基于MTT比色和响应面法优化侧孢短芽孢杆菌最大活菌数培养条件

目的:探索获得侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporus)最大活菌数的最佳培养基成分及培养条件。方法:在建立MTT比色法与平板计数法的相关回归方程基础上,对获得最大活菌数的侧孢短芽孢杆菌最适培养基成分(碳源、氮源、无机盐)和培养条件(初始pH、温度、接种量、磷酸二氢钾)进行优化。结果:MTT比色法与平板计数法对活菌数测定结果表现出显著的线性关联(R^(2)>0.999);麦芽糖、氯化钙、初始pH、磷酸二氢钾为显著影响因子,最佳发酵条件为麦芽糖8.75 g/L,氯化钙0.17 g/L,初始pH 7.07、磷酸二氢钾3.73 g/L,此条件下活菌数为8.12×10^(8)CFU/mL,与理论活菌数(8.25×10^(8)CFU/mL)无显著差异。结论:基于MTT比色和响应面法优化侧孢短芽孢杆菌最大活菌数培养条件,优化后的活菌数较优化前提高了3.02倍。

MTT,在保健与康复领域大有作为

随着现代社会生活节奏的加快和人口老龄化趋势的加剧,康复医学在医学领域占据举足轻重的地位,其重要性与日俱增。德国MTT医学运动康复体系,这一以标准化、流程化、精准可控的运动治疗为核心的康复技术体系,正是基于严谨的循证医学而建立。它凭借科学性和实效性,在康复领域得到了广泛的认可和应用,充分展示了其在提升康复效果、改善患者生活质量方面的巨大价值。体育保健与康复专业作为培养运动康复人才的重要途径,其康复评定技术课程的设置与教学方法融入MTT医学运动康复体系对于培养高质量的运动康复人才具有重要意义。

MTT法用于中药成分细胞毒性和增殖检测的干扰因素及控制措施

3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法具有操作简单和成本低廉等优点,被广泛应用于中药成分的细胞毒性和对细胞增殖影响等研究。然而,细胞的数量和密度、MTT浓度和作用时间等实验条件会干扰检测结果的准确性。另外,由于中药成分种类繁多而且化学结构复杂,可能导致吸收光谱漂移、形成近似检测波长的吸收峰及干扰细胞代谢的活性等,影响MTT检测结果的准确性。对近年的相关文献进行整理,归纳和分析了影响MTT实验的实验条件、优化措施和质量控制,归类了检测需要注意的某些中药成分,总结了替代MTT法的其他实验及MTT与其他实验的联合应用,对应用中存在的问题进行了探讨和展望,期望为MTT法在中药成分相关实验中的合理应用提供参考。

6-巯基-5-三唑并[4,3-b]-s-四嗪(MTT)的密度泛函理论研究

采用密度泛函理论(Density functional theory,DFT),在B3LYP/6-31g(d)(C,H,N,S),Ag原子采用LanL2d赝势基组水平上对甲醛(HCHO)与4-氨基-5肼基-3-巯基-1,2,4-三唑(4-amino-5-hydrazino-3-mercapto-1,2,4-triazole,AHMT)衍生化反应生的成产物6-巯基-5-三唑并[4,3-b]-s-四嗪(6-mercapto-5-triazolo[4,3-b]-s-tetrazine,MTT)及其银配合物进行结构优化,优化结果表明MTT的结构是一个近平面结构.通过对频率计算,获得MTT分子及其银配合物的拉曼光谱,对400-1800 cm^(-1)波段内的拉曼光谱特征峰进行了指认.同时讨论了MTT分子的表面静电势,分析可能发生化学反应的位点.并采用含时密度泛函理论(Time Dependent density functional theory,TDDFT)对MTT分子与Ag3配合物的激发态进行了计算分析,并使用电荷转移光谱对Ag配合物与MTT之间电荷转移关系进行了研究.该研究对MTT分子的光谱测定和电子性质提供了理论基础.

MTT-分光光度法快速测定地衣芽孢杆菌发酵液活菌数的研究

试验以地衣芽孢杆菌发酵液为研究对象,旨在建立1种快速、稳定、灵敏度高的活菌计数方法,并探讨MTT-分光光度法用于活菌计数的可行性。试验筛选显色反应终止液最适浓度、最适反应波长、最适反应时间、最适菌液浓度等,考察不同培养基、培养液保存后和其他干扰物对测定结果的影响,并对比MTT-分光光度法与稀释平板法测定发酵菌液中地衣芽孢杆菌活菌数结果的关系。结果显示,在最大吸收波长550 nm处测定OD值,反应时间为1 h,反应终止液为1.0 mol/L盐酸,MTT添加量为0.2 mL,新鲜的地衣芽孢杆菌发酵液OD值>0.04。菌液浓度为10^(8)~10^(9)CFU/mL时,OD550 nm值与稀释平板法得到的活菌数具有很好的线性对应关系,当菌液浓度<10^(8)CFU/mL时对应关系不再成立。研究表明,活菌量>10^(8)CFU/mL时,MTT-分光光度法不受地衣芽孢杆菌生长阶段的影响,可准确计量地衣芽孢杆菌发酵液活菌量相对应的吸光度,从而快速、准确地检测活菌数。

