工况排放测试用ndv值的计算方法

摩托车排气污染物测试中,工况排放的测试是非常重要的,影响因素也是最多的。在进行工况排放测试时,不仅要保证测试环境条件、油品的一致性,更要保证底盘测功机和工况排放分析仪计量有效性,同时还需要根据车辆的性能参数设置对应的换挡信息,保证所有被测车辆在同一条件下运转,保证测试的一致性。

抗NDVF蛋白单克隆抗体在鹅源新城疫病毒感染快速检测中的应用

自1997年以来,鹅源新城疫病毒(GNDV)的感染已经成为养鹅业最重要的疾病之一。本研究以抗新城疫病毒融合蛋白单克隆抗体为介导,建立了快速检测鹅源新城疫病毒感染的间接免疫荧光技术(IFA)。所建立的方法特异性强,与传染性法氏囊病病毒、马立克氏病病毒及小鹅瘟病毒等均不出现交叉反应;用100TCID50GNDV感染鸡胚成纤维细胞,结果显示在感染后18h就可以检测到GNDV。与技术要求高、操作繁琐的RT-PCR以及病毒分离鉴定相比,IFA检测鹅源新城疫病毒感染具有快速、简单、特异等优点,具有很好的应用前景。

鸭源、鸡源NDV对DF-1细胞的致病性特征

新城疫（ND）是由新城疫病毒（NDV）引起多种家禽发病的急性高度接触性疾病、为了研究鸡源和鸭源NDV体外致病特点，本研究选取鸡源GM和鸭源YC两株强毒接种于DF-1细胞，通过测定TCID50、细胞病变的程度及最大病变时细胞上清液的浓度，结果显示鸡源NDV—GM株最早于22h检测到HA阳性，先于鸭源NDV-YC株2个小时，2株病毒接种后70h左右HA均达到峰值，其中NDV-GM株HA峰值为5log2，低于NDV-YC株6log2，实验表明鸭源病毒对鸡源细胞有致病性，为研究鸭源病毒体外致病性差异研究奠定基础.

肿瘤患者ATV—NDV治疗的护理

目的:通过细致周密的护理过程尽量避免接受ATV-NDV患者发生不良反应。方法:对ATV-NDV疫苗的制备及治疗全过程采取一系列护理措施。结果:接受ATV-NDV治疗者未发现任何不良反应。结论:ATV-NDV治疗是生物治疗的一种,对术后肿瘤患者提供了难得的辅助治疗机会。其制备及治疗过程相当复杂,为保证治疗的安全有效,必须做好各阶段的护理。

新城疫病毒(NDV)HN基因真核表达重组质粒的构建

应用一对自行设计的引物 ,通过反转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)获得新城疫病毒 (NDV) Lasota株的血凝素神经氨酸酶 (HN)基因片段 ,其长度约为 1 .7kb,与已报道的 NDV-HN基因片段大小一致。再将该 HN基因片段定向插入真核表达质粒 pc DNA3中 ,经酶切和测序鉴定 ,表明构建的重组质粒含有 NDV-HN基因片段。

NDV长春株和四平株HN/F核酸疫苗的构建及表达

将新城疫病毒 (NDV)长春株和四平株 HN插入 p IRES1多克隆位点 (Eco R )中 ,构建成核酸表达疫苗 p IRc HN和 p IRs HN,然后切除 p IRc HN和 p IRs HN的新霉素基因 ,将长春株和四平株 F基因分别插入其中 ,构建成 p IRc HNF和 p IRs HNF,而后分别转染 Hela细胞。经血凝效价测定、Western blot分析 ,弱毒株构建的核酸疫苗的血凝活性比强毒株高 1个数量级 ,Hela细胞表达的 HN蛋白量以 p IRc HN最高 ,p IRs HN次之 ,p IRc HNF和 p IRs HNF较低。将重组疫苗转染 Hela细胞 ,用兔抗鸡 Ig Y进行间接免疫荧光试验 ,结果 ,在细胞膜和细胞浆中观察到了特异性的黄绿色荧光 ,证明表达产物具有特异性。

