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Effect of Ultraviolet Radiation on Hsp70 Protein Expression in HaCaT Cells
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作者 Sergio Hugo Sánchez Rodríguez Jesús Rodríguez Vergil +6 位作者 Manuel Venancio Muñoz Juárez Kevin Said Ramírez Dávila Luis Martín García Ortiz Germán Flores Cortés Luz Elena Vidales Rodríguez Jesús Adrián López David Alejandro García López 《World Journal of Nuclear Science and Technology》 CAS 2024年第1期59-71,共13页
Ultraviolet radiation by its wavelength is divided into: UVA, UVB and UVC. Only UVA and UVB manage to penetrate the ozone layer, but due to anthropological activities, all of them are capable of interacting with human... Ultraviolet radiation by its wavelength is divided into: UVA, UVB and UVC. Only UVA and UVB manage to penetrate the ozone layer, but due to anthropological activities, all of them are capable of interacting with humans to a greater or lesser extent, and can generate adverse effects such as cellular stress when interacting with intra-and extracellular biomolecules. The skin is the first organ in contact with UV radiation, and the stress it generates can be analyzed by the expression of a bioindicator of cellular damage such as Hsp70. Therefore, the objective of the project was: to determine the effect of UVA, UVB and UVC radiation on HaCaT epithelial cells, by analyzing the expression of Hsp70. Materials and methods: HaCaT cells were cultured in vitro, which were irradiated with UVA, UVB and UVC light at different doses, to subsequently determine the degree of Hsp70 expression by Immunodetection by PAGE-SDS and Western Blot. Results: Basal expression of Hsp70 was observed in no irradiated HaCaT cells. When HaCaT cells were irradiated with UVA, UVB, UVC, an increase in this Hsp70 protein was observed. With UVA, a higher degree of expression was observed at a time of 30 minutes of irradiation. With UVB the highest expression shifted to a time of 20 minutes. With UVC, overexpression was observed after 10 minutes. Conclusion: UV radiation generates cellular stress on HaCaT cells, evaluated by the stress bioindicator Hsp70. According to the wavelength of UV radiation, those that have a shorter wavelength have a greater potential for cellular damage, such as UVC. 展开更多
关键词 Ultraviolet A Light (UVA) Ultraviolet B Light (UVB) Ultraviolet C Light (UVC) Heat Shock protein 70 (hsp70) HACAT
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AAV mediated carboxyl terminus of Hsp70 interacting protein overexpression mitigates the cognitive and pathological phenotypes of APP/PS1 mice
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作者 Zhengwei Hu Jing Yang +7 位作者 Shuo Zhang Mengjie Li Chunyan Zuo Chengyuan Mao Zhongxian Zhang Mibo Tang Changhe Shi Yuming Xu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS 2025年第1期253-264,共12页
