lncRNA TUG1靶向调节miR-31-5p对急性胰腺炎小鼠炎症反应的影响

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)在急性胰腺炎(AP)中的作用机制。方法:体外培养小鼠胰腺腺泡细胞系(MPC-83),用脂多糖(LPS,10μg/ml)和雨蛙素(Caerulein,100 nmol/L)处理3 h,建立AP模型。实验分为对照组(control组)、AP组、AP+sh-NC组、AP+sh-TUG1组、AP+sh-TUG1+inhibitor-NC组、AP+sh-TUG1+miR-31-5p inhibitor组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中lncRNA TUG1和miR-31-5p表达水平;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测细胞上清液中IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA TUG1和miR-31-5p之间的靶向关系。构建AP小鼠模型,给予相应的干预后,qRT-PCR检测胰腺组织中lncRNA TUG1和miR-31-5p表达水平;试剂盒检测血清中炎症因子IL-1β、TNF-α含量和淀粉酶(AMY)和脂肪酶(Lipase)活性;HE染色观察胰腺组织病理学变化;TUNEL检测胰腺组织中细胞凋亡。结果:在Caerulein和LPS共同处理的MPC-83细胞中lncRNA TUG1水平、细胞凋亡率、IL-1β和TNF-α水平升高,miR-31-5p水平、细胞活力降低(均P<0.05);敲低lncRNA TUG1可上调miR-31-5p,增加细胞活力,降低IL-1β和TNF-α水平,抑制细胞凋亡(均P<0.05);下调miR-31-5p表达可减弱敲低lncRNA TUG1对细胞炎症反应的抑制作用。miR-31-5p是lncRNA TUG1的直接靶标。在体内敲低lncRNA TUG1表达可上调AP小鼠胰腺组织中miR-31-5p表达,降低IL-1β、TNF-α水平,减少细胞凋亡,改善胰腺组织损伤。结论:敲低lncRNA TUG1可能通过上调miR-31-5p表达水平,抑制炎症反应,改善AP。

中高应变速率轧制AZ31镁合金板的抗拉强度预测

本文采集了不同轧制温度、应变速率以及压下量等三个工艺参数下中高应变速率轧制的AZ31镁合金抗拉强度的27组样本,通过惯性权重、学习因子的改进和引入变异操作对PSO-BP神经网络进行改进,并与BP、PSO-BP神经网络对比,进行抗拉强度的预测。结果表明:BP神经网络不能预测AZ31镁合金抗拉强度的非线性变化,PSO-BP神经网络和改进的PSO-BP(IPSO-BP)神经网络均能较好地预测AZ31镁合金抗拉强度的非线性变化;这三个模型中IPSO-BP神经网络预测最为准确,相较于PSO-BP神经网络,其平均绝对误差从15.3764降低至3.4288,平均相对误差从5.94%降低至1.32%,均方误差从251.3662降低至20.7199,相关系数从0.7753提高至0.8937;通过Pearson相关性计算判断出应变速率、压下量对抗拉强度的影响均大于轧制温度,而应变速率与抗拉强度呈负相关关系,压下量与抗拉强度呈正相关关系。

PRPF31因子对视网膜色素变性影响的研究进展

剪接因子(SFs)是一种蛋白质,是剪接体的动态复合体的一部分。剪接体就像“剪刀”一样,能够精确地加工真核生物中前mRNA(pre-mRNA),形成多种mRNA序列,该过程对于基因调控和蛋白质表达十分重要。前mRNA加工因子31(PRPF31)是在生物组织中广泛表达的一种SFs, PRPF31突变会特异性地导致常染色体显性视网膜色素变性(adRP),称为PRPF31-RP。目前PRPF31-RP的发病机制尚不清晰。文章从PRPF31突变或缺失导致组织和生物学过程受损的角度对PRPF31在adRP发生发展分子机制及该病治疗的研究进展做一综述,以期为PRPF31-RP的发病机制与防治的研究提供新的思路。

