山柰酚对博来霉素诱导小鼠肺纤维化、MRC-5细胞胶原蛋白生成的影响

目的探讨山柰酚对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的预防作用和对MRC-5细胞胶原蛋白生成的影响。方法将C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、吡非尼酮组(100 mg/kg)、山柰酚组(20 mg/kg),每组10只。在假手术组气管内注射生理盐水,模型组气管内注射博来霉素诱导肺纤维化模型。术后第2天开始给药,连续28 d,检测小鼠呼吸功能、肺组织羟脯氨酸水平,Massson染色观察肺组织胶原活性,免疫组化法检测肺组织TGF-β1、ɑ-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达量。培养MRC-5细胞株,设置空白组、TGF-β1组和山柰酚20、40、80μmol/L组,分别干预48 h后,CCK-8检测山柰酚对MRC-5细胞抑制率,ELISA检测培养基中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原水平。结果与模型组比较,山柰酚能改善博来霉素诱导小鼠肺纤维化后的呼吸功能,减轻肺组织胶原沉积,降低肺组织羟脯氨酸水平和TGF-β1、ɑ-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达(P<005,P<001)。细胞实验表明,山柰酚能抑制TGF-β1对MRC-5细胞的增殖和Ⅰ型、Ⅲ型胶原生成(P<005,P<001)。结论山柰酚能预防博来霉素诱导小鼠肺纤维化,抑制体外MRC-5细胞株增殖、胶原生成。

BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性

目的 评价BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性。方法 将食蟹猴随机分为对照组、3针组及4针组,经后肢肌肉免疫,1.0 mL/剂。3针组及4针组均接种BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗,3针组于0 d、7 d、21 d各接种1剂,4针组于0 d、3 d、7 d、14 d各接种1剂;对照组接种市售国产同类疫苗,于0 d注射2剂、7 d及21 d各1剂。初免前(0 d)及初免后7 d、14 d、28 d、35 d、49 d、63 d后肢隐静脉采血,分离血清及外周血淋巴细胞。快速荧光灶抑制实验(Rapid Fluorescent focus Inhibition Test, RFFIT)及酶联免疫斑点检测技术(Enzyme-linked Immunospot Assay, ELISPOT)分别检测血清中抗狂犬病病毒中和抗体水平和外周血淋巴细胞中细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平。结果 食蟹猴血清中和抗体水平于免疫前均呈阴性(抗体效价<0.5 IU/mL),3针组和对照组在初免后7~28 d呈上升趋势,于28 d达最高,4针组在14 d达最高;在初免后28 d,对照组、3针组中和抗体水平显著高于4针组;初免后35 d,3针组中和抗体水平显著高于4针组,其余时间点同时间各组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。3针组及4针组外周血淋巴细胞中IL-2及IFN-γ水平在7~14 d呈上升趋势,于14 d达最高,且3针组IFN-γ水平显著高于对照组,其余时间点同时间各组间差异均无统计学意义。结论 BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)具有良好的免疫原性,具有优化狂犬病免疫接种程序的应用价值。

康复新液对转化生长因子-β1诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5纤维化模型的干预作用

为探讨康复新液对人胚肺成纤维细胞纤维化模型的干预作用,以转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5构建细胞纤维化模型,并运用CCK-8(cell counting kit-8)法检测康复新液对MRC-5细胞的毒性.以测得的最高不致死给药浓度(80倍稀释)的康复新液干预TGF-β1诱导的MRC-5细胞模型,进而通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(WB)检测细胞纤维化指标的mRNA及蛋白质表达水平变化.结果显示:10ng/mL TGF-β1可成功诱导MRC-5细胞发生纤维化,且细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、纤维连结蛋白(fibronectin,FN)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)的mRNA表达水平均显著升高;以80倍稀释的康复新液为最高不致死给药浓度,对MRC-5细胞纤维化模型进行干预,上述纤维化指标的mRNA及蛋白质表达水平均出现显著下降,与地塞米松(Dexamethasone,DXM)的干预效果相当.综上,康复新液可改善由TGF-β1诱导MRC-5细胞纤维化的表型,有望被应用于肺纤维化的治疗.

