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PRC1在肝内胆管细胞癌中的表达与作用机制研究
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作者 戴龙飞 《中国医药指南》 2023年第19期75-77,81,共4页
目的探讨胞质分裂蛋白调节因子1(PRC1)对人肝内胆管细胞癌(ICC)中表达及作用,探究受PRC1影响的ICC发病机制。方法首先通过免疫组化验证PRC1在ICC中的表达情况。进而敲低ICC中PRC1的表达,通过CCK-8、Transwell、细胞凋亡检测等方法,测定P... 目的探讨胞质分裂蛋白调节因子1(PRC1)对人肝内胆管细胞癌(ICC)中表达及作用,探究受PRC1影响的ICC发病机制。方法首先通过免疫组化验证PRC1在ICC中的表达情况。进而敲低ICC中PRC1的表达,通过CCK-8、Transwell、细胞凋亡检测等方法,测定PRC1在ICC中的作用,并通过Westernblot测定相关蛋白表达,探讨其可能的机制。结果PRC1在人ICC组织中表达升高。敲低PRC1后抑制ICC细胞的增殖、迁移和侵袭,促进ICC细胞的凋亡。结论PRC1在ICC中表达升高,其可能通过抑制ICC细胞的凋亡进而影响肿瘤细胞的活性。 展开更多
关键词 胆管细胞癌 prc1 肿瘤生长 细胞凋亡
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PRC1在细胞分裂及肿瘤发生中的作用 被引量:3
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作者 施晓婷 张斌 邹晓平 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第23期3860-3863,共4页
细胞分裂是生命活动中的必要过程,在有丝分裂过程中细胞形成胞质分裂必须的重要结构—纺锤体中央区,各种细胞分裂相关的蛋白在此区域内聚集。PRC1(protein regulating cytokinesis 1)蛋白分子是一种微管相关蛋白,是纺锤体中央区形成所... 细胞分裂是生命活动中的必要过程,在有丝分裂过程中细胞形成胞质分裂必须的重要结构—纺锤体中央区,各种细胞分裂相关的蛋白在此区域内聚集。PRC1(protein regulating cytokinesis 1)蛋白分子是一种微管相关蛋白,是纺锤体中央区形成所必须的蛋白分子。PRC1蛋白通过与其他蛋白分子的相互作用,在胞质分裂过程中发挥着不可或缺的作用。在乳腺癌中PRC1的作用已有报道,同时大数据库资料还表明PRC1与其他肿瘤的关系密切。对PRC1与肿瘤相关性的研究有助于为临床治疗手段提供新的依据。 展开更多
关键词 细胞分裂 prc1 相互作用 乳腺癌
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PRC1通过激活Wnt/β-catenin途径促进胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成
3
作者 曹杰 李民 +8 位作者 蔺鹏帧 孟发财 袁云超 黄卫东 侯明山 王继军 缪星宇 师蔚 张杰 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第10期1747-1752,共6页
目的:探讨胞质分裂原蛋白调节因子-1(protein regulator of cytokinesis-1,PRC1)对胶质母细胞瘤的作用及其可能的机制。方法:RT-PCR和Western blot检测胶质母细胞瘤组织和正常脑组织中PRC1的表达;人胶质母细胞瘤细胞株U251转染siRNA-NC... 目的:探讨胞质分裂原蛋白调节因子-1(protein regulator of cytokinesis-1,PRC1)对胶质母细胞瘤的作用及其可能的机制。方法:RT-PCR和Western blot检测胶质母细胞瘤组织和正常脑组织中PRC1的表达;人胶质母细胞瘤细胞株U251转染siRNA-NC和siRNA-PRC1序列,RT-PCR检测细胞中PRC1 mRNA表达;Western blot检测细胞中PRC1、Wnt1、β-catenin和CyclinD1蛋白表达;CCK-8检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期分布;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;血管生成实验检测血管生成。结果:与正常组织相比,癌组织中PRC1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.001);与siRNA-NC组相比,siRNA-PRC1组细胞在24 h、48 h及72 h的细胞增殖能力降低(P<0.01),G_(0)/G_(1)期细胞含量升高(P<0.05),S和G_(2)/M期细胞含量降低(P<0.05),细胞迁移数和侵袭数降低(P<0.01),内皮细胞管道形成数降低(P<0.001),Wnt1、β-catenin和CyclinD1蛋白表达降低(P<0.01)。结论:PRC1在胶质母细胞瘤组织中表达上调,PRC1可能通过促进Wnt/β-catenin途径活化,促进胶质母细胞瘤细胞增殖、细胞周期进程、迁移、侵袭和血管生成。 展开更多
关键词 prc1 胶质母细胞瘤 表达 Wnt/β-catenin途径
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PRC1基因表达对膀胱癌患者临床病理特征及预后的影响 被引量:1
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作者 何恒晶 袁佳仪 +4 位作者 蒋佳志 康志明 李胜 陈松 邓巧玲 《西部医学》 2019年第2期194-197,202,共5页
