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大鼠肝癌湿热证、脾虚证与野生型p53 mRNA、N-ras表达相关性研究 被引量:5
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作者 杨传标 张曼 +3 位作者 王红 廖春英 左建生 徐克成 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1738-1739,1742,共3页
目的探讨实验性肝癌湿热证、脾虚证与野生型p53 mRNA、N-ras表达的相关性,揭示中医证型分子水平的客观内涵。方法通过建立实验性大鼠肝癌湿热证和脾虚证模型,并设正常对照组,采用原位杂交和免疫组织化学法分别检测肝癌组织野生型p53 mRN... 目的探讨实验性肝癌湿热证、脾虚证与野生型p53 mRNA、N-ras表达的相关性,揭示中医证型分子水平的客观内涵。方法通过建立实验性大鼠肝癌湿热证和脾虚证模型,并设正常对照组,采用原位杂交和免疫组织化学法分别检测肝癌组织野生型p53 mRNA及N-ras蛋白表达。结果肝癌脾虚证组野生型p53 mRNA阳性表达率显著低于正常对照组(P<0.05),肝癌湿热证组与正常对照组比较,及肝癌脾虚证组与肝癌湿热证组比较差异无显著意义(P>0.05)。肝癌脾虚证组和肝癌湿热证组N-ras蛋白阳性表达水平比正常对照组均显著升高(P<0.05,P<0.01),肝癌脾虚证组与肝癌湿热证组比较差异无显著意义(P>0.05)。结论野生型p53 mRNA、N-ras异常表达与肝癌湿热证、脾虚证具有相关性,野生型p53 mRNA表达率显著降低是肝癌脾虚证的特征之一。 展开更多
关键词 肝肿瘤 湿热证 脾虚证 p53 nras
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重铬酸钾致N-ras基因DNA损伤作用研究 被引量:5
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作者 饶朝龙 衡正昌 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期297-299,共3页
目的 研究重铬酸钾对N -ras基因的DNA损伤作用,探讨其致癌作用分子机制。方法 制备N -ras基因外显子1单链探针;重铬酸钾染毒细胞提取基因组DNA ,再经RDPCR扩增后与探针杂交显色。结果 重铬酸钾染毒剂量10 0 μmol L可检测到DNA损伤... 目的 研究重铬酸钾对N -ras基因的DNA损伤作用,探讨其致癌作用分子机制。方法 制备N -ras基因外显子1单链探针;重铬酸钾染毒细胞提取基因组DNA ,再经RDPCR扩增后与探针杂交显色。结果 重铬酸钾染毒剂量10 0 μmol L可检测到DNA损伤片段杂交条带,其损伤片段长于完整的N ras基因外显子1;更高剂量(10 0 0 μmol L)未能检测出DNA损伤作用。结论 重铬酸钾可能造成N- ras基因外显子1上游序列DNA损伤,且该损伤作用可能正是其致癌作用分子机制的关键所在。 展开更多
关键词 nras基因 DnA损伤 重铬酸钾 依赖随机化末端连接物PCR
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树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras基因表达的影响 被引量:8
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作者 方志伟 于英君 《中医药学报》 CAS 2005年第3期60-61,i001,共3页
目的探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras基因表达的影响。方法运用原位杂交法、SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细包中N-rasmRNA量及N-Ras蛋白的表达量。结果树舌多糖组、猪苓多糖组中N-rasmRNA量及Ras蛋白的... 目的探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras基因表达的影响。方法运用原位杂交法、SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细包中N-rasmRNA量及N-Ras蛋白的表达量。结果树舌多糖组、猪苓多糖组中N-rasmRNA量及Ras蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P<0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论初步认为树舌多糖GF可通过降低N-rasmRNA量及Ras蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。 展开更多
关键词 树舌多糖GF HepA肿瘤细胞 nras基因
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树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras、C-myc蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 徐颖 周忠光 于英君 《中医药信息》 2008年第6期69-70,共2页