龙粳31大面积推广原因分析及其对黑龙江粳稻育种的启示

黑龙江省地域广阔,气候环境复杂多样,各地域间积温差异显著,给水稻品种选育和大规模推广带来了挑战。龙粳31是21世纪以来我国年推广面积和累计推广面积最大的粳稻品种。该品种以其高产稳产、抗病耐冷、生态广适、米优耐储等优点,打破了空育131在黑龙江长达10年之久的主导地位。本文结合黑龙江省粳稻育种现状,深入分析龙粳31大面积推广的原因,以供今后育种开展。

circLRP6调节miR-31-5p/HMGA1轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的分析circLRP6调节miR-31-5p/高迁移率族蛋白A1(HMGA1)轴对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,分为对照组、高糖组、高糖+si-NC组、高糖+si-circLRP6组、高糖+si-circLRP6+miR-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-NC组、高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组,对照组置于含5.5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养,其余各组置于含25 mmol/L葡萄糖的DMEM培养基内培养,并通过Lipofectamine 2000将相应质粒转染至HK-2细胞内,实时定量PCR测定细胞circLRP6、miR-31-5p、HMGA1 mRNA水平,试剂盒测定细胞上清液白细胞介素-6(IL-6)水平、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及丙二醛(MDA)含量;流式细胞仪观察细胞凋亡;Western blotting测定细胞HMGA1、Bax、Bcl-2蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验分析miR-31-5p与circLRP6、HMGA1的靶向关系。结果与对照组相比,高糖组HK-2细胞circLRP6水平升高,细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与高糖组相比,高糖+si-circLRP6组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05);与高糖+si-circLRP6组相比,高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor组相比,高糖+si-circLRP6+miR-31-5p inhibitor+si-HMGA1组HK-2细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、LDH、MDA、细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05)。miR-31-5p与circLRP6、HMGA1均具有靶向关系。结论沉默circLRP6可能通过上调miR-31-5p,抑制HMGA1表达,对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤发挥保护作用。

血清胎球蛋白A和脂肪酸结合蛋白4及微小RNA-31对妊娠期糖尿病妊娠结局的预测价值

目的探讨血清胎球蛋白A、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)和微小RNA-31(miR-31)与妊娠期糖尿病(GDM)的关系及对妊娠结局的预测价值。方法选取新疆维吾尔自治区人民医院2022年1月至2023年3月收治的GDM患者120例作为观察组,同时选取健康孕妇120例作为对照组。检测2组血清胎球蛋白A、FABP4、miR-31水平,分析不同临床特征患者胎球蛋白A、FABP4、miR-31水平及其与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)相关性,以及预测不良妊娠结局的价值。结果观察组血清胎球蛋白A、FABP4、miR-31水平均高于对照组[(40±10)μg/L比(30±7)μg/L、(27.1±3.6)mg/L比(15.6±2.9)mg/L、(2.03±0.41)比(1.00±0.26)](均P<0.001)。观察组HOMA-IR≥5、发生不良妊娠结局患者胎球蛋白A、FABP4、miR-31水平均分别高于HOMA-IR<5、未发生不良妊娠结局患者(均P<0.05)。观察组患者血清胎球蛋白A、FABP4、miR-31均与HOMA-IR呈正相关(均P<0.001)。血清胎球蛋白A、FABP4、miR-31预测不良妊娠结局的受试者工作特征曲线下面积分别为0.733、0.831和0.824。结论GDM患者血清胎球蛋白A、FABP4、miR-31水平升高,与HOMA-IR呈正相关,在预测不良妊娠结局方面有一定应用价值。

血清miR-31在主动脉狭窄致心肌肥厚患者中的作用价值

目的探究血清microRNA-31(miR-31)在主动脉狭窄致心肌肥厚患者中的作用。方法选取2020年1月至2020年10月就诊于新疆医科大学第一附属医院的主动脉狭窄致心肌肥厚患者150例为观察组,并选取同期健康志愿者150例为对照组,比较两组患者miR-31、舒张末期左心室后壁厚度(LVPWTd)、室间隔舒张末期厚度(IVSTd)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF)和左心室重量指数(LVMI)。同时对150例主动脉狭窄致心肌肥厚患者进行随访3年,观察其是否发生不良心血管事件,分析miR-31对不良心血管事件的预测价值。结果与对照组比较,观察组miR-31显著增加(1.25±0.26 vs.0.71±0.23,P<0.001)。血清miR-31与主动脉狭窄致心肌肥厚患者LVPWTd、IVSTd、LVEDD、LVMI均呈显著正相关(r=0.372、0.401、0.362和0.452,P<0.05),而与LVEF呈显著负相关(r=-0.317,P=0.010)。对150例主动脉狭窄致心肌肥厚患者随访3年发现,与未发生不良心血管事件的患者相比,发生不良心血管事件的患者血清miR-31显著增加(1.44±0.17 vs.1.21±0.26,P<0.001)。血清miR-31对主动脉狭窄致心肌肥厚患者不良心血管事件具有较好的预测价值,曲线下面积0.752(95%CI:0.668~0.837,P<0.001)。结论血清miR-31在主动脉狭窄致心肌肥厚患者中可能具有重要潜力,是主动脉狭窄致心肌肥厚的潜在生物学指标。