The E3 ubiquitin ligase,carboxyl terminus of heat shock protein 70(Hsp70)interacting protein(CHIP),also functions as a co-chaperone and plays a crucial role in the protein quality control system.In this study,we aimed... The E3 ubiquitin ligase,carboxyl terminus of heat shock protein 70(Hsp70)interacting protein(CHIP),also functions as a co-chaperone and plays a crucial role in the protein quality control system.In this study,we aimed to investigate the neuroprotective effect of overexpressed CHIP on Alzheimer’s disease.We used an adeno-associated virus vector that can cross the blood-brain barrier to mediate CHIP overexpression in APP/PS1 mouse brain.CHIP overexpression significantly ameliorated the performance of APP/PS1 mice in the Morris water maze and nest building tests,reduced amyloid-βplaques,and decreased the expression of both amyloid-βand phosphorylated tau.CHIP also alleviated the concentration of microglia and astrocytes around plaques.In APP/PS1 mice of a younger age,CHIP overexpression promoted an increase in ADAM10 expression and inhibitedβ-site APP cleaving enzyme 1,insulin degrading enzyme,and neprilysin expression.Levels of HSP70 and HSP40,which have functional relevance to CHIP,were also increased.Single nuclei transcriptome sequencing in the hippocampus of CHIP overexpressed mice showed that the lysosomal pathway and oligodendrocyte-related biological processes were up-regulated,which may also reflect a potential mechanism for the neuroprotective effect of CHIP.Our research shows that CHIP effectively reduces the behavior and pathological manifestations of APP/PS1 mice.Indeed,overexpression of CHIP could be a beneficial approach for the treatment of Alzheimer’s disease. 展开更多
关键词 adeno-associated virus Alzheimer’s disease APP/PS1 mice carboxyl terminus of hsp70 interacting protein gene therapy
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绵羊支原体HSP70的原核表达及抗体间接ELISA检测方法的建立
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作者 李祥龙 章志涛 +3 位作者 孔令丽 罗雨昕 秦泽亮 王冬英 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期16-20,共5页
为建立绵羊支原体(Mycoplasma ovis)的血清学检测方法,根据GenBank收录的绵羊支原体HSP70蛋白C端的基因序列(登录号:CP006935.1),构建了重组原核表达质粒。通过原核表达获取重组蛋白,并将纯化的重组蛋白作为包被抗原,建立了绵羊支原体间... 为建立绵羊支原体(Mycoplasma ovis)的血清学检测方法,根据GenBank收录的绵羊支原体HSP70蛋白C端的基因序列(登录号:CP006935.1),构建了重组原核表达质粒。通过原核表达获取重组蛋白,并将纯化的重组蛋白作为包被抗原,建立了绵羊支原体间接ELISA抗体检测方法。结果显示,成功构建了绵羊支原体HSP70蛋白的重组原核表达质粒;重组蛋白在大肠埃希氏菌BL21(DE3)感受态细胞中,同时以可溶性蛋白和包涵体蛋白的形式表达;以重组蛋白作为包被抗原建立的绵羊支原体间接ELISA抗体检测法,抗原包被最佳浓度为4μg/mL,血清最佳稀释度为1∶100,酶标二抗最佳稀释度为1∶2000。建立的ELISA方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,为绵羊支原体的检测及试剂盒的开发提供了技术支持。 展开更多