目的探讨PRC1基因表达对膀胱癌患者临床病理特征及预后的影响。方法在GEO数据库中下载膀胱癌样本资料GSE13507和相关临床信息。通过非配对t检验PRC1在正常膀胱组织与膀胱癌组织中的表达差异;采用卡方检验研究PRC1基因表达与膀胱癌患者... 目的探讨PRC1基因表达对膀胱癌患者临床病理特征及预后的影响。方法在GEO数据库中下载膀胱癌样本资料GSE13507和相关临床信息。通过非配对t检验PRC1在正常膀胱组织与膀胱癌组织中的表达差异;采用卡方检验研究PRC1基因表达与膀胱癌患者临床病理特征的相关性;Log-rank法进行生存分析比较;运用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)的方法预测PRC1调控膀胱癌细胞的相关通路。结果 PRC1在膀胱癌细胞中高表达(P<0.0001);在癌细胞的肌层浸润性、T分期、N分期、肿瘤分级和有无癌症进展方面PRC1高表达的膀胱癌患者明显较低表达患者严重(P<0.05);PRC1高表达患者的总生存期和肿瘤特异性生存期显著低于低表达患者(P<0.05);GSEA的结果显示PRC1可能通过调节精子发生、E2MF信号通路和G2M检查点、未折叠蛋白反应、mTORC1信号通路、MYC-V2信号通路、MYC-V1信号通路、P13K-AKT-mTOR信号通路、有丝分裂纺锤体、胆固醇动态平衡和糖酵解等影响膀胱癌的发生发展。结论 PRC1可能作为膀胱癌的新治疗靶点或潜在的肿瘤标志物来判断患者的预后情况。 展开更多
关键词 prc1 膀胱细胞癌 病理 预后
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PRC1通过MAPK途径促进肺癌对顺铂耐药的机制研究 被引量:2
5
作者 李祥鹏 付荣 +2 位作者 李宪威 单彬 徐靳伟 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第12期1063-1067,共5页
探讨PRC1与肺癌顺铂耐药的关系及可能机制。方法采用Western blotting检测不同浓度顺铂处理不同时间下A549细胞中PRC1蛋白水平。采用慢病毒转染和PCMV-PRC1过表达质粒转染构建稳定干扰和过表达PRC1的A549细胞(shPRC1组和PCMV-PRC1组),采... 探讨PRC1与肺癌顺铂耐药的关系及可能机制。方法采用Western blotting检测不同浓度顺铂处理不同时间下A549细胞中PRC1蛋白水平。采用慢病毒转染和PCMV-PRC1过表达质粒转染构建稳定干扰和过表达PRC1的A549细胞(shPRC1组和PCMV-PRC1组),采用CCK-8法和克隆形成实验检测不同PRC1表达对顺铂杀伤作用的影响。Western blotting检测shPRC1组和PCMV-PRC1组p-ERK1/2、cleaved PARP、cleaved caspase-3蛋白水平。结果PRC1蛋白水平随着顺铂浓度升高而升高,随作用时间的延长而升高。A549/DDP细胞中PRC1的蛋白水平显著高于A549细胞(4.04±0.50 vs.0.99±0.13,P<0.01)。5μg/ml顺铂处理下,与阴性对照组比较,shPRC1组细胞存活数量下降,PCMV-PRC1组细胞存活数量升高;PCMV-PRC1组细胞克隆形成能力升高。与阴性对照组比较,PCMV-PRC1组p-ERK1/2蛋白水平升高,cleaved PARP、cleaved caspase-3蛋白水平明显降低。PCMV-PRC1组同时加入特异性的ERK抑制剂U0126后,p-ERK1/2蛋白水平降低,cleaved PARP、cleaved caspase-3蛋白水平升高。结论PRC1通过激活MAPK信号途径促进A549细胞对顺铂耐药。 展开更多
关键词 肺癌 prc1 顺铂 耐药 MAPK
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PRC1.6复合体表观遗传调控生殖谱系特异性基因的时空表达
6
作者 孙晓伟 李宏阳 +1 位作者 王健 程博 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期271-284,共14页
多梳抑制复合体1 (polycomb repressive complex 1, PRC1)是一类通过催化和识别染色质表观遗传修饰进而调控基因表达的蛋白复合体,主要参与干细胞干性维持、细胞分化以及细胞周期调控等生理过程,该复合体功能异常影响机体发育或导致癌... 多梳抑制复合体1 (polycomb repressive complex 1, PRC1)是一类通过催化和识别染色质表观遗传修饰进而调控基因表达的蛋白复合体,主要参与干细胞干性维持、细胞分化以及细胞周期调控等生理过程,该复合体功能异常影响机体发育或导致癌症发生。在哺乳动物细胞内,PRC1根据组成差异被进一步细分为6种不同的亚型PRC1.1~PRC1.6,它们在靶基因群识别、表观调控机制及生物学功能上存在明显特化。近年来研究发现,PRC1.6复合体在胚胎干细胞及体细胞中对于稳定抑制生殖谱系特异性基因的表达至关重要,同时对于生殖干细胞的干性维持以及精子发生过程中生殖谱系特异性基因的精密调控承担着重要作用。本文在介绍PRC1.6复合体的发现、各组分的分子功能及其参与的生化反应途径的基础上,系统阐述了该复合体在胚胎发育、性腺发育、精子发生等过程中对生殖谱系特异性靶基因群的时空表达发挥的重要调控功能,并探讨了PRC1.6与已知表观遗传调控网络的相互作用,以期为进一步探索生殖谱系基因表达、精子发生的表观遗传调控机制以及男性不育的致病机制提供参考。 展开更多
关键词 多梳抑制复合体1 prc1.6 转录抑制 生殖谱系特异性基因 时空表达
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基于数据挖掘分析软组织肉瘤中PRC1的表达与意义及其对肉瘤细胞生长的影响
7
作者 王文娟 田涛 +2 位作者 蒋正东 王曙逢 李徐奇 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期859-866,共8页
