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MALDI-TOF-MS在耐碳青霉烯肠杆菌多黏菌素B快速药敏试验中的应用
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作者 王林 刘赛 王维 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第8期1050-1054,共5页
目的构建一种耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)多黏菌素B的快速药敏试验方法,为临床抗生素的选择和精准调整提供依据。方法采用WHONET 5.6软件对分离自西安市第一医院2023年3月至2024年3月的108株CRE菌株信息进行筛选,以肉汤稀释法为参比... 目的构建一种耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)多黏菌素B的快速药敏试验方法,为临床抗生素的选择和精准调整提供依据。方法采用WHONET 5.6软件对分离自西安市第一医院2023年3月至2024年3月的108株CRE菌株信息进行筛选,以肉汤稀释法为参比方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)进行多黏菌素B快速药敏测定。结果108株CRE分离株以肺炎克雷伯菌为主(48.14%),其次是产气肠杆菌和奇异变形杆菌(各占13.89%)。标本来源以痰液为主(65.74%),其次尿液(18.52%)和血液(8.33%)。临床科室分布以神经外科为主(48.15%),其次为重症医学科(18.52%)和呼吸内科(14.81%)。CRE分离株对大部分药物呈现高度耐药,对常见β内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类、β内酰胺复合药物耐药率分别超过70%,80%,50%和75%。与肉汤稀释法相比,MALDI-TOF-MS法测定CRE对多黏菌素B药敏结果的分类一致率(CA)为98.1%,重大误差(ME)为1.85%,未出现非常重大误差(VME),均在可允许范围之内。结论本院分离的CRE对多种抗菌药物广泛耐药,基于MALDI-TOF-MS的快速药敏试验方法准确可靠,可用来评价CRE对多黏菌素B的敏感性,便于临床及时调整泛耐药细菌治疗方案。 展开更多
关键词 maldi-tof-ms 耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌 细菌感染 多黏菌素B 药敏试验 肉汤稀释法
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基于MALDI-TOF-MS技术快速鉴定灵芝的可行性研究
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作者 张树振 房霞 +3 位作者 王春雷 李淑静 刘晋 李越峰 《食品与营养科学》 CAS 2024年第4期384-390,共7页
目的:探讨利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术快速鉴定灵芝的可行性。方法:采集灵芝菌丝、子实体、孢子样本后,用Autof ms800全自动微生物质谱检测系统检测,Autof Acquirer进行分析处理。结果:经过检测,得到了灵... 目的:探讨利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术快速鉴定灵芝的可行性。方法:采集灵芝菌丝、子实体、孢子样本后,用Autof ms800全自动微生物质谱检测系统检测,Autof Acquirer进行分析处理。结果:经过检测,得到了灵芝的蛋白指纹图谱。其蛋白指纹图谱可以分为四部分:菌丝图谱、产孢子前子实体图谱、产孢子后子实体图谱、孢子图谱。以此初步建立数据库后,可快速鉴定未知样本是否为本品种灵芝。结论:MALDI-TOF-MS技术快速鉴定灵芝具有可行性。Objective: To explore the feasibility of rapid identification of Ganoderma lucidum by using MALDI-TOF-MS technique. Methods: The samples of Ganoderma lucidum mycelium, fruiting bodies, and spores were collected first and then detected by Autof ms800 automatic microbial mass spectrometry system and analyzed by Autof Acquirer finally. Results: After