关键词 绵羊支原体 热休克蛋白70 原核表达 间接ELISA
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短指软珊瑚(Sinularia acuta)热休克蛋白HSP70家族特征及进化分析
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作者 李子若 罗晏杰 +2 位作者 曹政 Chin yaoxian 王沛政 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期123-136,共14页
热休克蛋白70(heat shock protein 70, HSP70)在生物细胞或组织免受热或氧化应激等方面起着关键作用,是已知高度保守的蛋白质之一。由于全球环境持续升温,珊瑚大面积白化、死亡,珊瑚如何应对持续升温的抗逆机制是科学研究热点。本研究... 热休克蛋白70(heat shock protein 70, HSP70)在生物细胞或组织免受热或氧化应激等方面起着关键作用,是已知高度保守的蛋白质之一。由于全球环境持续升温,珊瑚大面积白化、死亡,珊瑚如何应对持续升温的抗逆机制是科学研究热点。本研究从高温胁迫短指软珊瑚测序蛋白序列数据库分析鉴定出了28个HSP70蛋白家族成员,均为酸性亲水蛋白,大部分蛋白质结构较为稳定。亚细胞定位表明HSP70蛋白主要分布在珊瑚细胞核、细胞质中,在线粒体、内质网上也有少量分布。信号肽预测表明, 28个HSP70蛋白成员中26个没有信号肽,大部分不属于分泌蛋白,不存在跨膜结构。系统进化树结果表明短指软珊瑚HSP70蛋白家族成员聚成5大类。短指软珊瑚HSP70蛋白家族结构和保守基序分析中预测到了10条保守基序motif分为5个亚族。短指软珊瑚HSP70蛋白家族二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,α-螺旋的含量占比大。28个HSP70家族蛋白中有25个预测到了N-糖基化位点,且位点个数在1~9范围内。28个HSP70家族蛋白均预测到磷酸化位点和O-糖基化位点,总个数分别在41~96和1~23范围内。本研究HSP70家族蛋白结果为今后珊瑚在应对全球升温胁迫中的适应机制等方面研究奠定了基础。 展开更多
关键词 短指软珊瑚 热休克蛋白 hsp70家族 进化
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白背飞虱Hsp70基因的克隆及其对非生物胁迫的响应
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作者 许铁龙 周操 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第9期2069-2076,共8页
【目的】探明热休克蛋白Hsp70基因在白背飞虱适应非生物[杀虫剂、高温/低温和紫外线A(UV-A)]胁迫中的作用,为白背飞虱绿色防控提供参考。【方法】基于白背飞虱的基因组和转录组数据,克隆白背飞虱热休克蛋白Hsp70基因并对其进行鉴定,同... 【目的】探明热休克蛋白Hsp70基因在白背飞虱适应非生物[杀虫剂、高温/低温和紫外线A(UV-A)]胁迫中的作用,为白背飞虱绿色防控提供参考。【方法】基于白背飞虱的基因组和转录组数据,克隆白背飞虱热休克蛋白Hsp70基因并对其进行鉴定,同时采用RT-qPCR测定其在杀虫剂、高温/低温和UV-A胁迫下的转录水平。【结果】克隆获得1个Hsp70基因,命名为SfHsp70-1,其全长序列为2322 bp,开放阅读框为2001 bp,编码666个氨基酸残基,分子量为72.91 kDa,理论等电点为5.11。SfHsp70-1氨基酸序列中包含3个Hsp70家族蛋白的保守结构域,且在C端具有内质网Hsp70的保守序列“HDEL”。噻虫嗪亚致死浓度表现出显著的剂量效应,LC_(10)胁迫能够诱导SfHsp70-1基因的转录水平显著升高,为对照(丙酮处理)的2.59倍;而LC_(25)胁迫对SfHsp70-1基因的转录水平无显著影响。10℃(30 min)、20℃(30,60 min)和40℃(10,30,60 min)胁迫均能诱导SfHsp70-1基因的转录水平显著提高,依次较对照(25℃)显著提高77.24%、62.00%、85.89%、138.96%、75.67%和61.10%。UV-A(300μW/cm~2)胁迫显著抑制SfHsp70-1基因的转录水平,分别较对照(照射0 min)显著降低87.85%、88.74%、91.91%、89.78%、93.04%和91.16%,且随处理时间延长其表达水平呈逐渐降低趋势。【结论】SfHsp70-1基因的过表达有助于白背飞虱对噻虫嗪和高温/低温胁迫的适应。研究结果可为进一步明确Hsp70基因在白背飞虱适应非生物胁迫中的作用奠定基础,并为制订白背飞虱绿色防控措施提供参考。 展开更多
关键词 白背飞虱 热休克蛋白 hsp70基因 非生物胁迫
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Novel heat shock protein Hsp70L1 activates dendritic cells and acts as a Th1 polarizing adjuvant 被引量:1
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作者 WanT ZhouX ChenG AnH ChenT ZhangW LiuS JiangY YangF WuY CaoX 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期771-771,共1页