目的通过数据库挖掘,深入探讨细胞分裂蛋白调节因子1(PRC1)在软组织肉瘤(STS)中的表达及意义,以及沉默PRC1对脂肪肉瘤(LPS)细胞增殖和周期的影响。方法Oncomine数据库提取PRC1在STS组织和癌旁正常组织中的表达数据,随后以TCGA数据库加... 目的通过数据库挖掘,深入探讨细胞分裂蛋白调节因子1(PRC1)在软组织肉瘤(STS)中的表达及意义,以及沉默PRC1对脂肪肉瘤(LPS)细胞增殖和周期的影响。方法Oncomine数据库提取PRC1在STS组织和癌旁正常组织中的表达数据,随后以TCGA数据库加以验证;OncoLnc数据库提取PRC1的预后信息,分析PRC1表达水平与STS患者预后的关系;CCLE数据库提取PRC1在STS细胞中的表达数据;String网站获取PRC1的共表达分子并绘制PRC1的共表达网络。Western blotting和Real-time PCR检测LPS细胞株SW872及人皮下前脂肪细胞株HPA-s中PRC1的表达;应用siRNA构建沉默PRC1的SW872细胞(SW872-siPRC1),MTT和流式细胞术分别检测沉默PRC1后对SW872增殖及细胞周期的影响。结果Oncomine数据库中共11项研究涉及STS组织和癌旁正常组织中PRC1的表达,PRC1在STS中高表达(P<0.05)。TCGA数据库的验证结果与Oncomine数据库挖掘结果一致。OncoLnc数据库的预后分析结果显示,高表达PRC1的STS患者总体生存率较差(P<0.05)。CCLE数据库的结果提示,PRC1在STS细胞中呈普遍高表达(P<0.05)。String网站绘制PRC1的共表达网络,包括11个节点和55个连接。PRC1在LPS细胞SW872中呈高表达,细胞增殖曲线显示,沉默PRC1的SW872-siPRC1细胞培养48、72 h,较癌旁对照组SW872-NC细胞增殖明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与SW872-NC细胞比较,SW872-siPRC1组细胞G1期的细胞比例明显下降[(40.27±7.42)%vs.(62.01±4.89)%];G2/M期的细胞比例明显上升[(25.65±1.54)%vs.(8.17±0.96)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论PRC1在STS组织和细胞中呈现高表达,与STS预后相关;沉默PRC1基因抑制LPS SW872细胞增殖,阻滞细胞于G2/M期,可能为STS特别是LPS的临床治疗和预后研究提供潜在靶点。 展开更多
关键词 细胞分裂蛋白调节因子1 软组织肉瘤 脂肪肉瘤 数据挖掘 细胞增殖
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PRC1对于小鼠卵母细胞作用机制的初步研究
8
作者 王新洁 许钟峯 王海龙 《黑龙江动物繁殖》 2020年第2期10-14,共5页
胞质分裂调控蛋白1(PRC1)是微管结合蛋白家族中的重要成员之一,影响着细胞分裂过程的诸多生物学事件。为了探究PRC1调节减数分裂的机制,试验以小鼠卵母细胞体外成熟为研究模型,首先采用免疫荧光方法检测卵母细胞减数分裂不同时期PRC1的... 胞质分裂调控蛋白1(PRC1)是微管结合蛋白家族中的重要成员之一,影响着细胞分裂过程的诸多生物学事件。为了探究PRC1调节减数分裂的机制,试验以小鼠卵母细胞体外成熟为研究模型,首先采用免疫荧光方法检测卵母细胞减数分裂不同时期PRC1的表达,之后采用荧光定量PCR检测各个时期PRC1基因的mRNA表达量。结果表明:PRC1在小鼠卵母细胞发育的各个阶段都有表达,且与纺锤体微管处于共定位的状态;在小鼠卵母细胞体外培养到达第一次减数分裂末期(TI)时,PRC1基因的mRNA表达量最高。说明PRC1在减数分裂的过程中均有表达,且作用于减数分裂中的纺锤体微管。 展开更多
关键词 小鼠 卵母细胞 体外成熟 prc1 减数分裂 纺锤体 微管
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新型彩电遥控系统CTV222S.PRC1
9
作者 张玉香 《电子世界》 1999年第1期15-17,共3页
CTV222S.PRC1是荷兰飞利浦公司新推出的一个以微控制器PCA84C444为中心的面向中国市场的低成本彩电遥控系统。该系统采用先进的电压合成调谐选台方式,可适用于各种制式的彩色电视机,各种遥控功能可显示在电视机的屏幕上,显示功能较强,... CTV222S.PRC1是荷兰飞利浦公司新推出的一个以微控制器PCA84C444为中心的面向中国市场的低成本彩电遥控系统。该系统采用先进的电压合成调谐选台方式,可适用于各种制式的彩色电视机,各种遥控功能可显示在电视机的屏幕上,显示功能较强,可显示多种颜色的字符,字符清晰鲜艳。该系统采用了飞利浦公司独创I^2C总线控制技术,大大扩展了功能,而外围元器件少。CTV222S.PRC1为英文屏幕显示,CTV222S.PRC1.1为中文屏幕显示。 展开更多
关键词 彩电 遥控系统 CTV222S prc1
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Mitotic phosphorylation of PRC1 at Thr470 is required for PRC1 oligomerization and proper central spindle organization 被引量:3
10
作者 Chuanhai Fu Feng Yan +5 位作者 Fang Wu Quan Wu Joseph Whittaker Haiying Hu Renming Hu Xuebiao Yao 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2007年第5期449-457,共9页