testing, the protein fingerprint of Ganoderma lucidum was obtained. Its protein fingerprint can be divided into four parts: hyphal profile, pre-sporulation fruiting body profile, post-sporulation fruiting body profile, and spore profile. After initially establishing a database with this, it is possible to quickly identify whether unknown samples are of this variety of Ganoderma lucidum. Conclusion: It is feasible for rapid identification of Ganoderma lucidum by MALDI-TOF-MS technique. 展开更多
关键词 灵芝 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 鉴定
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克罗诺杆菌MALDI-TOF-MS数据库的建立及应用 被引量:14
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作者 赵贵明 刘洋 +3 位作者 陈颖 杨海荣 赵勇胜 王娉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第8期105-110,共6页
应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术建立了克罗诺杆菌MALDI-TOF-MS数据库,用于该菌属内种和亚种的高通量鉴定及菌株分型。在优化... 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术建立了克罗诺杆菌MALDI-TOF-MS数据库,用于该菌属内种和亚种的高通量鉴定及菌株分型。在优化培养条件、样品处理方法及确定MALDI-TOF-MS蛋白质指纹图谱采集参数的基础上,将采集的8种参考菌株蛋白质质谱数据通过Biotyper软件构建克罗诺杆菌的MALDI-TOF-MS数据库,再用相近肠杆菌及该属分离株验证数据库的准确性。结果表明:应用建立的克罗诺杆菌的MALDI-TOF-MS数据库对135株克罗诺杆菌分离株进行分析,鉴定分值均不小于2.0,达到了种水平鉴定要求,通过聚类分析,可进一步分型。构建的MALDI-TOF-MS数据库为克罗诺杆菌高通量鉴定与分型提供了一种新的手段。 展开更多
关键词 克罗诺杆菌 maldi-tof-ms 数据库 鉴定 分型
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单增李斯特氏菌MALDI-TOF-MS鉴定与分型研究 被引量:20
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作者 王耀 曹际娟 +5 位作者 赵昕 郑秋月 王刚 田卓 史媛媛 曹远银 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期194-198,共5页
为建立单增李斯特氏菌的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)快速鉴定与分型方法,实验收集37株单增李斯特氏菌分离株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质指纹图谱,汇总成标准图谱,建立单增李斯特氏菌鉴定数据库。... 为建立单增李斯特氏菌的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)快速鉴定与分型方法,实验收集37株单增李斯特氏菌分离株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质指纹图谱,汇总成标准图谱,建立单增李斯特氏菌鉴定数据库。采用单增李斯特氏菌标准菌株进行验证,表明鉴定结果的可信度很高。在数据库信息的基础上,对37株单增李斯特氏菌分离株进行聚类分型。分型结果表明,在蛋白质水平上,MALDI-TOF-MS可把37株单增李斯特氏菌分成9个型别。 展开更多
关键词 单增李斯特氏菌 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 鉴定 分型
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MALDI-TOF-MS鉴定布鲁氏菌方法建立和评价 被引量:13
