对氨基水杨酸钠对铅诱导体外培养PC12细胞凋亡的影响

目的探讨对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对铅诱导PC12细胞凋亡的影响。方法 PC12细胞培养至其对数生长期后,正常对照组和正常+PAS-Na 500μmol·L^(-1)组细胞于正常培养液中培养24 h后弃培养液,前者加入正常培养液、后者加入PAS-Na继续培养24 h。醋酸铅模型组及醋酸铅+PAS-Na 20,100和500μmol·L^(-1)组先与醋酸铅(终浓度10μmol·L^(-1))共培养24 h后弃培养液,再加入相应浓度PAS-Na继续培养24 h。用MTT法测定细胞存活率,试剂盒方法测定细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)含量,Hoechst33342荧光染色检测凋亡率,AnnexinⅤ/PI双染流式细胞术检测PC12细胞早期凋亡率,Western蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax和P53蛋白水平。结果与正常对照组比较,醋酸铅模型组细胞存活率降低(P<0.05),细胞凋亡形态变化典型,细胞早期凋亡率增高(P<0.05),细胞内GSH含量降低(P<0.01),P53蛋白水平升高(P<0.01),Bax/Bcl-2比值升高(P<0.01);正常+PAS-Na 500μmol·L^(-1)组上述指标未见明显变化。与醋酸铅模型组比较,醋酸铅+PAS-Na组细胞存活率增高(P<0.05),细胞凋亡率和早期凋亡率均降低(P<0.05),细胞内GSH含量增高(P<0.01),P53蛋白水平和Bax/Bcl-2比值降低(P<0.05)。结论 PAS-Na对铅致PC12细胞凋亡有一定的拮抗作用,其机制可能与PAS-Na抗脂质过氧化损伤和降低Bax/Bcl-2比值有关。

结核分枝杆菌对氨基水杨酸耐药相关基因的筛选及鉴定

目的筛选二线抗结核药物对氨基水杨酸(para-aminosalicylic acid,PAS)的耐药相关基因。方法构建H37Rv转座子文库,筛选PAS耐药克隆,随机引物PCR扩增转座子插入突变基因。在PAS耐药菌株中鉴定耐药相关基因的突变情况。结果构建了较完整的H37Rv转座子文库,并筛选出201个PAS耐药克隆,经测序找到4个可能的PAS耐药相关基因,分别是Rv1534、pknF、ndh、papA1。papA1基因检测到一个无义突变,为papA1基因339位C→T点突变。结论酰基转移酶基因papA1可能为PAS耐药相关基因。

对氨基水杨酸钠治疗慢性锰中毒机制的研究

用对氨基水杨酸钠(PAS-Na)治疗用氯化锰腹腔注射的大鼠和小鼠。结果:过量锰对动物机体的毒性表现为多个系统的异常反应,但用PAS-Na治疗后,能降低其血液和各器官(脑、肝、肾)组织中过量蓄积锰的含量;能增加其胆汁和粪中锰的排出量;能使被过量锰所影响动物的行为、免疫功能、酶活性、脑神经递质水平以及脑组织学等改变恢复正常或接近正常。揭示PAS-Na对治疗慢性锰中毒具有明显疗效。

对氨基水杨酸钠对染锰大鼠睾丸细胞内钙离子调节酶的影响

目的 探讨锰的雄性生殖毒性及对氨基水杨酸钠 (PAS Na)的治疗作用机理。方法 亚慢性染毒法给雄性大鼠染毒 (MnCl2 ·4H2 O每天 15mg/kg ,ip) 12周 ,然后 ,用PAS Na每天 12 0mg/kg ,ip ,(用药 3d ,停 4d) 3周 ,观察锰对睾丸细胞内钙离子调节酶的影响及PAS Na对其的干预作用。结果 染锰可使睾丸细胞的质膜、线粒体、微粒体内的Ca2 + Mg2 + ATPase、Ca2 + ATPase活性及巯基含量下降 ,其中以质膜和线粒体最为明显 (P <0 0 5 ) ,同时 ,质膜上Na+ K+ ATPase活性也显著受抑 (P <0 0 1)。PAS Na对上述三个亚细胞组分中受抑的Ca2 + Mg2 + ATPase、Ca2 + ATPase及下降的巯基含量均有促其恢复至正常的作用 ,使质膜上的Na+ K+ ATPase活性也有所恢复。结论 PAS