During cell division, chromosome segregation is orchestrated by the interaction of spindle microtubules with the centromere. A dramatic remodeling of interpolar microtubules into an organized central spindle between t... During cell division, chromosome segregation is orchestrated by the interaction of spindle microtubules with the centromere. A dramatic remodeling of interpolar microtubules into an organized central spindle between the separating chromatids is required for the initiation and execution ofcytokinesis. Central spindle organization requires mitotic kinesins, the chromosomal passenger protein complex, and microtubule bundling protein PRC 1. PRC 1 is phosphorylated by Cdc2 at Thr470 and Thr481 during mitosis. However, the functional relevance of PRC 1 phosphorylation at Thr470 has remained elusive. Here we show that expression of the non-phosphorylatable mutant PRC 1T470A but not the phospho-mimicking mutant PRC 1^T470E causes aberrant organization of the central spindle. Immunoprecipitation experiment indicates that both PRC 1^T470A and PRC 1^T470E mutant proteins associate with wild-type PRC 1, suggesting that phosphorylation of Thr470 does not alter PRC 1 self-association. In addition, in vitro co-sedimentation experiment showed that PRC 1 binds to microtubule independent of the phosphorylation state of Thr470. Gel-filtration experiment suggested that phosphorylation of Thr470 promotes oligomerization of PRC 1. Given the fact that prevention of the Thr470 phosphorylation inhibits PRC 1 oligomerization in vitro and causes an aberrant organization of central spindle in vivo, we propose that this phosphorylation-dependent PRC 1 oligomerization ensures that central spindle assembly occurs at the appropriate time in the cell cycle. 展开更多
关键词 central spindle MICROTUBULE OLIGOMERIZATION PRC 1 PHOSPHORYLATION
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Variant PRC1 subunit RYBP/YAF2 forms condensate with RING1B and promotes H2AK119ub deposition
11
作者 Yanjiang Liu Gongcheng Hu +4 位作者 Shengxiong Yang Chenghong Yan Juehan Wang Guangjin Pan Hongjie Yao 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2024年第9期2036-2038,共3页
Dear Editor,Polycomb group(Pc G)proteins represent important roles in repressing gene expression throughout development.The Polycomb repressive complexes(PRCs)have been subdivided into two central protein complexes,PR... Dear Editor,Polycomb group(Pc G)proteins represent important roles in repressing gene expression throughout development.The Polycomb repressive complexes(PRCs)have been subdivided into two central protein complexes,PRC1 and PRC2.PRC1 catalyzes H2AK119ub and PRC2catalyzes H3K27me1/2/3(Fursova et al.,2019).PRC1 is further categorized as CBX-containing canonical PRC1(c PRC1)and RYBP/YAF2-containing variant PRC1(v PRC1)(Blackledge and Klose,2021). 展开更多
