银屑病患者血清中链球菌M6蛋白抗体的检测

为进一步证实链球菌中M6蛋白和点滴型银屑病之间的关系,用分离提纯的M6蛋白对银屑病患者血清中的抗体进行检测研究。(1)对点滴型银屑病患者咽部培养获得的化脓性链球菌进行PCR检测,经检测确认含有M6蛋白基因表达的菌株进行分离提纯M6蛋白。(2)用提纯的M6蛋白使用ELISA方法分别对30例点滴型银屑病患者,30例斑块型银屑病患者和30名健康对照组进行血清中M6蛋白抗体进行检测。点滴型银屑病患者血清中M6蛋白的抗体OD值明显高于斑块型银屑病组和正常对照组(P<0.01),而斑块型银屑病组和正常对照组间无明显差异。本组研究结果显示,点滴型银屑病患者与链球菌体中的M6蛋白有明显相关性。

聚合酶链式反应检测银屑病患者咽部菌群中M6蛋白

根据编码M 6蛋白的emm6基因序列设计一对寡核苷酸引物 ,可特异扩增2 2 0bp的DNA片段。应用聚合酶链式反应(PCR)方法对点滴型银屑病患者咽部培养出的 19株细菌中的M 6蛋白基因进行检测 ,结果 ,15株链球菌中 6株为阳性 ,其中化脓链球菌 3株 ,无乳链球菌、似马链球菌和乳房链球菌各 1株 ,4株非链球菌均为阴性。M 6蛋白基因不仅存在化脓性溶血链球菌中 ,在其它链球菌如乳房链球菌中也存在。研究结果显示 ,化脓性溶血链球菌中的化脓链球菌、无乳链球菌和似马链球菌与点滴型银屑病的发生有明显相关性 ,可能主要是菌体中的M 6蛋白在起作用 ,其它含有M 6蛋白的细菌如乳房链球菌也可诱发或加重银屑病的发生。

银屑病患者外周血单一核细胞对链球菌M6蛋白的反应

目的 :探讨链球菌M6蛋白 (M 6P)在点滴型银屑病发病中的作用机制 .方法 :MTT法检测点滴型银屑病 (GP)、斑块型银屑病 (PP)患者及正常人外周血单一核细胞 (PBMC)对极微量 (10 0ng)M6P、葡萄球菌肠毒素B(staphylococcalen dotoxinB ,SEB)的增殖反应 ;双抗夹心ELISA法检测M6P刺激培养 72h点滴型银屑病PBMC上清中IFN γ,IL 4水平 .结果 :M6P可引起点滴型银屑病患者PBMC明显的增殖反应 ,与RPMI 16 4 0组 (空白对照 )差异非常显著 (P <0 .0 1) ;与斑块型组及正常对照组相比差异极显著 (P <0 .0 1) ;点滴型银屑病组M6P刺激 72h培养上清中IFN γ 含量较空白对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,IL 4含量均未检出 .结论 :在点滴型银屑病的发病中 ,M

链球菌M6蛋白诱导点滴型银屑病样动物模型的研究

目的利用链球菌M6蛋白建立严重联合免疫缺陷鼠(SCID鼠)银屑病样动物模型。方法将点滴型银屑病患者非皮损区全层皮片、正常对照全层皮片移植到不同的SCID鼠背部,分别在移植皮片皮内多次注射经链球菌M6蛋白刺激后和未经链球菌M6蛋白刺激的外周血单一核细胞(PBMC)悬液,4周后对移植皮片行组织活检。结果光学显微镜下观察,13例点滴型银屑病患者非皮损区皮片内注射经链球菌M6蛋白刺激后的PBMC有12例产生银屑病样改变;9例正常对照皮片内注射经链球菌M6蛋白刺激后的PBMC均未出现银屑病样改变;10例点滴型银屑病患者非皮损区皮片及9例正常对照皮片内注射未经链球菌M6蛋白刺激后的PBMC均未出现银屑病样改变。经统计学处理两组间差异有显著性(P<0.001)。结论本试验利用链球菌M6超抗原成功建立了银屑病样动物模型,从而进一步证实链球菌M6蛋白在点滴型银屑病发病中发挥着重要的作用。

METTL3对乳腺上皮细胞中乳蛋白和乳脂肪合成的影响

本试验旨在研究m6 A甲基转移酶(methyltransferase-like protein 3,METTL3)在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMEC)中对乳蛋白和乳脂肪的调节作用。试验建立不同的BMEC模型,应用Western blotting、免疫荧光法检测添加雌激素(E)、蛋氨酸(Met)、METTL3超表达和抑制时对BMEC中乳蛋白和乳脂的影响,以及基因定位和表达变化。结果显示,当在BMEC培养液中添加E、Met及METTL3表达水平提高时,mTOR、p-mTOR、GlyRS、p-GlyRS、CSN2、SREBP-1c等表达量均增加,反之,这些基因表达量均下降,表明METTL3可以通过调控乳脂、乳蛋白的相关信号通路分子的基因表达进而影响乳脂、乳蛋白的表达。提示METTL3是乳合成的重要调节分子,可对细胞中乳脂、乳蛋白的合成起正调控作用。

咽部链球菌感染与银屑病皮损角蛋白14表达关系的研究

目的 为研究银屑病皮损角蛋白 14 (K 14 )的表达情况 ,探讨与含M6蛋白链球菌感染的关系。方法 对寻常型银屑病患者进行咽部细菌培养、鉴定 ,链球菌阳性者分为含M6蛋白组及不含M6蛋白组。两组皮损和正常皮肤组织链霉亲合素 -过氧化酶 (S -P)免疫组化染色后 ,用光学显微镜描述并图像分析定量统计。结果 银屑病表皮全层表达K14 ,正常皮肤主要在基底层浓集表达 ,咽部培养出含M6蛋白链球菌的银尿病患者比不含M 6蛋白链球菌者有更密、更深染的K14阳性颗粒 (P <0 0 5)。结论 银屑病表皮过度表达K14 ,咽部感染含M 6蛋白链球菌的银屑病患者比感染不含M

一种高效的真菌总蛋白质提取方法

蛋白的提取是蛋白质组学研究的首要步骤,其质量的好坏直接影响蛋白质表达分析研究的开展及其结果的准确性。为了从深黄被孢霉M6-22中提取细胞总蛋白质并进一步进行蛋白组学等一些相关研究,采用五种已报道的蛋白质提取方法分别提取深黄被孢霉M6-22的总蛋白质,以蛋白质浓度和SDS-PAGE结果分析相结合的方法比较提取方法。结果显示,其中一种方法提取的蛋白质浓度相对较高而且蛋白质条带丰度最高,进一步对该方法进行了改良,所获得蛋白质的浓度可达约2.99mg/ml。改进后的方法操作步骤简单,蛋白质条带丰度更高。采用改进后的方法提取其他五种真菌的总蛋白质,结果显示其对其他真菌也有很好的提取效果,说明可作为一种真菌总蛋白质的高效提取方法。