猪HB-EGF基因多态性与产仔数的关联性分析

【目的】研究猪HB-EGF基因的多态性及其与产仔数的关系,寻找与猪产仔数相关的分子遗传标记,以加快猪育种进程。【方法】利用PCR-SSCP技术研究HB-EGF基因外显子多态性,利用最小二乘均数法对其与产仔数的关系进行分析,同时对两个多态位点的方差组分进行了分析。【结果】在两对引物(E5和E7)中各检测到一个多态位点,均出现3种基因型(AA、BB、AB)。E5位点:对于大白猪,在3～8胎中,BB型个体的TNB和NBA均显著高于AA型个体(P<0.05),在所有胎次中,BB型个体的TNB显著高于AA型个体(P<0.05),NBA极显著高于AA型个体(P<0.01),TNB和NBA的遗传主要受基因加性效应的影响;对于长白猪,在4个阶段中3种基因型个体的TNB和NBA之间差异不显著(P>0.05)。E7位点:对于大白猪,在3～8胎和所有胎次中,AA型个体的TNB均显著高于BB型个体(P<0.05),TNB的遗传主要受基因加性效应的影响;对于长白猪,在3～8胎和所有胎次中,AB型个体的NBA均显著高于BB型个体。【结论】对于大白猪,E5位点BB基因型可作为在TNB和NBA性状上的标记基因型,E7位点BB基因型可以作为TNB性状的标记基因型。

HB-EGF对系膜细胞己糖激酶活性的调节

目的 :探讨肝素结合性表皮生长因子 (heparin bindingepidermalgrowthfactor likegrowthfactor,HB EGF)对肾系膜细胞己糖激酶 (hexokinases,HKs)的调节及其对葡萄糖净利用的影响。方法 :以SV40MES13系膜细胞株作为细胞模型 ,用 6 磷酸葡萄糖脱氢酶偶联比色法检测系膜细胞HKs活性 ,并利用Trander氧化法检测系膜细胞葡萄糖的净利用。结果 :HB EGF以时间和剂量依赖形式诱导了系膜细胞HKs活性 ,并增加了系膜细胞对葡萄糖的净利用。结论 :HB EGF通过增加HKs活性 ,使系膜细胞内葡萄糖流量增加 ,参与了糖尿病肾病的发生和发展。

血清HB-EGF、HIF-1α水平与狼疮性肾炎患儿预后的相关性

【目的】探讨狼疮性肾炎患儿血清肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)水平与患儿预后的相关性。【方法】选取2016年7月至2018年7月榆林市第一医院收治的70例狼疮性肾炎患儿(观察组),对其进行随访观察,随访时间18~36个月。根据随访终止时患儿是否发生复合肾脏终点事件将其分为预后良好组(n=55)和预后不良组(n=15)。选择同期于本院体检的50例健康儿童为对照组,测定入院时不同组别受试者血清HB-EGF、HIF-1α水平,应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)及曲线下面积(AUC)评估二者表达水平对狼疮性肾炎患儿预后的预测价值,并对影响患儿预后的相关因素进行Logistic回归分析。【结果】观察组患儿血清HB-EGF、HIF-1α水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组患儿血肌酐、血尿素氮及血清HB-EGF、HIF-1α水平均高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清HB-EGF、HIF-1α表达水平的曲线下面积(AUC)分别为0.869、0.822,截断值分别为39.692pg/mL、97.448ng/L,敏感度分别为86.70%、66.70%,特异度分别为76.40%、92.70%;二者联合的AUC为0.937,敏感度和特异性为80.00%、96.40%。Logistic分析结果显示:高血清HB-EGF、HIF-1α水平均是影响狼疮性肾炎患儿预后的独立危险因素。【结论】狼疮性肾炎患儿血清HB-EGF、HIF-1α水平明显升高,且其表达水平对患儿预后具有一定的预测价值,二者水平升高是影响狼疮性肾炎患儿预后的危险因素。

