MELAS和MERRF综合征相关mtDNA突变位点检测集成芯片的建立

文中建立了一种新型的寡核苷酸芯片,用于线粒体脑肌病伴高乳酸血症和卒中样发作(Mitochondrial encephalomyopathy with lactic acidosis and stroke-like episodes,MELAS)和肌阵挛性癫痫伴发不规整红纤维(Myoclonic epilepsy with ragged red fibers,MERRF)线粒体DNA所有已知突变位点的集成检测。将31对allele位点特异性的寡核苷酸探针包被在醛基修饰的载玻片表面,以多重不对称PCR方法制备Cy5荧光标记靶基因。利用此芯片对5例MELAS患者、5例MERRF患者及20例健康对照进行筛查,结果发现,MELAS患者均为MT-T1基因A3243G突变;在MERRF患者组,MT-TK基因A8344G突变4例,T8356C突变1例;健康对照组均未发现31种相关mtDNA突变。芯片检测与DNA测序结果完全一致。结果表明,这种寡核苷酸芯片可以对MELAS和MERRF综合征已知突变位点进行同步快速检测,具有较高的灵敏度和特异性。这一模式的基因芯片经过适当改装后也可用于其他人类线粒体疾病的基因诊断。

关于线粒体脑肌病MERRF和MELAS的癫痫发作

报告线粒体脑肌病ＭＥＲＲＦ和ＭＥＬＡＳ各３例的临床特点，并结合文献探讨其癫痫发作的发病机制。提出对于青少年期癫痫应注意鉴别线粒体脑肌病ＭＥＲＲＦ和ＭＥＬＡＳ。

MERRF型和MELAS型线粒体脑肌病的临床特点及可能发病机制

目的：分析MERRF和MELAS型线粒体脑肌病的临床表现及辅助检查特点，以利明确诊断。方法：对确诊为MERRF和MELAS型线粒体脑肌病患者各6例进行回顾性研究。结果：MERRF型6例均有肌阵挛性癫痫发作，脑电图见发作性慢波，发作性棘波或棘慢波综合等典型的癫痫波型；5例有小脑性症状，头CT或MRI检查见全脑或小脑、脑干萎缩。MELAS型6例均有卒中样发作，头痛4例，头颅CT或MRI显示分布在颞、顶、枕叶的新旧不一的多发性梗死样改变，且不按血管支配区域分布。两型均有肌病伴RRF、血乳酸丙酮酸偏高及不同比例的智能损害。结论：MERRF与MELAS的临床表现多样化，有部分重叠，对两型的鉴别诊断必须与临床、神经影像学、病理相结合，有条件也可参考基因检测。其中，COX染色为本病的鉴别提供重要依据。

MERRF综合征的认识、特征及处理

按＂中国神经系统线粒体病的诊治指南＂分类,MERR F综合征归属于线粒体脑肌病的一个亚型[1],按1989年WHO糖尿病的最新分型,MERRF综合征归属于＂伴糖尿病的其它遗传综合征＂。

线粒体DNA 8344 A>G突变导致的MELAS/MERRF/Leigh重叠综合征

目的:线粒体DNA 8344 A>G(m.8344A>G)是肌阵挛性癫痫伴破碎红纤维(mitochondrial myoclonus epilepsy with ragged-red fibers,MERRF)综合征的常见致病突变,报道1例罕见的由m.8344A>G突变引起的线粒体脑肌病伴乳酸酸中毒和卒中样发作/肌阵挛性癫痫伴破碎红纤维/Leigh(mitochondrial encephalopathy,lactic acidosis and stroke-like episodes/MERRF/Leigh,MELAS/MERRF/Leigh)重叠综合征。方法:随访观察1例线粒体病患者,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)、高通量测序及Sanger测序对其线粒体基因进行分析。结果:患者男性,25岁,6岁后出现运动耐力差;10岁时因偏侧视野缺损行头颅磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)示枕叶卒中样病灶,磁共振波谱分析(magnetic resonance spectroscopy,MRS)示病灶内乳酸峰升高;后患者认知功能逐渐减退;12岁出现行走不稳、意向性震颤,以及四肢肌阵挛发作;21岁因意识障碍入院,多次行头颅MRI示双侧壳核后部、丘脑及中脑对称性异常信号且范围逐渐扩大,并出现额叶多发卒中样病灶,经改善代谢、抗癫痫和物理康复治疗后症状逐渐好转;24岁时复查MRI示双侧基底节及丘脑异常信号范围缩小,中脑病灶消退。肌肉病理活检可见破碎红纤维(ragged-red fibers,RRF)。PCR-PFLP检测患者血液DNA发现存在m.8344A>G突变,二代测序显示其突变比例为90%,且未发现其他线粒体DNA位点致病突变。患者母亲的血液亦存在低比例m.8344A>G突变。结论:报道了m.8344A>G可导致MELAS/MERRF/Leigh重叠综合征,该例患者扩展了m.8344A>G的表型谱。