噬菌体展示技术筛选MRC-5细胞上人巨细胞病毒的结合位点

目的以人巨细胞病毒(HCMV)感染的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)为靶细胞,寻找参与HCMV识别并结合细胞的多肽区域,研究HCMV膜蛋白中哪些功能域参与细胞识别以及膜融合过程。方法以HCMV感染阳性的MRC-5细胞为液相筛选物,从随机七肽噬菌体展示库中筛选出能够与感染阳性MRC-5细胞特异性结合而与正常细胞不结合的噬菌体配体。通过ELISA分析亲和力、DNA测序、序列对比及理化性质分析多肽。结果初步发现EVNMSDS、NVSVFET和GQQPTTV3个肽段可能参与HCMV与宿主细胞的识别过程。同时通过同源比对分析还发现,这3个七肽与HCMVgB和gH蛋白存在共有序列。结论应用PHD7噬菌体随机肽库和生物信息学方法筛选出3个可能参与HCMV识别宿主细胞并进行膜融合的功能域,为进一步研究HCMV感染宿主细胞的具体机制提供新的思路以及为抗HCMV感染提供新的策略。

樟脑对MRC-5细胞p53 mRNA表达的影响

目的:检测樟脑(C10H16O)处理MRC-5细胞对p53基因mRNA表达水平的影响。方法:DMEM培养基培养MRC-5细胞,设试验组和对照组。1×105细胞/孔的细胞密度接种于6孔板,每组设三复孔,180μg.ml-1的樟脑分别作用MRC-5细胞24h和48h。MTT法测定细胞相对增殖百分率。提取细胞总RNA,逆转录得cDNA。GAPDH mRNA作为内参,p53/GAPDH mRNA为相对表达量,反转录半定量聚合酶链式反应(SQ-PCR)分析MRC-5细胞中p53表达水平,试验重复三次。结果:180μg.ml-1樟脑作用MRC-5细胞24h和48h后,细胞相对增殖百分率均高于90%。给药24h,对照组和试验组MRC-5细胞p53 mRNA表达水平分别为0.81±0.24和0.56±0.13(P>0.05)。给药48h,对照组和试验组MRC-5细胞p53 mRNA表达水平分别为0.76±0.11和1.08±0.19(P>0.05)。给药24h和48h,试验组MRC-5细胞p53 mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论:180μg.ml-1浓度的樟脑对MRC-5为安全给药浓度。给药后MRC-5细胞p53 mRNA表达水平上调有统计学意义,提示樟脑可能间接影响p53基因的表达调控。

MRC-5细胞株支持脐带血和外周血CD_(34)^+细胞增殖分化的研究

运用Ｄｅｘｔｅｒ体外细胞长期培养法，对脐带血和外周血造血干细胞进行单独培养，用ＭＲＣ－５细胞株作为基底层与之混合培养，将二者进行对照研究。结果发现外周血和脐带血不含或仅含极少数基质细胞，单独培养时造血干细胞的增殖分化受到影响；而用ＭＲＣ－５细胞株作为基底层的混合培养中，ＣＤ＋３４可以在５周～６周内持续存活，并得到增殖分化，揭示ＭＲＣ－５细胞株具有基质细胞的支持作用，为脐带血和外周血ＣＤ＋３４在体外的长期培养提供了简便可行的技术方法。