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作者 汤旭 肖迪 +5 位作者 张慧芳 陈经雕 毛玲玲 崔步云 张建中 姜海 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期772-778,共7页
目的为了快速、准确、便捷的检测和鉴定布鲁氏菌,本研究拟建立鉴定布鲁氏菌属的MALDI-TOF-MS方法,利用现场分离菌株对该方法进行特异性和敏感性评价。方法收集布鲁氏菌标准菌株和地方流行株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质... 目的为了快速、准确、便捷的检测和鉴定布鲁氏菌,本研究拟建立鉴定布鲁氏菌属的MALDI-TOF-MS方法,利用现场分离菌株对该方法进行特异性和敏感性评价。方法收集布鲁氏菌标准菌株和地方流行株,应用MALDI-TOF-MS采集图谱,获取独特的蛋白质指纹图谱,汇总成标准图谱,建立布鲁氏菌鉴定数据库。并用39株布鲁氏菌菌株,对建立的数据库进行验证。结果经数据库鉴定,39株布鲁氏菌菌株与数据库中布鲁氏菌的匹配分数全部大于2.300,均报告为布鲁氏菌,表明鉴定结果的可信度很高。聚类分型结果表明,在蛋白质水平,MALDI-TOF-MS将测试的布鲁氏菌分成3大类。结论MALDI-TOF-MS对布鲁氏菌进行鉴定,具有快速、准确、灵敏等优点,可以实现对布鲁氏菌属的准确鉴定,对布鲁氏菌病的临床诊断具有较高的使用价值。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 maldi-tof-ms 鉴定
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MALDI-TOF-MS方法检测、鉴定副溶血性弧菌 被引量:11
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作者 龚艳清 陈信忠 +2 位作者 郭书林 杨俊萍 叶妍妍 《食品安全质量检测学报》 CAS 2013年第2期521-527,共7页
目的建立快速检测和鉴定副溶血性弧菌的基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析方法。方法采用副溶血性弧菌标准菌株,在不同的培养基或不同的培养时间下进行MALDI-TOF-MS检测,同时对长时间冷冻保存的菌株进行检测,以验证... 目的建立快速检测和鉴定副溶血性弧菌的基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析方法。方法采用副溶血性弧菌标准菌株,在不同的培养基或不同的培养时间下进行MALDI-TOF-MS检测,同时对长时间冷冻保存的菌株进行检测,以验证该方法的稳定性和重复性。对不同来源的菌株进行检测,以确认方法的准确性。结果用PW、TCBS琼脂和弧菌显色培养基等3种培养基,分别培养18、42、72h时,对该菌的蛋白质谱图影响很小;保存2年的菌株,其MALDI-TOF-MS鉴定分值保持稳定;对来自不同国家和地区的菌株都可以得到同样准确的结果。结论 MALDI-TOF-MS方法可以快速、准确地鉴定副溶血性弧菌。因其具有很好的稳定性和重复性,可用于副溶血性弧菌的日常检测。 展开更多
关键词 maldi-tof-ms 副溶血性弧菌 检测 鉴定
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MALDI-TOF-MS在病原微生物鉴定中的研究进展 被引量:29
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作者 陈信忠 龚艳清 郭书林 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期43-48,共6页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)是鉴定多种致病性细菌的快速、可靠的方法,具有较好的稳定性和可重复性,在快速和准确性方面的总体表现明显好于传统的细菌生化鉴定方法。适合于一些致病菌的快速、高通量的检测和鉴定。... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)是鉴定多种致病性细菌的快速、可靠的方法,具有较好的稳定性和可重复性,在快速和准确性方面的总体表现明显好于传统的细菌生化鉴定方法。适合于一些致病菌的快速、高通量的检测和鉴定。综述MALDI-TOF-MS技术在普通病原菌、多血清型病原菌、非发酵性细菌,以及植物病原菌等病原微生物鉴定方面的最新研究进展。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 微生物 鉴定 进展
