LAIR-1通过阻断JAK2 V617F突变的人HEL细胞JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制其增殖并促进其凋亡

目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法采用反转录PCR和基因测序鉴定JAK2 V617F突变;应用免疫共沉淀和Western blot法鉴定LAIR-1募集的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)种类;采用CCK-8法检测HEL细胞的增殖;采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测HEL细胞的凋亡率;采用Western blot法检测JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR通路蛋白酪氨酸磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、Bcl2相关X蛋白(BAX)和B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)的蛋白表达。结果在JAK2 V617F突变的HEL细胞中,LAIR-1与其配体胶原蛋白结合后可募集含Src同源域2磷酸酶2(SHP-2);LAIR-1可以下调HEL细胞JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、AKT和mTOR的蛋白酪氨酸磷酸化水平,并能够显著抑制cyclin D1和Bcl2的表达,而对BAX的表达水平未见显著影响;LAIR-1能够明显抑制HEL细胞的增殖,促进HEL细胞凋亡。结论在JAK2 V617F突变的人白血病HEL细胞中,LAIR-1可通过募集SHP-2抑制JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路的活化,进而抑制HEL细胞的增殖,促进细胞凋亡。

LAIR-1对GM-CSF介导的JAK/STAT信号通路的调节作用及其对Mo7e细胞功能的影响

目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor-1,LAIR-1)对粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)依赖的Mo7e细胞增殖、凋亡和迁移的影响,并探讨LAIR-1调节GM-CSF功能的分子机制,为进一步研究LAIR-1在造血细胞分化中的作用提供资料。方法采用LAIR-1慢病毒表达载体(LV-LAIR-1)转染GM-CSF依赖的Mo7e细胞,建立稳定高表达LAIR-1的Mo7e-LAIR-1细胞株,并采用流式细胞术、Western blot法检测、反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)以及激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)鉴定LAIR-1分子的表达;采用CCK-8试剂盒、FITC Annexin V凋亡试剂盒以及Transwell实验分别检测LAIR-1对Mo7e细胞功能的影响;采用Western blot法检测LAIR-1对酪氨酸蛋白激酶/信号转导及转录激活因子(janus kinase/signal transducer and activator of transcription,JAK/STAT)信号通路影响。结果经LV-LAIR-1转染的Mo7e细胞高表达LAIR-1分子;与对照组比较,LAIR-1能够显著抑制Mo7e细胞的增殖(P<0.001),促进细胞迁移(P<0.05),但对细胞凋亡无明显影响(P>0.05);GM-CSF能够上调JAK2、STAT1、STAT3和STAT5的磷酸化水平,而LAIR-1的表达能够明显抑制STAT1、STAT3和STAT5蛋白酪氨酸的磷酸化水平。结论免疫抑制性受体LAIR-1可能通过抑制细胞因子GM-CSF介导的JAK/STAT信号通路的活化,参与对髓系造血细胞分化的调节。

肿瘤患者外周血中抑制性受体LAIR-1表达升高

目的:研究LAIR-1在肿瘤患者中的表达,探讨其在抗肿瘤免疫应答中的作用。方法:应用夹心ELISA检测肿瘤患者血清中可溶型sLAIR-1的水平;应用免疫荧光染色和流式细胞术分析,观察LAIR-1在患者PBMC中NK细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞上的表达。结果:肿瘤患者血清sLAIR-1水平为(4.6±3.2)μg/L,明显高于正常人血清sLAIR-1水平(3.9±3.0)μg/L,P<0.05。NK细胞,CD4+T细胞及CD8+T细胞表达LAIR-1水平上调。肺癌患者CD4/CD8比值明显低于正常人,B细胞百分率明显高于正常人。NK细胞、CD4+T细胞CD8+T细胞中LAIR-1的表达阳性率高于对照组。结论:在肿瘤患者LAIR-1分子表达水平高于正常人。肿瘤患者抑制性受体LAIR-1表达水平的上调可能与肿瘤的免疫逃逸有关。