目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras、c-myc蛋白表达的影响。方法:运用SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中N-ras、C-myc蛋白的表达量。结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中N-ras、C-myc蛋白的表达量均显著... 目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤组织N-ras、c-myc蛋白表达的影响。方法:运用SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中N-ras、C-myc蛋白的表达量。结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中N-ras、C-myc蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P<0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:树舌多糖GF可通过降低N-ras、C-myc蛋白的表达,抑制He-pA瘤细胞的增殖。 展开更多
关键词 树舌多糖GF HEPA瘤细胞 C—myc基因 nras基因
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原位杂交法检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞N-ras基因mRNA表达的影响 被引量:3
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作者 李和伟 宋高臣 于英君 《中医药信息》 2008年第5期82-83,共2页
目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤细胞癌基因N-ras mRNA水平的影响。方法:应用地高辛标记探针原位杂交技术,检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞中癌基因N-ras mRNA丰度的作用。结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中mRNA表达量均显著低于模型组(P(0.01),... 目的:探明树舌多糖GF对HepA瘤细胞癌基因N-ras mRNA水平的影响。方法:应用地高辛标记探针原位杂交技术,检测树舌多糖GF对HepA瘤细胞中癌基因N-ras mRNA丰度的作用。结果:树舌多糖组、猪苓多糖组中mRNA表达量均显著低于模型组(P(0.01),树舌多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:树舌多糖GF可通过调节N-ras基因mRNA的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。 展开更多
关键词 树舌多糖GF HEPA瘤细胞 nras 原位杂交
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人肝癌细胞N-ras基因RNA干涉有效靶点的确定 被引量:1
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作者 徐凯成 所剑 +2 位作者 赵岳 王权 佟伟华 《中国实验诊断学》 2006年第1期75-77,共3页
目的寻找人肝癌细胞N-ras基因的RNA干涉有效靶点。方法利用计算机网络资源及Oligo6.0、BlastResearch等生物学软件在N-ras基因编码区寻找RNAi有效靶点,并设计用于体内转录形成以U6启动子的siRNA发夹结构的DNA。结果成功筛选出RNA干涉的... 目的寻找人肝癌细胞N-ras基因的RNA干涉有效靶点。方法利用计算机网络资源及Oligo6.0、BlastResearch等生物学软件在N-ras基因编码区寻找RNAi有效靶点,并设计用于体内转录形成以U6启动子的siRNA发夹结构的DNA。结果成功筛选出RNA干涉的有效序列14个,并设计出siRNA发夹结构的DNA。结论这种对人肝癌细胞N-ras基因的RNAi有效靶点的筛选为进一步研究奠定了理论基础。其工作的开展将在RNAi治疗、肝癌N-ras基因功能研究、新药开发等方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 RnA干涉 nras 肝癌 基因 小干扰RnA
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VEGF和N-Ras及pERK1/2在急性髓系白血病骨髓中的表达及相关性研究 被引量:4
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作者 樊华 杜宏 +5 位作者 张国君 王萍萍 王艳萍 卢香兰 李霞 金锋 《肿瘤防治杂志》 2005年第12期903-906,共4页
目的:研究VEGF、NRas和pERK1/2在急性髓系白血病(AML)中的表达及临床意义,探讨白血病发展过程中VEGF的表达与Ras/MAPK信号通路之间的相互关系。方法:应用免疫组织化学染色法检测骨髓单个核细胞VEGF、NRas和pERK1/2蛋白的水平,应用PCR/R... 目的:研究VEGF、NRas和pERK1/2在急性髓系白血病(AML)中的表达及临床意义,探讨白血病发展过程中VEGF的表达与Ras/MAPK信号通路之间的相互关系。方法:应用免疫组织化学染色法检测骨髓单个核细胞VEGF、NRas和pERK1/2蛋白的水平,应用PCR/RFLP、PCRSSCP和DNA测序方法对初诊和完全缓解(CR)AML患者进行Nras基因12位点突变分析。结果:检测AML46例,在初诊组28例AML中,VEGF、Nras和pERK1/2的表达[(52.1±0.31)%、(59.8±0.32)%和(41.9±0.38)%]显著高于20例对照组[(20.5±0.16)%、(20.9±0.12)%和(14.1±0.14)%],P=0.034、P=0.008和P=0.005。