海藻多糖对H2O2诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5氧化损伤的影响及其机制

目的探讨海藻多糖对H_2O_2诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5氧化损伤的影响及机制。方法将体外培养的人胚肺成纤维细胞MRC-5随机分为空白组、H_2O_2组、海藻多糖组、海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组。空白组正常培养,H_2O_2组给予H_2O_2处理,海藻多糖组给予海藻多糖处理,海藻多糖+H_2O_2组先给予海藻多糖干预1 h、再给予H_2O_2处理,H_2O_2+海藻多糖组先给予H_2O_2干预1 h、再给予海藻多糖处理。各组H_2O_2浓度均为600μmol/L,海藻多糖浓度均为0.312 5 mg/m L。各组均于干预0、24、48、72 h时采用MTT法检测细胞增殖抑制率;处理24 h时检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)表达,采用免疫荧光法检测核转录因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达,采用RT-PCR法检测Nrf2、Kelch样ECH联合蛋白1(Keap1)、NADP(H)醌氧化还原酶1(NQO1)、血红素氧合酶1(HO-1)、CGLC mRNA表达。结果培养24、48、72 h时,H_2O_2组、海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组细胞增殖抑制率均高于空白组及海藻多糖组,海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组均低于H_2O_2组,组间比较P均<0.05。与空白组及海藻多糖组比较,H_2O_2组、海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组MDA、ROS表达增加,SOD表达降低;与H_2O_2组比较,海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组MDA、ROS表达降低,SOD表达增加,组间比较P均<0.05。与空白组及海藻多糖组比较,H_2O_2组、海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组Nrf2 mRNA和蛋白相对表达量均降低,海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组均较H_2O_2组升高,组间比较P均<0.05。与空白组及海藻多糖组比较,H_2O_2组、海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组Keap1 mRNA相对表达量均升高,NQO1、CGLC、HO-1 mRNA相对表达量均降低;与H_2O_2组比较,海藻多糖+H_2O_2组、H_2O_2+海藻多糖组Keap1 mRNA相对表达量均降低,NQO1、CGLC、HO-1 mRNA相对表达量均升高;组间比较P均<0.05。结论海藻多糖可抑制H_2O_2诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5的氧化应激损伤,上调Nrf2表达、激活Nrf2/Keap1/抗氧化反应序列元件信号通路可能是其作用机制。

黄芪多糖对过氧化氢诱导的MRC-5细胞氧化损伤的保护作用

目的研究黄芪多糖(APS)在过氧化氢(H2O2)诱导的MRC-5人胚肺成纤维细胞氧化损伤细胞模型中,对无嘌呤/无嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子1(APE/Ref-1)和硫氧还蛋白(TRX)水平的影响,分析APS在氧化损伤过程中对MRC-5细胞的保护机制。方法将培养的MRC-5细胞随机分组:空白对照组、不同浓度H2O2组、(200、400、800)mg/L APS处理组。通过H2O2作用于MRC-5细胞建立细胞氧化损伤模型,使用MTT法检测H2O2对MRC-5细胞的增殖抑制率,待H2O2作用的MRC-5细胞氧化损伤模型建立后,用最佳H2O2浓度与不同浓度的APS共同作用于MRC-5细胞,确定APS对氧化损伤MRC-5细胞的最佳作用浓度;采用免疫荧光检测8-羟脱氧鸟苷(8-OHd G)含量反映MRC-5细胞DNA氧化损伤情况;应用流式细胞术检测MRC-5细胞的凋亡;采用反转录PCR分析TRX和APE/Ref-1 mRNA的水平;Western blot法检测TRX和APE/Ref-1蛋白水平的变化。结果实验表明,H2O2孵育MRC-5细胞24 h,可诱导细胞损伤,使细胞存活力下降,且具有浓度依赖性。800μmol/L H2O2浓度时建立细胞氧化损伤模型。与H2O2引起氧化损伤的模型组相比,200 mg/L的APS明显抑制H2O2引起的APE/Ref-1、TRX蛋白表达下调,降低8-OHd G含量,抑制MRC-5细胞凋亡,细胞存活率明显升高。结论 H2O2引起MRC-5细胞氧化损伤,APS促进氧化损伤的MRC-5细胞APE/Ref-1和TRX的表达,APS减轻MRC-5细胞的氧化损伤并抑制其凋亡。