重组酵母鸡α干扰素的诱导表达及其抗MDV、NDV能力

【目的】获得鸡α干扰素重组酵母菌诱导表达的最佳诱导时间和甲醇的体积分数,并测定诱导表达产物对鸡马立克氏病毒(MDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的抑制能力。【方法】挑取2个鸡α干扰素重组酵母菌单菌落至BMGY培养基中培养,待菌液OD600为4左右时,分别转接至BMMY培养液诱导,1瓶每隔12 h补加1次体积分数0.5%甲醇,另1瓶每隔12 h补加1次体积分数1%甲醇,于24,48,72 h收集样品,备SDS-PAGE检测用。根据不同时间(24,48,72,96 h)诱导上清液表达量的差异,留用表达量最高时段的上清液,经初步纯化后,利用鸡胚成纤维细胞(CEF),分别测定重组酵母鸡α干扰素抑制MDV及NDV的能力。【结果】鸡α干扰素重组酵母菌在每隔12 h补加1次体积分数1%甲醇诱导48 h时,或每隔12 h补加1次体积分数0.5%甲醇诱导72 h时,重组酵母鸡α干扰素表达量均达到最高;且诱导上清液具有较好地抑制MDV、NDV的能力。【结论】获得了鸡α干扰素重组酵母菌小量发酵的最佳条件;获得的重组酵母鸡α干扰素对MDV和NDV有明显的抑制作用。

NDV7793体外激活的小鼠单核巨噬细胞(MΦ)对小鼠肝癌细胞的杀伤作用及其机制

目的初步研究NDV7793激活的小鼠单核巨噬细胞(MΦ)对小鼠肝癌Novikoff细胞的杀伤作用,并探讨其杀伤机制与TNF-α和TRAIL的关系。方法从腹腔分离6周龄BALB/C小鼠MΦ,用NDV7793于体外刺激小鼠MΦ,以ELISA分别测定NDV7793刺激小鼠MΦ后产生的TNF-α及TRAIL水平;NDV7793体外刺激MΦ后,与小鼠肝癌Novikoff细胞混合培养,以LDH微量释放法测定小鼠MΦ对小鼠肝癌Novikoff细胞的杀伤效应。同时设立3组实验对照组:IFN-β阳性对照组、紫外线灭活NDV(UV-NDV)对照组以及空白对照组。结果与3个对照组相比,NDV7793在体外能提高MΦ分泌TNF-α、TRAIL的水平;NDV体外刺激后的小鼠MΦ能杀伤小鼠肝癌Novikoff细胞。结论NDV7793在体外能激活小鼠MΦ,小鼠MΦ被NDV7793刺激后,对小鼠肝癌Novikoff细胞的杀伤作用增强,NDV激活后的小鼠MΦ对小鼠肝癌Novikoff细胞的杀伤机制可能与TNF-α和TRAIL有关。

应用三重聚合酶链反应同时检测NDV、IBV、MG的研究

本文建立了一种同时检测ＮＤＶ、ＩＢＶ和ＭＧ三种病原体的三重ＰＣＲ技术。根据ＮＤＶ、ＩＢＶ和ＭＧ的基因文库，设计了三对分别与ＮＤＶ、ＩＢＶ和ＭＧ某段基因序列互补的引物，用这三对引物对同一样品中的ＮＤＶ、 ＩＢＶ、 ＭＧ核酸模板进行多重 ＰＣＲ扩增，结果均同时得到了三条特异性大小与实验设计相符的３１０ ｂｐ（ＮＤＶ）、１７２０ ｂｐ（ＩＢＶ）和７３２ ｂｐ（ＭＧ）多重ＰＣＲ扩增带，而对其他６种禽病病原的ＰＣＲ扩增结果均为阴性；敏感性测定结果表明，该多重 ＰＣＲ技术能检出 １０ ｐｇ的 ＩＢＶ、１ｐｇ的 ＮＤＶ ＲＮＡ模板和 １ｐｇ的 ＭＧ ＤＮＡ模板。

4种中药成分复方抗NDV感染CEF细胞筛选效果分析

将氧化苦参碱、黄芪多糖、甘草酸和栀子苷等4种中药成分按一定比例分别配成复方1、2、3、4,并根据对鸡胚成纤维细胞(CEF)安全浓度的测定结果,分别稀释成高、中、低3种浓度,分别与新城疫病毒(NDV)加入到已培养24 h的单层CEF中,通过MTT法测定OD值,分析其对鸡NDV病毒增殖的影响。结果表明:先加中药后加病毒时,复方1、2、3的高、中、低3个浓度组和复方4的高、中浓度组,对病毒增殖有显著的抑制作用;先加病毒后加中药时,复方1的高、中、低3个浓度组,和复方2的中、低2个浓度组,以及复方3的高、中浓度组,复方4高浓度组对病毒增殖有显著的抑制作用;中药与病毒同时加入时,复方1、3、4的高浓度组,能够显著抑制病毒增殖。综合不同加药方式测试结果,4种中药复方抑制NDV的能力依次为复方1>复方3>复方2和复方4。