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APTIMA HPV E6/E7 mRNA和MALDI-TOF-MS HPV基因分型检测宫颈高度病变效果评价 被引量:12
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作者 杜辉 张艳萍 +4 位作者 张薇 王纯 吴若松 Belinson JL 吴瑞芳 《现代妇产科进展》 CSCD 2014年第12期937-941,共5页
目的:以HC-Ⅱ法HPV DNA为对照,评价APTIMA法HPV E6/E7 mRNA检测(A-HPV)和MALDI-TOF-MS HPV分型检测技术(M-HPV)用于宫颈癌与癌前病变筛查的临床价值。方法:深圳市25-59岁、3年内未行宫颈癌筛查、未接受过子宫切除和盆腔放疗的209... 目的:以HC-Ⅱ法HPV DNA为对照,评价APTIMA法HPV E6/E7 mRNA检测(A-HPV)和MALDI-TOF-MS HPV分型检测技术(M-HPV)用于宫颈癌与癌前病变筛查的临床价值。方法:深圳市25-59岁、3年内未行宫颈癌筛查、未接受过子宫切除和盆腔放疗的2095例未孕妇女参加了本次筛查。医生于患者宫颈外口处直接收集2份宫颈脱落细胞标本,一份用于液基细胞学检查,一份用于HC-Ⅱ、A-HPV和M-HPV检测。宫颈细胞学≥ASCUS及3种方法 HPV检测任一阳性结果者均回叫行阴道镜下定点或四象限活检及宫颈管诊刮(ECC)。以病理诊断为标准评价各种HPV检测方法用于宫颈癌筛查的价值。结果:2095例研究对象中各项检测数据齐全者1970例。1970例患者的平均年龄为(35.89±7.655)岁。细胞学≥ASCUS者占6.4%(127/1970),CINⅡ+者占1.3%(26/1970),CINⅢ+者占0.76%(15/1970)。HC-Ⅱ、A-HPV和M-HPV总的HPV阳性率分别是19.4%、12.1%和14.8%,差异有统计学意义(P〈0.05)。HC-Ⅱ、A-HPV和M-HPV对检出CINⅡ+病变的敏感性分别为88.5%(95%CI为68.7-97.0)、100%(95%CI为84.0-100)和92.3%(95%CI为73.4-98.7),特异性分别为81.5(95%CI为79.7-83.2)、89.1%(95%CI为87.6-90.4)和86.3%(95%CI为84.6-87.8);A-HPV与HC-Ⅱ相比敏感性稍高(P〈0.05),M-HPV敏感性和HC-Ⅱ相同(P〉0.05),三者比较有统计学意义(P〈0.05)。结论:A-HPV和M-HPV用于宫颈癌筛查都有很好的敏感性和准确性,两者活检率明显低于HC-Ⅱ,可减少医疗负担和花费。HPV亚型分型和HPV E6/E7 mRNA结合有更好地预测宫颈癌患病风险的作用。 展开更多
关键词 人群为基础的宫颈癌筛查 APTIMA HPV E6/E7 MRNA检测 maldi-tof-ms HPV基因分型检测
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应用MALDI-TOF-MS联合分离胶法快速鉴定阳性血培养标本的初步研究 被引量:9
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作者 钱扬会 李艳君 +1 位作者 丁毅伟 赵强元 《检验医学与临床》 CAS 2019年第9期1196-1199,共4页
目的运用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)联合分离胶法快速鉴定血培养阳性标本,探讨快速鉴定法的符合率。方法运用分离胶法提取阳性血培养瓶中富集的菌落,应用MALDITOF-MS对经前处理的血培养阳性标本进行直接鉴定,鉴定... 目的运用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)联合分离胶法快速鉴定血培养阳性标本,探讨快速鉴定法的符合率。方法运用分离胶法提取阳性血培养瓶中富集的菌落,应用MALDITOF-MS对经前处理的血培养阳性标本进行直接鉴定,鉴定结果与传统的VITEK-2Compact全自动细菌分析仪鉴定结果进行比较,若有不符,以16SrRNA序列分析结果作为金标准。结果在实验的200株阳性血培养标本中,革兰阳性菌的鉴定符合率达79.5%;革兰阴性菌鉴定符合率达85.7%;真菌的鉴定符合率达20.0%。由此可见,革兰阴性菌的鉴定符合率高于革兰阳性菌,二者鉴定符合率均远高于真菌。两种及两种以上细菌混合感染的阳性标本直接鉴定还存在一定困难,其直接鉴定方式还需进一步探讨。应用两种鉴定方法得出不同结果的12株阳性标本,16SrRNA序列分析结果均与VITEK-2Compact全自动细菌分析仪鉴定结果一致。结论MALDI-TOF-MS联合分离胶促凝管直接检测血培养阳性标本,对血流感染中主要病原菌的鉴定符合率较高,且迅速简便,此方法可将细菌更快地鉴定到种属,使临床能够进行早期治疗,有效控制菌血症的病死率和院内感染。 展开更多