TGF-β_1,ADAM12和HB-EGF在原发性肝癌组织中的表达(英文)

Objective: To detect the expression and location of TGF-β1, ADAM12 and HB-EGF in primary hepatic carcinoma and study their effect on the growth and metastasis of hepatoma carcinoma cell. Methods: TGF-β1, ADAM12 and HB-EGF were detected by RT-PCR and immunohistochemistry in 30 cases of hepatic carcinoma tissues, 30 cases of adjacent carci- noma tissues and 5 cases of normal hepatic tissues. Results: RT-PCR analyses showed that the mRNA expression of TGF-β1, ADAM12 and HB-EGF were markedly increased in each hepatic carcinoma tissue compared with its adjacent tissue (P < 0.01), but no signal was detected in normal hepatic tissue. Immunohistochemistry showed the same outcome on the expression of above three factors in hepatic tissues as RT-PCR. Proteins location analyses showed the proteins of TGF-β1, ADAM12 and HB-EGF all distributed in the stroma of hepatic carcinoma tissues. The positive correlation was found between TGF-β1 and ADAM12 (r = 0.6137, P < 0.05), as well as ADAM12 and HB-EGF (r = 0.5763, P < 0.05). The protein expression of TGF-β1, ADAM12 and HB-EGF were correlated with the size of tumors, degree of differentiation of hepatoma carcinoma cells, portal vein thrombus and the metastasis of absorbent glands, especially with hepatic cirrhosis caused by hepatitis B virus. Conclu- sion: TGF-β1, ADAM12 and HB-EGF possibly play an important role in the process of growth, invasion and metastasis of hepatoma carcinoma cell, meanwhile, the above three factors may collectively participate in the transition from hepatic cirrhosis caused by hepatitis B virus to hepatocellular carcinoma.

血清肝素结合表皮生长因子mRNA与急性冠脉综合征的关系

目的 观察分析血清肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)信使核糖核酸(mRNA)与急性冠脉综合征(ACS)的关系,探讨血清HB-EGF mRNA对ACS发病的预测价值及发病早期的诊断价值。方法 收集青海省人民医院急诊科2019年12月至2022年3月收治的经冠脉造影(CAG)确诊为ACS患者113例,分为急性心肌梗死(AMI)组58例和不稳定型心绞痛(UA)组55例,以同期在门急诊或体检时经CAG或冠脉CT检查无狭窄并有含高血压、糖尿病或吸烟的人群51例为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测ACS患者血清HB-EGF mRNA的表达水平。运用多元有序Logistic回归分析HB-EGF mRNA与ACS的关系。根据Gensini不同评分将ACS患者分为低分组(n=34)、中分组(n=56)和高分组(n=23),比较三组患者血清HB-EGF mRNA水平,并分析两组ACS患者血清HB-EGF mRNA与冠脉病变程度之间的相关性。应用ROC曲线下面积(AUC)评估血清HB-EGF mRNA对ACS患者的诊断价值。结果 多元有序Logistic回归分析显示,HB-EGF mRNA是ACS的危险因素(OR=10.994, 95%CI4.005~30.182,P<0.001)。血清HB-EGF mRNA水平低分组<中分组<高分组(P<0.05)。UA组(r_(s)=0.667,P<0.001)和AMI组(r_(s)=0.857,P<0.001)血清HB-EGF mRNA与冠脉病变程度呈正相关。UA组和AMI组血清HB-EGF mRNA的AUC分别为0.911和0.979(P值均<0.001),以约登指数最大值所对应的值为最佳截断值,得到最佳工作点(optimal operating point, OOP)分别为1.68和2.14。结论 血清HB-EGF mRNA升高与ACS有关,HB-EGF mRNA在动脉粥样硬化的发生、发展中可作为一个独立的危险因子。