9.1C3/LAIR-1的真核表达、纯化及单克隆抗体的制备和鉴定

目的 表达并纯化 9.1C3/LAIR 1胞膜外区与人的IgG1Fc段的融合蛋白 ,制备针对 9.1C3/LAIR 1胞膜外区的单克隆抗体 (mAb)。方法 构建真核表达载体 pIg/ 3C 9.1C3/LAIR 1,表达并纯化 9.1C3/LAIR 1 Fc融合蛋白。以 9.1C3/LAIR 1 Fc融合蛋白免疫BALB/c小鼠 ,制备。以间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定mAb的特异性 ,以竞争结合实验鉴定mAb识别LAIR 1的表位。结果表达并纯化了 9.1C3/LAIR 1 hIgFc融合蛋白 ,以其免疫BALB/c小鼠 ,获得 1株针对 9.1C3/LAIR 1胞膜外区的mAb 4H7。4H7对HL 6 0细胞和经 9.1C3/LAIR 1cDNA转染的COS7细胞上的表位识别 ,与已报道的抗 9.1C3mAb体不同。结论 成功地构建了 9.1C3/LAIR 1胞膜外区基因的真核表达载体 ,并表达纯化了 9.1C3/LAIR 1 hIgFc融合蛋白。获得一株针对 9.1C3/LAIR 1胞膜外区的mAb ,为进一步研究9.1C3/LAIR

LAIR-1/LAIR-2(CD305/CD306)推定配体分布的研究

目的:研究LAIR-1(CD305)及LAIR-2(CD306)推定配体在多种细胞系上的分布,为鉴定LAIR-1/LAIR-2推定配体提供了实验依据。方法:建立稳定表达LAIR-1-Fc和LAIR-2-Fc融合蛋白的细胞系。以纯化的融合蛋白进行活细胞免疫荧光染色,用流式细胞仪检测LAIR-1及LAIR-2推定配体在多种细胞系膜表面的表达,并比较LAIR-1和LAIR-2推定配体的分布及可能结合的位点。结果:LAIR-1推定配体及LAIR-2推定配体均在人羊膜来源的上皮细胞系WISH上高表达,在人黑色素瘤细胞系C32、人胚肾上皮细胞系293T及人脐静脉内皮细胞系ECV304上有一定程度的表达。LAIR-1-Fc和LAIR-2-Fc融合蛋白与推定配体的结合,可分别被可同时识别LAIR-2和LAIR-1的单克隆抗体(mAb)FMU-LAIR-2.2和FMU-LAIR-2.1阻断。结论:LAIR-1推定配体及LAIR-2推定配体的分布基本一致,主要表达于WISH、C32、293T和ECV304细胞系。LAIR-1和LAIR-2可能拥有共同的配体。

4个品种猪血清中sLAIR-1表达量的ELISA检测

【目的】进一步证实利用广西巴马小型猪建立异种器官移植供体模型的可行性。【方法】利用夹心ELISA方法分别检测广西巴马小型猪、长白猪、大约克猪及杜洛克猪血清中可溶型白细胞相关免疫球蛋白样受体1(sLAIR-1)含量,筛选出血清中sLAIR-1表达量最低的猪品种,为异种移植提供一定参考指标。【结果】所检测的4个不同品种猪血清中sLAIR-1的表达量分别为:广西巴马小型猪(2.39±0.20μmol/L)<大约克猪(3.51±0.28μmol/L)<长白猪(3.59±0.28μmol/L)<杜洛克猪(3.62±0.31μmol/L),且广西巴马小型猪血清中sLAIR-1的表达量显著低于长白猪、大约克猪、杜洛克猪3个品种(P<0.01)。【结论】广西巴马小型猪在异种移植中具有良好的先天优势,可能会成为异种移植的理想动物模型。