关键词 maldi-tof-ms 分离胶法 血培养 快速鉴定
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基于2D-DIGE/MALDI-TOF-MS技术筛选奶牛低血钙症生物标志物 被引量:3
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作者 舒适 夏成 +5 位作者 张洪友 许楚楚 李昌盛 肖鑫焕 王刚 白云龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1238-1245,共8页
奶牛乳热(MF)是一种严重的营养代谢性疾病,通常被分为临床型及亚临床型低血钙症(SH)。奶牛乳热的诊断通常是应用奶牛血浆中的钙浓度进行判定的,但是在奶牛乳热整个发生发展的过程中,发病的具体机制仍是研究的盲点。在本试验中通过筛选... 奶牛乳热(MF)是一种严重的营养代谢性疾病,通常被分为临床型及亚临床型低血钙症(SH)。奶牛乳热的诊断通常是应用奶牛血浆中的钙浓度进行判定的,但是在奶牛乳热整个发生发展的过程中,发病的具体机制仍是研究的盲点。在本试验中通过筛选奶牛乳热、亚临床低血钙症及健康奶牛间生物标志物进而解释可能的发生机制。选取27头奶牛作为实验动物,并根据其血浆钙浓度及有无临床症状分为乳热组(MF组)、亚临床低血钙组(SH组)和正常组(C组)。在组内每3个样品混合成为1个混合样本应用于2D-DIGE试验。结果得到110个差异蛋白质点,选取其中80个点进行MALDI-TOF-MS质谱分析,得到66个阳性结果并整合成为16种蛋白质。根据试验结果,选取A2M、HP和PON1进行Western blotting验证试验。本试验首次证实A2M、HP和PON1是奶牛乳热症3种新的生物标志物,并分析了其在乳热症发生过程中的可能作用机制。 展开更多
关键词 奶牛 乳热 亚临床低血钙症 2D-DIGE/maldi-tof-ms WESTERN blottin
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MALDI-TOF-MS鉴定宋内志贺菌的初步应用研究 被引量:17
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作者 鲍春梅 崔恩博 +5 位作者 陈鹏 张鞠玲 陈素明 王欢 张成龙 曲芬 《传染病信息》 2012年第1期10-13,共4页
目的通过扩充基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrixassisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)的数据库研究宋内志贺菌的鉴定。方法用提取法进行宋内志贺菌质谱图的建库,建库后分别使... 目的通过扩充基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrixassisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)的数据库研究宋内志贺菌的鉴定。方法用提取法进行宋内志贺菌质谱图的建库,建库后分别使用直接涂抹法和提取法对50株宋内志贺菌野生株进行鉴定。结果提取法的鉴定符合率为100%,而直接涂抹法的鉴定符合率为60%。结论 MALDI-TOF-MS通过数据库的扩充和流程的优化可以鉴定宋内志贺菌到血清学水平,它将会成为临床微生物实验室的诊断和鉴别工具。 展开更多
关键词 maldi-tof-ms 答定 宋内志贺菌
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MALDI-TOF-MS技术快速鉴定临床酵母样真菌的应用评价 被引量:5
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作者 梁铮 柏彩英 +4 位作者 罗娅莎 张文 蓝锴 李苗苗 周强 《检验医学与临床》 CAS 2015年第18期2659-2660,2663,共3页
目的评价基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)在快速鉴定临床分离的酵母样真菌中的应用价值。方法收集临床分离的酵母样真菌135株,分别用VITEK MS、API20C和CHROMargar显色培养同时进行鉴定与比较,χ2检验分析VITEK MS和AP... 目的评价基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)在快速鉴定临床分离的酵母样真菌中的应用价值。方法收集临床分离的酵母样真菌135株,分别用VITEK MS、API20C和CHROMargar显色培养同时进行鉴定与比较,χ2检验分析VITEK MS和API及显色培养基鉴定结果的准确率,以真菌内转录间隔区(ITS)基因测序作为鉴定结果的金标准,同时比较各种方法在临床使用中的优缺点。结果 VITEK MS、API20C和显色培养基鉴定的准确率分别为98.5%(133/135)、78.5%(106/135)、59.3%(80/135),经χ2检验分析,差异有统计学意义(χ2=51.996,P<0.05)。结论 MALDI-TOF-MS可将酵母样真菌快速、准确地鉴定到种。 展开更多