肝细胞生长因子抑制MRC-5成纤维细胞所致的纤维化作用

本研究采用人胎儿肺来源的成纤维细胞株MRC 5 ,作为体外研究肝细胞生长因子 (HGF)抗组织纤维化的模型。成纤维细胞MRC 5被转化生长因子 β1(TGF β1)转化为肌成纤维细胞后 ,应用外源人重组HGF修饰细胞 ,检测细胞中分子表达水平的变化。研究发现 ,TGF β1在诱导成纤维细胞株MRC 5转化为肌成纤维细胞的同时 ,上调HGF受体 c Met在肌成纤维细胞中的表达。而且 ,应用外源人重组HGF修饰细胞后 ,内源性TGF β1的表达水平被降低 ,内源性HGF的表达水平上调 ,基质金属蛋白酶I (MMP I)mRNA表达增加 ,从而加速了细胞外基质主要成分—胶原蛋白I [Col (I) ]的水解。结果显示在组织纤维化过程中 ,HGF通过其受体c Met直接作用于肌成纤维细胞 ,抑制细胞内TGF β1的表达 ,在一定程度上抑制组织纤维化的发生和发展。研究中我们还发现 ,肝素结合表皮生长因子样生长因子 (HB EGF)上调肌成纤维细胞中HGF的表达 ,是其抑制肌成纤维细胞形成。

自然流产患者滋养细胞肝素表皮生长因子的表达及意义

目的 探讨自然流产患者滋养细胞肝素表皮生长因子 (HB EGF)的表达及其与滋养细胞增殖细胞核抗原 (PCNA)的关系。方法 选择自然流产患者和正常妊娠者各 2 0例 ,采用免疫组织化学法分析滋养细胞HB EGF和PCNA的表达。结果 HB EGF主要存在于细胞质 ,合体滋养层和细胞滋养层均有表达 ,部分流产滋养细胞不表达。自然流产患者滋养细胞HB EGF和PCNA的表达显著低于正常妊娠者 (P <0 .0 1) ,成正相关 (r =0 .4 5 4 ,P <0 .0 1)。结论 HB EGF的表达和滋养细胞增殖相关 ,HB

毛蕊异黄酮对大鼠呼吸机相关性肺损伤的影响及其与HB-EGF的关系

目的评价毛蕊异黄酮对大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)的影响及其与肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)的关系。方法清洁级雄性Wistar大鼠25只,6周龄,体重250~300 g,采用随机数字表法分为5组(n=5):假手术组(Sham组)、VILI组、毛蕊异黄酮5 mg/kg组(M1组)、毛蕊异黄酮10 mg/kg组(M2组)、毛蕊异黄酮20 mg/kg组(M3组)。于机械通气前7 d开始口饲药物,Sham组和VILI组口饲玉米油1 ml/d;M1组-M3组分别口饲毛蕊异黄酮溶液5、10、30 mg/kg,共7 d。之后禁食8 h,制备VILI模型。机械通气4 h后,行左肺肺泡支气管灌洗术,回收支气管肺泡灌洗液(BALF),采用BCA法检测总蛋白浓度,采用ELISA法测定IL-1β、TNF-α和IL-10浓度,瑞氏染色后计算中性粒细胞比例;随后处死大鼠,取肺组织,计算湿重/干重(W/D)比值,采用Western blot法检测Bax、Bcl-2及HB-EGF表达,免疫组化法检测HB-EGF染色面积,HE染色法观察肺病理学改变,TUNEL法检测细胞凋亡情况,计算TUNEL阳性细胞密度。结果与Sham组比较,VILI组W/D比值、BALF中性粒细胞比例、总蛋白、TNF-α和IL-10浓度升高,HB-EGF表达下调,免疫组化染色面积增加,Bax和Bcl-2表达上调,TUNEL阳性细胞密度升高(P<0.05),肺组织病理学损伤加重。与VILI组比较,M1组BALF总蛋白、TNF-α和IL-1β浓度降低,HB-EGF表达上调,TUNEL阳性细胞密度降低;M2组W/D比值、BALF总蛋白、TNF-α和IL-1β浓度降低,M3组W/D比值、BALF中性粒细胞比例、总蛋白、TNF-α、IL-1β和IL-10浓度降低,M2组和M3组HB-EGF表达上调,免疫组化染色面积增加,Bax表达下调,Bcl-2表达上调,TUNEL阳性细胞密度降低(P<0.05),肺组织病理学损伤减轻。结论毛蕊异黄酮可减轻大鼠VILI,机制可能与促进肺组织HB-EGF的表达,减轻炎症反应及细胞凋亡有关。