Heat shock proteins (HSPs) are reported to act as effective adjuvants to elicit anti-tumor and anti-infection immunity. Here, we report that Hsp70-like protein 1 (Hsp70L1), a novel HSP derived from human dendritic cel... Heat shock proteins (HSPs) are reported to act as effective adjuvants to elicit anti-tumor and anti-infection immunity. Here, we report that Hsp70-like protein 1 (Hsp70L1), a novel HSP derived from human dendritic cells (DCs), has potent adjuvant effects that polarize responses toward Th1. With a calculated molecular weight of 54.8 kDa, Hsp70L1 is smaller in size than Hsp70 but resembles it both structurally and functionally. Hsp70L1 shares common receptors on DCs with Hsp70 and can interact with DCs, promoting DC maturation and stimulating secretion of the proinflammatory cytokines interleukin 12p70 (IL-12p70), IL-1beta, tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), and the chemokines IP-10, macrophage inflammatory protein-1alpha (MIP-1alpha), MIP-1beta, and normal T cell expressed and secreted (RANTES). The induction of interferon-gamma-inducible protein 10 (IP-10) secretion by Hsp70L1 is not shared by Hsp70, and other functional differences include more potent stimulation of DC IL-12p70, CC-chemokine, and CCR7 and CXCR4 expression by Hsp70L1. Immunization of mice with the hybrid peptide Hsp70L1-ovalbumin(OVA)(257-264) induces an OVA(257-264)-specific Th1 response and cytotoxic T lymphocyte (CTL) that results in significant inhibition of E.G7-OVA tumor growth. The ability of Hsp70L1 to activate DCs indicates its potential as a novel adjuvant for use with peptide immunizations; the Hsp70L1 antigen peptide hybrid may serve as a more effective vaccine for the control of cancer and infectious diseases. 展开更多
关键词 Th heat Novel heat shock protein hsp70L1 activates dendritic cells and acts as a Th1 polarizing adjuvant
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血清HSP70、sCD74对慢性阻塞性肺疾病患者急性加重风险的预测效能 被引量:1
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作者 李瑞彤 张志斌 《临床误诊误治》 CAS 2023年第12期62-65,95,共5页
目的探讨血清热休克蛋白70(HSP70)、可溶性CD74(sCD74)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者急性加重风险的预测效能。方法选取2022年1—12月收治的COPD 103例为观察组,选取同期体检的健康者90例作为对照组。根据患者入院前1年内患者急性加重... 目的探讨血清热休克蛋白70(HSP70)、可溶性CD74(sCD74)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者急性加重风险的预测效能。方法选取2022年1—12月收治的COPD 103例为观察组,选取同期体检的健康者90例作为对照组。根据患者入院前1年内患者急性加重次数分为急性加重低风险组48例和急性加重高风险组55例。应用酶联免疫吸附试验检测血清热休克蛋白70(HSP70)、血清sCD74表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清HSP70、sCD74对COPD患者急性加重风险的预测价值;采用多因素Logistic回归分析COPD患者急性加重风险的影响因素。结果观察组血清HSP70水平低于对照组,血清sCD74水平高于对照组(P<0.01)。急性加重低风险组血清HSP70水平高于高风险组,血清sCD74水平低于高风险组(P<0.01)。血清HSP70、sCD74联合预测COPD患者急性加重风险的曲线下面积大于二者单独预测。HSP70<1.16μg/L,sCD74≥75.56 ng/mL是COPD患者急性加重高风险的危险因素(P<0.01)。结论低水平HSP70与高水平sCD74会增加COPD急性加重风险。HSP70、sCD74联合检测在COPD急性加重风险预测中具有较高效能。 展开更多
关键词 肺疾病 慢性阻塞性 急性加重 hsp70热休克蛋白质类 可溶性CD74 预测 ROC曲线 曲线下面积 危险因素
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热休克对H22细胞膜HSP70蛋白及其mRNA水平的影响 被引量:7