MRC-5人二倍体细胞培养OKa株水痘病毒的研究

取自美国菌种保藏中心(ATCC)的MRC-5人二倍体细胞建立工作细胞库。按生物制品《人二倍体细胞建株、检定及制备疫苗规程》要求进行全面检定,证实其不携带外源因子,无致肿瘤源性,染色体正常,在该细胞上连续传代及培养的OKa株水痘病毒,其繁殖特性甚佳,细胞病变规律,病毒滴度稳定,是用于制备疫苗的良好细胞基质。

FOXM1在高糖诱导的MRC-5细胞胶原合成中的作用

目的探讨转录因子FOXM1在高糖诱导MRC-5细胞胶原合成中的作用。方法①通过CCK8探究MRC-5细胞高糖诱导模型的最适时间和浓度:时间梯度为6、12、24、48、72 h;浓度梯度为5.5、15、30、45 mmol·L^(-1),甘露醇30 mmol·L^(-1)为高渗对照组。②检测高糖诱导对MRC-5细胞胶原合成的影响:将细胞分为正常对照组、高渗对照组(甘露醇30 mmol·L^(-1))和高糖(30 mmol·L^(-1))组,通过Western blot和qPCR法检测胶原合成相关因子(Fn、COLⅠ、COLⅢ、α-SMA、MMP9、TIMP1)和TGF-β信号通路相关因子(TGF-β1、p-Smad2/Smad2)的表达。③探讨FOXM1在高糖促进胶原合成中的作用:将细胞分为正常对照组、高渗对照组(甘露醇30 mmol·L^(-1))、高糖(30 mmol·L^(-1))组和高糖(30 mmol·L^(-1))+硫链丝菌素(1μmol)组,Western blot和qPCR法检测FOXM1和胶原合成相关因子的表达。结果甘露醇对MRC-5细胞增殖没有明显影响,30 mmol·L^(-1)高糖培养MRC-5细胞24 h时,细胞增殖比对照组明显降低;高糖培养MRC-5细胞促进COLⅠ、COLⅢ和FOXM1等因子的表达;加入硫链丝菌素后,FOXM1的表达明显被抑制,胶原合成相关因子的蛋白表达及mRNA水平较高糖组也均有下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论FOXM1是高糖诱导MRC-5细胞胶原合成增加的一个相关因子。

银染法检测短串联重复序列(STR)位点PCR产物鉴别MRC-5细胞

通过采用银染法鉴别短串联重复序列聚合酶链式反应(STR)位点的PCR产物来鉴别人二倍体细胞MRC-5株主细胞库、工作细胞库及限制代细胞。运用PCR方法对细胞库的9个STR位点(CSF1PO、TPOX、TH01、F13A01、FESFPS、vWA、D16S539、D7S820、D13S317)和性别鉴别位点Am elogen in进行扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染法显影技术,检测MRC-5主细胞库、工作细胞库及限制代细胞的遗传标记。与ATCC公布的MRC-5的荧光STR图谱的8个STR位点和Am elogen in位点相比,MRC-5主细胞库、工作细胞库、限制代细胞的银染STR图谱的9个STR位点和Am elogen in位点,荧光法和银染法重叠的8个位点(CSF1PO、TPOX、TH01、FESFPS、vWA、D16S539、D7S820、D13S317和Am elogen in)数据完全吻合,说明细胞鉴别试验成立。STR图谱作为细胞鉴别的方法简单、易行、准确。