抑制性受体LAIR-1对巨核谱系分化的调节作用

目的研究抑制性受体LAIR-1在巨核谱系细胞的表达及其对巨核细胞分化的调节作用。方法采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测LAIR-1在巨核谱系细胞的表达;免疫磁珠法纯化脐血CD34+细胞,体外无血清培养系统诱导CD34+细胞向巨核细胞分化,观察LAIR-1被抗体或配体交联激活后对巨核细胞分化的影响。结果 LAIR-1表达于人骨髓CD34+CD41a+和CD41a+CD42b+细胞以及脐血CD34+CD41a-和CD34+CD41a+细胞;脐血CD34+细胞向巨核细胞分化过程中,LAIR-1表达在倍性为2N和4N的不成熟CD41a+细胞上;交联激活LAIR-1分子能够抑制脐血CD34+细胞向巨核细胞的分化。结论 LAIR-1可能是参与巨核细胞早期分化发育的一种新的负调控分子。

LAIR-1受体在LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应中的表达

目的研究LAIR-1受体在LPS诱导RAW264.7细胞发生炎症反应中表达规律的变化。方法以LPS分别刺激RAW264.7细胞6、12、24和48 h。采用Greiss法测定NO的含量,ELISA法测定TNF-α、IL-6的含量,Western blot法检测LAIR-1受体的表达。NF-κB抑制剂PDTC(50μmol/L)预处理1 h后,检测LPS刺激24 h后LAIR-1受体的表达。结果随着LPS刺激RAW264.7细胞时间的延长,NO、TNF-α和IL-6分泌量显著增加,LAIR-1受体表达量逐渐降低;经过PDTC预处理后,与LPS处理组比较,LAIR-1受体表达量上调。结论 LAIR-1受体在LPS诱导RAW264.7细胞发生炎症反应过程中表达量逐渐下调,抑制NF-κB通路其表达量上调,LAIR-1受体可能与炎症反应密切相关。

LAIR-1通过影响线粒体生物能量代谢抑制卵巢癌HO8910细胞生长

目的:研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体-1(LAIR-1)对卵巢癌细胞HO8910线粒体能量代谢的影响。方法:利用低氧模拟剂CoCl2处理细胞,分析缺氧对LAIR-1表达的影响;利用LAIR-1慢病毒RNAi干扰载体(LAIR-1-RNAi-lentivirus),下调LAIR-1在卵巢癌HO8910细胞中的表达。Western blot、qRT-PCR法鉴定HO8910慢病毒感染后LAIR-1的表达水平;通过CCK-8实验和细胞克隆形成实验,验证下调LAIR-1表达对HO8910细胞生长的影响;通过Seahorse生物能量分析仪,检测下调LAIR-1表达后对HO8910细胞生物能量代谢的影响。结果:在低氧环境下,HO8910细胞的LAIR-1表达显著上调;LAIR-1-RNAi-lentivirus转染后,HO8910细胞的LAIR-1表达显著下调,细胞生长能力明显增强(P<0.01);LAIR-1表达显著下调的HO8910细胞,ATP产生明显改善(P<0.001),同时其基础呼吸(P<0.001)和最大呼吸能力(P<0.001)均明显提高。结论:LAIR-1分子可能通过影响线粒体生物能量代谢抑制人卵巢癌HO8910细胞的生长。

LAIR-1在三阴性乳腺癌患者中的表达情况

目的分析LAIR-1在三阴性乳腺癌患者中的表达情况,比较不同临床特征乳腺癌患者的LAIR-1表达水平,为评估、治疗乳腺癌提供参考。方法选取2017年5月至2020年12月于九江市第一人民医院治疗的55例原发性乳腺癌患者为研究对象,其中三阴性乳腺癌25例,非三阴性乳腺癌30例,收集患者的癌组织及癌旁组织(距离癌组织5 cm以上),通过免疫组化方法检测标本中LAIR-1蛋白的表达情况。结果LAIR-1蛋白在乳腺癌组织中阳性表达率为69.09%(38/55),高于癌旁组织的阳性表达率34.48%(20/55),差异有统计学意义(P<0.05)。LAIR-1在乳腺癌组织中的表达水平为(3.227±1.025),高于在癌旁组织中的表达(1.184±0.523),差异有统计学意义(P<0.05)。LAIR-1在三阴性乳腺癌肿瘤组织中呈现高表达(0.952±0.287),高于非三阴性乳腺癌的表达水平(0.613±0.325),差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤直径和TNM分期患者的LAIR-1表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。年龄>35岁、淋巴结转移阳性患者的LAIR-1表达水平高于年龄≤35岁、淋巴结转移阴性的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论LAIR-1在乳腺癌组织中呈高表达,要重点关注年龄>35岁、淋巴结转移阳性的患者,LAIR-1在三阴性乳腺癌的发生和发展过程中可能有促进作用,值得临床深入研究。