正常妊娠及妊娠期高血压疾病的晚期胎盘组织中肝素结合性表皮生长因子免疫组化分析

目的:研究肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)在正常妊娠及妊娠期高血压疾病胎盘中的表达,并探讨HB-EGF在妊娠期高血压疾病病因中的作用。方法:采用免疫组化链霉菌抗生物素—过氧化物酶(SP)连接法检测正常妊娠期妇女及各种程度妊娠期高血压疾病患者妊娠晚期胎盘组织中HB-EGF的表达。结果:正常妊娠组与妊娠期高血压疾病组胎盘组织内均有HB-EGF表达,妊娠期高血压疾病组胎盘组织HB-EGF表达明显减弱(t=3.096,P=0.003,P<0.01),重度妊娠期高血压疾病组HB-EGF表达显著减弱(t=3.691,P=0.0006,P<0.01)。结论:胎盘产生的HB-EGF在正常妊娠及妊娠期高血压疾病妊娠晚期胎盘的表达有明显差异,妊娠期高血压疾病胎盘组织内HB-EGF表达水平显著低于正常妊娠,HB-EGF在妊娠期高血压疾病的发病及病理生理过程中有重要的作用,胎盘组织内HB-EGF的减少有可能是发生妊娠期高血压疾病的原因之一。

白介素-1β对小鼠胚胎体外发育及胚胎子宫内膜共培养体系分泌Hb—EGF、α_υβ_3的影响

目的使用不同浓度的白介素-1β(IL-1β)对小鼠胚胎体外发育进行干预并检测与着床相关因子Hb—EGF、αυβ3的分泌,探讨IL-1β在胚胎着床中的作用。方法将IL-1β稀释成不同浓度,研究其对小鼠2-细胞期胚胎囊胚形成率及囊胚孵出率的影响,并用酶联免疫吸附法检测不同浓度的IL-1β对胚胎子宫内膜共培养体系Hb—EGF、αυβ3表达的影响。结果 2-细胞胚胎体外培养,经含不同浓度的IL-1β培养液干预,培养72h的囊胚率明显高于对照组,有显著性差异(P<0.01)。1ng/ml和10ng/ml组培养96h的胚胎孵出率明显高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。100ng/ml组的孵出率与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。胚胎-子宫内膜共培养体系经1ng/ml、10ng/mlIL-1β干预后Hb—EGF、αυβ3蛋白表达上调,与对照组相比,有显著性差异(P<0.05);共培养体系经100ng/ml IL-1β干预后Hb—EGF、αυβ3蛋白表达与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论合适的IL-1β可以促进体外培养小鼠胚胎发育及胚胎着床。

肝素结合性表皮生长因子在生殖医学中的研究进展

肝素结合性表皮生长因子(heparin-binding epithelial growth factor,HB-EGF)是表皮生长因子家族中的一员,是一种跨膜蛋白膜固定型HB-EGF(pro HB-EGF)。proHB-EGF在特殊的金属蛋白酶作用下可水解产生可溶性HB-EGF(s HB-EGF)。proHB-EGF不仅是sHB-EGF的前体,而且本身也是生物活性分子。proHB-EGF与膜蛋白形成复合体,此复合体定位于细胞间连接区,暗示proHB-EGF可能是通过近分泌机制实现其在细胞间的信号传导功能。在一个试管模型中,proHB-EGF表达为生长抑制活性,而sHB-EGF表达为生长激活活性。这些特性指出pro HB-EGF和sHB-EGF是通过不同的通路发挥作用。proHB-EGF和sHB-EGF在人体内的功能尚不明确,但他们在许多生理过程中起重要作用,HB-EGF在生殖内分泌领域的研究受到极大关注,如黄体细胞的分裂与凋亡、卵泡发育、胚胎移植等。