CR组18例AML患者中,VEGF、NRas和pERK1/2的表达[(18.6±0.18)%、(28.2±0.27)%和(15.1±0.19)%]与对照组差异无统计学意义,P>0.05、P=0.411和P=0.343。初诊组VEGF、Nras和pERK1/2的表达较CR组显著增高,P=0.029、P=0.018和P=0.008。初诊和CR组中未发现Nras基因12位点突变。VEGF与Nras和pERK1/2表达水平相关性分析结果表明,VEGF的表达与NRas和pERK1/2的表达具有密切相关性(VEGF与NRas:r=0.510,P=0.003;VEGF与pERK1/2:r=0.513,P=0.003;VEGF与pERK1/2:r=0.464,P=0.009)。结论:VEGF和NRas/ERK信号传导通路共同参与了AML的发展过程,NRas/ERK信号传导通路的工作状态与Nras基因突变关系不密切。 展开更多
关键词 白血病 VEGF nras ERK
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N-ras基因DNA损伤检测方法的建立
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作者 饶朝龙 张遵真 衡正昌 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期779-781,共3页
目的建立应用依赖随机化末端连接物PCR(RDPCR)技术检测N-ras基因DNA损伤的试验方法。方法采用单引物PCR技术制备N-ras基因外显子1单链探针,酶切构建DNA损伤模型,再经RDPCR扩增后与探针杂交显色。结果单引物PCR技术制备单链探针获得成功... 目的建立应用依赖随机化末端连接物PCR(RDPCR)技术检测N-ras基因DNA损伤的试验方法。方法采用单引物PCR技术制备N-ras基因外显子1单链探针,酶切构建DNA损伤模型,再经RDPCR扩增后与探针杂交显色。结果单引物PCR技术制备单链探针获得成功,目的基因在相应位置出现了清晰的杂交条带。结论RDPCR技术可定位检测到该酶切DNA损伤位点,表明该方法已成功建立,将有利于其在化学致癌作用机制研究及肿瘤预防领域的应用。 展开更多
关键词 nras基因 DnA损伤 依赖随机化末端连接物PCR
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PCR-SSCP在恶性血液病N-ras癌基因点突变检测中的应用
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作者 欧英贤 达万明 +1 位作者 刘源 吕桂玲 《西北国防医学杂志》 CAS 1998年第3期15-17,共3页
目的:检测血液系统肿瘤中N-ras癌基因点突变的活性。方法:采用PCRSSCP技术分析了28例恶性血液病Nras基因的突变活性,包括:ANLL6例,ALL12例,HD2例,NHL3例,MDS5例。结果:28例中P... 目的:检测血液系统肿瘤中N-ras癌基因点突变的活性。方法:采用PCRSSCP技术分析了28例恶性血液病Nras基因的突变活性,包括:ANLL6例,ALL12例,HD2例,NHL3例,MDS5例。结果:28例中PCRSSCP检测与正常对照,发生阳性者4例(14.6%),其中ALL1例(8.3%)、ANLL1例(16.6%)、MDS2例(40%)。4例中有2例临床缓解后持续阳性,1例为ALL患者,于骨髓移植后104d复发死亡。1例MDS患者转化为急性白血病,另2例临床缓解后3个月检测转阴,其中1例为ANLL,1例为MDS。结论:PCRSSCP方法可作为一种癌基因点突变检测手段常规应用于临床,但值得注意的是,PCRSSCP方法只能提供分析区域是否存在突变点。 展开更多
关键词 聚合酶链式反应-单股链构象多态性(PCR-SSCP) nras原癌基因 白血病.急性 恶性淋巴瘤 骨髓增生异常综合征(MDS)
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The Finding and Phylogenetic Evolution Analysis of Bovine Piroplasms in the Rasǒn Area of North Korea
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作者 JIA Li-jun ZHANG Shou-fa +3 位作者 CAO Shi-nuo QIAN Nian-chao YU Long-zheng XUAN Xue-nan 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2013年第10期1847-1854,共8页
The objective of this study was to investigate the epidemiology of bovine Piroplasms infections in the Rasǒn area of North Korea.The survey was carried out by light microscopic examination of Giemsa-stained blood sme... The objective of this study was to investigate the epidemiology of bovine Piroplasms infections in the Rasǒn area of North Korea.The survey was carried out by light microscopic examination of Giemsa-stained blood smears,PCR,and phylogenetic evolution