冻干人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)非临床安全性研究

目的 对冻干人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)进行全身主动过敏试验、肌肉刺激性、单次给药毒性和溶血性评价,以考察其安全性。方法 本研究起止时间为2014年3月至2016年10月。按照确定的工艺和质量标准,使用人二倍体细胞MRC-5培养狂犬病固定毒株,灭活、纯化后制备冻干人用狂犬病疫苗,质量检定合格后,用于开展全面的动物毒理试验。结果 在本试验条件下,含有人血白蛋白的赋形剂组、低剂量和高剂量疫苗组均会引起豚鼠过敏症状,第14和21天激发后病死率分别为0(0/6)、0(0/6)、16.67%(1/6)和33.33%(2/6)、50.00%(3/6)、33.33%(2/6),三组病死率差异无统计学意义(P>0.05),不含人血白蛋白的赋形剂组无过敏症状;单次或多次给药均不会引起家兔肌肉刺激性反应;最高剂量50 IU/kg时,均未见明显的ICR小鼠毒性反应;疫苗不会引起红细胞溶血和凝聚。结论 动物试验表明,冻干人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)显示出良好的安全性。

不同pH值对人胚肺二倍体成纤维细胞MRC-5生长的影响

目的在不同pH值培养液中培养人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5),观察其生长情况,选出最有利于MRC-5细胞生长的pH值范围。方法采用细胞培养技术,分别在pH值为6.8,6.9,7.0,7.1,7.2,7.3,7.4,7.5,7.6的培养液中培养MRC-5细胞,通过显微技术观察细胞形态、对细胞进行计数,然后对MRC-5细胞的生长情况进行分析比较。结果在不同pH值的培养液中,MRC-5细胞的生长状况不同,细胞数量和细胞形态都有差异,当培养液的pH值为7.2-7.3时,细胞生长形态最好,细胞数量最高可达2.37×106/ml。结论研究表明,培养液的pH值为7.2-7.3时,MRC-5细胞的生长状况最佳。

IL-1β对体外培养MRC-5细胞增殖、表型转化的影响

目的探讨外源性白介素-1β(IL-1β)对体外培养的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)表型转化的影响。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5),以不同浓度IL-1β(0、0.1、1、5、10ng/ml)刺激48h和同一浓度(10ng/ml)IL-1β刺激不同时间(0、24、48、72h);采用CCK-8法检测细胞增殖情况,半定量反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)、Western blot检测细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA和蛋白水平。结果 IL-1β以浓度和时间依赖性方式调节MRC-5细胞α-SMA mRNA和蛋白表达。结论 IL-1β可能通过促进肺成纤维细胞增殖和肺成纤维细胞-肌成纤维细胞的细胞表型转化,促进气道炎症后的重塑进程。

CO2分压对贴壁细胞MRC-5连续传代培养的影响

研究培养过程中CO2的使用和pH稳定性对MRC-5细胞增殖、传代培养及产毒水平的影响。采用不同浓度的NaHCO3调节细胞培养液pH值,结合CO2使用,监测细胞培养过程中pH变化情况,以及在连续传代过程中的细胞形态和增殖情况。接种水痘-带状疱疹病毒比较不同状态下细胞的产毒能力。采用碳酸氢盐缓冲体系时,无CO2分压的封闭培养组细胞培养液pH波动较大,在传代培养中观察到细胞形态较差,细胞状态下滑快;细胞连续传代至35-37代;细胞在31代平均产毒水平4.64 LgPFU/mL。有CO2分压的开放组细胞培养液pH相对平稳,在传代培养中细胞活率维持80%以上,细胞状态下滑趋势平缓,可连续传代至41代;31代细胞平均产毒水平4.83Lg PFU/mL。采用碳酸氢盐缓冲体系的细胞培养液匹配合适的CO2分压有助于细胞状态的优化提升。

胸腺基质淋巴细胞生成素促进纤维化并激活MRC-5细胞中的丝裂原活化蛋白激酶

急性肺损伤（acute lung injury,ALI）是一种可以危及生命的低氧性呼吸紊乱发生率和死亡率极高。ALI通常表现为广泛炎症和肺纤维化,伴有促炎、促纤维化因子和胶原蛋白蓄积。胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）在炎症调控过程中发挥着重要作用,但其对肺纤维化和ALI的作用尚不清楚。