具有MELAS和MERRF临床特征患者的一种新型线粒体DNA ND5突变

Background: The mitochondrial DNA gene encoding subunit 5 of complex I (ND5) has turned out to be a hot spot for mutations associated with mitochondrial encephalomyopathy with lactic acidosis and strokelike episodes (MELAS) and various overlap syndromes. Objective: To describe a novel mutation in the ND5 gene in a young man man with an overlap syndrome of MELAS and myoclonus epilepsy with ragged-red fibers. Design: Case report. Patient: A 25-year-old man had recurrent strokes, seizures, and myoclonus. His mother also had multiple strokes. A muscle biopsy specimen showed no ragged-red fibers but several strongly succinate dehydrogenasereactive blood vessels. Results: Biochemical analysis showed isolated complex I deficiency and molecular analysis revealed a novel heteroplasmic mutatio n (G13042A) in the ND5 gene. Conclusions: These data confirm that ND5 is a genet ic hot spot for overlap syndromes, including MELAS and strokelike and myoclonus epilepsy with ragged-red fibers.

Beneficiality of combined levetiracetam, clonazepam for myoclonus in MERRF requires further confirmation

To the Editor: With interest, we read the article by Su et al[1] about the antiepileptic drug (AED) treatment of 17 patients with genetically confirmed myoclonic epilepsy with ragged-red fibers (MERRF) syndrome. It was found that monotherapy with either levetiracetam (LEV), clonazepam (CZP), valproic acid (VPA).

m.10158T>C基因突变致Melas/Merrf重叠综合征1例并文献复习

目的探讨m.10158T>C基因突变临床表型与基因型的关系。方法回顾性分析1例2015年8月在浙江大学附属第二医院初次住院确诊的m.10158T>C基因突变所致线粒体脑肌病患儿的临床资料,并以"m.10158T>C"为检索词通过PubMed、中国知网、万方数据库、Google学术等数据库对国内外文献进行检索,总结m.10158T>C基因突变患儿的临床表型及其与基因型的关系。结果该患儿线粒体基因MT-ND3上发现m.10158T>C突变(异质率约为45%)的异质性变异。根据临床表现、影像学检查、血液生化诊断为Melas/Merrf重叠综合征。以"m.10158T>C"为检索词对国内外文献进行检索,共检索m.10158T>C突变致线粒体脑肌病国外文献9篇,国内文献3篇,共报道m.10158T>C突变15例(1例临床资料不详),诊断Leigh7例,其中6例发病年龄在1岁内,且婴幼儿期死亡;Melas3例,Melas/Leigh综合征3例,Melas/Leigh/Merrf1例,致Melas/Merrf重叠综合征未见报道。结论m.10158T>C基因突变临床表型高度异质性,可引起Melas/Merrf临床表型。对于具有高度怀疑线粒体疾病的病例,应行基因测定明确诊断。

线粒体DNA 8344A>G突变导致线粒体遗传病的研究进展和防治策略

线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变会导致以呼吸链受损为特征的一系列线粒体疾病,这类疾病以发病早、难治愈、母系遗传为特点。线粒体tRNA赖氨酸基因中第8344位点的突变会导致mtDNA编码蛋白的翻译减少,机体能量供应不足,导致肌阵挛性癫痫伴破碎红纤维(myoclonic epilepsy associated with ragged red fiber,MERRF)综合征,产生严重的肌阵挛、癫痫发作、共济失调等症状,另一种特征性病变是颈后及上背部多发对称性脂肪瘤病(multiple symmetric lipomatosis,MSL)。在所有致病性mtDNA突变中,m.8344A>G突变约占4%;核基因修饰和环境因素可能共同参与了m.8344A>G突变的致病过程。目前MERRF综合征缺乏特定的治疗方式。基于辅助生殖技术的胚胎植入前遗传学诊断和线粒体置换技术有望成为治疗此类线粒体遗传病的新方法,但其安全性和有效性仍需进一步验证。