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作者 吴伟忠 刘康达 +5 位作者 汤钊猷 汤晓雷 吴厚生 胡新美 谢倩 高艳琴 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1998年第1期5-8,共4页
研究不同热休克条件对H22小鼠肝癌细胞的HSP70mRNA及蛋白表达的影响,以期获得最佳诱导条件.分别用MTT、RT-PCR、免疫荧光和FCM检测等方法观察不同热休克条件对鼠H22细胞的生存率、胞内HSP70mRNA转录水平及胞膜HSP70蛋白表达水平的改变.... 研究不同热休克条件对H22小鼠肝癌细胞的HSP70mRNA及蛋白表达的影响,以期获得最佳诱导条件.分别用MTT、RT-PCR、免疫荧光和FCM检测等方法观察不同热休克条件对鼠H22细胞的生存率、胞内HSP70mRNA转录水平及胞膜HSP70蛋白表达水平的改变.结果表明,H22细胞经轻度热休克(42~43℃),细胞生存率无影响,而中重度热休克(44~45℃)则随休克时间的延长,细胞生存率明显下降;42℃热休克初期(0.5~4小时)胞内HSP70mRNA水平低于对照组,休克后期(8~12小时)mRNA水平有所恢复并逐渐增高;不同时间热休克组H22细胞胞膜HSP70表达均较对照组显著增高(P<O.005),其中非致死性热休克以12小时表达最高,42℃为59.5%,43℃为96.8%.因此适当热休克条件可引起H22细胞HSP7OmRNA的改变及膜上HSP70蛋白表达的增加,从而增加肿瘤细胞的免疫原性. 展开更多
关键词 H22细胞 hsp70 MRNA转录 热休克蛋白 肿瘤
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仔猪HSP70蛋白表达与断奶腹泻关系研究 被引量:5
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作者 王莉 汪蕊 王希彪 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期29-32,I0011,共5页
为了探讨HSP70在断奶过程中的作用,试验通过免疫组化方法检测民猪、长白猪断奶仔猪的胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠六个组织中HSP70蛋白的组织定位与定量变化。结果表明,胃肠道中HSP70蛋白主要在黏膜上皮和肠腺内表达,在各组织... 为了探讨HSP70在断奶过程中的作用,试验通过免疫组化方法检测民猪、长白猪断奶仔猪的胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠六个组织中HSP70蛋白的组织定位与定量变化。结果表明,胃肠道中HSP70蛋白主要在黏膜上皮和肠腺内表达,在各组织内的表达没有因腹泻与否而发生组织定位的改变,在除胃以外的其他消化道组织中,长白健康组仔猪的HSP70蛋白的表达量显著高于长白腹泻组、民猪健康与腹泻组。 展开更多
关键词 断奶 hsp70蛋白 免疫组化
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+Gz暴露对大鼠海马HSP70蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 韩磊 孙喜庆 +1 位作者 李鸣皋 马贵喜 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期277-280,共4页
目的观察不同值的+G z暴露对大鼠海马HSP70蛋白表达水平的影响,探讨+G z暴露诱导产生HSP70蛋白的机制。方法100只SD大鼠随机分为对照组、+2G z暴露组、+6G z暴露组、+10G z暴露组,各组在+G z暴露后的6h、1d、2d、4d、6d处死,采用免疫组... 目的观察不同值的+G z暴露对大鼠海马HSP70蛋白表达水平的影响,探讨+G z暴露诱导产生HSP70蛋白的机制。方法100只SD大鼠随机分为对照组、+2G z暴露组、+6G z暴露组、+10G z暴露组,各组在+G z暴露后的6h、1d、2d、4d、6d处死,采用免疫组织化学方法观察大鼠海马HSP70蛋白表达情况,并对实验结果进行统计分析。结果3个+G z暴露组,HSP70蛋白表达水平表现出相同的变化趋势:在+G z暴露后6h,HSP70蛋白表达水平开始增加,1d达峰值,6d时基本恢复正常,而对照组没有这一变化趋势;不同+G z值之间的比较表明,+6G z组HSP70蛋白表达水平最高,+10G z组最低。结论+G z暴露对大鼠海马HSP70蛋白表达有显著影响,+6G z暴露时HSP70蛋白表达水平最高。 展开更多
关键词 正加速度 hsp70蛋白 +GZ暴露 海马
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昆虫热休克蛋白Hsp70的研究进展 被引量:12
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作者 王薇 韩岚岚 赵奎军 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期129-132,共4页
热休克蛋白Hsp70诱导性显著,合成量多并具有高度的保守性。Hsp70表达于所有的活体细胞中。Hsp70具有分子伴侣、抗细胞凋亡功能,参与免疫反应、抗氧化功能,可以提高细胞对环境胁迫或伤害的耐受性。文章对Hsp70的特性以及其在昆虫学中的... 热休克蛋白Hsp70诱导性显著,合成量多并具有高度的保守性。Hsp70表达于所有的活体细胞中。Hsp70具有分子伴侣、抗细胞凋亡功能,参与免疫反应、抗氧化功能,可以提高细胞对环境胁迫或伤害的耐受性。文章对Hsp70的特性以及其在昆虫学中的研究意义、研究现状及前景进行了综述。 展开更多
关键词 热休克蛋白 hsp70 昆虫
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大肠癌组织中HSP70和p53蛋白的表达及其意义 被引量:3