多重PCR同时检测鸡AIV、NDV、IBV、ILTV和MG方法的建立和临床应用

通过建立针对鸡AIV、NDV、IBV、ILTV和MG的多重PCR鉴别诊断技术,并进行了特异性、敏感性试验和临床应用。结果表明:设计的5对引物对同一样品中的RNA(AIV、NDV、IBV)和DNA(ILTV、MG)进行多重PCR扩增,均同时得到5条片段大小与设计相符的特异性片段,即268bp(AIV)、321bp(NDV)、457bp(IBV)、662bp(ILTV)和732bp(MG)。说明该多重PCR技术具有较强特异性和较高敏感性,能检测出1pg AIV、1pg NDV、10pg IBV的RNA和1pg ILTV、10pgMG的DNA。对自然感染鸡临床样品检测的结果则证明,该技术在临床诊断方面具有广阔的应用前景。

血吸附法浓缩NDV病毒及与其他几种方法的比较

用人O型红细胞吸附—释放病毒的方法纯化被感染的鸡胚尿囊液中的新城疫病毒 (NDV) ,然后分别对纯化的病毒液及弃去的上清进行血凝检测。结果表明 ,使用 1%的红细胞悬液只能吸附部分病毒 ,损失较大 ,只有将红细胞悬液的浓度增加到2 0 %时 ,才基本将病毒全部吸附住。同时还比较了差速离心、PEG沉淀、PEG包埋等方法。

6株NDV鄱阳株对肝癌细胞杀伤作用的初步研究

目的:研究从江西鄱阳湖野鸭分离的6株NDV对肝癌细胞的杀伤效应,进一步筛选NDV溶瘤毒株。方法:用MTT法研究6株NDV鄱阳株对两株传代肝癌细胞株Novikoff和HepG-2及一株正常肝细胞株HL-7702的杀伤效应。结果:6株NDV鄱阳株对肝癌细胞株Novikoff和HepG-2有显著杀伤效应,而对人正常肝细胞HL-7702无明显影响;病毒对细胞的杀伤活性与病毒作用剂量和病毒作用时间成正比;病毒在肝癌细胞中有明显复制增殖现象;Novikoff肝癌细胞对NDV敏感性强于HepG-2肝癌细胞。结论:6株NDV鄱阳株对Novikoff及HepG-2肝癌细胞产生显著的杀伤作用,而对正常肝细胞HL-7702未见明显影响。

东北地区不同宿主NDV分离株的系统发育进化分析

本研究针对我国东北地区获得高免新城疫(Newcastledisease,ND)抗体鸡群仍然发生ND的情况,对所分离的18株鸡源新城疫病毒(Newcastlediseasevirus,NDV)和1株鸽源NDV的融合蛋白(F)基因(532bp或280bp)高变区片段进行扩增、克隆和测序(GenBank序列号:AY208680-AY208698)。结果表明,各分离毒株之间核苷酸同源性为83.1%～100%。各分离株间的氨基酸同源性为85.5%～100%。系统进化树分析表明,JL-12、HLJ-3与V4株同属于基因型;HLJ-4、JL-14为基因型,其余15株均为基因型。可见目前东北地区ND的流行是由三种不同基因型毒株,老的基因型、型,新的型所引发,但以基因型为主要流行株,这与我国其他地区和世界其他国家的ND流行情况相一致。

芝芪菌质多糖对CEF的增殖和抵抗NDV感染的研究

[目的]明确芝芪菌质多糖是否是芝芪菌质提高动物免疫力的有效成分。[方法]用不同浓度的乙醇对芝芪菌质水提物进行分级沉淀,得到3种芝芪菌质多糖(GAP30、GAP60和GAP90),采用中性红染料吸收法,研究其对鸡胚成纤维细胞(CEF)增殖的影响及抵抗NDV感染的效果。[结果]GAP30、GAP60、GAP90的得率分别为0.37%、0.70%、1.04%,表明乙醇分级沉淀已将芝芪菌质中的多糖成分提取完全。GAP30、GAP60在浓度为1×10-1、1×10-2mg/ml时能显著促进CEF增殖,GAP90在浓度为1×10-3mg/ml时即能显著促进CEF增殖。GAP30、GAP60在浓度为1×10-2mg/ml时能显著抵抗NDV感染,GAP90在浓度为1×10-1、1×10-2mg/ml时能显著抵抗NDV感染。[结论]芝芪菌质多糖能不同程度地促进CEF增殖、抵抗NDV感染,以GAP90的效果最好。