关键词 prc1 RING1 RYBP
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拟南芥PRC1蛋白功能研究进展 被引量:2
12
作者 丰景 卢江 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期702-708,共7页
多梳家族蛋白(Pc G)是一类高度保守的表观调控因子,在动植物中普遍存在,发挥着重要的生物学功能。Pc G蛋白形成多个蛋白复合物,如Polycomb repressive complex 1(PRC1)和PRC2,其作用是抑制基因的表达。PRC2组分在植物中保守并且已经在... 多梳家族蛋白(Pc G)是一类高度保守的表观调控因子,在动植物中普遍存在,发挥着重要的生物学功能。Pc G蛋白形成多个蛋白复合物,如Polycomb repressive complex 1(PRC1)和PRC2,其作用是抑制基因的表达。PRC2组分在植物中保守并且已经在拟南芥中被广泛研究。相比之下,PRC1的组成和功能在动植物之间存在较大差异。本文对拟南芥PRC1蛋白的特异性和保守性进行了综述,并强调了拟南芥PRC1组分在种子胚发育、种子萌发、茎尖干细胞命运确定和花发育中的关键作用。 展开更多
关键词 表观调控 POLYCOMB GROUP H3K27me3 PRC2 prc1
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Mitotic motor CENP-E cooperates with PRC1 in temporal control of central spindle assembly 被引量:4
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作者 Xu Liu Leilei Xu +19 位作者 Junying Li Phil Y.Yao Wanjuan Wang Hazrat Ismail Haowei Wang Bryce Liao Zhihong Yang Tarsha Ward Ke Ruan Jianchun Zhang Quan Wu Ping He Xia Ding Dongmei Wang Chuanhai Fu Zhen Dou Feng Yan Wenwen Wang Xing Liu Xuebiao Yao 《Journal of Molecular Cell Biology》 SCIE CAS CSCD 2020年第8期654-665,共12页
Error-free cell division depends on the accurate assembly of the spindle midzone from dynamic spindle microtubules to ensure chromatid segregation during metaphase-anaphase transition.However,the mechanism underlying ... Error-free cell division depends on the accurate assembly of the spindle midzone from dynamic spindle microtubules to ensure chromatid segregation during metaphase-anaphase transition.However,the mechanism underlying the key transition from the mitotic spindle to central spindle before anaphase onset remains elusive.Given the prevalence of chromosome instability phenotype in gastric tumorigenesis,we developed a strategy to model context-dependent cell division using a combination of light sheet microscope and 3D gastric organoids.Light sheet microscopic image analyses of 3D organoids showed that CENP-E inhibited cells undergoing aberrant metaphase-anaphase transition and exhibiting chromosome segregation errors during mitosis.Highresolution real-time imaging analyses of 2D cell culture revealed that CENP-E inhibited cells undergoing central spindle splitting and chromosome instability phenotype.Using biotinylated syntelin as an affinity matrix,we found that CENP-E forms a complex with PRC1 in mitotic cells.Chemical inhibition of CENP-E in metaphase by syntelin prevented accurate central spindle assembly by perturbing temporal assembly of PRC1 to the midzone.Thus,CENP-E-mediated PRC1 assembly to the