肝素结合表皮生长因子对肝癌细胞迁移、侵袭以及上皮间质转化的影响

目的:探讨肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)对肝癌细胞转移能力的影响。方法:划痕法观察HB-EGF对肝癌Huh7细胞的迁移能力的影响,Transwell侵袭实验检测HB-EGF作用48h后肝癌Huh7细胞的侵袭情况,RT-PCR检测上皮间质转化(EMT)分子标记物基因表达。结果:10μg/L的HB-EGF可以促进肝癌Huh7细胞的迁移,1μg/L和10μg/L的HB-EGF均可以促进肝癌Huh7细胞的侵袭。并且HB-EGF可以抑制E-钙黏蛋白表达同时促进Slug的表达。结论:HB-EGF可以促进肝癌Huh7细胞的迁移、侵袭以及EMT。

右旋美托咪啶诱导脑片ERK_(1/2)磷酸化的信号传导途径

目的探讨右旋美托咪啶(DEX)在脑片引起ERK磷酸化的信号传导途径。方法将培养脑片随机分为生理盐水对照组、DEX组、抑制剂组[α2肾上腺素能受体抑制剂阿替美唑、肝素结合上皮生长因子(HB-EGF)拮抗剂肝素或上皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478]和DEX+抑制剂组。采用Western印迹法半定量检测各组ERK磷酸化水平。结果 DEX组ERK磷酸化水平升高,与对照组和抑制剂组相比,差异有统计学意义(P<0.05),而DEX+抑制剂组与对照组和抑制剂组相比,差异无统计学意义。结论 DEX作用于肾上腺素能受体,引起HB-EGF释放,释放的HB-EGF作用于EGFR,引起脑片ERK磷酸化。

不同级别胚胎对小鼠子宫内膜的诱导作用研究

【目的】探讨不同级别胚胎对子宫内膜肝素结合表皮生长因子（HBEGF）和白血病抑制因子（LIF）的诱导作用。【方法】选用4～6周昆明小鼠,实验分为以下6组进行胚胎移植：18细胞胚胎（8c）,28细胞胚胎＋4细胞胚胎（8c＋4c）,38细胞胚胎＋2细胞胚胎（8c＋2c）,44细胞胚胎（4c）,52细胞胚胎（2c）,65μL培养液为对照组（NC）。收集小鼠子宫内膜标本行荧光定量PCR、免疫组织化学、Western blotting技术检测HBEGF、LIF的表达情况;移植后第7天取出子宫,观察胚胎种植情况。【结果】各组间HBEGF和LIF的m RNA及蛋白的表达水平均具有显著统计学差异（P均〈0.001）。组间比较发现：8c＋4c与8c＋2c两组间HBEGF、LIF表达量没有显著性差异（P〉0.05）,但较8c组相比有显著性提高（P〈0.05）;4c与2c两组间HBEGF、LIF表达量没有显著性差异（P〉0.05）,但较NC组相比有显著性增加（P〈0.001）,较8c组有显著性降低（P〈0.05）;8c＋4c与8c＋2c两组的胚胎种植数较8c组有提高的趋势。【结论】胚胎对子宫内膜容受性因子HBEGF和LIF具有正向诱导作用,4细胞和2细胞胚胎诱导作用的强弱没有显著性差异,4细胞和2细胞胚胎对子宫内膜容受性的诱导作用低于8细胞胚胎。