关键词 酵母样真菌 maldi-tof-ms质谱分析 ITS基因测序
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HPLC结合MALDI-TOF-MS分析木聚糖水解产物 被引量:2
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作者 黎海龙 李成国 +4 位作者 秦光辉 刘健 甘礼惠 谢茹胜 龙敏南 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第5期10-14,共5页
利用HPLC结合MALDI-TOF-MS对1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后山毛榉木聚糖水解产物进行分析,检测到了难以获得标准品对照的木聚糖水解产物。结果表明,稀硫酸水解山毛榉木聚糖的主要水解产物有木糖和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木糖(B2)... 利用HPLC结合MALDI-TOF-MS对1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后山毛榉木聚糖水解产物进行分析,检测到了难以获得标准品对照的木聚糖水解产物。结果表明,稀硫酸水解山毛榉木聚糖的主要水解产物有木糖和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木糖(B2),以及少量4-O-甲基葡萄糖醛酸(B1)。内切重组木聚糖酶An Xyn10C水解山毛榉木聚糖产生木糖、木二糖和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木三糖(B3),而内切重组木聚糖酶Ho Xyn11A水解山毛榉木聚糖主要产生木糖、木二糖、木三糖、4-O-甲基葡萄糖醛酸-木四糖(B4)和4-O-甲基葡萄糖醛酸-木五糖(B5)。基于PMP柱前衍生化的HPLC结合MALDI-TOF-MS方法能高效地分析复杂的木聚糖水解产物。 展开更多
关键词 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮 低聚木糖 4-O-甲基葡萄糖醛酸 maldi-tof-ms HPLC
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MALDI-TOF-MS在爱德华氏菌检测中的应用 被引量:4
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作者 龚艳清 郭书林 +2 位作者 陈信忠 杨俊萍 叶妍妍 《中国动物检疫》 CAS 2014年第6期89-93,共5页
为建立快速检测和鉴定鱼类常见的爱德华氏菌的方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法对来自淡水鱼的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)和鮰爱德华氏菌(E.ictaluri)进行检测和鉴定。为测试该方法的重复性和稳... 为建立快速检测和鉴定鱼类常见的爱德华氏菌的方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法对来自淡水鱼的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)和鮰爱德华氏菌(E.ictaluri)进行检测和鉴定。为测试该方法的重复性和稳定性,采用营养肉汤、BHI琼脂、DHL和TSA等4种不同培养基,以及用肉汤分别培养24 h、36 h、48 h和72 h的菌株进行检测,结果表明对该菌的蛋白质谱图影响很小;冷冻保存2年的菌株,用MALDI-TOF-MS进行检测,鉴定分值变化很小。对分离自不同水生动物的迟缓爱德华氏菌菌株进行检测,均可得到准确的结果。表明MALDI-TOF-MS技术可以快速、准确地检测和鉴定这两种爱德华氏菌。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(maldi-tof-ms) 迟缓爱德华氏菌 鮰爱德华氏菌 检测 鉴定