广西巴马小型猪LAIR-1基因cDNA克隆及序列分析

【目的】了解广西巴马小型猪白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)基因的序列特征及基本结构,为以广西巴马小型猪作为人类器官模型及器官移植手术后的排斥反应研究奠定基础。【方法】根据GenBank上已登录的人和家鼠LAIR-1基因序列的保守区域,用Oligo设计合成1对引物,并以广西巴马小型猪总RNA为模板,对LAIR-1基因进行RT-PCR扩增,经PCR和双酶切鉴定后,进行测序及同源性比对分析。【结果】从广西巴马小型猪的外周血淋巴细胞中克隆获得LAIR-1基因cDNA序列,全长867bp;与人、家鼠和挪威鼠的同源性分别为79.3%、50.9%和49.9%。【结论】广西巴马小型猪LAIR-1基因cDNA序列与人类的亲缘关系最近,进一步验证了广西巴马小型猪作为人类器官模型研究的可行性。

LAIR-1与TGF-β在口腔扁平苔藓患者外周血中表达的相关性研究

目的:研究LAIR-1和TGF-β在口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血中的表达情况,探讨LAIR-1和TGF-β对OLP患者免疫功能的影响。方法:采用流式细胞术检测LAIR-1在OLP患者(n=22)和健康人(n=22)外周血Treg上的表达水平,ELISA检测外周血TGF-β的水平。结果:OLP患者外周血CD4+Foxp3+Treg上LAIR-1阳性率高于健康人,TGF-β的水平亦高于健康人,LAIR-1在CD4+Foxp3+Treg上的表达水平和TGF-β的水平呈正相关(r=0.43,P<0.05)。结论:LAIR-1和TGF-β在OLP患者外周血中表达上调,提示LAIR-1和TGF-β可能参与了OLP的发病。

夹心ELISA检测可溶型LAIR-1方法的建立及其应用的研究

为了探讨血清可溶型白细胞相关免疫球蛋白样受体 1 (sLAIR 1 )的水平与疾病的关系 ,用生物传感器鉴定了 3种抗LAIR 1分子胞膜外区mAb识别的表位 ,并应用 2种识别不同LAIR 1表位的mAb首次建立了检测sLAIR 1的夹心ELISA方法 ,其检测灵敏度达到 1 5 μg/L。以此方法检测了活化的人PBMC培养上清以及正常人和肾综合征出血热 (HFRS )患者血清中sLAIR 1的水平。在经PMA、PHA、LPS和抗CD3mAb活化的人PBMC细胞培养上清中检测到sLAIR 1。 2 4例正常人血清sLAIR 1的平均水平为 (6 2± 3 3) μg/L ,6 2例HFRS患者血清sLAIR 1的平均水平为 (4 7 2± 35 9) μg/L。证明体内和体外存在天然sLAIR 1。HFRS患者血清sLAIR 1水平明显升高。为进一步研究LAIR

幽门螺杆菌感染对LAIR-1影响的实验研究

目的通过构建小鼠感染模型,研究幽门螺杆菌(Hp)感染对白细胞相关免疫球蛋白样受体-1(LAIR-1)表达的影响。方法将32只C57BL/6小鼠随机分为对照组和感染组。感染组通过Hp菌液灌胃建立小鼠感染模型,对照组以PBS灌胃。6周后处死小鼠,采用胃黏膜分离培养、革兰染色、PCR及生化反应检查Hp定植情况,采用流式细胞术检测小鼠外周血单个核细胞(PBMC)中单核细胞和淋巴细胞表面LAIR-1的表达。结果感染组小鼠Hp感染率为91.3%(21/23)。感染组和对照组小鼠PBMC中单核细胞比例分别为(22.85±3.56)%和(49.85±0.35)%,淋巴细胞比例分别为(40.93±10.05)%和(30.15±0.35)%,差异均有统计学意义(t=5.845和2.137,P<0.05)。感染组和对照组小鼠PBMC表面LAIR-1表达率分别为(70.16±7.75)%和(83.4±0.1)%,淋巴细胞表面LAIR-1表达率分别为(56.81±11.37)%和(72.3±0.6)%,差异均有统计学意义(t=3.761和2.491,P<0.05)。结论 Hp感染下调了小鼠PBMC中单核细胞及LAIR-1的表达,上调淋巴细胞比例但下调其LAIR-1的表达。