central spindle constitutes a temporal switch to organize dynamic kinetochore microtubules into stable midzone arrays.These findings reveal a previously uncharacterized role of CENP-E in temporal control of central spindle assembly.Since CENP-E is absent from yeast,we reasoned that metazoans evolved an elaborate central spindle organization machinery to ensure accurate sister chromatid segregation during anaphase and cytokinesis. 展开更多
关键词 organoids.cell division central spindle CENP-E syntelin prc1
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The Polycomb Complex PRC1:Composition and Function in Plants 被引量:6
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作者 Anne Molitor Wen-Hui Shen 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2013年第5期231-238,共8页
Polycomb group(PcG) proteins are crucial epigenetic regulators conferring transcriptional memory to cell lineages.They assemble into multi-protein complexes,e.g.,Polycomb Repressive Complex 1 and 2(PRC1,PRC2),whic... Polycomb group(PcG) proteins are crucial epigenetic regulators conferring transcriptional memory to cell lineages.They assemble into multi-protein complexes,e.g.,Polycomb Repressive Complex 1 and 2(PRC1,PRC2),which are thought to act in a sequential manner to stably maintain gene repression.PRC2 induces histone H3 lysine 27(H3K27) trimethylation(H3K27me3),which is subsequently read by PRCl that further catalyzes H2A monoubiquitination(H2Aub1),creating a transcriptional silent chromatin conformation.PRC2 components are conserved in plants and have been extensively characterized in Arabidopsis.In contrast,PRCl composition and function are more diverged between animals and plants.Only more recently,PRC1 existence in plants has been documented.Here we review the aspects of plant specific and conserved PRC1 and highlight critical roles of PRC1 components in seed embryonic trait determinacy,shoot stem cell fate determinacy,and flower development in Arabidopsis. 展开更多
关键词 Epigenetics Chromatin Histone modifications Polycomb prc1 Arabidopsis development
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葡萄PRC1-like核心组分基因克隆及序列分析
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作者 丰景 卢江 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期3637-3645,共9页
克隆葡萄PRC1-like核心组分基因并预测其功能。在NCBI中分别查找与拟南芥PRC1核心组分基因同源性最高的葡萄序列,采用CTAB法提取葡萄品种‘赤霞珠’(Cabernet sauvignon)嫩叶中总RNA,运用RT-PCR技术进行克隆,得到葡萄PRC1-like核心组分... 克隆葡萄PRC1-like核心组分基因并预测其功能。在NCBI中分别查找与拟南芥PRC1核心组分基因同源性最高的葡萄序列,采用CTAB法提取葡萄品种‘赤霞珠’(Cabernet sauvignon)嫩叶中总RNA,运用RT-PCR技术进行克隆,得到葡萄PRC1-like核心组分基因的CDS序列,并通过各种在线软件对葡萄PRC1-like核心组分基因及其编码的蛋白质进行生物信息学分析。获得4个葡萄PRC1-like核心基因,这些基因CDS全长分别为1 614 bp、1 362 bp、1 293 bp和1 275 bp,分别编码568个、453个、430个和424个氨基酸,预测其蛋白质的相对分子量分别为64.17 kD、50.69 kD、47.99 kD和47.71 kD,推测这些蛋白均为亲水性不稳定蛋白,与已知拟南芥PRC1相应的核心蛋白具有高度的同源性,亚细胞定位预测结果表明这些蛋白主要存在于细胞核中。推测葡萄PRC1-like在葡萄发育中起着重要作用,这为进一步阐明葡萄PRC1-like的功能及作用机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 葡萄 prc1 基因克隆 序列分析