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MALDI-TOF-MS用于微生物鉴定的影响因素分析 被引量:6
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作者 徐淑菲 孔繁德 +1 位作者 林双庆 蔡绍鑫 《中国动物检疫》 CAS 2019年第2期88-96,共9页
影响MALDI-TOF-MS微生物鉴定的因素有很多。本研究主要从微生物培养基、培养状态、菌体前处理、上样量等方面进行MALDI-TOF-MS操作技术和方法的探讨。研究结果显示:进行MALDI-TOF-MS细菌鉴定,培养时间在4~24 h之间为佳;尽量选择无色、... 影响MALDI-TOF-MS微生物鉴定的因素有很多。本研究主要从微生物培养基、培养状态、菌体前处理、上样量等方面进行MALDI-TOF-MS操作技术和方法的探讨。研究结果显示:进行MALDI-TOF-MS细菌鉴定,培养时间在4~24 h之间为佳;尽量选择无色、不含盐的液体培养基;0.1μL菌液是最低鉴定菌量;上样量对结果无影响;对于菌体前处理,除按照标准化前处理程序操作外,也可将菌体加dd H2O制成混悬液进行点靶鉴定,这样更加简便。本研究有助于减少MALDI-TOF-MS操作盲目性,提高鉴定质量,利于操作的规范化和简便化。 展开更多
关键词 maldi-tof-ms 微生物鉴定 影响因素
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应用MALDI-TOF-MS自建鲍氏志贺菌蛋白指纹图谱数据库的研究 被引量:3
16
作者 钱扬会 李艳君 +1 位作者 丁毅伟 赵强元 《检验医学与临床》 CAS 2019年第10期1348-1350,共3页
目的运用MALDI-TOF-MS技术建立鲍氏志贺菌的蛋白指纹图谱并将其添加至数据库,实现对临床细菌的快速鉴定,便于临床医生对疾病进行快速而有效的控制。方法采用甲酸萃取法进行鲍氏志贺菌蛋白指纹图谱的添加,研究不同的标本前处理方法对鉴... 目的运用MALDI-TOF-MS技术建立鲍氏志贺菌的蛋白指纹图谱并将其添加至数据库,实现对临床细菌的快速鉴定,便于临床医生对疾病进行快速而有效的控制。方法采用甲酸萃取法进行鲍氏志贺菌蛋白指纹图谱的添加,研究不同的标本前处理方法对鉴定结果的影响,并用新分离的鲍氏志贺菌和大肠埃希菌对图谱进行验证。结果采用新的图谱鲍氏志贺菌提取法鉴定准确率为95%,直接涂抹法准确率为79%,对大肠埃希菌的鉴定准确率为97%。鲍氏志贺菌不同处理方法的鉴定准确率比较,差异有统计学意义(P<(0.05)。结论新添加的鲍氏志贺菌蛋白指纹图谱能快速准确地鉴定鲍氏志贺菌,此图谱可以应用于鲍氏志贺菌的临床快速诊断。 展开更多
关键词 鲍氏志贺菌 maldi-tof-ms 数据库 自建
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山羊脾脏来源多肽MALDI-TOF-MS定性分析 被引量:2
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作者 杨兆勇 张志斐 苏秀兰 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期797-797,共1页
多肽类化合物广泛存在于自然界中,可作为药物、疫苗、导向药物、诊断试剂、酶抑制剂及药物先导化合物等[1~2].脾脏是哺乳动物最大的外周淋巴器官,产生多种生物活性物质,这些生物活性物质具有分子量小、结构相对简单、免疫原性小等特点... 多肽类化合物广泛存在于自然界中,可作为药物、疫苗、导向药物、诊断试剂、酶抑制剂及药物先导化合物等[1~2].脾脏是哺乳动物最大的外周淋巴器官,产生多种生物活性物质,这些生物活性物质具有分子量小、结构相对简单、免疫原性小等特点.本实验应用MALDI-TOF-MS对经前期诱导后山羊脾脏中获得的多肽进行分析,为此种多肽的开发提供依据. 展开更多
关键词 山羊 脾脏 多肽maldi-tof-ms 定性分析 多肽提取方法
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应用MALDI-TOF-MS法筛选儿童急性淋巴细胞白血病潜在标记物 被引量:1
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作者 王叨 吕艳琦 +2 位作者 刘玉峰 苏淑芳 李白 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1365-1369,共5页