具有细晶/混晶交替分布组织特征的AZ31镁合金轧板拉伸变形行为仿真

通过中等应变速率轧制获取细晶区和混晶区交替分布的AZ31镁合金轧制板材,构建不同组织特征的黏塑性自洽(VPSC)模型,预测板材在室温拉伸下的变形机制、织构演变和力学响应,研究细晶区与混晶区对塑性变形的贡献。结果表明:经410℃、平均应变速率1.9 s^(-1)、4.8 s^(-1)和7.8 s^(-1)制备的轧制板材中细晶区与混晶区呈现板织构特征,细晶区织构组分相较于混晶区更接近ND方向;随着轧制平均应变速率的增加,板材的细晶区与混晶区的织构组分差异逐渐减小。在室温拉伸塑性变形初期阶段,轧制板材的主要变形机制是基面滑移,次要变形机制是棱柱面滑移和锥面滑移,而拉伸孪生几乎不开启。压缩孪生启动时,部分晶粒向TD方向偏转56°,形成TD方向的织构组分。棱柱面滑移活性的降低,有利于增强锥面滑移的分离效应,促使ND方向织构极密度降低和双峰织构形成。轧制板材在拉伸过程中,由于细晶区的织构组分相较于混晶区更接近ND方向,使得在拉伸过程中细晶区相较于混晶区的基面滑移开启较少,非基面滑移开启较多,促使拉伸变形的过程中细晶区起强化作用,混晶区起弱化作用。织构组分差异逐渐减小,使得细晶区与混晶区的变形机制活性趋于一致,促使其在拉伸过程中对抗拉强度贡献也逐渐趋于一致。

子痫前期孕妇血清miR-424、miR-31-5p水平与胎儿生长受限的相关性分析

目的探究子痫前期孕妇血清微小RNA-424(miR-424)、微小RNA-31-5p(miR-31-5p)水平与胎儿生长受限(FGR)的相关性。方法选取2019年9月至2022年9月该院收治的122例子痫前期孕妇作为研究对象,根据是否发生FGR分为FGR组(62例)与非FGR组(60例)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-424、miR-31-5p的相对表达水平。采用Pearson相关分析子痫前期患者血清miR-424、miR-31-5p表达水平与尿酸、胎儿双顶径、胎儿股骨长度的关系。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-424、miR-31-5p单独及联合检测对子痫前期孕妇发生FGR的诊断价值。采用多因素Logistic回归分析子痫前期孕妇发生FGR的影响因素。结果FGR组尿酸水平明显高于非FGR组,胎儿双顶径、胎儿股骨长度均明显低于非FGR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。FGR组血清miR-424、miR-31-5p表达水平均明显高于非FGR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,子痫前期患者血清miR-424、miR-31-5p表达水平与尿酸水平均呈正相关(P<0.05),与胎儿双顶径、胎儿股骨长度均呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-424、miR-31-5p联合诊断FGR的曲线下面积(AUC)高于各指标单独诊断的AUC(Z_(miR-424 vs.miR-424+miR-31-5p)=2.500,P=0.012;Z_(miR-31-5p vs.miR-424+miR-31-5p)=3.521,P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清miR-424高表达、miR-31-5p高表达是子痫前期孕妇发生FGR的危险因素(P<0.05)。结论子痫前期发生FGR孕妇血清miR-424、miR-31-5p表达水平明显升高,二者联合诊断FGR发生的效能较单一指标高。