analysis of 128 blood samples collected from the Rasǒn area.The results showed that the infection rates of the small and large parasites were about 2.5 and 1.5% on average,respectively,in all Theileria sergenti and Babesia ovatapositive blood smears by microscopic examination of blood smears.The detection rate of T.sergenti Giemsa-stained smears was 43.75%,while that with PCR was 67.97%.The detection rate of B.ovata Giemsa-stained smears was 49.21%,while that with PCR was 71.88%.The sequence and phylogenetic analysis of DNA showed 98.84% homology between the 18S rRNA gene sequences of T.sergenti isolates from North Korean and that of Yanbian state from China,indicating the closest genetic relationship between both of them.Moreover,100% homology was shown between the 18S rRNA gene sequence of B.ovata isolates from North Korea and the published sequence AY081192 of GenBank,indicating the closest genetic relationship between both of them.This survey confirmed that Ras n is the endemic area of T.sergenti and B.ovata in North Korea. 展开更多
关键词 rasǒn area of north Korea bovine Piroplasms phylogenetic trees
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RNA干扰肝癌MHCC97-H细胞N-Ras基因对放射敏感性的影响
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作者 张洪波 张红雁 +2 位作者 王宏梅 罗文广 陈龙华 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期252-255,共4页
目的探讨RNA干扰(RNAi)N—Ras基因增强人肝癌MHCC-97细胞的放射敏感性。方法通过构建干扰N-Ras基因siRNA,采用免疫组织化学法、实时荧光定量RT—PCR、Westernblot、MTT法观察RNAi前后肝癌MHCC97-H细胞RNA水平、蛋白水平、生长情况等... 目的探讨RNA干扰(RNAi)N—Ras基因增强人肝癌MHCC-97细胞的放射敏感性。方法通过构建干扰N-Ras基因siRNA,采用免疫组织化学法、实时荧光定量RT—PCR、Westernblot、MTT法观察RNAi前后肝癌MHCC97-H细胞RNA水平、蛋白水平、生长情况等变化,照射后用细胞克隆计数实验检测放射敏感性变化。结果MHCC97-H细胞株RNAi后mRNA表达抑制率为96.9%±0.159%,RNAi前后差异有统计学意义(t=40.377,P〈0.05),蛋白表达抑制率为89.8%±0.012%,RNAi前后差异有统计学意义(t=31.595,P〈0.05),免疫组织化学显示90%表达被抑制,细胞生长抑制率为21.9%,RNAi前后差异均有统计学意义(F=4.63,P〈0.05)。MHCC97-H细胞RNAi后增敏比(SER)=1.15。结论RNAi肝癌MHCC97一H细胞N—Ras基因可以达到放射增敏的目的。 展开更多
关键词 放射敏感性 nras基因 RnA干扰 肝肿瘤
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p21^(WAF1)蛋白的表达与非小细胞肺癌增殖和预后的关系 被引量:1
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作者 于卉影 朱继江 +2 位作者 李宗铉 马东初 丁晓慧 《肿瘤防治杂志》 2005年第22期1725-1728,共4页
目的:检测人非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)组织中的p21WAF1/CIP1表达水平,探讨NSCLC中p21WAF1/CIP1的表达与细胞增殖活性和预后的关系。方法:采用流式细胞术检测60例NSCLC中p21WAF1/CIP1的表达量及DNA含量;分析p21WAF1/C... 目的:检测人非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)组织中的p21WAF1/CIP1表达水平,探讨NSCLC中p21WAF1/CIP1的表达与细胞增殖活性和预后的关系。方法:采用流式细胞术检测60例NSCLC中p21WAF1/CIP1的表达量及DNA含量;分析p21WAF1/CIP1表达水平与S期细胞比例、预后的关系。结果:正常肺组织中未见p21WAF1/CIP1的表达,60例NSCLC组织中p21WAF1/CIP1阳性率为60%(36/60),p21WAF1/CIP1阳性表达者的S期细胞比例(10.87±0.69)%低于阴性表达者(13.30±0.93)%,t=3.232,P=0.001。p21WAF1/CIP1的表达与患者的术后累积生存月数和5年生存率有关,p21WAF1/CIP1阳性表达者的术后平均生存月数(40个月)明显高于阴性表达者(25个月),t=2.885,P=0.003;5年生存率(29%)也高于阴性表达者(9%),t=2.712,P=0.004。结论:p21WAF1/CIP1表达是判断NSCLC预后的一个可参考指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺/病理学 原癌基n蛋白质p21(ras) 流式细胞术 预后