结核分枝杆菌thyA基因突变与对氨基水杨酸钠耐药关系的研究

目的了解Mtb临床分离菌株中对氨基水杨酸钠（PAS）的耐药率及PAS耐药性与thyA基因突变的关系。方法从肺结核患者的痰液或咽拭子标本中分离并鉴定Mtb96株，采用比例法、PCR的方法检测上述Mtb临床菌株对PAS的耐药性情况及其thyA基因突变情况。结果分离得到的96株Mtb中，65株为PAS敏感菌株和31株为PAS耐药菌株。以Mtb标准菌株H37Rv为对照，筛选敏感和耐药菌株中的thyA突变率分别是46．1％（30／65）、71％（22／31），突变多为单个碱基的缺失和插入突变，其中又以第19位密码子缺失C、第168位密码子缺失C为主，在耐药中所占比率分别是54．8％（17／31）、25．8％（8／31），其在敏感菌株中的比率也分别是35．5％（23／65）、12．3％（8／65）。结论thyA基因可能是PAS耐药潜在靶点，但本研究未发现其特异性突变位点。

结核分枝杆菌对氨基水杨酸耐药相关基因的筛选及鉴定

目的筛选二线抗结核药物对氨基水杨酸（para-aminosalicylic acid，PAS）耐药相关基因。方法构建H37Rv转座子文库，筛选对氨基水杨酸耐药克隆，随机引物PCR扩增转座子插入突变基因。在PAS耐药菌株中鉴定耐药相关基因的突变情况。结果构建了较完整的H37Rv转座子文库，并筛选出201个PAS耐药克隆，经测序找到4个可能的PAS耐药相关基因。papA1基因检测到一个无义突变。结论酰基转移酶基因papA1可能为PAS耐药相关基因。

含结核清和含对氨基水杨酸钠方案治疗耐多药肺结核疗效分析

目的 考核结核清抗结核的疗效并寻求治疗耐多药肺结核合理有效的方法。方法 选取39例耐多药肺结核患者 ,随机分为含结核清 (DPC)组及含对氨基水杨酸钠 (P)组。结果 两组方案满疗程后痰菌阴转率分别为 95%、93%。X线胸片吸收好转率均为 86 %。随访二年复发率分别为 5%、8%。以上两组结果比较差异均无显著性 (P >0 .0 5)。但P费用比DPC高数倍且含DPC组胃肠道反应及静脉炎发生率远低于含P组 (P <0 .0 5)。结论 DPC、P分别配合K、O、TH、Z组成的治疗耐多药肺结核方案安全有效 ,适用于耐多药结核的治疗 ,含DPC组的 2KOTHZDPC/6 - 10OTHZDPC方案口服给药、费用较含P组低、副作用小患者易接受 。

对氨基水杨酸肠溶颗粒单次和多次给药人体药代动力学和生物等效性研究

目的研究对氨基水杨酸肠溶颗粒单次和多次给药人体药代动力学特征和生物等效性。方法采用双周期自身交叉对照试验设计。空腹/餐后试验和多次给药试验各24名男性健康志愿者,分别单次或多次口服受试制剂或参比制剂4 g。采用HPLC法测定给药后不同时间对氨基水杨酸(PAS)的血药浓度,采用非房室模型药动学参数计算的方法求算药动学参数,并进行统计分析。结果单次给药试验:受试者口服试验药物和参比药物后血浆中PAS主要药代动力学参数Cmax、AUC0~24 h和AUC0~∞比值的90%置信区间均未超出80%~125%。不同制剂间tmax均无显著性差异(P>0.05)。餐后组与空腹组相比,tmax略有缩短,但Cmax、AUC0~24 h和AUC0~∞显著增加。多次给药试验:受试制剂与参比制剂PAS的Css-max和AUCss比值的90%置信区间均未超出80%~125%。不同制剂间tss-max均无显著性差异(P>0.05)。结论对氨基水杨酸肠溶颗粒试验制剂与参比制剂生物等效。