MTT训练对改善手外伤患者患侧上肢肌肉萎缩的疗效观察

目的探讨MTT训练对改善手外伤患者患侧上肢肌肉萎缩的疗效。方法选取2019年8月12日-2021年3月10日东莞市桥头医院收治的60例手外伤患者作为此次研究的研究对象。采用随机数字分组法,分为治疗组和对照组,30例/组。对照组患者采用常规康复治疗,治疗组患者在常规治疗的基础上进行MTT训练治疗。观察并记录两组患者的患侧上肢肌肉萎缩的改善情况,以一个月为周期。结果在经过治疗后,治疗组的患者患侧上肢肌肉萎缩的改善情况明显好于对照组,且患侧上肢的主动屈伸、旋转活动度,各运动方向的肌力等手功能情况评价均较好于对照组的患者(P<0.05)。此外,结果显示,治疗组的生活质量明显高于对照组,组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论MTT训练对改善手外伤患者患侧上肢的肌肉萎缩状况有着良好的效果,相关的医疗人员应该要积极将MTT训练应用到手外伤患者肌肉萎缩改善过程中。

MTT方法检测肉鸡淋巴细胞增殖条件的优化

细胞的增殖水平是衡量宿主适应性细胞免疫应答的重要指标之一。免疫系统中淋巴细胞增殖是机体对非己抗原刺激产生免疫应答的重要过程,通过淋巴细胞与抗原或丝裂原在体外培养下,其代谢和形态发生变化,来反映机体细胞的免疫状态。检测淋巴细胞反应的方法主要有MTT比色法、3H-TdR掺入法和BrdU标记法等,这些方法在小鼠和灵长类上得到很好的应用。淋巴胞转化试验中最常使用的T细胞丝裂原是植物血凝素（PHA）和刀豆蛋白A（ConA），

双琼脂MTT法用于肿瘤药敏的研究

目的:采用将集落法和MTT法结合发展而成的双琼脂MTT法进行肿瘤药敏试验,以克服MTT法中正常细胞干扰测定的缺点。方法:对小鼠肿瘤细胞及正常细胞株用两种方法的光密度、抑制率进行比较。结果:正常细胞在用双琼脂MTT法时生长不良,而肿瘤细胞则生长良好。结论:双琼脂MTT法优于MTT法。

MTT法药物敏感试验和鼻咽癌临床

目的尝试建立鼻咽癌(NPC)化疗药敏药物的体外筛选方法。方法利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外药敏试验检测48例NPC对7种临床化疗药物的敏感性,并且与临床化疗效果进行对比。结果NPC细胞对DDP、5-Fu、VCR、CTX、BLM、HHA、VM-26的敏感性存在明显个体差异,其敏感率分别为52%、56%、61%、48%、48%、35%、74%。与临床化疗结果对比结果显示:阳性符合率89.4%,阴性符合率80.0%;敏感性94.4%,特异性66.7%。结论MTT可应用于NPC临床筛选药物。

MTT比色法在细胞生物学实验教学中的实验安排与效果分析

MTT比色法是一种检测细胞增殖与细胞活力的最常用方法。但因该方法用时偏长,无法在高校基础细胞生物学实验课完成。为了解决这一难题,以小鼠腹水瘤细胞为材料,建立了"权宜之MTT比色法"。该法通过调整向细胞悬液中加入MTT溶液的时间,使实验可以在3 h内完成。结果显示,"权宜之MTT比色法"可以替代常规MTT比色法用于基础细胞生物学实验教学。

用MTT法检测羊胎盘免疫调节因子对T淋巴细胞增殖活力的影响

目的:建立MTT比色法;用MTT法观察羊胎盘免疫调节因子(GPIF)对T淋巴细胞的调节功能。方法:以正交实验设计四个因素三个水平来筛选MTT实验最佳条件,用3批次GPIF重复实验来证明MTT法的重复性;以MTT比色法为检测手段,通过体外实验及动物实验来观察GPIF对T淋巴细胞增殖活力的影响。结果:MTT法的最佳实验条件为细胞浓度10 6个/孔、刀豆蛋白浓度5 μg/ml、培养结束前4h加入MTT继续孵育,整个细胞培养过程为4 8h ;GPIF可以促进正常T淋巴细胞的增值活力(P <0 .0 1) ,显著恢复T淋巴细胞增殖活力的抑制(P <0 .0 5 )。结论:MTT法可作为检测GPIF活性的稳定方法;GPIF可促进T淋巴细胞增殖活力,增强T淋巴细胞介导的细胞免疫功能。

