应用L_（929）细胞从患者血液分离立克次体

作者收集临床疑似立克次体病患者血液标本２０份，应用Ｌ９２９细胞分离立克次体，用ｍＩＦ法鉴定出恙虫病立克次体３株，斑疹伤寒立克次体２株，斑点热立克次体７株。恙虫病立克次体感染的细胞悬液用ＰＣＲ技术均检出恙虫病立克次体ＤＮＡ。在国内首次应用细胞培养方法从患者血液直接分离立克次体成功。

疟原虫感染小鼠血清对L_(929)细胞的毒性作用

采用Ｌ９２９细胞作为靶细胞，对约氏疟原虫感染小鼠血清的细胞毒活性（ＣＡ）进行了测定。结果：持续疟原虫感染鼠血清在感染后第３ｄ即出现轻度的ＣＡ，至感染后第８～１５ｄＣＡ达到较高水平（３５％～４０％），以后逐渐下降，１个月时仍有２０％的ＣＡ。仅感染疟原虫７ｄ的鼠血清，高水平ＣＡ维持时间较短，感染后１５ｄＣＡ尚存留１７．８％，１个月后仅有６％。在小鼠感染疟原虫后第８ｄ注射大肠杆菌内毒素（ＬＰＳ），可迅速增强感染鼠血清的ＣＡ，此活性在注射ＬＰＳ后６０ｍｉｎ达高峰，１５０ｍｉｎ后下降至未注射ＬＰＳ的持续感染鼠水平。提示：疟原虫感染鼠血清具有一定的抗肿瘤细胞活性，此活性可以被ＬＰＳ协同增强。

甾体激素对大鼠L_(929)细胞摄取甘氨酸的非基因组作用

目的 研究甾体激素对成纤维细胞非基因组作用。方法 将大鼠成纤维细胞株L92 9和标记甘氨酸孵育一定时间 ,同时加入甾体激素和 /或其它试剂 ,应用液体闪烁技术检测细胞摄取标记甘氨酸量的变化。结果 甾体激素快速抑制L92 9细胞摄取甘氨酸 ,不同的甾体激素作用强度有差异 ,皮质酮和醛固酮的作用均表现有浓度依赖性 ,牛血清白蛋白偶联皮质酮作用和硫酸皮质酮作用没有差别 ,糖皮质激素胞浆内受体阻断剂能部分阻断皮质酮作用 ,细胞外液Ca2 +能影响皮质酮作用。结论 甾体激素对L92 9细胞摄取甘氨酸的快速抑制为非基因组效应 ,其作用可能是通过细胞膜受体介导的 ,细胞膜受体在结构上可能和胞浆受体有某种相似性。

肿瘤坏死因子对L_(929)细胞发生细胞毒作用的形态学探讨——光镜及扫描、透射电镜观察

观察肿瘤坏死因子对L_(929)细胞发生细胞毒作用时,靶细胞在间隔时间内的光镜、扫描及透射电镜下的形态学改变,发现光镜下的改变,符合理化因素作用于细胞发生变性、坏死的特点;扫描及透射电镜的动态观察发现,肿瘤坏死因子使靶细胞线粒体增多、肿胀、裂解、溶酶体增多、溶酶体酶释放、细胞器溶解,最后使细胞损伤死亡。故认为肿瘤坏死因子的细胞毒作用不是使细胞膜受到破坏。

磁感应热疗用镍-铜热籽对L-929细胞及兔肌肉组织的影响

目的探讨磁感应热疗用镍-铜热籽体外升温特性以及对细胞与组织的影响。方法测量感应热籽在离体兔肝组织内升温特性;通过细胞毒性试验(MTT试验)评价该治疗热籽浸提液体外细胞毒性;溶血试验评价其有无溶血作用;兔体内肌肉埋植试验来评价其材料的组织毒性。结果实验中所用的铁磁热籽在离体兔肝内具有良好的升温效果;细胞毒性试验结果显示镀金热籽对L-929细胞毒性为1级,属对细胞无毒性范畴;溶血试验中镀金热籽的溶血率3.25%(<5%),表明实验用热籽无溶血作用;各期体内埋植试验反映了材料在肌肉组织中不同的炎性反应。结论自制的镀金镍-铜热籽在感应加温交变磁场中可升温到适合的温度,对L-929细胞毒性为1级,无溶血作用。

