,并与国外的... 目的对自制免疫层析试剂盒检测恶性疟原虫富组氨酸蛋白II(HRP-II)的敏感性、特异性、稳定性等技术参数进行评价,为试剂盒的临床应用提供科学依据。方法对试剂盒的敏感性、特异性、灵敏度、精密度、稳定性等性能指标进行测定,并与国外的同类试剂盒进行比较研究。结果自制试剂盒操作简便,反应快速;以血涂片显微镜检查为金标准,对49例恶性疟血样、30例间日疟血样、43例正常人血样检测的敏感性为98%,特异性为100%;对恶性疟原虫血样的最小检出量为原虫密度0.01%,对重组HRP-II蛋白的最小检出量为10ng/ml;试剂盒精密度和稳定性均较好;各项性能指标相当或优于国外同类试剂盒。结论自行研制的恶性疟原虫免疫层析检测试剂盒测定结果较为准确、稳定和可靠,适用于恶性疟的快速诊断、流行病学筛查、疟区献血员筛查及过境边民筛查。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 富组氨酸蛋白 免疫层析法 诊断
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HK-Ⅱ、TS和Ki-67在青年人结肠癌组织中的表达及其意义 被引量:8
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作者 冯青青 刘红梅 +1 位作者 彭秋平 柯传庆 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期663-665,共3页
目的检测己糖激酶-Ⅱ(HK-Ⅱ)、胸苷酸合成酶(TS)和Ki-67核抗原(Ki-67)在青年人结肠癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测78例青年人(≤40岁)结肠癌和75例随机抽取的同期收治的中老年人(>40岁)结肠癌组织中HK... 目的检测己糖激酶-Ⅱ(HK-Ⅱ)、胸苷酸合成酶(TS)和Ki-67核抗原(Ki-67)在青年人结肠癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测78例青年人(≤40岁)结肠癌和75例随机抽取的同期收治的中老年人(>40岁)结肠癌组织中HK-Ⅱ、TS及Ki-67蛋白的表达。结果 HK-Ⅱ和TS在青年人组和中老年人组结肠癌组织中的阳性表达率分别为82.1%(64/78)和65.3%(49/75),69.2%(54/78)和52.0%(39/75),而Ki-67增殖指数分别为(59.1±3.0)%和(48.5±3.2)%。两组比较,以上三种蛋白的表达水平差异均有统计学意义(均P<0.01)。HK-Ⅱ、TS及Ki-67表达在青年人结肠癌肿瘤分化程度、分期之间的差异均有统计学意义(均P<0.05)。青年人结肠癌HK-Ⅱ表达与TS、Ki-67成正相关性。结论 HK-Ⅱ、TS和Ki-67阳性蛋白表达可作为青年人结肠癌的恶性指标。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 己糖激酶- 胸苷酸合成酶 KI-67核抗原 青年患者
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MHCⅡ类反式激活因子在上调HepG2细胞HLAⅡ类分子表达中的作用 被引量:6
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作者 柏秀娟 张绪清 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第21期2019-2022,共4页
目的探讨主要组织相容性复合物(major histocom patibility complex,MHC)Ⅱ类反式激活因子(classⅡtrans-activator,CⅡTA)在调控HepG2细胞HLAⅡ类分子表达中的作用。方法将含CⅡTAcDNA的真核表达载体EBS-NPL-CⅡTA和不含CⅡTAcDNA的空... 目的探讨主要组织相容性复合物(major histocom patibility complex,MHC)Ⅱ类反式激活因子(classⅡtrans-activator,CⅡTA)在调控HepG2细胞HLAⅡ类分子表达中的作用。方法将含CⅡTAcDNA的真核表达载体EBS-NPL-CⅡTA和不含CⅡTAcDNA的空载体EBS-NPL分别转染至HepG2细胞。用RT-PCR技术检测未经转染的HepG2细胞、转染EBS-NPL-CⅡTA及空载体EBS-NPL的HepG2细胞CⅡTA mRNA的表达,并用间接细胞免疫荧光技术及流式细胞技术检测其3种HLAⅡ类分子(HLA-DR、DP、DQ)的表达。结果未经转染的HepG2细胞和转染空载体EBS-NPL的HepG2细胞均无CⅡTA mRNA和HLAⅡ类分子的表达。转染EBS-NPL-CⅡTA后的HepG2细胞出现CⅡTA mRNA表达,并表达3种HLAⅡ类分子。结论CⅡTA是调控HepG2细胞是否表达HLAⅡ类分子的关键因子,HepG2细胞不表达HLA-Ⅱ类分子与其缺乏CⅡTA表达有关,为进一步研究CⅡTA在肝癌治疗中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 MHC类反式激活因子 HEPG2细胞 HLA类分子