腭扁桃体中几种杀伤功能相关分子的表达

目的探讨CD56、PTA1、LA IR-1等与非特异性免疫反应有关的分子在腭扁桃体组织中的表达及分布。方法首先用间接免疫荧光染色流式细胞术分析的方法观察腭扁桃体细胞(PTC)在IL-2活化前后3种分子的表达情况。然后用免疫组化确定CD56表达的部位,以原位杂交法确定PTA1表达的部位。结果 在静止PTC中CD56、PTA1、LA IR-1的表达率分别为3.8%、1.9%和35.1%。经IL-2活化后表达率上升为5.9%,19.2%和54.8%。免疫组化法表明CD56+细胞散在地分布于生发中心。原位杂交法表明,PTA1主要分布于腭扁桃体的滤泡旁区,少量分布在生发中心和内皮细胞上。结论 CD56、PTA1、LA IR-1这3种分子在腭扁桃体细胞中均有表达,且能被IL-2诱导。

LAIR-1对巨核细胞系Dami生长分化的影响作用

研究LAIR-1在巨核细胞系Dami上的表达,及其表达对细胞生长分化的影响,为深入研究LAIR-1在巨核细胞造血中的功能奠定基础。采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测LAIR-1分子的表达;应用CCK-8法、AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测LAIR-1对细胞增殖及凋亡的影响;应用PI染色流式细胞术检测LAIR-1对细胞倍性的影响。结果:LAIR-1在Dami细胞膜上低水平表达,PMA可以显著刺激其表达;应用特异性抗体或配体交联LAIR-1分子,与对照组相比,细胞的增殖降低、凋亡增多、分化过程中2N和4N的细胞较多、细胞上CD41a和CD42b的表达降低。提示,PMA可以显著诱导LAIR-1在Dami细胞上的膜表达;LAIR-1的表达抑制Dami细胞的增殖,刺激其凋亡,阻碍细胞核内DNA的复制,抑制细胞上CD41a和CD42b的表达。

胆汁可溶型抑制性受体LAIR-1以及白介素-2受体监测在肝移植急性排斥反应中的意义

目的 探讨胆汁中sLAIR-1及IL-2R的表达在肝移植排斥反应中的意义.方法 连续3周应用双单克隆抗体夹心ELISA方法检测55例肝移植受者术后胆汁sLAIR-1及sIL2R水平.结果 在22例移植肝功能正常的受体中（对照组）,胆汁sIL-2R在（23.1±3.5）～（55.1±6.1）ng/L范围之内呈较低水平的波动,sLAIR-1则波动于（3.2±1.1）～（6.1±1.4）ng/L范围之内,亦呈低水平表达.在急性排斥反应（AR）组,胆汁sIL-2R水平在排斥反应确诊前2 d为（116.1±10.3）ng/L,确诊前1 d则为（136.8±12.7）ng/L,均显著高于对照组（P＜0.01）.在经激素冲击治疗3 d时则下降至（74.2±6.2）ng/L,明显低于确诊前1、2 d水平.在对照组,胆汁sLAIR-1在（3.2±1.1）～（6.1±1.4）ng/L范围之内呈较低水平的波动;在AR组确诊前3 d为（18.1±2.2）ng/L,确诊前2 d为（25.1±3.5）ng/L,确诊前1 d则为（31.1±5.5）ng/L,均显著高于对照组（P＜0.01）;经激素冲击治疗3 d时,胆汁sLAIR-1水平下降至（8.1±2.5）ng/L,接近对照组水平,且sLAIR-1的下降早于sIL2R.结论 胆汁sLAIR-1在发生移植肝急性排斥反应的病人血清中有较高水平的表达,其波动较sIL-2R大,将二者联合进行监测,可望成为早期预测移植物排斥反应发生及转归的诊断指标.