基于Deform 3D的AZ31镁合金不对称挤压变形工艺模拟

通过Deform 3D软件模拟了AZ31镁合金不对称挤压变形工艺过程。结果表明,设置不同水平长度流动距离促使材料不对称地流入挤压通道,进而形成不对称剪切变形,出现应变及应力集中分布的不对称性,促使材料晶粒沿着剪切面偏转,获得细晶、弱织构的高性能镁合金坯料。

血清miR-31、IL-22联合检测在儿童病毒性心肌炎诊断及预后评估中的价值

目的 研究血清微小RNA-31(miR-31)、白细胞介素-22(IL-22)在儿童病毒性心肌炎(VMC)诊断及预后评估中的价值。方法 选取2017年1月至2022年1月河南省儿童医院心血管内科收治的病毒性心肌炎患儿作为研究对象,将其命名为VMC组(n=106),另选同期在本院进行体检的健康儿童为对照组(n=70)。比较两组血清miR-31、IL-22、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)及心电图参数[QRS间期、PR间期]与超声心动图参数[左室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)];在治疗结束后对VMC患儿随访1年,以随访期间发生恢复迁延、扩张性心肌病、遗留心律失常及患儿死亡等事件为预后不良,根据多因素Logistic回归分析VMC患儿预后不良的影响因素,并绘制ROC曲线分析血清miR-31、IL-22水平对VMC患儿诊断及预后不良评估的价值。结果 VMC组的血清miR-31、IL-22、CK-MB、cTnT水平及QRS间期、PR间期均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),LVEF、LVFS均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,miR-31水平高表达、IL-22水平升高、CK-MB水平升高、cTnT水平升高、QRS间期延长、PR间期延长、LVEF降低及LVFS降低均是VMC患儿预后不良的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清miR-31、IL-22水平二者联合检测诊断VMC的曲线下面积(AUC)为0.990,优于单一检测(P<0.05);血清miR-31、IL-22水平二者联合检测评估VMC患儿预后不良的曲线下面积(AUC)为0.919,优于单一检测(P<0.05)。结论 miR-31、IL-22在病毒性心肌炎患儿血清中高表达,可能成为儿童病毒性心肌炎诊断及预后评估的辅助诊断指标。

浇铸温度对AZ31镁合金铸轧凝固焊合线的影响

基于φ880 mm×400 mm水平双辊铸轧机的实际工况,通过有限元模拟分析了浇铸温度对铸轧区AZ31镁合金凝固焊合线的影响规律。结果表明,浇铸温度对凝固焊合线位置影响较为明显,但对其形状影响较小。随着浇铸温度提升,凝固焊合线逐渐向出口靠近,边部Kiss点(K')和Kiss线上的凸点(K')连线与过K'点平行于铸轧方向的直线的夹角α先减小后增大。当浇铸温度为965 K时,铸轧过程中极易出现漏液,合适的浇铸温度范围为915~959 K。对比不同浇铸温度下的仿真结果,浇铸温度为945 K时,∠α最小,有利于缓解镁合金铸轧板带边裂。

预制孪晶对AZ31镁合金绝热剪切敏感性的影响

为了分析不同孪晶体积分数对材料绝热剪切敏感性的影响,预制具有不同孪晶体积分数的AZ31镁合金。采用分离式霍普金森压杆在200℃、944 s^(-1)条件下对AZ31镁合金帽状试样进行高速冲击试验,采用电子背散射衍射仪和光学显微镜对试样在高应变速率变形前后的微观组织进行观察,计算了试样发生绝热剪切时的吸收能量,比较了绝热剪切带内外的显微硬度。结果表明:不同孪晶体积分数试样内均产生了绝热剪切带,随着孪晶体积分数的增加,绝热剪切带宽度和吸收能量减小,而绝热剪切敏感性增大。

AZ31镁合金和7050铝合金ECAP过程的数值模拟研究

利用Abaqus有限元软件分别对AZ31镁合金和7050铝合金进行等通道转角挤压(ECAP)数值模拟研究。利用有限元(FE)模拟得到应力场、应变场及载荷-位移曲线,分析了在不同挤压温度、挤压速度、摩擦条件和不同截面下等通道转角挤压的变形规律。结果表明,挤压温度升高可以降低挤压载荷,这有利于AZ31镁合金挤压,在摩擦较小情况下进行变形有利于降低挤压载荷,提高变形均匀性;在不考虑变形过程中温升效应的情况下,挤压速度对挤压载荷影响较小,当挤压速度提高时,最大等效应变值有所提高;圆形截面比方形截面更适合进行等通道转角挤压。