sHB-EGF在上皮性卵巢癌患者腹水中水平测定及临床相关性研究

目的:检测sHB-EGF在上皮性卵巢癌患者腹水中水平,以探讨其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附实验分别测定10例上皮性卵巢良性肿瘤患者,10例慢性盆腔炎患者,46例上皮性卵巢癌患者腹水sHB-EGF水平。结果:上皮性卵巢癌腹水中sHB-EGF水平(5.1410±4.0984)ng/ml显著高于上皮性卵巢良性肿瘤组(0.5888±0.0992)ng/ml(P<0.05),上皮性卵巢良性肿瘤组与慢性盆腔炎组(2.5139±4.1963)ng/ml,无显著性差异(P>0.05)。上皮性卵巢癌患者中低分化组(3.5848±3.1170)ng/ml,中分化组(6.0122±3.9187)ng/ml,高分化组(5.0681±6.7513)ng/ml腹水sHB-EGF浓度差异无显著性意义(P>0.05)。腹水中sHB-EGF浓度与临床分期及病理分型无显著性关联(P>0.05)。结论:腹水sHB-EGF浓度可作为卵巢良恶性肿瘤鉴别指标之一。

髋关节发育不良合并骨关节炎患者血清标志物表达

目的探讨血清肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)、CC类趋化因子配体5(CCL5)在髋关节发育不良(DDH)并发骨关节炎患者中表达情况及临床意义。方法本研究纳入邢台市第三医院收治的180例DDH患者设为研究组,排除合并血液系统疾病、代谢性疾病、风湿性免疫疾病、重要脏器功能衰竭、恶性肿瘤、全身炎性疾病以及长期使用免疫抑制剂、糖皮质激素、非甾体类抗炎药的患者,根据有无并发骨关节炎将其分为并发组(72例)和未并发组(108例)。另同期选取180例健康体检者设为对照组。所有受试者均检测血清HB-EGF、CCL5水平。根据Tonnis分级标准判定骨关节炎严重程度,对比骨关节炎不同严重程度DDH患者的血清HB-EGF、CCL5水平,采用多因素logistic回归分析DDH患者并发骨关节炎的影响因素,并采用Spearman相关性分析法分析血清HB-EGF、CCL5表达水平与DDH患者骨关节炎严重程度的关系。结果研究组血清HB-EGF、CCL5水平高于对照组(t=29.933、14.021,均为P<0.001);并发组年龄、Crowe分型Ⅲ~Ⅳ型患者占比及血清HB-EGF、CCL5水平均高于未并发组(t=8.857、χ^(2)=7.018、t=12.025、t=8.536,均为P<0.05);年龄[比值比(OR)=1.504,95%置信区间(CI)(1.132,2.457),P=0.014]、Crowe分型[OR=2.347,95%CI(1.568,3.742),P<0.001]、血清HB-EGF水平[OR=1.994,95%CI(1.472,2.993),P<0.001]、血清CCL5水平[OR=1.548,95%CI(1.055,2.602),P=0.007]均是DDH患者并发骨关节炎的独立影响因素;骨关节炎不同严重程度DDH患者血清HB-EGF、CCL5水平差异有统计学意义(F=27.255、12.855,均为P<0.05),2级和3级均高于1级(2级t=5.599、5.749,3级t=3.669、3.803,均为P<0.05),3级高于2级(t=2.157、2.232,均为P<0.05);血清HB-EGF、CCL5表达水平与DDH患者骨关节炎严重程度呈正相关(r=0.628、0.497,均为P<0.05)。结论血清HB-EGF、CCL5在DDH患者中表达上调,在DDH并发骨关节炎中表达水平更高,与骨关节炎严重程度呈正相关,且是DDH患者并发骨关节炎的独立影响因素。

