维持性血液透析患者PDGF-AA与腹主动脉钙化关系的研究

目的 观察维持性血液透析患者(maintenance hemodialysis, MHD)血小板衍生生长因子-aa(Platelet-derived growth factor-aa, PDGF-AA)与腹主动脉钙化情况,探讨PDGF-AA与血管钙化(vascularcalcification, VC)之间的关系。方法 选取2020年7月—2021年7月在徐州医科大学附属医院治疗的MHD患者65例作为研究对象,采用腹主动脉钙化评分(abdominal aortic calcification score, AACs)分为无或轻度钙化组(33例)和中重度钙化组(32例)两组。收集患者一般临床资料及检验资料,ELISIA方法检测PDGF-AA、骨形态发生蛋白-2(Bone Morphogenetic Protein-2,BMP-2)、骨形态发生蛋白-4(Bone Morphogenetic Protein-4,BMP-4)。Spearman相关法分析、Logistic回归法分析AAC的危险因素,受试者工作特征曲线(ROC)评价PDGF-AA预测AAC的准确性。结果 不同钙化组年龄、透析龄、是否糖尿病,血清磷、PDGF-AA、BMP-2、BMP-4、甲状旁腺激素(Parathyroid hormone, PTH)、钙磷乘积存在明显差异(P<0.05)。以PDGF-AA预测患者钙化的ROC曲线分析,曲线下面积为0.772(0.658~0.886)(P<0.05)。结论 MHD患者普遍存在血管钙化,高龄、高血糖、透析时间长、PTH升高、BMP-2升高是引发维持性血液透析患者发生腹主动脉钙化的主要因素,有必要将其作为预测指标,对相关人群提前采取预防干预措施。其PDGF-AA与腹主动脉钙化的相关性呈正相关,可能为血管钙化的预防提供新的思路。

PDGF-AA对高血压血管平滑肌细胞钙信号的影响

目的 明确自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞 (SHR VSMC)增殖与血小板源生长因子 -AA(PDGF AA)、PDGF α受体表达的关系及钙信号在其中的作用。方法 在培养的血管平滑肌细胞模型中 ,采用免疫印迹 (Westernblot)、3 H TdR及3 H Leu掺入、荧光探针标记测定单细胞内钙浓度等方法 ,观察不同来源大鼠 (SHR/Wistar)VSMC ,PDGF AA、PDGF α受体和PDGF β受体表达的差异性以及在PDGF AA刺激下 ,VSMC增殖肥大反应、胞内 [Ca2 + ]i变化和钙离子阻断剂 (nimodipine)对其的影响。结果 与Wistar VSMC相比SHR VSMC中PDGF AA、PDGF α受体蛋白表达明显增加 ,而PDGF β受体蛋白表达在SHR VSMC与Wistar VSMC无明显变化。在PDGF AA刺激下 ,增殖细胞核抗原(PCNA)、3 H掺入率及胞内 [Ca2 + ]i浓度在SHR VSMC明显增强 ;钙离子阻断剂 (nimodipine)明显抑制PCNA表达及3 H掺入 ,胞内 [Ca2 + ]i浓度明显下降。结论 自发性高血压大鼠VSMCPDGF A链及其α受体的自发性增高 ,可能是导致SHR VSMC异常增殖、肥大 ,从而触发血管反应性和血管构型变化的重要原因之一 ;

PDGF-AA和PDGF-BB在大鼠矽肺组织中的表达及意义

目的研究血小板衍生生长因子-AA(PDGF-AA)和血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)在二氧化硅所致矽肺大鼠肺组织中的表达。方法40只SD大鼠随机分为模型组和对照组,每组20只,雌雄各半。模型组大鼠向气管灌注石英粉尘制作矽肺模型;正常对照组以灭菌生理盐水lml代替。45d后,观察各组大鼠肺组织的病理改变,免疫组化方法观察肺组织中PDGF-AA和PDGF-BB的蛋白表达情况。结果PDGF-AA和PDGF-BB在实验组矽肺模型肺组织中的表达量均高于在正常对照组大鼠肺组织中的表达量,且差异有统计学意义(P<0.05);两者蛋白表达量间无直线相关关系(P>0.05)。结论PDGF-AA和PDGF-BB可能参与了尘肺的发生发展。