韭菜新品种久星31号的选育

久星31号是以天津青韭优选株系96-13-32为母本,以92-1优选株系19-5-6为父本,经有性杂交、系统选育而成的韭菜新品种。直立性强,春季返青早,平均株高49.0 cm,假茎长10.1 cm、粗0.6 cm;叶片深绿色,蜡粉少,长宽条形,先端锐尖,平均叶长38.9 cm,叶宽0.8 cm,单株功能叶片数5片,单株质量8.7 g;分蘖能力强,冬季不休眠,耐寒性强,对灰霉病的抗性强于对照791,蛋白质含量1.82%,β-胡萝卜素含量9.10μg·g^(-1),VC含量216.0 mg·kg^(-1),铁含量71.1 mg·kg^(-1);年收割6~7茬,每667 m^(2)产量12500 kg左右,适宜河南省以及生态型相似地区种植。

^(31)P NMR Study on Some Phosphorus-Containing Compounds

31P NMR has become a widely applied spectroscopic probe of the structure of phosphorus-containing compounds. Meanwhile, the application of 31P NMR has been rapidly expanded to biochemistry and medicinal chemistry of phosphorus-containing compounds because the growing importance of the phosphorus compounds is now widely realized. We report here the results of 31P NMR study on some phosphorus-containing compounds, namely, O-alkyl O-4-nitrophenyl methyl phosphonates with different alkyl chain-length (MePO-n), 4-nitrophenyl alkylphenylphosphinates with different alkyl chain-length (PhP-n), diethyl phosphono- acetonitrile anion and diethyl phosphite anion . Our results indicate that 31P NMR can not only be applied to not only the study of the hydrolytic reactions of MePO-8 and PhP-8 but also be applied to the study of the presence of the anions of diethylphosphonoacetonitrile and diethyl phosphite in nucleophilic reactions.

31CrMoV9钢离子渗氮层的微动摩擦磨损特性研究

针对31CrMoV9钢基体及其渗氮层,采用切向微动磨损试验机开展球/平面接触模式下的切向微动磨损试验探究了在法向载荷为20 N时,不同位移幅值下(D=5、10、50μm)的切向微动损伤机制和损伤演变规律.采用X射线衍射仪(XRD)对试样表层物相进行分析,扫描电子显微镜(SEM)和白光干涉仪对试样磨损区进行形貌表征,能谱仪(EDS)和电子探针显微分析仪(EPMA)进行化学元素分析.结果表明:离子渗氮处理后在基体表面形成了化合物层和扩散层,显著提高了表面硬度.在法向载荷F_(n)=20 N时,随着微动位移幅值的增大,31CrMoV9基体及其渗氮层的微动运行区均由部分滑移区逐渐向混合、完全滑移区转变,磨损体积增大,磨损更加严重,稳定阶段的摩擦系数逐渐增大.在部分滑移区和完全滑移区,渗氮层较基体在稳定阶段的摩擦系数更小,而在混合区基体的摩擦系数更小在混合区和完全滑移区时,基体及渗氮层的损伤机制均为剥层、磨粒磨损和氧化磨损.离子渗氮生成的化合物层能提高材料的抗微动磨损性能,在D=10和50μm时,磨损率分别降低了约38.5%和70.2%.研究结果可为轨道交通等领域结构件的选材和抗微动磨损设计提供参考.