肝素结合表皮生长因子调控核因子κB诱导卵巢上皮性癌紫杉醇耐药的作用及机制

目的探讨肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)通过上调核因子κB(NF-κB)的表达从而诱导卵巢上皮性癌(卵巢癌)对紫杉醇耐药的作用及可能的机制。方法(1)NF-κB表达的检测:将卵巢癌亲本细胞系A2780细胞和紫杉醇耐药细胞系A2780/Taxol细胞及其对应的裸鼠分成4组,即A2780组、A2780+交叉反应物质197(CRM197,为HB-EGF抑制剂)组、A2780/Taxol组和A2780/Taxol+CRM197组,采用双重免疫荧光染色法检测4组卵巢癌细胞中HB-EGF和表皮生长因子受体(EGFR)蛋白的表达,蛋白印迹法(western blot法)检测4组卵巢癌细胞中NF-κB的表达,免疫组化SP法检测4组裸鼠移植瘤组织中NF-κB蛋白的表达。(2)NF-κB功能的检测:将A2780/Taxol细胞分4组,即空载体组、NF-κB小分子干扰RNA(siRNA)组、空载体+CRM197组、NF-κB siRNA+CRM197组,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测4组A2780/Taxol细胞对紫杉醇的耐药性[以50%抑制浓度(IC50)表示],western blot法检测4组A2780/Taxol细胞中P-糖蛋白(P-gp)的表达,流式细胞仪检测4组A2780/Taxol细胞中P-gp的功能[以细胞内累积的若丹明(Rh123)的荧光强度表示]。结果(1)NF-κB表达的检测:A2780组、A2780+CRM197组、A2780/Taxol组和A2780/Taxol+CRM197组细胞中HB-EGF蛋白的表达水平分别为(5.6±1.3)、(2.1±1.2)、(11.7±3.5)、(6.2±1.4)分,EGFR蛋白的表达水平分别为(5.1±1.6)、(2.8±0.6)、(10.4±3.1)、(5.6±1.9)分,NF-κB蛋白的表达水平分别为1.89±0.23、0.74±0.12、3.45±0.16、1.31±0.08;4组裸鼠移植瘤组织中NF-κB蛋白的表达水平分别为(3.3±1.1)、(1.4±0.4)、(8.7±2.3)、(3.6±1.2)分。其中,A2780组和A2780/Taxol组细胞中HB-EGF、EGFR、NF-κB蛋白的表达水平及裸鼠移植瘤组织中NF-κB蛋白的表达水平分别高于A2780+CRM197组和A2780/Taxol+CRM197组,而A2780组细胞中HB-EGF、EGFR、NF-κB蛋白的表达水平及裸鼠移植瘤组织中NF-κB蛋白的表达水平低于A2780/Taxol组,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)NF-κB功能的检测:空载体组、NF-κB siRNA组、空载体+CRM197组、NF-κB siRNA+CRM197组A2780/Taxol细胞对紫杉醇的IC50分别为(39.4±0.8)、(7.6±0.6)、(6.7±0.5)、(4.2±0.4)μmol/L,4组A2780/Taxol细胞中P-gp蛋白的表达水平分别为3.11±0.23、1.45±0.16、1.73±0.21、0.68±0.14,4组A2780/Taxol细胞内的Rh123荧光强度分别为110±15、246±19、231±22、296±24。其中,NF-κB siRNA组、空载体+CRM197组、NF-κB siRNA+CRM197组A2780/Taxol细胞对紫杉醇的IC50及细胞中P-gp蛋白的表达水平均明显低于空载体组(P<0.01),而细胞内Rh123荧光强度明显高于空载体组(P<0.01);NF-κB siRNA组、空载体+CRM197组A2780/Taxol细胞对紫杉醇的IC50及细胞中P-gp蛋白的表达水平均明显高于NF-κB siRNA+CRM197组(P<0.01),而细胞内Rh123荧光强度明显低于NF-κB siRNA+CRM197组(P<0.01)。结论NF-κB的表达与卵巢癌紫杉醇耐药相关,HB-EGF可能通过调控EGFR/NF-κB/P-gp信号通路诱导卵巢癌对紫杉醇产生耐药。