微载体上MRC-5细胞扩大培养的研究

通过研究摸索微载体上人二倍体细胞mrc-5的扩大培养,以期达到规模化生产病毒性疫苗的目的。本文对mrc-5细胞在微载体上的持续放大提出了一种新的思路,即"球转球",这就是将微载体上长满的mrc-5细胞全部消化下来,制备成细胞悬液,按照合适的比例转入到新的微载体上继续扩大培养。

无血清培养MRC-5和狂犬病毒的研究

摸索适合培养mrc-5细胞和狂犬病毒培养的无血清培养基,为开发无血清培养mrc-5细胞制备狂犬疫苗奠定基础。

羊栖菜硫酸多糖通过PI3K/AKT通路抑制H2O2诱导的MRC-5细胞氧化损伤

目的阐明羊栖菜硫酸多糖(SFPSⅢ)对过氧化氢(H2O2)诱导的正常人胚肺细胞(MRC-5)氧化应激损伤的保护作用及潜在分子机制。方法通过噻唑蓝(MTT)法检测MRC-5细胞暴露于H2O2或SFPSⅢ后的活力,Hoechst染色法检测细胞凋亡形态,流式细胞仪测定细胞凋亡率,酶联免疫吸附实验测定超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活力、一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量。通过免疫印迹Western bloting检测相关蛋白水平。结果H2O2处理使MRC-5细胞活力显著降低(P<0.05),而SFPSⅢ(200~600μg/mL)干预可明显增强MRC-5细胞活力。酶联免疫法结果表明,SFPSⅢ干预抑制H2O2诱导的细胞内NO和MDA的过度分泌,并增加了H2O2诱导的细胞内SOD和GSH-Px的活力。免疫印迹结果表明,120μmol/L H2O2处理的细胞中p-AKT和p-mTOR相对蛋白表达水平下调,而p-AKT和p-mTOR相对蛋白表达水平在SFPSⅢ处理的MRC-5细胞中被逆转。结论SFPSⅢ对H2O2诱导的MRC-5细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能是激活PI3K/AKT/mTOR通路发挥其抗凋亡作用。研究结果为羊栖菜高附加值产品开发及天然、安全抗氧化功能因子的筛选提供了一定的理论依据。

干扰素受体1沉默的人二倍体MRC-5细胞系对水痘-带状疱疹病毒复制的影响

目的通过优化人二倍体细胞系MRC-5降低其干扰素(interferon,IFN)相关基因表达水平,以提高水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)在该细胞系中的复制水平,并提高VZV疫苗产量。方法通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建IFN受体1(interferon receptor 1,IFNAR1)沉默的MRC-5细胞系(MRC-5^(IFNAR1-))。采用qRT-PCR法检测MRC-5^(IFNAR1-)细胞系IFNAR1 mRNA相对表达量,同时检测VZV感染后IFN相关基因IFNβ和OAS1 mRNA相对表达量,评价基因沉默效果。通过沉默位点的基因测序进一步鉴定基因突变序列。采用qRT-PCR法和空斑形成单位(plaque formation unit,PFU)试验,对比VZV感染后168 h病毒在MRC-5和MRC-5^(IFNAR1-)细胞系中的复制情况,评价MRC-5^(IFNAR1-)细胞系对VZV复制的影响。结果MRC-5^(IFNAR1-)细胞系生长状态与MRC-5细胞一致,IFNAR1 mRNA相对表达量降低73%;VZV感染后MRC-5^(IFNAR1-)细胞系中IFN相关基因IFNβ和OAS1 mRNA相对表达量比MRC-5细胞分别降低了61%和90%;VZV感染后168 h,病毒DNA复制水平增加5.7倍,病毒滴度增加4倍。结论成功建立了MRC-5^(IFNAR1-)细胞系,可作为增加基于人二倍体细胞疫苗产量的潜在方案,为扩大VZV疫苗生产提供了参考。