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非经典型多梳抑制复合物1.6的电镜结构分析
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作者 蔡单 黄晶 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1136-1145,共10页
目的·通过负染色及透射电子显微镜(电镜)技术分析非经典型多梳抑制复合物1.6(polycomb repressive complex 1.6,PRC1.6)的蛋白结构,获得人源PRC1.6七元复合物的三维轮廓信息。方法·将PRC1.6复合物中7个组分基因RNF2、PCGF6、R... 目的·通过负染色及透射电子显微镜(电镜)技术分析非经典型多梳抑制复合物1.6(polycomb repressive complex 1.6,PRC1.6)的蛋白结构,获得人源PRC1.6七元复合物的三维轮廓信息。方法·将PRC1.6复合物中7个组分基因RNF2、PCGF6、RYBP、L3MBTL2、CBX3、E2F6和TFDP1分别克隆至N端带有6×His^(-3)×Flag标签的pMLink载体中,利用聚乙烯亚胺瞬时转染的方式在悬浮培养的哺乳动物细胞Expi293F中表达PRC1.6七元复合物,依次使用anti-DYKDDDDK标签亲合树脂、分子筛Superdex 200 Increase 10/300 GL(凝胶过滤层析)和甘油密度梯度离心分离纯化PRC1.6复合物;通过液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)确认PRC1.6七元复合物组分;利用泛素化活性实验和电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)对复合物的体外泛素化活性以及与核小体结合亲和力进行验证;使用乙酸双氧铀进行样品制备并通过透射电镜观察蛋白样品,随后通过单颗粒重构技术对PRC1.6复合物的三维结构信息进行分析;利用UCSF Chimera软件将蛋白质结构数据库(Protein Data Bank,PDB)中的目的蛋白相关原子结构模型与重构获得的PRC1.6电子密度图进行拟合,预测PRC1.6七元复合物中各亚基的定位。结果·通过真核表达、亲和层析、凝胶过滤层析和甘油密度梯度离心,以及LC-MS/MS验证,获得了纯度较高、均一性较好的PRC1.6七元复合物,且泛素化活性实验和EMSA发现该复合物在体外具有泛素化活性和核小体结合亲和力。利用负染色、透射电镜和单颗粒重构技术初步解析了分辨率约为15.2Å(1Å=10^(-10) m)的PRC1.6七元复合物的三维结构,将已有RNF2、PCGF6、RYBP、L3MBTL2、CBX3和DP1部分氨基酸序列的原子模型以及E2F6的AlphaFold2预测结构与重构获得的电子密度图进行匹配,初步确认了7个亚基在PRC1.6复合物三维结构中的定位情况。结论·使用负染色和透射电镜,以及单颗粒重构技术搭建了人源PRC1.6七元复合物的三维结构模型。 展开更多
关键词 多梳抑制复合物1 表观遗传调控 组蛋白泛素化 负染色 透射电子显微镜 蛋白质三维结构
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Division of labor:different tasks for PRC1 and PRC2 in preimplantation embryos
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作者 Jun Xiong Bing Zhu 《Science Bulletin》 SCIE EI CSCD 2021年第24期2440-2441,共2页
Epigenetic regulation on gene expression is key to the decision and maintenance of cell fates during development.One of the oldest and the most explored epigenetic machinery involves the Polycomb group(PcG)proteins,wh... Epigenetic regulation on gene expression is key to the decision and maintenance of cell fates during development.One of the oldest and the most explored epigenetic machinery involves the Polycomb group(PcG)proteins,which regulate a plethora of critical biological processes,including chromatin organization,X chromosome inactivation,proliferation and differentiation,and tumorigenesis.The functions of PcG proteins are further diversified by the highly sophisticated multi-subunit