眼虫Astasia longa类核纤层蛋白基因的初步研究

利用PCR和克隆测序技术 ,对眼虫Astasialonga的核纤层蛋白 (lamin)基因进行了研究。参考多种相对较低等多细胞动物的已知序列 ,设计出扩增lamin基因尾部区的引物 ,扩增获得两个主要片段 :序列Ⅰ(6 5 0bp)和序列Ⅱ (797bp)。测序分析表明 ,序列Ⅱ包含序列Ⅰ ,并具有lamin基因尾部特征 (编码“CaaX”序列的四种密码子 +终止密码子 )

A型核纤层蛋白编码基因LMNA调控IOP1表达机制的初步研究

目的探讨A型核纤层蛋白编码基因(LMNA)与唯铁脱氢酶编码基因1(IOP1)在细胞自噬中潜在的调控关系。方法在人胚胎肾细胞(HEK293T)中分别转染靶向LMNA基因和IOP1基因的siRNA,首先通过RT-PCR和Western Blotting检测LMNA基因和IOP1基因的表达水平,进而检测自噬相关标志物的表达水平,包括LC3BⅡ/LC3BⅠ蛋白比值、p62蛋白、ATG5-ATG12复合体、ATG5、ATG12和FOXO3a。结果在HEK293T中干扰LMNA基因的表达,IOP1基因的mRNA和蛋白水平表达水平下降,自噬标志物LC3BⅡ/LC3BⅠ蛋白比值上调;在HEK293T中下调IOP1的表达,不影响LMNA基因的表达水平,自噬标志物LC3BⅡ/LC3BⅠ蛋白比值、FOXO3a、ATG5、ATG12、ATG5-ATG12复合体水平升高,p62蛋白水平略有降低。结论LMNA基因可以调控IOP1基因的表达,进而参与调控细胞自噬过程。