肝素结合表皮生长因子通过诱导人子宫内膜细胞骨桥蛋白的表达促进人滋养层细胞的体外侵袭

目的:探讨肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)对人子宫内膜细胞RL95-2与人滋养层细胞Be Wo体外黏附和铺展的影响及其作用机制。方法:利用免疫荧光法观察骨桥蛋白(OPN)在RL95-2细胞中的表达定位,采用RT-PCR和Western blotting检测HB-EGF对RL95-2细胞中OPN表达水平的影响,并通过黏附和铺展实验观察HB-EGF对Be Wo球状体细胞在RL95-2单层细胞上侵袭活性的影响。结果:OPN在RL95-2细胞膜表面高表达,HB-EGF能诱导RL95-2细胞中OPN的表达,并促进Be Wo细胞球在RL95-2细胞上的黏附和铺展。结论:HB-EGF可能通过上调子宫内膜细胞膜OPN的表达而促进滋养层细胞的体外侵袭活性。

骨桥蛋白在肝素结合表皮生长因子样生长因子介导的小鼠胚胎对子宫内膜黏附和扩展中的作用研究

目的:探讨肝素结合表皮生长因子样生长因子(HB-EGF)对小鼠胚胎黏附和扩展中的作用机制。方法:建立小鼠胚胎与小鼠子宫内膜细胞共培养模型,分A、B、C、D、E共5组,分别加入不同浓度的HB-EGF(0μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L),于倒置显微镜下统计各组胚胎黏附率及扩展率;用免疫组织化学法检测小鼠子宫内膜细胞骨桥蛋白(OPN)的表达及定位,Western blotting法测定各浓度HB-EGF对子宫内膜细胞OPN表达水平的影响,并分析其与HB-EGF的关联。结果:OPN在小鼠子宫内膜细胞高表达,主要分布于胞质中,随HB-EGF浓度升高,小鼠子宫内膜细胞中OPN的表达增强,小鼠胚胎对子宫内膜的黏附和扩展率也逐渐增高。结论:HBEGF可能通过上调小鼠子宫内膜细胞OPN的表达,促进小鼠胚胎对子宫内膜的黏附和扩展。

经鼻给予肝素结合表皮生长因子样生长因子对脑出血大鼠血肿周围组织巢蛋白和胱天蛋白酶-3表达的影响

目的：探讨经鼻腔给予肝素结合表皮生长因子样生长因子（heparin binding epidermal growth factor-like growth factor, HB-EGF）对脑出血大鼠血肿周围组织巢蛋白和胱天蛋白酶-3表达水平的影响。方法36只成年雄性 Sprague-Dawley 大鼠随机分为 HB-EGF 组、对照组和假手术组（各12只）,然后进一步分为4 d、7 d和10 d亚组（每亚组各4只）。采用Ⅳ型胶原酶注射法制作脑出血模型。 HB-EGF组在模型制作后1~3 d经鼻腔给予 HB-EGF,对照组给予等体积生理盐水。在相应时间点进行Bederson评分和前肢放置实验后处死大鼠,采用免疫组化法检测血肿周围组织巢蛋白和胱天蛋白酶-3表达。结果假手术组无神经功能缺损,HB-EGF 组在4 d和7 d时 Bederson 评分（P 均〈0．05）和前肢放置实验结果（P 均〈0．01）均显著优于对照组,但10 d时不再有统计学差异。在4 d、7 d和10 d时,HB-EGF组血肿周围组织巢蛋白阳性细胞数量均显著多于对照组（P 均〈0．05）,而胱天蛋白酶-3阳性细胞数量均显著少于对照组（P 均〈0．01）。结论经鼻腔给予 HB-EGF 可改善脑出血大鼠早期神经功能,上调血肿周围组织巢蛋白表达和下调胱天蛋白酶-3表达,提示经鼻腔给予 HB-EGF可促进血肿周围组织神经前体细胞增殖并减轻细胞凋亡。