全生物化组织工程血管SMA、PDGF-AA及MMP-2的表达

目的探讨血管平滑肌细胞的α-actin(SMA)、血小板源性生长因子-AA(PDGF-AA)及金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达情况。方法采用以酶消化为主的方法制备猪颈总动脉脱细胞支架,再种植犬胸主动脉的平滑肌细胞,培养4周,分别于2周和4周取材作形态学观察和SMA、MMP-2及PDGF-AA的免疫组化染色及图象分析,并以幼年犬和成年犬的胸主动脉作对照。结果组织工程血管培养2周和4周,α-actin的表达高于幼年犬,但明显低于成年犬;PDGF-AA表达低于幼年犬,但明显高于成年犬;MMP-2高于成年犬,培养4周时MMP-2的表达接近幼年犬。结论全生物化组织工程血管体外构建中VSMC的PDGF-AA和ECM的表达逐渐增多,SMA的表达逐渐减少,VSMC由收缩表型逐渐转变为合成表型,VSMC大量增殖,伴有新的细胞外基质产生,同时MMP-2分泌增加,促进种植细胞的迁移,重建了组织工程血管的管壁结构。

PDGF-AA在大鼠外伤性白内障模型中的表达

目的:研究大鼠单眼外伤性白内障形成过程中,双眼前、后节血小板源性生长因子同二聚体A亚型(PDGF-AA)及其受体(PDGFR-α)的表达。方法:以45只大鼠晶状体穿通伤建立单眼外伤性白内障动物模型,用ELISA法检测伤后不同时相双眼房水中PDGF-AA含量,用免疫组化法检测晶状体上皮细胞及葡萄膜中PDGFR-α的表达,并进行相关的统计学分析。结果:单眼晶状体穿通伤后2wk内,双眼房水中PDGF-AA含量值均成双峰样规律性变化,伤眼组含量值明显高于对侧眼组(P<0.001);伤眼组晶状体上皮及葡萄膜PDGFR-α表达为阳性,对侧眼没有PDGFR-α的表达。结论:晶状体穿通伤后PDGF-AA参与了外伤性白内障形成的病理环节。

妊娠高血压患者胎盘组织VCAM及PDGF-AA表达及其意义

目的探讨血管细胞粘附因子(VCAM)及血小板源生长因子-AA(PDGF-AA)在妊娠高血压患者胎盘组织中的表达及临床意义。方法选择82例妊娠高血压患者胎盘组织及30例正常产妇胎盘组织进行免疫组化染色,观察VCAM及PDGF-AA表达情况及其相关性。结果妊娠高血压患者胎盘组织VCAM及PDGF-AA表达阳性率及阳性强度高于正常胎盘组织,在妊娠高血压患者胎盘中,VCAM与PDGF-AA表达呈现正相关关系,不同分级妊娠高血压患者胎盘组织中,VCAM与PDGF-AA表达阳性率存在统计学意义。结论妊娠高血压患者胎盘组织中VCAM与PDGF-AA过度表达,其可能是妊娠高血压的胎盘病变及进展的机制之一。

针刺人迎穴调控RhoA/ROCK1通路改善自发性高血压大鼠血压及血管损伤的机制研究

[目的]基于RhoA/ROCK1通路探讨针刺人迎穴对自发性高血压大鼠血压及血管损伤的作用机制。[方法]11周龄雄性自发性高血压大鼠,随机分为模型组、针刺组和西药组,选取同周龄雄性Wistar大鼠作为正常组。针刺组和西药组分别给予针刺人迎穴和厄贝沙坦灌胃给药。观察大鼠血压变化情况,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和ROCK1的表达水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测内皮素-1(ET-1)和人血小板衍化生长因子-AA(PDGF-AA)的mRNA和蛋白表达水平,免疫荧光检测颈动脉组织中基质金属蛋白酶2(MMP2)和RhoA的定位及表达水平。[结果]1)与模型组比较,西药组和针刺组在治疗3周,治疗6周时的平均动脉压有降低(P<0.05)。2)与模型组比较,西药组和针刺组在治疗6周时ET-1和PDGF-AA的mRNA和蛋白的表达均降低(P<0.05)。3)与模型组比较,西药组和针刺组在治疗6周时RhoA、AngⅡ和ROCK1的蛋白表达均降低(P<0.05),针刺组在治疗6周时MMP2的蛋白表达降低(P<0.05)。4)与西药组比较,针刺组在治疗6周时AngⅡ和ROCK1的蛋白表达均降低(P<0.05)。[结论]针刺人迎穴可能通过下调颈动脉RhoA/ROCK1通路来改善自发性高血压大鼠血压及血管损伤。