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关于一个积分均值的估计
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作者 丁争尚 《商洛学院学报》 2007年第4期14-15,共2页
目的讨论单叶函数论中的一些问题.方法复变函数的几何理论.结果给出函数族Pa,n中函数P(z)的一个积分均值的估计,并得到一个推论.结论运用具有正实部的解析函数的估计式,可以进行单叶函数的某些特殊性质的讨论。
关键词 函数族Ra n 积分均值 估计
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杞菊合剂防治高血压左室肥厚机制研究 被引量:3
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作者 高鸿山 杨万勇 高焕萍 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第5期1140-1142,共3页
目的:通过观察杞菊合剂对自发性高血压大鼠(SHR)血压、左室重量与体重比(LVW/BW)、心肌组织原癌基因N-ras及c-myc mRNA表达的影响,探讨该方剂对高血压左室肥厚的作用及其机理。方法:SHR 32只,随机分成杞菊合剂组(A组,8只)、苯那普利组(B... 目的:通过观察杞菊合剂对自发性高血压大鼠(SHR)血压、左室重量与体重比(LVW/BW)、心肌组织原癌基因N-ras及c-myc mRNA表达的影响,探讨该方剂对高血压左室肥厚的作用及其机理。方法:SHR 32只,随机分成杞菊合剂组(A组,8只)、苯那普利组(B组,8只)、杞菊合剂加苯那普利组(C组,8只)、模型组(D组,8只),再取8只正常SD大鼠作为正常对照组(E组,8只),共五组。各治疗组给予相应药物剂量灌胃,正常组与模型组同时给予等量的蒸馏水灌胃,每日1次,治疗12周,每周测量血压,实验结束时收集标本,检测左室重量与体重比(LVW/BW)、心肌组织原癌基因N-ras及c-myc mRNA的表达。结果:杞菊合剂可降低SHR的血压、左室重量、心肌组织N-ras c-myc mRNA的表达(P<0.05)。以杞菊合剂加苯那普利疗效最佳,杞菊合剂在降压方面不及苯那普利,二者对左室重量及N-ras、c-myc mRNA表达的影响与苯那普利无显著性差异(P﹥0.05)。结论:杞菊合剂可有效逆转高血压左室肥厚;杞菊合剂逆转高血压左室肥厚的机制可能与其降低血压,抑制原癌基因N-ras、c-myc表达有关;杞菊合剂与苯那普利联合应用其逆转高血压左室肥厚的作用更为显著。 展开更多
关键词 杞菊合剂 苯那普利 高血压 左室肥厚 nras c—myc
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pEGFP-N1-hIL-1Ra真核表达质粒的构建及其在兔软骨细胞中的稳定表达
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作者 赵雪 叶程 《医学新知》 CAS 2009年第5期257-260,263,共5页
目的构建含绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFP—N1-hIL-1Ra,稳定转染兔软骨细胞后检测其表达。方法通过RT—PCR扩增hIL-1Ra基因,并在两端添加HindⅢ和BamHⅠ酶切位点。将pEGFP—N1载体经BamHⅠ酶切后电泳鉴定,利用定向克隆技... 目的构建含绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFP—N1-hIL-1Ra,稳定转染兔软骨细胞后检测其表达。方法通过RT—PCR扩增hIL-1Ra基因,并在两端添加HindⅢ和BamHⅠ酶切位点。将pEGFP—N1载体经BamHⅠ酶切后电泳鉴定,利用定向克隆技术将经HindⅢ和BamHⅠ双酶切后的hIL-1Ra基因片段和pEGFP-N1载体经T4连接酶进行连接。重组的pEGFP—N1-hIL-1Ra在大肠杆菌DH5α感受态细胞内扩增,经过酶切电泳鉴定和DNA测序证明质粒构建是否成功。将构建正确的pEGFP—N1/hIL-1Ra重组质粒DNA由脂质体介导转染兔软骨细胞,RT—PCR检测基因的表达,western-blot检测蛋白的表达。结果通过对重组质粒pEGFP—N1-hlL-1Ra进行酶切鉴定以及DNA序列测定分析,证明真核表达质粒pEGFP—N1-hlL-1Ra构建成功,开放阅读框架正确。稳定转染兔软骨细胞后,RT-PCR得到目的基因片段,ELISA检测到目的蛋白的表达。结论利用DNA重组技术能成功将hIL-1Ra基因克隆入pEGFP—N1载体中,构建出真核表达质粒pEGFP-N1-hIL-1Ra,并获得了稳定表达目的IL-1Ra的兔软骨细胞系,为骨关节炎的基因治疗研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 骨关节炎 pEGFP—n1-hIL-1Ra 质粒 基因治疗
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