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作者 胡文秀 杨成旺 +1 位作者 欧阳晓晖 苏秀兰 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期363-365,F0003,共4页
目的探讨大肠癌组织中HSP70和p53蛋白的表达特点及其相互间关系。方法运用SP法结合图像分析,探讨HSP70和p53蛋白在大肠癌组织、癌旁组织及正常组织中的表达。结果在31例大肠癌、癌旁、正常组织标本中,HSP70表达的平均光密度值分别为:0.5... 目的探讨大肠癌组织中HSP70和p53蛋白的表达特点及其相互间关系。方法运用SP法结合图像分析,探讨HSP70和p53蛋白在大肠癌组织、癌旁组织及正常组织中的表达。结果在31例大肠癌、癌旁、正常组织标本中,HSP70表达的平均光密度值分别为:0.5917±0.0678、0.3363±0.0485、0.1742±0.0193;癌组织中HSP70的表达水平显著升高,与癌旁、正常组织中的表达比较差异有统计学意义(P<0.01)。p53蛋白表达的平均光密度值分别为:0.7547±0.2732、0.5388±0.1542、0.3770±0.0682;癌组织中p53蛋白的表达水平显著升高,与癌旁、正常组织中的表达比较差异有统计学意义(P<0.01)。HSP70和p53在大肠癌组织中的表达存在依从关系(P<0.01),二者呈直线相关,相关系数r为0.795。结论HSP70和p53蛋白在大肠癌组织中高表达,提示二者在大肠癌的发生发展中起一定的作用,是细胞恶变的指标之一;他们在大肠癌的发生发展中具有协同作用,或者在大肠癌组织中可能存在着HSP70-p53蛋白的复合物形式。 展开更多
关键词 大肠癌 热休克蛋白70 P53蛋白 免疫组织化学
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脊尾白虾热休克蛋白HSP70基因的克隆及其表达分析 被引量:28
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作者 韩俊英 李健 +3 位作者 李吉涛 常志强 陈萍 李华 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1130-1138,共9页
克隆了脊尾白虾热休克蛋白基因全长cDNA,并进行了序列分析。该基因由2 250 bp的碱基组成,开放阅读框长1 959 bp,编码由652个氨基酸组成的蛋白,基因两翼分别存在83 bp(5'端)和208 bp(3'端)的非翻译区,将该基因命名为Ec-HSP70。... 克隆了脊尾白虾热休克蛋白基因全长cDNA,并进行了序列分析。该基因由2 250 bp的碱基组成,开放阅读框长1 959 bp,编码由652个氨基酸组成的蛋白,基因两翼分别存在83 bp(5'端)和208 bp(3'端)的非翻译区,将该基因命名为Ec-HSP70。与其它物种HSP70s氨基酸序列进行同源性比较发现,与甲壳动物的同源性都在90%以上,表明该蛋白属于热休克蛋白HSP70家族。聚类分析表明,脊尾白虾热休克蛋白氨基酸序列与中国明对虾和凡纳滨对虾紧密聚为一支,之后聚类顺序依次为斑节对虾、日本囊对虾、刀额新对虾等。通过荧光定量RT-PCR对该基因在肝胰腺、肌肉的表达分析表明,温度、pH和氨氮胁迫都可以引起该基因的高表达,而且肝胰腺中的高表达时间相对肌肉中出现的较早。试验结果表明,温度、pH和氨氮胁迫对脊尾白虾HSP70基因表达有一定的诱导效果,但胁迫的时间过长则抑制其表达,肝胰腺对胁迫比肌肉较敏感。 展开更多
关键词 脊尾白虾 热休克蛋白70 基因克隆 表达分析
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基于Hsp70基因的马梨形虫分类学定位分析 被引量:7
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作者 罗金 刘光远 +4 位作者 田占成 谢俊仁 张萍 沈辉 党根生 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期3694-3700,共7页
【目的】为了进一步确定马泰勒虫的分类学定位。【方法】根据GenBank上登录的马巴贝斯虫Hsp70基因序列(AB248743.1),设计引物TeHsp70F,TeHsp70R,以马泰勒虫基因组DNA为模板进行扩增,获得全长为1 920 bp的核酸片段。将该基因序列与GenBan... 【目的】为了进一步确定马泰勒虫的分类学定位。【方法】根据GenBank上登录的马巴贝斯虫Hsp70基因序列(AB248743.1),设计引物TeHsp70F,TeHsp70R,以马泰勒虫基因组DNA为模板进行扩增,获得全长为1 920 bp的核酸片段。将该基因序列与GenBank中23种已知虫种的相应序列进行分析比较。【结果】该片段编码639个氨基酸,其疏水性氨基酸达到208个,极性氨基酸167个。同一性分析显示,该基因片段与报道的马巴贝斯虫Hsp70基因(B.equi BAF02625.1)亲缘关系最近,其次是小泰勒虫(T.parva XP764717.1)和环形泰勒虫(T.annulata AAA30130.1),而与感染马属动物的另一个虫种驽巴贝斯虫(B.caballi BAF02619.1)亲缘关系较远。【结论】马泰勒虫Hsp70基因的克隆及系统发育分析显示,之前被定名为马巴贝斯虫(B.equi)的虫种隶属于泰勒虫虫种。本试验为马巴贝斯虫正确更名为马泰勒虫(T.equi)的分类地位提供了又一佐证。 展开更多
关键词 马泰勒虫 努巴贝斯虫 热休克蛋白(hsp70) 分类学定位
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热休克蛋白70(hsp70)基因对利什曼原虫中国分离株的系统发育分析 被引量:4
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作者 张春莹 黄玉霞 +2 位作者 袁余 胡孝素 马莹 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期163-168,190,共7页