体外诱导对氨基水杨酸高浓度耐药结核分枝杆菌及其突变位点研究

目的:通过对实验室诱导产生的对氨基水杨酸(para-aminosalicylic acid,PAS)耐药结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)和临床分离株进行全基因组测序,探索PAS的潜在作用机制和耐药性。方法:通过体外药物浓度梯度诱导法,将MTB标准菌株H37Rv诱导成标准耐PAS菌株及高水平耐药菌株,收集并保存每一代诱导菌株。用液体微孔板法检测上述诱导菌株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)及交叉耐药情况,筛选耐药水平相似的临床分离株。通过对PAS耐药的实验室突变株和临床分离株进行全基因组测序,从基因水平上探索MTB对PAS的耐药机制。结果:本研究在体外建立了耐PAS的MTB耐药动态变化模型。全基因组测序结果显示,PAS耐药可能与3个位点突变直接相关,分别是plcC(Q462R)、folC(S150R)和1个thyA上游位点(3074495G→A)。MTB对高水平的PAS耐药的产生除了基因突变因素以外,尚存在其他的调控机制。对PAS敏感和耐药的MTB临床分离株测序发现某些folC、thyA和thyX突变并非由PAS引起。结论:本研究构建的PAS耐药MTB菌株模型,为PAS耐药结核病研究和临床实践提供了理想的生物模型。全基因组测序分析在DNA水平上阐明了MTB对PAS的耐药机制,尚存在其他的调控机制,仍需进一步研究。所得的与PAS耐药相关的基因突变也需要进一步的实验验证。

对氨基水杨酸 异烟肼与丁胺卡那霉素联合应用治疗复治肺结核临床观察

目的 探讨对氨基水杨酸、异烟肼与丁胺卡那霉素联合应用治疗复治肺结核的效果与安全性。方法 93例复治肺结核患者 ,随机分为对照组 (A组 )和治疗组 (B1、B2 组 ) ,每组各 31例。化疗方案 :A组为丁胺卡那霉素组 ,3KaHRZ/ 3HRE ,B1组为对氨基水杨酸 -异烟肼组 ,3DkaRZ/ 3HRE ;B2 组为静脉联合给药组 ,3PHKaRZ/ 3HRE。结果 A组 :显效 8例 ,有效 13例 ,无效 10例 ,总有效率 6 7 7% ;B1组 :显效 19例 ,有效 9例 ,无效 3例 ,总有效率 90 3% ;B2 组 :显效 2 7例 ,有效 3例 ,无效 1例 ,总有效率 96 8%。A组与B1组比P<0 0 1,A组与B2 组比P <0 0 0 1。结论 对氨基水杨酸、异烟肼与丁胺卡那霉素联合治疗复治肺结核效果显著 ,静脉联合应用效果亦很好 ,其不良反应少 ,使用安全 。

PAS-Na对亚急性锰暴露大鼠学习记忆及海马超微结构的影响

目的研究对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对亚急性锰暴露大鼠学习记忆及海马超微结构改变的影响。方法雄性大鼠腹腔注射(ip)二氯化锰15mg/(kg·d),每周5天,连续3周。然后每日背部皮下注射PAS-Na100或200mg/kg(L-或H-PAS),连续5周。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,透射电镜观察大鼠海马CA1区超微结构变化。结果染锰组第4和5天逃避潜伏期、游泳总路程与正常对照组差异较大;H-PAS组测得值接近正常组,但是差异无统计学意义(P﹥0.05)。染锰组穿环轨迹路线比较分散,H-PAS组穿环轨迹路线集中于第一象限目标区,与对照组相似。染锰大鼠海马神经元出现变性、凋亡和胀亡,神经元突起肿胀,神经原纤维排列紊乱、中断,线粒体嵴间隙增宽,崩解呈空泡状。PAS-Na治疗后大鼠海马胀亡神经元形态不典型,线粒体结构恢复接近正常,在H-PAS组较为明显。结论在本试验条件下,PAS-Na对锰致海马神经元的损害可能有干预作用。