complex assembly like LEGOs[1].Biochemically,PcG proteins assemble into two major complexes with unique chromatin-modifying activities:Polycomb repressive complex(PRC)1 and PRC2.PRC1 contains a core involving E3 ubiquitin ligases RING1A and RING1B,and catalyzes monoubiquitination on lysine 119 of histone H2A(H2AK119ub1),whereas PRC2 catalyzes mono-,di-,and tri-methylation on lysine 27 of histone H3(H3K27me1/2/3).Although PRC1 and PRC2 cooperate intimately in mediating transcriptional silencing,emerging evidence suggests independent roles at a subset of PcG targets.Recently,Zhu et al.[2]revealed distinct requirements for H2AK119ub1 and H3K27me3 to repress the expression of canonical PcG targets and DNA methylation-independent non-canonical imprinting genes,respectively,during early embryonic development. 展开更多
关键词 development. PRC prc1
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新型彩电遥控系统CTV222S.PRC1
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作者 张玉香 《无线电》 1998年第12期3-5,共3页
关键词 彩电 遥控系统 CTV222S.prc1
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紫杉醇放射增敏作用的分子机制 被引量:20
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作者 翁婉雯 许玉杰 +4 位作者 万建美 王宗站 丁文秀 刘敏 洪承皎 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第8期844-850,共7页
背景与目的:紫杉醇作为一种放射增敏剂,能稳定微管系统,把细胞阻断在G2/M期从而改变肿瘤细胞的放射反应性。但其分子机制目前还未完全阐明,本文旨在研究紫杉醇的放射增敏作用及其分子机制。方法:克隆形成实验分析不同浓度紫杉醇联合不... 背景与目的:紫杉醇作为一种放射增敏剂,能稳定微管系统,把细胞阻断在G2/M期从而改变肿瘤细胞的放射反应性。但其分子机制目前还未完全阐明,本文旨在研究紫杉醇的放射增敏作用及其分子机制。方法:克隆形成实验分析不同浓度紫杉醇联合不同剂量照射对KB细胞增殖抑制率的影响,多靶单击拟合模型方程测定各组细胞放射增敏比并评价增敏效果;流式细胞仪检测KB细胞经紫杉醇及射线共同作用后细胞周期分布变化;采用基因芯片技术筛选与紫杉醇放射增敏作用相关的差异表达基因;荧光定量PCR验证芯片提示细胞分裂相关基因PRC1、cyclinB2的变化。结果:紫杉醇与射线协同作用能明显抑制KB细胞增殖,20nmol/L药物协同射线作用时SERD0及SERDq分别为2.40±1.87、12.23±2.81。药物加照射处理后G1期细胞由48.32±2.40%下降为15.73±7.00%(P<0.01),G2/M期细胞由13.66±2.16%上升到52.51±5.02%(P<0.01)。基因芯片结果显示的差异变化基因中共有176条与紫杉醇放射增敏作用相关,10条在调控细胞分裂过程中起作用,其中上调表达2条,下调表达8条。荧光定量PCR证实与细胞分裂相关的PRC1和CyclinB2均下调表达,与芯片结果一致。结论:紫杉醇对KB细胞有明显的放射增敏作用,其机制可能是使细胞有丝分裂相关基因PRC1和CyclinB2表达特异性下调,导致双极纺锤体形成受阻,细胞无法完成正常的分裂,从而使细胞增殖受到抑制并最终死亡。 展开更多
关键词 放射增敏 紫杉醇 KB细胞 细胞周期 基因芯片荧光定量PCR prc1 CYCLIN B2
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植物Polycomb Group功能研究进展 被引量:2
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作者 胡博 金璐 +1 位作者 周雅智 阮颖 《湖南农业科学》 2014年第5期9-11,共3页
Polycomb Group(PcG)是一类高度保守的表观调控因子,在动植物中普遍存在,并发挥着非常重要生物学功能。研究发现PcG蛋白不仅调控生物个体正确的生长发育模式,而且与细胞增殖、分化、胚胎发育、植物形态建成和植物对环境的响应等有密切... Polycomb Group(PcG)是一类高度保守的表观调控因子,在动植物中普遍存在,并发挥着非常重要生物学功能。研究发现PcG蛋白不仅调控生物个体正确的生长发育模式,而且与细胞增殖、分化、胚胎发育、植物形态建成和植物对环境的响应等有密切关系。综述了PcG因子在植物中的组成、作用机制及其功能,并对PcG未来的研究方向进行了展望。 展开更多
关键词 表观遗传 POLYCOMB GROUP H3K27me3 PRC2 prc1
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