大鼠深度烫伤后局部组织中PDGF mRNA表达水平

目的：研究深度烫伤后局部组织中ＰＤＧＦｍＲＮＡ表达水平及其意义。方法：应用α－ ３２ＰｄＡＴＰ标记的ＰＤＧＦ－ ＡＡ和－ ＢＢ的ｃＤＮＡ 探针和斑点杂交测定大鼠深度烫伤后不同时相局部组织中ＰＤＧＦｍＲＮＡ的表达水平。结果：烫伤后组织中ＰＤＧＦ－ ＡＡ和－ ＢＢｍＲＮＡ的表达，较之对照组都有所升高，且在烫伤早期出现高峰，尤其是－ ＢＢｍＲＮＡ表达水平在深度烫伤后期又有持续升高，且绐终高于－ ＡＡｍＲＮＡ的表达水平。结论：ＰＤＧＦ在大鼠深度烫伤后的炎症反应和修复愈合过程中起着一定的作用。

生物组织工程血管的体外构建及其生物力学特性的研究

目的:探索生物组织工程血管(TEBV)的体外构建,观察血管壁形成过程中血管平滑肌细胞的变化,检测TEBV的生物力学特性,为构建理想的临床血管替代物提供资料。方法采用酶消化法制备猪颈总动脉脱细胞支架,再种植犬胸主动脉的平滑肌细胞,体外培养4周,分别于2周和4周取材作形态结构观察和平滑肌肌动蛋白-α(SMA)、金属蛋白酶-2(MMP-2)及血小板衍生生长因子-AA(PDGF-AA)的免疫组化染色并作图象分析。将幼年犬和成年犬的胸主动脉作对照。用INSTRON1122型万能电子强力仪检测TEBV的断裂强度、应力应变关系和松弛试验。结果体外培养2周和4周,血管平滑肌细胞大量增殖并迁移至支架全层,细胞间出现桥粒、缝隙连接。TEBV培养2周和4周,SMA的表达高于幼年犬,但明显低于成年犬;PDGF-AA的表达低于幼年犬,但明显高于成年犬;MMP-2高于成年犬,培养4周时MMP-2的表达接近幼年犬。TEBV的应力应变曲线呈典型的粘弹性特征,松弛应力和断裂强度均与生理血管相似。结论生物组织工程血管体外构建中平滑肌细胞分泌PDGF-AA、SMA的表达逐渐减少,平滑肌细胞由收缩表型逐渐转变为合成表型,大量增殖和分泌胶原,有细胞连接形成;同时MMP-2分泌增加,细胞发生迁移,重建TEBV的管壁结构,且血管壁的生物力学特性逐渐接近于生理血管。

酪氨酸蛋白激酶抑制剂对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖肥大的影响

为明确自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞(SHR VSMC)增殖与血小板源生长因子 AA (PDGF AA)、PDGF α受体表达的关系及酪氨酸蛋白激酶在其中的作用 ,我们在培养的血管平滑肌细胞中 ,采用免疫印迹 (Westernblot)、3 H TdR及3 H Leu掺入等方法 ,观察在不同来源大鼠(SHR/Wistar)血管平滑肌细胞中 ,PDGF AA、PDGF α受体及PDGF β受体表达的差异性 ;在PDGF AA刺激下细胞的增殖、肥大反应及酪氨酸蛋白激酶抑制剂 (genistein)对其的影响。结果表明 :在SHR VSMC中PDGF AA、PDGF α受体蛋白表达明显高于Wistar VSMC ,而PDGF β受体蛋白表达在SHR VSMC与Wistar VSMC无明显差异 ;在不同浓度PDGF AA(2、5、10、2 0 )ng/mL刺激下 ,SHR VSMC中PCNA表达呈剂量依赖性增高P <0 0 1;加入酪氨酸激酶抑制剂 ,SHR VSMC中PCNA表达呈剂量依赖性显著减少P <0 0 1。在不同浓度PDGF AA(2、5、10、2 0 )ng/mL刺激下 ,SHR VSMC中3 H Leu、3 H TdR掺入率呈剂量依赖性增强 ;加入酪氨酸激酶抑制剂SHR VSMC中 3 H Leu、3 H TdR掺入率显著减少。PDGF与其受体结合后 ,可激活受体细胞膜内的酪氨酸蛋白激酶 ,导致蛋白分子磷酸化的级联反应 ,启动MAPK、PKC等信号转导通路 。