PAS-Na对染锰大鼠学习记忆及海马神经微丝蛋白表达的影响

[目的]探讨对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对染锰大鼠学习记忆功能及神经微丝蛋白(NF)表达的影响。[方法]将48只雄性SD大鼠随机分为对照组、染锰组、PAS-Na低、高剂量治疗组(L-PAS、H-PAS)四组,染锰组、L-PAS组、H-PAS组大鼠每日腹腔注射(ip)氯化锰(MnCl2·4H2O,15mg/kg),每周5d,共3周。然后,L-PAS、H-PAS组大鼠每日分别于背部皮下注射(sc)PAS-Na100mg/kg、200mg/kg,持续5周。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,免疫组织化学方法检测海马齿状回颗粒细胞下层微丝蛋白(NF)阳性细胞数。[结果]染锰组逃避潜伏期、游泳总路程均比正常对照组长(P<0.05);H-PAS组逃避潜伏期和游泳总路程比染锰组缩短(P<0.05)。染锰组NF阳性细胞数比正常对照组减少(P<0.01),H-PAS组NF阳性细胞数较染锰组增多(P<0.01),但是仍达不到正常对照组水平(P<0.01)。[结论]高剂量PAS-Na对锰致学习记忆能力及海马颗粒细胞受损可能有作用。

PAS-Na对染锰大鼠血清脂质过氧化、血和骨骼金属元素水平的影响

目的探讨对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对染锰大鼠血清脂质过氧化、血和骨骼金属元素水平的影响。方法28只SD雄性大鼠被随机分为对照组、染锰组、低、高剂量PAS-Na治疗(L-、H-PAS)组。染锰组、L、H-PAS组腹腔注射(ip)Mn Cl2·4H2O 15 mg/kg,对照组ip等容量生理盐水,每日1次,每周5 d,连续3周。然后,L、H-PAS组背部皮下注射(sc)PAS-Na 100和200 mg/kg,对照组和染锰组背部sc等容量生理盐水,每日1次,连续5周。测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量,测定血、股骨、髂骨锰(Mn)、铁(Fe)、锌(Zn)、铜(Cu)、钙(Ca)和镁(Mg)含量。结果与对照组比较,染锰组血清MDA含量增高,H-PAS组MDA含量降低(P<0.05)。血、股骨、髂骨Mn含量比对照组高,L-PAS组比对照组低(P<0.05);染锰组血Fe、Mg含量均高于对照组,Zn含量低于对照组,L-PAS组Mg含量降低(P<0.05);染锰组髂骨Cu、Mg含量均低于对照组(P<0.05)。结论过量锰暴露可致机体产生脂质过氧化,干扰Fe、Cu、Mg、Zn含量的分布。PAS-Na有促排锰作用,对锰致血脂质过氧化和镁含量影响有干预作用。

对氨基水杨酸钠对亚慢性铅暴露大鼠海马超微结构的影响

目的探讨对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对亚慢性铅暴露大鼠海马超微结构的影响。方法雄性大鼠每日腹腔注射(ip)醋酸铅6 mg/kg,每周5 d,连续5周。每日背部皮下注射PAS-Na100或200 mg/kg,连续3周。采用石墨炉原子吸收光谱法测定血铅,透射电子显微镜观察大鼠海马颗粒层超微结构变化。结果铅中毒大鼠血铅含量明显增高,海马超微结构出现病理性改变。PAS-Na 200 mg/kg治疗使铅中毒大鼠海马轴突、树突超微结构恢复接近正常,髓鞘板层结构较紧密,神经原纤维排列紊乱及断裂程度减轻,突触结构比较清晰。结论PAS-Na对铅致大鼠海马神经元的损害可能有拮抗作用。