MTT及MTTp的微机处理

介绍了Ｆｌｅｉｓｃｈ 流量换能器、压力换能器、４８６ 微机组成用力呼气肺量图指标自动测试系统。该系统不仅能自动测试、打印用力呼气肺量图平均通过时间和部分平均通过时间，还能测试、打印常规的肺功能指标。

MTT法简介及在兽医临床上的应用展望

MTT全称为3-（4,5-Dimethylthia zol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazolium bromide,化学名为3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名为噻唑蓝[1],是一种黄色燃料。MTT法,又称MTT比色法（四甲基偶氮噻唑蓝比色法）,是二十世纪八十年代发展起来的一种快速、简便的检测细胞数量的方法。由于其具有简单、快速、可评价率高、测定结果客观等优点。

用力呼气肺量图MTT及MTTp自动测试

MTT对大小气道阻塞均见敏感性,可作为一项单独的全面的肺功能指标。MTTp则是测定小气道疾病非常敏感的指标。本文报告了用APPLE-Ⅱ机连接水封式肺量计自动测试MTT及MTTp的设计方法和打印结果,为用力呼气肺量图的MTT及MTTp测试在临床上推广普及开辟一条新途径。

MTT法在抗病毒药物筛选中的应用

目的 :采用MTT法评价清热消炎复方制剂体外抗柯萨奇病毒 (CVB3 )、呼吸道合胞病毒 (RSV)效果。方法 :待正常细胞长成单层 ,用病毒感染 ,培养一定时间后 ,根据不同病毒感染细胞出现细胞病变 (CPE)时间的不同 ,加入一定量的MTT液 ,然后测定OD570 值 ,计算病毒抑制率。结果 :MTT法较光镜CPE法更为客观 ,能以OD值变化反映药物对病毒的抑制程度 ,从而获得实验结果 ,且便于统计学处理。结论

SRB法与MTT法细胞计数应用比较

目的比较SRB(SulforhodamineB)法与MTT法细胞计数的灵敏性与稳定性。方法取4种不同类型细胞系指数生长期细胞,调整细胞密度为1×106,并按比例稀释为0.078-10×105细胞梯度。分别用SRB法与MTT法测量各细胞梯度吸光度(A),分析其与相应细胞数目的相关性。SRB法与MTT法各随机取100个A值,测量其在2、16、24h和7d后的A值,比较这两种方法的稳定性。结果SRB法与MTT法测定的A值与不同细胞系细胞数目均有极好的相关性;SRB法的测定结果几乎不随时间而变,而MTT法的测定结果受时间影响较大。结论SRB法相对于MTT法是进行大规模细胞计数与细胞生长曲线测定前途更加光明的实验方法。

MTT分析法、空斑减数法及CPE观察法评估药物体外抗病毒效果的比较与分析

目的:比较MTT分析法、空斑减数试验及细胞病变效应(CPE)观察3种方法在评估药物体外抗病毒效果分析中的优劣,为选择适宜的药物体外抗病毒效果的检测方法提供实验依据。方法:分别采用 CPE法、MTT分析法和空斑减数试验法评价大黄素于体外抗疱疹病毒 1 型、疱疹病毒 2 型和柯萨奇病毒增殖的效果,比较 3 种检测方法的结果,并分析该方法的实用性与利弊。结果:在抗疱疹病毒增殖的检测中,MTT法与空斑减数法所测结果具有显著性差异,空斑减数法比MTT法更准确,但对抗柯萨奇病毒增殖的检测,MTT法与空斑减数法无明显差异。结论:MTT法与 CPE法结合,可广泛用于对抗病毒药物的筛选,但对于疱疹病毒类非杀细胞病毒,使用空斑减数法较好。

MTT还原法检测NK细胞活性的方法学研究

对ＭＴＴ还原法用于检测ＮＫ细胞毒活性进行了方法学探讨，实验表明，在ＭＴＴ还原法中，用二甲亚砜代替异丙醇溶解存活的靶细胞，并选效靶细胞比例为１０：１，效应细胞浓度为１×１０＾６，孵育时间４ｈ，即能获得满意的结果。

SRB法和MTT法抗肿瘤药物筛选结果相关性研究

为了探索抗肿瘤药物体外筛选中磺酰罗丹明B(SRB)法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法实验结果的相互验证作用,作者以PC-3、BGC-823、Bcap-37细胞系为研究对象,利用SRB法和MTT比色法对供试化合物行体外抑制活性考察,并用SPSS12.0对两种筛选方法得到的实验结果进行差异性分析。结果表明,SRB法和MTT比色法实验结果相关性好,可以相互验证实验结果的准确性和可靠性。