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拓扑异构酶Ⅱα和Ki-67表达与子宫肉瘤预后的相关性研究 被引量:6
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作者 孙旸 李立安 +1 位作者 宋磊 朱守兰 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1325-1328,共4页
目的通过检测DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)、细胞核相关抗原-67(Ki-67)的表达水平,评价子宫肉瘤细胞增殖的生物学行为,寻找其预后相关因素。方法回顾性分析解放军总医院因子宫肉瘤行肿瘤切除手术的患者48例。按照国际妇产科联盟(FIGO)... 目的通过检测DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)、细胞核相关抗原-67(Ki-67)的表达水平,评价子宫肉瘤细胞增殖的生物学行为,寻找其预后相关因素。方法回顾性分析解放军总医院因子宫肉瘤行肿瘤切除手术的患者48例。按照国际妇产科联盟(FIGO)分期标准,分为Ⅰ期22例,Ⅱ期12例,Ⅲ期8例,Ⅳ期6例。按照美国妇科肿瘤组(GOG)病理组织学分类,包括子宫平滑肌肉瘤(LMS)19例,子宫内膜间质肉瘤(ESS)21例,子宫恶性中胚叶混合瘤(MMMT)8例。应用免疫组织化学(IHC)方法检测TopoⅡα、Ki-67在子宫肉瘤中的表达水平并分析其与子宫肉瘤预后的相关性。结果TopoⅡα和Ki-67的高增殖(LI)组(阳性表达细胞数>25%)患者的2年、5年生存率与低LI组(阳性表达细胞数≤25%)患者比较均无明显差别,但总体生存率高LI组均明显低于低LI组(分别为P=0.002,P=0.004)。TopoⅡα和ki-67低LI组患者的复发包块体积均大于高LI组(P=0.005,P=0.000),且复发时间均明显长于高LI组(P=0.000,P=0.000)。TopoⅡα与Ki-67表达呈明显正相关(r=0.9355,P=0.000)。COX多因素分析表明,除病理类型及分期外,TopoⅡα和Ki-67的表达与患病年龄、初潮年龄、孕产次、月经周期及经期、是否绝经均无关。结论TopoⅡα与Ki-67均可作为细胞增殖的特异性标记物,但TopoⅡα在反映细胞精确的增殖状态方面较Ki-67可能有更好的特异性,结合病理类型及分期,可能对判断子宫肉瘤的预后具有重要指导意义。 展开更多
关键词 肉瘤 子宫肿瘤 预后 细胞增殖 DNA拓扑异构酶类 KI-67抗原
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恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ抗原基因在大肠杆菌中的表达及表达蛋白的活性鉴定研究 被引量:1
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作者 方建民 余新炳 +3 位作者 罗树红 王善青 蔡贤铮 潘波 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第1期23-26,共4页
目的恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ(Histidine-richproteinⅡ,HRPⅡ)是疟原虫红内期生活史过程中从感染红细胞分泌至血浆中的水溶性抗原,是重要的诊断用抗原。本文通过实现恶性疟原虫HRPⅡ在大肠杆菌中的... 目的恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ(Histidine-richproteinⅡ,HRPⅡ)是疟原虫红内期生活史过程中从感染红细胞分泌至血浆中的水溶性抗原,是重要的诊断用抗原。本文通过实现恶性疟原虫HRPⅡ在大肠杆菌中的表达,为研制用于疟疾诊断的抗HRPⅡ单克隆抗体奠定基础。方法将含有HRPⅡ抗原基因的重组表达质粒HRPⅡ/pET8c用钙法转化大肠杆菌BL21(DE3),重组子经聚合酶链反应(PCR)和BamHI与BglⅡ双酶切鉴定。重组子HRPⅡ/pET8c/BL21(DE3)在28℃条件下,用1mMIPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western免疫印迹分析表达产物。结果成功构建HRPⅡ/pET8c重组质粒,在低温条件下经IPTG诱导,HRPⅡ呈可溶性、非融合性表达,SDS-PAGE分析表明表达产物的分子量约33kDa,薄层扫描显示表达蛋白占菌体总蛋白的20.76%。Western免疫印迹表明,表达产物能被抗HRPⅡ人工合成九肽单克隆抗体特异识别。结论恶性疟原虫HRPⅡ在原核表达系统pET8c/BL21(DE3)中获得成功表达。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 大肠杆菌 hrp
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