对氨基水杨酸钠对染锰大鼠基底核GABA_AR及GAT-1表达的影响

[目的]探讨对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对短期或亚慢性染锰大鼠基底核γ-氨基丁酸(gamma-aminobutryicacid,GABA)A受体(GABAAreceptor,GABAAR)及GABA转运载体-1(GABA transporter-1,GAT-1)表达的影响。[方法]将短期实验大鼠分为染锰组、PAS低(L-)、高(H-)剂量治疗组和对照组,观察期为7、10周;将亚慢性实验大鼠分为对照组、染锰组、PAS预防组和PAS低(L-)、中(M-)、高(H-)剂量治疗组,观察期为4、8、12、18周。用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Western blot)检测大鼠脑基底核GABAAR及GAT-1表达。[结果]短期实验中,观察期7周,染锰组GABAAR蛋白表达较对照组高(P<0.05);观察期10周,染锰组GABAAR和GAT-1 mRNA表达较对照组低,L-PAS、H-PAS治疗组基底核GAT-1 mRNA表达较染锰组高(P<0.05)。亚慢性实验中,观察期4周,染锰组GABAAR mRNA表达较对照组高(P<0.05);观察期8周,染锰组GABAAR mRNA表达较对照组低,预防组GABAAR mRNA表达较染锰组高(P<0.05)。观察期12周,染锰组GABAAR蛋白表达较对照组高,预防组GABAAR蛋白表达较染锰组低(P<0.05)。观察期18周,染锰组GABAAR mRNA表达较对照组低,GAT-1 mRNA表达较对照组高,H-PAS治疗组GAT-1 mRNA表达较染锰组低(P<0.05)。[结论]短期或亚慢性锰暴露对大鼠基底核GABAAR和GAT-1 mRNA表达都有明显的毒性影响,PAS-Na对亚慢性锰暴露致GABAAR mRNA或蛋白表达改变有预防性干预作用,对锰致大鼠基底核GAT-1 mRNA表达改变有治疗性干预作用。

^(54)锰在小鼠睾丸和脑分布及对氨基水扬酸钠驱锰实验的研究

单次给雄鼠腹腔注射0.25μCi/g体重的M_nCl_2,注射后锰可在睾丸、脑和其它器官中测出,表明锰是能够通过血睾屏障和血脑屏障产生蓄积和滞留。锰对小鼠下丘脑、垂体-睾丸轴的毒作用是由于锰直接作用于下丘脑和睾丸组织所致,未见在垂体内沉积。资料证明,PAS-Na能与睾丸和脑组织中锰作用并有一定的排锰效果。

对氨基水杨酸钠对锰致大鼠肾抗氧化酶和病理学改变的影响

目的观察对氨基水杨酸钠(PAS-Na)对锰致大鼠肾线粒体、微粒体抗氧化酶、病理学改变的影响。方法 50只雄性SD大鼠按体重随机分为对照组、染锰组。染锰组腹腔注射(ip)MnCl2.4H2O 15mg/kg,对照组ip等容量生理盐水,1次/d,每周5 d,连续6周。然后,将染锰组按体重随机分为染锰组、低、中、高(L、M、H)-PAS干预组。L、M、H-PAS干预组大鼠分别背部皮下注射(sc)PAS-Na 100、200和300 mg/kg,对照组、染锰组背部sc等容量生理盐水,1次/d,每周4 d,连续4周。末次干预后72 h,处死大鼠取肾。试剂盒检测肾线粒体、微粒体超氧化物歧化酶(SOD,WST-1法)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px,DTNB比色法)活性,显微镜观察肾组织病理学改变。结果染锰组肾线粒体SOD活性比对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。经4周干预,PAS-Na干预组肾线粒体、微粒体SOD、GSH-Px活性与染锰组比较,差异无统计学意义。肾病理学检查显示,染锰组出现肾小管蛋白管型、肾小管上皮细胞水肿,部分肾小球出现毛细血管扩张,M-PAS干预组蛋白管型等病理改变恢复明显,L-PAS、H-PAS干预组与染锰组比较也有所恢复。结论染锰可抑制大鼠肾线粒体SOD活性,使大鼠出现肾小管蛋白管型、肾小管上皮细胞水肿、肾小球毛细血管扩张,PAS-Na干预可使其病理形态学改变明显好转。

结核分枝杆菌耐对氨基水杨酸相关基因研究进展

对氨基水杨酸(PAS)是20世纪40年代研发的有效抗结核药物之一,其对结核分枝杆菌具有良好的抑制作用,与其他抗结核药物联用有利于增强其他抗结核药物疗效并减少其他抗结核药物耐药性。目前,PAS仍是世界卫生组织(WHO)推荐的有效抗结核药物之一,主要用于治疗耐多药结核病(MDR-TB)。近年来,结核分枝杆菌对PAS耐药现象逐渐增多,但具体耐药机制尚未完全清楚。本文综述了结核分枝杆菌耐PAS相关基因,旨在为结核分枝杆菌对PAS的耐药机制研究提供参考。