血小板源生长因子-AA对高血压血管平滑肌细胞钙信号的影响

目的 :明确自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞 (SHR VSMC)增殖与血小板源生长因子 AA(PDGF AA)、PDGF α受体表达的关系及钙信号在其中的作用。方法 :在培养的血管平滑肌细胞模型中 ,采用免疫印迹 (Westernblot)、3 H TdR及3 H Leu掺入、荧光探针标记测定单细胞内钙浓度等方法 ,观察不同来源大鼠 (SHR/WKY)VSMC ,PDGF AA、PDGF α受体和PDGF β受体表达的差异性以及在PDGF AA刺激下 ,VSMC增殖肥大反应、胞内 [Ca2 + ]i变化和钙离子阻断剂 (nimodipine)对其的影响。 结果 :与WKY VSMC相比SHR VSMC中PDGF AA、PDGF α受体蛋白表达明显增加 ,而PDGF β受体蛋白表达在SHR VSMC与WKY VSMC无明显变化。在PDGF AA刺激下 ,增殖细胞核抗原 (PCNA)、3 H掺入率及胞内 [Ca2 + ]i浓度在SHR VSMC明显增强 ;钙离子阻断剂 (nimodipine)明显抑制PCNA表达及3 H掺入 ,胞内 [Ca2 + ]i浓度明显下降。结论 :自发性高血压大鼠VSMCPDGF A链及其α受体的自发性增高 ,可能是导致SHR VSMC异常增殖、肥大 ,从而触发血管反应性和血管构型变化的重要原因之一 ;

高脂血症肾移植患者外周血血小板衍生生长因子AA及其受体mRNA表达及辛伐他汀治疗影响

目的探讨肾移植术后高脂血症患者外周血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)及其受体PDGFαmRNA的表达及辛伐他汀治疗影响。方法根据患者肾移植术后6个月的血脂水平,从167例肾移植受者中选择60例作为研究对象,分为血脂正常组、血脂增高组,用逆转录聚合酶链反应检测各组外周血PDGF-AA及PDGFαmRNA表达水平。血脂增高组给予辛伐他汀治疗,分别于1.5个月3、个月时复查血脂水平及PDGF-AA及PDGFαmRNA表达水平。结果肾移植受者外周血PDGF-AA及PDGFαmRNA表达水平显著高于对照组,B组增高更为显著。辛伐他汀治疗1.5个月时,B组患者血脂水平及外周血PDGF-AA及PDGFαmRNA表达水平显著降低,3各月时进一步降低。结论肾移植后高脂血症患者外周血PDGF-AA及PDGFαmRNA表达水平显著增高,可能参与了移植后心血管疾病及慢性移植肾排斥的发生,辛伐他汀治疗可显著降低肾移植受者外周血PDGF-AA及PDGFαmRNA表达水平,此可能有助于减少或延缓移植后心血管疾病及慢性移植肾病的发生。

血小板衍生生长因子-AA对破骨细胞功能的影响

目的 研究血小板衍生生长因子 (PDGF) AA对破骨细胞功能的影响。 方法 利用免疫电镜技术证明PDGF α受体在破骨细胞膜得以表达 ;酶动力学法测定培养基中酸性磷酸酶与抗酒石酸酸性磷酸酶活性 ;通过荧光探针在共聚焦显微镜下观察破骨细胞内氢离子随PDGF AA浓度的变化情况 ;利用甲苯胺蓝对骨吸收陷窝染色并在图像分析仪下测定其面积和数目。 结果 破骨细胞膜有胶体金颗粒沉着 ,抗酒石酸酸性磷酸酶的活性无显著变化 (P >0 0 5 ) ,细胞内氢离子显著增加 ,但PDGF AA不能促进其释放 ;骨吸收陷窝的面积与数目均无显著变化。 结论 PDGF AA虽然能够促进氢离子在细胞内产量增加 ,但由于不能显著改变抗酒石酸酸性磷酸酶活性 ,因而不能直接促进破骨细胞的骨吸收功能。

血小板衍生生长因子-AA在骨关节炎发生发展中的作用

骨关节炎是一种累及整个关节的慢性退行性疾病,它的发生、发展与软骨、软骨下骨、滑膜等组织的破坏及代谢异常存在密切关系。血小板衍生生长因子-AA(PDGF-AA)是包括软骨细胞、成骨细胞、破骨细胞、间充质干细胞在内的多种细胞重要的促有丝分裂和迁移的生长因子,能够有效地促进创伤修复。本文就软骨、软骨下骨、滑膜在骨关节炎的发展过程中的病理变化,以及PDGF-AA对这些组织及其相关细胞的作用研究进展做一综述。目前的研究已经基本阐明骨关节炎中软骨、软骨下骨、滑膜的基本病理变化,以及PDGF-AA对骨关节炎相关组织或细胞的重要调节作用,然而其内在机制仍不明确,如何将PDGF-AA运用于临床以及如何基于细胞来诊疗骨关节炎仍值得进一步研究。