矾冰纳米乳对L-929细胞抑制作用的影响

目的:探讨矾冰纳米乳对L-929实验细胞增殖抑制作用。方法:采用细胞病变抑制法与MTT法,将试验药物稀释后加入培养4h贴壁的L-929细胞中,37℃、5%CO2培养箱中观察24h、48h,同时设传统药物矾冰液和正常细胞对照,倒置显微镜下观察药物对细胞形态的影响,测定OD值比较药物对细胞生长的影响。结果:矾冰纳米乳对L-929细胞的生长有随浓度增加其生长抑制率也增加的趋势,与矾冰液比较有统计学差异(P<0.05);矾冰纳米乳在同一浓度、同一时间内细胞增长抑制率低于矾冰液,差异有统计学意义(P<0.05);同时矾冰纳米乳有随浓度降低,细胞培养时间延长其细胞抑制率也降低,与正常组细胞比较无统计学差异(P>0.05);倒置显微镜下观察细胞形态良好。结论:纳米矾冰乳对L-929培养细胞无毒性作用,可以用于临床。

三尖杉酯碱对HL_(60)和L_(1210)细胞核DNA结构的影响

用国产抗肿瘤药物三尖杉酯碱处理HL60 和L12 10 细胞 ,探讨药物对两种不同的白血病细胞以及在不同条件下培养的同种白血病细胞核DNA结构的影响。DNA凝胶电泳结果表明 :(1) 0 2 μg/mlHT作用 2h的HL60 细胞和HT作用 2～ 2 4h的L12 10 细胞有明显的DNAladder。 (2 )HT处理 6～ 2 4h的HL60 细胞、在DBA/ 2纯种小鼠体内培养的被HT处理不同时间的L12 10 细胞及所有对照细胞无DNAladder。 (3)HT处理 2 4h的HL60 细胞和HT处理 12h的白血病小鼠体内的L12 10 细胞核DNA断裂成碎片 ,在琼脂糖凝胶上呈弥散状分布。

三种比色法评价4种牙科金属材料对L-929细胞的毒性

背景:采用不同方法评价材料的细胞毒性可能会得出不同的实验结果。目的:采用3种比色法评价镍铬合金、钴铬合金、3铬13及纯钛等牙科金属材料对小鼠成纤维细胞(L-929细胞)的细胞毒性。方法:以镍铬合金、钴铬合金、3铬13及纯钛4种牙科金属材料的浸提液分别作用于体外培养的L-929细胞24,72h。以体积分数10%小牛血清+高糖DMEM培养液培养的L-929细胞为阴性对照组,以0.7%丙烯酰胺+体积分数10%小牛血清+高糖DMEM培养液培养的L-929细胞为阳性对照组,分别采用MTT、CCK-8及结晶紫3种比色法检测上述材料的细胞毒性。结果与结论:①4种材料浸提液中培养的细胞形态正常,胞内结构清晰,随着培养时间延长细胞大量增殖,与阴性对照组细胞形态无明显差异。阳性对照组细胞数量明显减少,形态完整性受破坏,形成大量细胞碎片。②培养24h时,CCK-8比色法检测中钴铬合金组的细胞相对增殖率低于阴性对照组(P<0.05),MTT及结晶紫比色法检测中钴铬合金组的细胞相对增殖率与阴性对照组比较差异无显著性意义(P>0.05);培养72h时,MTT比色法检测中4种牙科金属材料组细胞相对增殖率低于阴性对照组(P<0.01),CCK-8及结晶紫比色法检测中4组的细胞相对增殖率与阴性对照组比较差异无显著性意义(P>0.05),但材料细胞毒性均为0-1级。表明上述4种牙科金属材料细胞毒性均在临床应用的允许范围内,具有良好的生物安全性。

钙拮抗剂逆转L_（1210）／HR细胞抗药性的动物体内试验研究

本文将体外培养的抗高三尖杉酯碱Ｌ１２１０耐药细胞（Ｌ１２１０／ＨＲ细胞）移植至ＤＢＡ／２小鼠体内，建立了Ｌ１２１０／ＨＲＤＢＡ／２小鼠动物模型，并用钙拮抗剂异搏定、尼群地平进行Ｌ１２１０／ＨＲＤＢＡ／２动物模型的逆转试验，证明异搏定能明显延长动物的存活期，有效地逆转了Ｌ１２１０／ＨＲ细胞的抗药性。另外用高效液相色谱议检测了经异搏定、尼群地平逆转的Ｌ１２１０／ＨＲ细胞内高三尖杉酯碱的药物含量，表明经钙拮抗剂异搏定逆转后细胞内高三尖杉酯碱药物含量明显增高，经异搏定逆转的细胞内药物含量比未逆转的细胞高２．３倍。

