Effects of L-Tetrahydropalmatine on NOSⅢ Gene Expression in Hypoxia and Cultured Porcine Cerebral Arterial Endothelial Cells during Reoxygenation

To investigate the expression of NOSⅢ mRNA and protein in cultured porcine cerebral arterial endothelial cells (CAEC) during hypoxia and reoxygenation and the effects of L-Tetrahydropalmatine (L-THP) on the gene expression of NOSⅢ in CAEC during hypoxia and reoxygenation. The cultured CAEC were divided into 5 groups: control, hypoxia, hypoxia+reoxygenation, hypoxia+L-THP and reoxygenation+L-THP groups. NOSⅢ mRNA expression was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Immunocytochemistry was used to detect the level of NOSⅢ protein. The expression of NOSⅢ mRNA and protein were increased when CAEC were exposed to hypoxia for 1 h, and significantly decreased during reoxygenation 2, 6 and 12 h after 1-h of hypoxia. L-THP from 10 -8 mol/L to 10 -3 mol/L could inhibit the up-regulation of NOSⅢ gene expression during hypoxia and down-regulation of NOSⅢ gene expression during reoxygenation.

一氧化氮合成酶Ⅲ基因多态性与阿尔茨海默病的相关性

目的 研究中国汉族人群中的一氧化氮合成酶 (nitric oxide synthase NOS)Ⅲ基因 G 894T 多态性与散发 性 阿 尔 茨 海 默 病 (Alzheim er's disease AD ) 的 相 关 性 。 方 法 采 用 聚 合 酶 链 反 应 - 限 制 性 片 段 长 度 多 态 性PCR -RFLP 法对 75例 AD 患者 68例正常对照者进行 NOSⅢ等位基因和基因型分析。结果 在 AD 组和正常对照组均可鉴别到 GG 、GT 两种基因型,其在 AD 组频率分别为 78.7%和 21.3%,在正常对照组分别为 82.4%和 17.6%,两组间频率分布差异无显著性 (P >0.05)。NOSⅢ基因型与 AD 无明显关联 (P >0.05)。在 AD 组和正常对照组中均检出两种等位基因 G 和 T,在 AD 组 G 、T 等位基因频率分别为 89.3%和 10.7%,正常对照组分别为 91.2%和 8.8%,两组间频率分布差异无显著性 ( P >0.05)。未发现 NOSⅢ等位基因与 AD 有明显关联 (P >0.05)。结论 未发现中国汉族人群中 NOSⅢ基因 G 894T 多态性与 AD 存在关联。

超氧化物歧化酶对脑动脉内皮细胞缺氧复氧时一氧化氮合酶Ⅲ表达的影响

目的 探讨在脑动脉内皮细胞缺氧复氧时超氧化物歧化酶对一氧化氮合酶Ⅲ (NOSⅢ )mRNA及蛋白表达的影响。方法 将原代培养的猪脑动脉内皮细胞 (CAEC)进行缺氧复氧 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT -PCR)和免疫细胞化学方法 (ABC法 )分别测定缺氧、复氧以及超氧化物歧化酶 (SOD)干预时 ,NOSⅢmRNA及蛋白质表达的变化。结果 ①缺氧 1h ,NOSⅢmRNA、蛋白质的表达增加 ,分别是正常对照组的 1 32、1 2 9倍 ,加用SOD干预后 ,不能抑制其表达的上调 ;②复氧 2、6、12h ,NOSⅢmRNA、蛋白的表达低于正常对照组 ,6h降至最低 ,是正常对照组的 0 6 1、0 6 9倍。用不同浓度的SOD(10 0～ 4 0 0U/mL)预处理内皮细胞缺氧 1h后复氧 6h ,SOD能抑制NOSⅢmRNA、蛋白表达的下调 ,并且呈剂量依赖性。结论 在内皮细胞复氧时SOD能抑制NOSⅢ基因表达的下调 ,缺氧时SOD不能抑制NOSⅢ基因表达的上调 ;氧自由基可能参与了复氧时NOSⅢ基因表达的下调。

左旋四氢巴马汀在脑动脉内皮细胞缺氧复氧时对一氧化氮合酶ⅢmRNA表达的影响

目的 探讨左旋四氢巴马汀 (L THP)在缺氧与复氧时对原代培养的猪脑动脉内皮细胞(CAEC)一氧化氮合酶Ⅲ (NOSⅢ )mRNA表达的影响。方法 将原代培养的猪脑动脉内皮细胞进行缺氧与复氧实验 ,用逆转录 聚合酶链式反应 (RT -PCR)方法测定缺氧、复氧、以及L THP干预时NOSⅢmRNA表达的变化。结果 (1)缺氧 1h ,NOSⅢmRNA表达上调 (P <0 0 1) ,复氧 2、 6、 12hNOSⅢmRNA表达低于正常 ,6h最低 (P <0 0 1) ,复氧 2 4h其表达恢复正常 ;(2 )加入不同浓度的L THP (10 -8～ 10 -3 mol.L-1)缺氧 1h ,NOSⅢmRNA表达较缺氧组下调以 10 -5mol·L-1浓度作用最显著 (P <0 0 5 ) ,接近正常对照组 (P <0 0 5 ) ;(3)加入不同浓度的L THP (10 -8～ 10 -3 mol·L-1)复氧 6h ,NOSⅢmRNA表达明显高于缺氧复氧 6h组 ,10 -5mol·L-1浓度作用最显著 (P <0 0 1) ,接近正常对照组 (P >0 0 5 )。结论 在脑动脉内皮细胞缺氧时L THP抑制NOSⅢmRNA表达的上调 ;在复氧时抑制NOSⅢmRNA表达的下调 。