目的选用hsp70基因探讨我国各疫区不同宿主利什曼原虫的种系发育关系。方法采用PCR方法扩增分离自中国各疫区不同宿主的利什曼原虫之热休克蛋白70(hsp70)基因,将扩增的目的片段纯化后测序。使用MEGA 5.0软件对测序产物进行多序列比对并... 目的选用hsp70基因探讨我国各疫区不同宿主利什曼原虫的种系发育关系。方法采用PCR方法扩增分离自中国各疫区不同宿主的利什曼原虫之热休克蛋白70(hsp70)基因,将扩增的目的片段纯化后测序。使用MEGA 5.0软件对测序产物进行多序列比对并构建系统发育树,同时与国外利什曼原虫分离株的hsp70序列共同分析,观察利什曼原虫中国分离株在世界范围利什曼原虫的系统发育和分子进化中的地位。结果中国各流行疫区利什曼原虫均获得约1 300bp长度的hsp70基因片段,存在丰富的多态位点。中国23株利什曼原虫经hsp70基因分型聚集为四群,其中人来源的原虫分离株均在A群,为杜氏利什曼原虫(L.donovani),并分为杜氏利什曼原虫指名亚种(L.donovani)和杜氏利什曼原虫婴儿亚种(L.infantum)两个亚支;分离自新疆沙鼠或白蛉的6株利什曼原虫聚在B群,为都兰利什曼原虫(L.turanica);分离自新疆白蛉和内蒙古沙鼠的两株利什曼原虫为C群沙鼠利什曼原虫(L.gerbilli);分离自内蒙古蜥蜴和新疆白蛉的两株原虫为D群蜥蜴利什曼原虫(Sauroleishmania)。结论利什曼原虫中国分离株属于利什曼原虫亚属的不同种和蜥蜴利什曼原虫亚属,我国利什曼原虫分离株的种系发育复杂多样。 展开更多
关键词 利什曼原虫 种系发育 热休克蛋白70(hsp70)基因
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维氏气单胞菌感染对西伯利亚鲟血清指标和hsp70基因表达的影响 被引量:7
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作者 田照辉 徐绍刚 +3 位作者 朱华 胡红霞 王巍 董颖 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期6-12,共7页
为研究西伯利亚鲟Acipenser baerii在维氏气单胞菌Aeromonas veronii感染过程中的生理免疫反应,进行了维氏气单胞菌攻毒试验,将体质量为(260.2±37.8)g的西伯利亚鲟从背部肌肉注射菌液浓度为2.0×107cfu/mL的维氏气单胞菌,注射... 为研究西伯利亚鲟Acipenser baerii在维氏气单胞菌Aeromonas veronii感染过程中的生理免疫反应,进行了维氏气单胞菌攻毒试验,将体质量为(260.2±37.8)g的西伯利亚鲟从背部肌肉注射菌液浓度为2.0×107cfu/mL的维氏气单胞菌,注射后40h后开始死亡,62h后停止死亡,累积死亡率为46.7%。结果表明:40h对照组和53h处理正常鱼组中的血清皮质醇含量最低,与不再出现死亡后的处理组和对照组无显著性差异(P>0.05),与处理患病鱼各组有显著性差异(P<0.05);62h处理组血清超氧化物歧化酶(SOD)活力最低,与40h对照组、53h处理组、53h处理正常鱼组、93h对照组、93h处理组有显著性差异(P<0.05);93h处理组血清丙二醛(MDA)含量最低,与40h处理组、44h处理组、53h处理正常鱼组、62h处理组有显著性差异(P<0.05),其他各组之间无显著性差异(P>0.05);各处理组血清溶菌酶(LZM)活力从44h开始升高,直到62h,各个处理组均显著高于40h的处理组和对照组以及93h和168h的对照组和处理组(P<0.05);实时定量了肝、鳃、脾、肠组织中hsp70基因表达的变化。研究表明:西伯利亚鲟感染维氏气单胞菌后,血清皮质醇含量和溶菌酶活力升高可作为机体免疫状态的参考指标;热休克蛋白hsp70基因的诱导表达较血清指标变化更为灵敏,hsp70基因在鳃组织最先有较高的诱导表达。 展开更多
关键词 西伯利亚鲟 维氏气单胞菌 细菌感染 血清指标 热休克蛋白hsp70基因
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重组蛋白PSCA-HSP70的免疫活性及抗肿瘤效应观察 被引量:4
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作者 董磊 刘娟 +4 位作者 马红雨 全首祯 吕建晓 李莹 朱美财 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期714-719,共6页
目的探讨重组前列腺干细胞抗原(PSCA)-热休克蛋白70(HSP70)融合蛋白对前列腺肿瘤模型小鼠的免疫激活作用及抗肿瘤活性。方法健康雄性C57BL/6小鼠25只,随机均分为PSCA组、HSP组、PSCA+HSP组、PSCAHSP组及PBS组(n=5)。小鼠皮下注射1×... 目的探讨重组前列腺干细胞抗原(PSCA)-热休克蛋白70(HSP70)融合蛋白对前列腺肿瘤模型小鼠的免疫激活作用及抗肿瘤活性。方法健康雄性C57BL/6小鼠25只,随机均分为PSCA组、HSP组、PSCA+HSP组、PSCAHSP组及PBS组(n=5)。小鼠皮下注射1×106个前列腺肿瘤细胞(RM-PSCA/Luc细胞),3d后分别采用相应重组蛋白进行免疫(100μg/只),2周后采用相同剂量加强免疫1次,观察肿瘤生长及小鼠存活状况。加强免疫后10d处死动物,采用ELISPOT法和流式细胞术检测PSCA特异性T细胞反应,ELISA法检测PSCA特异性抗体水平。结果 ELISPOT法检测显示,PSCA-HSP组分泌IFN-γ的CD8+T细胞数明显高于其他各组(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,PSCA-HSP组CD8+/IFN-γ+T细胞数明显高于其他各组(P<0.05);ELISA检测显示,PSCA、PSCA+HSP、PSCA-HSP均可诱导产生PSCA特异的体液免疫反应,且3组间抗体水平差异无统计学意义(P>0.05)。PSCA-HSP组肿瘤体积明显小于其余各组,小鼠存活时间明显长于其余各组(P<0.05)。结论 HSP70是一种效应显著的分子伴侣,重组PSCA-HSP70融合蛋白在前列腺癌的治疗中具有重要的潜在应用价值。 展开更多
关键词 前列腺干细胞抗原 hsp70热休克蛋白质类 肿瘤 实验性