复方中药对L_(1210)白血病小鼠抗瘤机理研究

目的:探讨复方中药对 L_(1210)白血病小鼠抗肿瘤机理。方法:采用益气养阴和补气养血方中药观察其对 L_(1210)白血病小鼠在体天然杀伤细胞(NK 细胞)活性,采用体外培养观察这两方中药对 L_(1210)白血病细胞增殖抑制作用。结果:两方中药均可增加荷瘤小鼠的 NK细胞活性(P<0.01和 P<0.05),补气养血方中药还有抑制培养 L_(1210)白血病细胞的直接作用(P<0.05)。结论:两方中药通过增强机体 NK 细胞活性,补气养血中药还可通过抑瘤生长发挥治疗作用。

戊脉安体外对小鼠L_(1210)白血病细胞杀伤作用的观察

本文采用体外培养的L_(1210)细胞株,研究了戊脉安的体外抗肿瘤作用.发现戊脉安对L_1210细胞的生长有一定的抑制作用,且呈剂量相关,并能显著降低L_1210细胞的分裂指数.其抗肮瘤作用与细胞外钙离子浓度无关.

蛋白激酶C抑制剂对细胞生长增殖的影响

本文对新近分离纯化的蛋白激酶C抑制剂的生物学特性进行了分析,应用细胞增殖试验表明,蛋白激酶C抑制剂对培养的L_(929)细胞和Hela细胞生长增殖有显著的抑制作用,并且该抑制作用有细胞周期特异性。对这种抑制功能的可能机理进行了初步探讨。

自制磷酸钙骨水泥人工骨的生物安全性

目的 评价自制磷酸钙骨水泥人工骨 (CPC)的生物相容性。方法 将CPC人工骨制成生理盐水浸提液 ,培养L 92 9细胞 ,观察浸提液对L 92 9细胞生长和相对增殖度的影响 ,评价CPC人工骨对细胞的潜在毒性作用 ;将CPC人工骨制成一定大小和形状植入新西兰兔股部肌肉 ,观察植入后不同时期试样周围组织反应程度 ,评价CPC对组织的刺激性和相容性。结果 CPC对L 92 9靶细胞未见毒性作用 ;植入后对周围组织、肌肉无刺激反应。

肿瘤基质成纤维细胞模型的建立及生物学特性研究

目的 建立肿瘤基质成纤维细胞模型并探讨其恶性生物学特性 ,为研究其恶性转化机制、开发靶向肿瘤基质的抗癌药物提供有价值的细胞模型。方法 用小鼠肝癌细胞H2 2 培养上清液诱导小鼠成纤维细胞L92 9,获得能稳定生长的L92 9 H2 2 细胞。用光镜、电镜观察其形态改变 ,MTT法检测其生长情况 ,免疫细胞化学测定其PCNA、bcl 2、MMP 9、TN表达变化 ,RT PCR测定其端粒酶活性 ,并分析其核型、蛋白合成能力、对常用抗癌药物的反应性及其条件培养基 (conditionedmedium ,CM)对H2 2 细胞生长的影响。结果 L92 9 H2 2 细胞出现多核和畸形核 ,染色体众数略有增加。细胞群体倍增时间较亲代细胞缩短 (t=2 65 41,P <0 0 5 ) ,分裂指数增高 (χ2 =4 5 2 5 ,P <0 0 5 ) ,PCNA、bcl 2、MMP 9、TN表达增强 (t≥ 3 3 0 5 5 ,P<0 0 1)。端粒酶活性增高 (t=-4 0 4163 ,P <0 0 0 1)。L92 9 H2 2 细胞对作用于S期或S期和M期或细胞骨架的抗癌药物较L92 9敏感 (q≥ 3 0 15 2 ,P <0 0 5 )。蛋白质合成能力增强 (q =-5 90 11,P <0 0 0 1)。其CM促进H2 2 细胞生长。结论 L92 9 H2 2 细胞较亲代细胞增殖快 ,核型发生变化 ,存活能力强 ,功能活跃 ,表达并分泌促进肿瘤细胞生长与侵袭的因子增强 。