本研究旨在分析儿童急性淋巴细胞白血病(c-ALL)的肿瘤特异性蛋白,寻找新的肿瘤蛋白分子标志物。应用双向凝胶电泳(2-DE)及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析(MALDI-TOF-MS)及联网检索数据库,鉴定表达上调的差异蛋白,并应用细胞免疫... 本研究旨在分析儿童急性淋巴细胞白血病(c-ALL)的肿瘤特异性蛋白,寻找新的肿瘤蛋白分子标志物。应用双向凝胶电泳(2-DE)及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析(MALDI-TOF-MS)及联网检索数据库,鉴定表达上调的差异蛋白,并应用细胞免疫组织化学法验证相关蛋白。结果表明,获得了4个表达上调的蛋白点,经质谱分析初步鉴定出其中2个表达上调的差异蛋白为谷胱甘肽S转移酶P和阻殖蛋白;细胞免疫组织化学法检测发现,二者在儿童ALL细胞内的表达阳性率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:谷胱甘肽S转移酶P和阻殖蛋白有望成为儿童ALL新的诊断标志物和药物靶点。 展开更多
关键词 儿童急性淋巴细胞白血病 蛋白质组学 双向凝胶电泳 maldi-tof-ms质谱仪
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应用MALDI-TOF-MS分析大肠癌血浆相关蛋白差异表达 被引量:1
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作者 廖国海 谭诗云 +2 位作者 覃丽佳 王军 李明 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期49-53,共5页
目的通过对大肠癌患者血浆蛋白质组学表达差异的研究,以期寻找大肠癌早期诊断及新相关特异的性标志物。方法采用弱阳离子(MB-WCX)磁珠结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MAL-DI-TOF-MS)技术检测样品血浆蛋白质质谱,运用Ciphergen Pr... 目的通过对大肠癌患者血浆蛋白质组学表达差异的研究,以期寻找大肠癌早期诊断及新相关特异的性标志物。方法采用弱阳离子(MB-WCX)磁珠结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MAL-DI-TOF-MS)技术检测样品血浆蛋白质质谱,运用Ciphergen ProteinChip Software 3.2.1软件及BiomarkWizard 5.0软件进行数据分析筛选,并对差异表达显著的质谱峰于Swiss-Prot及TrEMBL蛋白数据库进行检索。结果通过对比研究大肠癌组、大肠腺瘤组及正常对照组血浆差异表达质谱峰,共发现23个差异表达蛋白质谱峰,其中在大肠癌组中4个显著差异高表达(P<0.05),荷质比(M/Z)分别为6 683、8 700、9 187、9 342;虽在大肠腺瘤组与正常组蛋白质谱峰表达无显著性差异(P>0.05),但三组间荷质比为6 683、8 700蛋白表达呈一定递进性趋势;检索Swiss-Prot蛋白质数据库结果:M/Z 6 683是成纤维细胞生长因子受体-1(FGFR1),其余均为未知蛋白,有待进一步鉴定。本研究通过表达差异蛋白建立诊断模型对大肠癌预测的准确率、敏感性、特异性分别为89.19%、83.33%、84%。结论运用MALDI-TOF-MS技术分析大肠癌血浆蛋白质差异表达对大肠癌早期诊断以及发现或寻找新的肿瘤标志物可能具有一定的临床价值。 展开更多
关键词 大肠癌 蛋白质组学 血浆 maldi-tof-ms 磁珠
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MALDI-TOF-MS研究糖蛋白核糖核酸酶B的一级结构 被引量:1
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作者 蔡耘 王京兰 +1 位作者 邱丰和 钱小红 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2000年第1期24-28,共5页
本文应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱 ( MALDI- TOF- MS)测定了糖蛋白核糖核酸酶 B的平均分子量及其糖基化程度。结合蛋白酶及内切糖苷酶酶切的方法 ,确证了核糖核酸酶 B的糖基化位点及糖苷键类型 ,测定值与理论值相符。为糖蛋... 本文应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱 ( MALDI- TOF- MS)测定了糖蛋白核糖核酸酶 B的平均分子量及其糖基化程度。结合蛋白酶及内切糖苷酶酶切的方法 ,确证了核糖核酸酶 B的糖基化位点及糖苷键类型 ,测定值与理论值相符。为糖蛋白一级结构的直接质谱分析建立子快速、准确的方法。 展开更多
关键词 maldi-tof-ms 核糖核酸酶B 糖蛋白 一级结构
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