13例儿童线粒体脑肌病临床特点及诊断分析

目的分析儿童线粒体脑肌病的临床特点及诊断方法,以提高认识做到早期诊断。方法回顾性分析13例线粒体脑肌病患儿的临床表现、实验室检查、基因学、神经电生理、组织病理及影像学表现。结果主要临床表现有抽搐(92.3%)、呕吐(38.4%)、头痛(38.4%)、共济失调(38.4%)、构音障碍(30.7%)、智力倒退(30.7%)、肢体无力(30.7%)、肌张力异常(30.7%)、腱反射异常(53.8%)、发作性偏瘫(23%)、心脏疾病(23%)、视觉异常(23%),诊断手段有运动疲劳试验、神经电生理、影像学、基因学、肌肉病理活检等。结论儿童线粒体脑肌病临床表现复杂多样,应结合临床表现和实验室结果进行综合分析做出早期诊断。

肌阵挛癫痫伴破碎样红纤维综合征1例并文献复习

肌阵挛癫痫伴破碎样红纤维（myoclonus epilepsy with ragged-red fibers,MERRF）综合征是线粒体病中较少见的一种类型,国内外报道较少,典型的临床表现为肌阵挛癫痫、共济失调、肌病伴破碎样红纤维病理改变,分子遗传学检查是诊断该病的可靠手段。MERRF综合征尚无根治方法,目前广泛采用的鸡尾酒疗法对本病的发展有可能起到延缓的作用,

肌阵挛癫痫合并破碎红纤维综合征的线粒体DNA突变特点

目的 探讨肌阵挛癫痫伴破碎红纤维综合征 ( MERRF)的分子遗传学特点。方法 用聚合酶链反应-限制片段长度多态性 ( PCR- RFL P)方法检测 6例 MERRF患者及其部分母系亲属的肌肉和 (或 )外周血细胞的mt DNA的 A8344 G点突变 ,并进行突变型 mt DNA的定量分析。结果 在 2例患者的肌肉和外周血细胞中检测到A8344 G点突变。但其母亲的外周血细胞中未能检测到此突变。这 2例 A8344 G阳性标本中 ,肌肉组织的突变型mt DNA的比例分别为 79.0 %和 86 .8%,而在外周血细胞中分别为 5 9.7%和 72 .9%,突变型 m t DNA的比例在肌肉组织中高于外周血细胞中。结论 在 MERRF患者不同组织中检测到 mt DNA A8344 G点突变 ,与国外报道一致。但国外报道 MERRF多为母系遗传 ,而我们的病例未能有此发现 ,须扩大样本量进一步分析。

肌阵挛发作 癫 共济失调

患者男性，16岁。发作性意识丧失伴肢体抽搐4年、双上肢抖动2年、加重2个月，于2013年9月4日人院。患者于4年前玩游戏时出现双眼反复眨眼，随即意识丧失、呼之不应，伴四肢抽搐、双眼上翻、面部发紫，无大小便失禁和舌咬伤，每次发作持续约2min后自行缓解。当地医院诊断为“癫痫”，

MT-TK基因m.8344A>G变异患儿的临床特征分析

目的总结携带MT-TK基因m.8344A>G变异患儿的临床特征。方法病例系列研究,回顾性收集2012年1月至2024年1月于首都医科大学附属北京儿童医院神经内科就诊的22例MT-TK基因m.8344A>G变异临床诊断线粒体病患儿的病例资料,对患儿临床表现、实验室检查、肌肉病理、基因检测及肌阵挛治疗的随访结果进行分析。采用Pearson相关分析进行相关性分析。结果22例MT-TK基因m.8344A>G变异患儿中男13例、女9例,起病年龄5.00(2.75,9.00)岁。15例为肌阵挛性癫痫伴破碎红纤维病(MERRF),3例Leigh综合征(LS),4例为LS和MERRF重叠综合征(LS-MERRF)。15例MERRF患儿均存在肌阵挛表现,其中10例为首发症状,5例在病程中出现且随病程呈进行性加重,主要以局灶性肌阵挛为主,多在精细动作或精神紧张时加重。15例MERRF中10例脑电图监测到肌阵挛发作(6例提示为肌阵挛癫痫发作,4例提示为皮层下肌阵挛);2例合并全面性肌阵挛发作,合并失神发作和发全面性癫痫发作各1例;12例存在小脑共济失调;10例存在运动不耐受;8例存在肌无力;头颅磁共振成像检查1例脑室周围白质受累、1例双侧海马受累(癫痫频繁发作继发可能性大)。3例LS均存在发育倒退,其他伴随症状包括小脑共济失调、肌无力、吞咽困难等。4例LS-MERRF临床表现均叠加MERRF和LS的症状。7例LS和LS-MERRF的头颅磁共振成像显示,6例脑干受累(均累及中脑),4例基底节区受累。22例患儿血液标本中,m.8344A>G变异比例>90%共12例,>80%~90%3例,>70%~80%4例,>60%~70%3例。血m.8344A>G变异比例与LS表型和起病年龄均相关(r=0.47、-0.50,P=0.018、0.029)。19例患儿母亲完成血液样本m.8344A>G的Sanger测序,18例存在变异,其中4例存在运动不耐受症状。13例患儿对应用抗肌阵挛的药物治疗进行了随访,2例左乙拉西坦单药治疗肌阵挛发作减少75%以上,5例2种药联用,6例联合3种药物,13例均在肌阵挛出现的2年内药物控制有效,发作次数减少50%以上,但随病情进展各种抗癫痫药物疗效较差。结论m.8344A>G变异罕见,临床以MERRF最常见,LS及LS-MERRF较少见。血液中m.8344A>G变异比例较高的患儿更易出现LS表型,肌阵挛和肌病是其所致MERRF表型的重要特征。肌阵挛表现形式多变,局灶性为主,成因复杂,其控制首选左乙拉西坦,控制不佳时,应尽早加用苯二氮?类药物。