超高相对分子质量聚乙烯纤维的体外细胞毒性

目的:研究新型口腔修复材料超高相对分子质量聚乙烯纤维(Ribbond)的体外细胞毒性。方法:将Rib-bond置于细胞培养液中72h制备出材料浸渍液,用同一培养液稀释为12.5%,25%和50%后,分别加入含L-929细胞悬液的培养液中,阳性对照组为稀释25%的PVC浸渍液,阴性对照组为新鲜细胞培养液。分别培养1d,3d,5d和7d后,采用MTT法观察细胞活性,计算细胞增殖率用于评定各材料的毒性级。结果:Ribbond的3个浓度组除第1d的25%和50%2个浓度组与阴性对照组相比差异有统计学意义外,其余与阴性对照组相比,差异均无统计学意义。第3d、5d、7d,Ribbond12.5%和25%浓度组的A值均高于阳性对照组。Ribbond的细胞毒性为0～1级。结论:Ribbond无明显细胞毒性。

聚-DL-乳酸复合材料的细胞毒性评价

本文对新研制的聚-DL-乳酸可吸收复合材料进行细胞毒性的实验研究,采用L-929小鼠成纤维细胞,经材料浸提液与细胞接触2、4、7 天后,在分光光度仪下测定光吸收度,以评价材料的细胞毒性.结果表明;该材料对培养细胞无明显细胞毒性刺激作用,细胞生长良好,各期实验组的细胞增殖状况与阴性对照组相似.

两种新型玻璃陶瓷材料的体外细胞毒性评价

为了初步检测两种新型玻璃陶瓷材料Hypress和Hycam的生物相容性,本实验采用间接接触法检测了它们对L-929细胞的细胞毒性。结果显示:随着细胞培养时间的延长,(1)光吸收度(OD)值呈增长趋势且与阴性对照走势相同,两者间无显著性差异(P>0.05);(2)细胞增殖率(RGR)逐渐增加;(3)Hypress材料组表现为极轻微的细胞毒性,Hycam材料组未见明显的细胞毒性。

甾体激素对L_(929)细胞摄取甘氨酸快速作用的机制

目的 探讨甾体激素对L92 9细胞摄取甘氨酸非基因组作用的细胞内信号转导机制的作用。方法 应用液体闪烁技术 ,通过检测L92 9细胞在加入了甾体激素和 (或 )其他试剂后摄入标记甘氨酸量的改变 ,确定甾体激素的作用及其机制。结果 皮质酮、醛固酮、雌二醇、地塞米松和氢化可的松均能不同程度地快速抑制L92 9细胞甘氨酸摄取 ,牛血清白蛋白偶联皮质酮和硫酸皮质酮作用没有明显差别 ,G蛋白抑制剂GDP β S能阻断皮质酮作用 ,磷酯酶C阻断剂新霉素不能阻断皮质酮作用 ,蛋白激酶C抑制剂Chelery能阻断皮质酮作用 ,蛋白激酶激动剂佛波脂能模拟皮质酮作用 ,腺苷酸环化酶激动剂福司柯林 (Forskolin)及蛋白激酶A阻断剂H89能阻断皮质酮作用。结论 甾体激素快速抑制L92 9细胞摄取甘氨酸是非基因组作用 ,这一作用的细胞内信号转导过程是通过G蛋白 蛋白激酶C途径。

正常及炎症牙髓组织中白细胞介素1的活性检测

用细菌内毒素建立豚鼠的牙髓炎模型，借助体外培养的Ｌ９２９细胞，在培养液中加入正常和炎症的牙髓组织上清液，采用成纤维细胞增殖法测定正常和炎症牙髓组织中白细胞介素１（ＩＬ１）的活性。结果发现正常牙髓组织无ＩＬ１的活性，炎症牙髓组织产生明显的ＩＬ１活性，并随内毒素诱导时间的延长而增强。ＩＬ１为牙髓炎的主要介质之一，介导了牙髓炎的发生和发展。

四种鬼臼毒衍生物的体外抗肿瘤作用

目的：研究四种鬼臼毒衍生物在体外对Ｌ＿（１２１０）细胞生长的抑制作用。方法：采用活细胞计数法和软琼脂克隆形成法及有丝分裂指数计数法。结果：ＶＰ＿（１６），ＧＰ＿１，ＧＰ＿１Ｈ和ＧＰ＿１ＯＨ体外剂量，时间依赖性的抑制Ｌ＿（１２１０）细胞生长，２４ｈＩＧ＿（５０）依次为０．０４９，１．０６，３．８９，５．３３μｇ／ｍｌ，不同时间ＶＰ１６均降低细胞有丝分裂指数而ＧＰ１等反之。结论：ＶＰ＿（１６），ＧＰ＿１，ＧＰ＿１Ｈ和ＧＰ＿１ＯＨ的抗肿瘤机理有所不同。