抑制性受体LAIR-1在巨核细胞系Dami上的表达及PMA对其表达的影响

研究LAIR-1在巨核细胞系上的表达,探讨其表达与巨核细胞分化发育的关系,为深入研究LAIR-1在巨核细胞造血中的作用奠定基础。分别通过RT-PCR技术和流式细胞术在核酸和蛋白质水平上检测LAIR-1在巨核细胞系HEL、Dami、Mo7e中的表达。应用PMA和TPO刺激Dami细胞分化,流式细胞术和激光共聚焦显微镜技术检测Dami细胞分化过程中CD41a、CD42b和LAIR-1分子的表达。结果显示:Dami细胞中LAIR-1分子在核酸水平上呈现高表达,但膜蛋白表达水平很低。在PMA诱导Dami细胞分化过程中LAIR-1分子膜表达水平显著上调,PMA未刺激的Dami细胞中LAIR-1分子的阳性表达率为2.78%±0.50%,PMA刺激6 d后,Dami细胞中LAIR-1分子的阳性表达率为49.52%±1.86%。PMA可显著诱导Dami细胞中LAIR-1分子的表达;Dami细胞的分化与LAIR-1分子的表达水平之间存在因果关系;由于PMA是PKC的激活剂,LAIR-1分子表达水平可能受PKC信号通路的调节。

沉默LAIR-1表达对卵巢癌细胞增殖功能的影响

沉默白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)在卵巢癌H08910细胞的表达,探讨其对卵巢癌细胞增殖功能的影响。构建LAIR-1的shRNA慢病毒表达载体,转染人浆液性卵巢癌细胞系H08910。RT-PCR和Western blot检测H08910细胞中LAIR-1分子的沉默效率;采用PI染色法和MTT法检测沉默LAIR-1表达对HO8910细胞周期及增殖功能的影响。成功建立沉默LAIR-1分子表达的稳定HO8910细胞株。与阴性对照组比较,转染LAIR-1-shRNA慢病毒载体的HO8910细胞中LAIR-1的mRNA及蛋白水平表达均明显降低(P<0.05)。LAIR-1-shRNA组G1期细胞数目明显低于CON组和NCshRNA组(P<0.05);沉默LAIR-1分子表达后,LAIR-1-shRNA HO8910细胞的增殖率明显高于NC-shRNA HO8910组和空白对照组(P<0.05)。沉默卵巢癌细胞HO8910LAIR-1分子表达可明显增强细胞增殖的能力,提示卵巢癌细胞表达的LAIR-1可能对癌细胞的生物学功能发挥抑制作用。

人工高表达LAIR-1对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor 1,LAIR-1)对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖、凋亡和侵袭的影响,探讨LAIR-1的表达在肝癌中的作用。以LAIR-1慢病毒表达载体(LV-LAIR-1)转染SMMC-7721细胞,建立稳定高表达LAIR-1的细胞株LAIR-1+SMMC-7721。采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)、Western blotting、RT-PCR和激光扫描共聚焦显微技术(laser scanning confocal microscopy,LSCM)等方法鉴定LAIR-1分子在SMMC-7721细胞的表达水平;采用CCK-8试剂盒、FITC Annexin V凋亡试剂盒和Transwell侵袭实验分别检测LAIR-1对SMMC-7721细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。检测结果显示,经LV-LAIR-1转染的SMMC-7721细胞高水平表达LAIR-1分子;功能实验结果显示,与实验组细胞相比,LAIR-1的表达对细胞增殖无明显影响(P>0.05),但是能够明显促进细胞凋亡(P<0.05),并能够显著抑制细胞的侵袭能力(P<0.05)。上述研究结果提示,LAIR-1分子的表达可能是影响肝癌细胞生物学特性的一个重要因素。