肌阵挛癫痫伴破碎红纤维详情并文献复习

肌阵挛伴破碎红纤维(MERRF)综合征是一种罕见的线粒体肌病。其临床特征包括进行性肌阵挛癫痫、小脑性共济失调、肌病、心律失常等,其中以肌阵挛癫痫最为显著。本文所述病例起初被误诊为癫痫,后经病理学和基因检测,方才最终确诊。为丰富该病种的临床资料,提高对其了解,本文详细描述了这例MERRF综合征患者资料,反思总结了误诊经验,并对临床、诊断和遗传特征进行了回顾分析。以期增强临床医师询问细微之处病史的意识,并进一步加强对MERRF综合征的认知,增强对该病的诊断治疗水平。

线粒体DNAA8344G点突变的临床异质性表现

目的报道线粒体DNA（mtDNA）A8344G点突变的临床特点。方法对北京大学第一医院1994--2011年10例经基因检查证实存在mtDNAA8344G点突变的患者，分析其临床表现和肌肉病理改变特点。结果6例患者表现为青少年起病的肌阵挛癫痫和小脑性共济失调，符合肌阵挛癫痫伴破碎红纤维（MERRF）综合征；2例患者为婴幼儿起病的以脑干和基底节病变为主的Leigh综合征；2例患者表现为成人起病的肢带型分布的线粒体肌病。10例患者均行骨骼肌病理检查，除1例MERRF患者外，其余患者均出现破碎红纤维（RRF）。肌肉组织中mtDNAA8344G突变比例定量分析显示，Leigh综合征患者（87．2％、88．4％）〉MERRF综合征（69．0％一86．8％）〉线粒体肌病患者（67．2％、58．4％）。结论mtDNAA8344G突变导致的临床类型存在明显的异质性，患者中肌肉mtDNA突变比例与临床表型可能有一定相关性，突变比例越高，临床严重程度越重。

mtDNA8344A>G基因变异导致急性中枢性呼吸衰竭起病的线粒体病患者临床特点及分子遗传学分析

目的总结mtDNA8344A>G突变临床表型谱,探讨其临床新表型。方法回顾性分析首都儿科研究所附属儿童医院2019年4月收治的以急性中枢性呼吸衰竭起病mtDNA8344A>G突变患者一家系,对该家系先证者及其母亲进行临床资料收集、总结,并文献复习。结果该先证者为4岁男童,以快速进展的中枢性呼吸衰竭起病,持续机械辅助通气,血清乳酸水平波动于4.5~8.3 mmol/L,头颅磁共振成像可见延髓背侧至第1及第2颈椎水平脊髓线性异常信号,肌肉活组织检查(活检)病理可见不整红边纤维、破碎蓝纤维、细胞色素C氧化酶阴性肌纤维以及血管琥珀酸脱氢酶反应增强,符合线粒体肌病样病理特征;肌肉组织呼吸链酶复合物活性检测结果为线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ和复合物Ⅳ活性联合降低;外周血淋巴细胞及尿液脱落上皮细胞均检测到mtDNA8344A>G突变,血中的突变比例为91.08%,尿中突变比例92.64%。患儿母亲30岁,体形消瘦,无明显的临床症状及体征,其外周血及尿液中亦均检测到mtDNA8344A>G突变,血淋巴细胞中突变比例为77.29%,尿脱落上皮细胞中突变比例为90.13%。结论本文报道了1例以快速进展中枢性呼吸衰竭起病的患儿及其家系,基因检测发现mtDNA8344A>G突变,同时肌肉活检病理和肌肉组织呼吸链酶复合物活性检测结果均支持线粒体病诊断,通过该病例扩充了该基因的表型谱。