NDV La Sota株、V4株F蛋白表位的预测

为进一步研究 2 种疫苗的表位,以深入探讨NDV La Sota株、V4疫苗免疫差异的根本所在。应用亲水性、可及性、抗原性、可塑性和二级结构预测等 5 种参数分别对新城疫病毒 La Sota株和 V4 株 F蛋白的 B细胞抗原表位进行了综合预测,预测到二者的 B细胞抗原表位分别有 19 个,这些表位中含有已经确定的 5 个中和表位, A1: 72aa, A2:78aa, A3: 79aa, A4: 157 aa、161 aa、170 aa、171 aa,A5:343 aa。比较发现,二者有 9 个预测的B细胞表位氨基酸序列存在差异。

NDV对小鼠H_(22)腹水瘤治疗作用的探讨

肿瘤逃避机体免疫排斥的机制之一,是肿瘤细胞存在的肿瘤相关抗原的免疫原性较弱,不足以引起宿主有效的抗肿瘤免疫反应。NDV可以改变或影响瘤细胞的免疫原性,诱发和促进机体对肿瘤的排斥反应。本文探讨了新城疫病毒(new castle disease virus,NDV)对小鼠H_(22)腹水瘤的治疗作用。对照组接种H_(22)瘤细胞后第8d死亡1只,至第16d10只小鼠全部死亡,存活率为0％,平均存活14.1d。实验组注射瘤细胞后第12d死亡2只,至23d死亡9只,1只无瘤存活,存活率为10％。死亡鼠平均存活天数为18d,比对照组延长3.9d,两组相差显著(P<0.05)。实验结果表明NDV对小鼠H_(22)腹水瘤有治疗作用,能抑制小鼠H_(22)腹水瘤的生长,可延长小鼠生存时间。NDV可作治疗肿瘤的一种新生物制剂。

NDV、KLT及其联用时小鼠H_(22)肝癌瘤组织的病理变化与TNF-α表达的研究

【目的】研究新城疫病毒(New Castle Disease Virus,NDV)、康莱特注射液(Kanglaite Injection,KLT)及NDV+KLT联用治疗肝癌肿瘤过程中,癌组织的病理变化以及肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)在肿瘤组织中的表达情况,探究TNF-α在抗肿瘤过程中的作用,为应用生物素治疗肿瘤提供一定的理论依据。【方法】建立小鼠H22肝癌肿瘤模型,将96只荷瘤小鼠随机均分成生理盐水对照组(0.8mL/只)、NDV治疗组(0.8mL/只)、KLT治疗组(0.5mL/只)及NDV+KLT联合治疗组共4组,分别在治疗后的4,8,12和16d取小鼠肿瘤组织制作2套石蜡切片,一套进行HE染色检测病理变化;另一套进行免疫组织化学SP观察TNF-α的表达情况。【结果】HE染色发现,与对照组相比,NDV组和KLT组都有明显的肿瘤生长抑制及肿瘤细胞坏死现象,特别是NDV+KLT联合治疗组的治疗效果显著;免疫组化研究结果表明,不同的治疗组TNF-α分布差异显著,其中NDV+KLT联合治疗组的阳性反应最强,其次是KLT治疗组。【结论】NDV和KLT的抗肿瘤作用与TNF-α细胞因子表达有一定的相关性,其中NDV+KLT联合治疗的抗肿瘤效果最好。

基于NDVI的云南省植被覆被变化趋势分析

选取云南省为研究区域,利用2001-2015年MODIS中国植被指数合成产品Tiff遥感图像,通过Arcgis软件对遥感图像进行分区统计,得到研究区域各年每月的植被归一化指数(NDVI)。在此基础上进行统计分析,结合当地的生长季与种植制度,分析研究区域植被指数的年际、季节及月变化的特点。结果表明,在2001-2015年,云南省植被指数有增加的趋势,表明在2001-2015年云南省植被覆盖度基本保持稳定或略有增加的趋势;2001-2015年云南省春季和冬季的NDVI整体呈增加趋势,冬季的增速大于春季,夏季NDVI整体呈减少趋势,而秋季处于平稳状态,说明云南省2001-2015年春、冬两季植被覆盖度不断增加;云南省NDVI月变化差异较为明显,与当地生长季和种植制度密切相关,说明植被指数的月变化特征主要受种植作物的影响。