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非小细胞肺癌HSP70、p27、bcl-2蛋白的表达水平及其临床意义 被引量:6
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作者 陈亮 齐协飞 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2004年第4期247-251,共5页
目的 探讨HSP70、p2 7、bcl- 2蛋白在非小细胞肺癌组织中表达水平及其临床意义。方法 用S -P免疫组化法检测 6 0例非小细胞肺癌组织和 2 0例癌旁正常组织中的HSP70、p2 7、bcl- 2的表达水平。结果 HSP70、bcl- 2在肺癌组织中呈高表... 目的 探讨HSP70、p2 7、bcl- 2蛋白在非小细胞肺癌组织中表达水平及其临床意义。方法 用S -P免疫组化法检测 6 0例非小细胞肺癌组织和 2 0例癌旁正常组织中的HSP70、p2 7、bcl- 2的表达水平。结果 HSP70、bcl- 2在肺癌组织中呈高表达 ,表达率分别为 81.6 7%、73.33% ;p2 7蛋白呈低表达 ,为 2 1.6 7% ,三者与癌旁正常组织 (分别为 2 0 %、2 5 %、70 % )比较具有显著性差异(P <0 .0 5 )。在与肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移、TNM分期等关系中 ,p2 7在有淋巴结转移者表达明显低下 ,bcl- 2表达与TNM分期相关 ,而HSP70与它们均无关系。在HSP70表达阳性的肺癌组织中 ,bcl - 2亦有较高的阳性表达率 ,两者呈正相关 ,而与p2 7表达无明显关系。结论 HSP70、p2 7、bcl- 2蛋白作为细胞调控因子参与非小细胞肺癌的发生、发展 ,其中HSP70、bcl- 2可能起促进作用 ,而p2 7则起抑制作用 ;HSP70和bcl- 2表达呈正相关 ,提示两者共同或协同促进肺癌的形成。通过该三项指标的检测有助于非小细胞肺癌的临床诊断 ,并为肺癌的生物治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 hsp70 P27 BCL-2蛋白 表达
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朱砂叶螨热激蛋白HSP70基因TCHSP70-4的克隆与表达 被引量:6
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作者 李明 卢文才 +3 位作者 冯宏祖 袁亮 王进军 何林 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1235-1243,共9页
为了研究朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus(Boisduval)热激蛋白HSP70的表达与其适应高温和低温胁迫的关系,我们利用物种的同源性及RACE技术,获得朱砂叶螨热激蛋白HSP70基因1个,命名为TCHSP70-4(GenBank登录号为EU977182)。该基因全长21... 为了研究朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus(Boisduval)热激蛋白HSP70的表达与其适应高温和低温胁迫的关系,我们利用物种的同源性及RACE技术,获得朱砂叶螨热激蛋白HSP70基因1个,命名为TCHSP70-4(GenBank登录号为EU977182)。该基因全长2182bp,包含1959bp的开放阅读框,编码653个氨基酸,理论分子量为70.9kDa,等电点为5.4,含有HSP70家族高度保守的基序。运用real-time PCR分析冷激(4℃)和热激(40℃)1h后TCHSP70-4在朱砂叶螨体内的表达量。结果显示冷激后TCHSP70-4表达量明显下降,而热激后TCHSP70-4表达量却明显上升。这些结果一方面表明该基因属于诱导型HSP70基因,另一方面揭示了朱砂叶螨分别受到冷和热胁迫后体内TCHSP70-4的表达及所起的保护作用是不同的。 展开更多
关键词 朱砂叶螨 热激蛋白 hsp70基因 克隆 表达 温度胁迫 实时定量PCR
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瓜实蝇热激蛋白基因hsp70的克隆及序列分析 被引量:6
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作者 姜建军 王凤英 +3 位作者 黄立飞 陈红松 李磊 杨朗 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期800-805,共6页
【目的】克隆分析瓜实蝇热激蛋白hsp70基因序列特征,为进一步研究瓜实蝇的热适应性机制及制定综合防治策略奠定基础。【方法】根据NCBI数据库中已报道的昆虫hsp70基因保守序列,设计合成扩增瓜实蝇hsp70基因部分片段的简并引物,并利用RAC... 【目的】克隆分析瓜实蝇热激蛋白hsp70基因序列特征,为进一步研究瓜实蝇的热适应性机制及制定综合防治策略奠定基础。【方法】根据NCBI数据库中已报道的昆虫hsp70基因保守序列,设计合成扩增瓜实蝇hsp70基因部分片段的简并引物,并利用RACE-PCR扩增其全长序列。【结果】克隆获得瓜实蝇hsp70基因c DNA全长序列(获取号:KM112021)2271 bp,含1911 bp的开放阅读框,编码636个氨基酸,具有真核生物hsp70基因家族的3个明显基序标签,同时在C-末端具有EEVD基序,推测其属于胞质型热激蛋白。BLAST分析结果表明该序列与双翅目实蝇科昆虫hsp70基因高度相似,最高相似度达91%。氨基酸序列系统发育分析结果显示,瓜实蝇与双翅目实蝇科昆虫聚类为一个分支,证实hsp70基因的高度保守。【结论】瓜实蝇hsp70基因具有真核生物hsp70基因家族的特征,序列表现为高度的保守性,可作为今后研究瓜实蝇抗逆性机制的一个参数指标。 展开更多
关键词 瓜实蝇 热激蛋白70基因 RACE-PCR 序列分析
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