微小RNA-31对缺血性脑卒中患者氧化应激水平和神经功能的影响

目的 探讨在缺血性脑卒中(Ischemic stroke,IS)患者体内微小RNA-31对氧化应激各指标和神经功能的影响。方法 自2019年10月至2022年5月收集65例在我院进行诊治的缺血性脑卒中患者作为观察组,选择同期在我院进行健康体检的志愿者65例作为对照组。检测两组研究对象体内的微小RNA-31、血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的表达水平,并进行美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分和临床神经功能缺损评分,对比分析微小RNA-31对缺血性脑卒中患者氧化应激水平和神经功能的影响。结果 观察组的IS患者体内微小RNA-31表达量明显高于健康对照组(t=18.758,P=0.000),血清MDA水平明显高于对照组(t=15.002,P=0.000),GSH-Px水平明显低于对照组(t=11.359,P=0.000);患者组组内比较,随着病情的加重,NIHSS评分呈上升趋势,且组间比较差异具有统计学意义(P>0.05);通过Pearson相关性分析结果显示,患者组血清微小RNA-31表达量与MDA及NIHSS评分呈正相关(r=0.526,r=0.511,P<0.05),与GSH-Px呈负相关(r=-0.435,P=0.032);MDA与NIHSS评分呈正相关(r=0.547,P<0.05),GSH-Px与NIHSS评分呈负相关(r=-0.424,P<0.05)。结论 微小RNA-31的表达参与缺血性脑卒中的发生与发展,其作用机制可能与抑制机体的氧化应激反应有关。

绿盲蝽气味结合蛋白AlucOBP31配体筛选及EAG测定

绿盲蝽Apolyguslucorum是重要的农业害虫,了解其化学感受机制对该虫的绿色防控具有重要指导意义。气味结合蛋白(Odorant-binding proteins,OBPs)在昆虫化学感受过程中发挥关键作用。为深入探究绿盲蝽OBP家族成员AlucOBP31的生物学功能,本研究采用荧光竞争结合试验和触角电位技术(Electroantennogram,EAG),系统分析了AlucOBP31对候选配体化合物的结合特性及其电生理活性。荧光竞争结合试验结果表明,重组Aluc OBP31蛋白能够与16种配体化合物发生不同程度的结合,其中与植物挥发物β-紫罗兰酮的结合能力最强,而与十二醛和顺-丁酸-3-己烯酯的结合能力相对较弱。值得注意的,AlucOBP31能与绿盲蝽性信息素组分4-氧代-反-2-己烯醛结合,提示其可能参与绿盲蝽的性信息素识别过程。此外,AlucOBP31还对槲皮素、芦丁水合物、棉酚和单宁酸等4种非挥发性苦味物质具有强结合能力,暗示其可能在绿盲蝽的味觉识别中发挥一定作用。EAG试验进一步验证了AlucOBP31配体的电生理活性。绿盲蝽雌、雄成虫的触角对12种AlucOBP31挥发性配体均产生了明显的EAG反应,其中对顺-丁酸-3-己烯酯和4-氧代-反-2-己烯醛的EAG响应值显著高于其它配体,并且雄性触角对这些配体的EAG反应普遍强于雌性,提示AlucOBP31介导的化学感受过程可能存在性别差异。综上所述,本研究系统分析了绿盲蝽AlucOBP31的结合特性及相应配体的电生理活性,发现该蛋白能够结合寄主植物挥发物、绿盲蝽性信息素组分以及多种非挥发性苦味物质,表明AlucOBP31可能在绿盲蝽的嗅觉和味觉识别过程中发挥多重生物学功能。这一发现为进一步探究AlucOBP31与其配体在绿盲蝽寄主选择、交配等重要生命活动中的生物学意义提供了研究基础,加深了我们对绿盲蝽化学感受机制的认知,也为绿盲蝽的绿色防控提供了新的分子靶标。

鸡毒支原体P31蛋白原核表达及膜定位鉴定

为筛选鸡毒支原体(MG)膜蛋白,利用生物信息学软件对其进行序列分析后,选择不含跨膜区的714 bp基因片段作为靶标蛋白进行原核表达(因其分子量约31 kDa,故而命名为P31蛋白),表达P31蛋白并进行纯化后制备兔多克隆抗体,运用ELISA方法检测抗体效价,提取MG液体培养物总蛋白、胞浆蛋白、膜蛋白,利用Western blot进行亚细胞定位。结果显示,P31蛋白具有跨膜结构和良好的B细胞抗原表位,原核表达后获取融合蛋白rP31,大小约为31 kDa,ELISA检测兔血清效价为1∶25600,Western blot分析显示,rP31蛋白分布在MG膜表面。本研究证实了P31蛋白确为MG膜蛋白且抗原性良好,可做为研发MG新型诊断方法、基因工程疫苗及治疗药物的候选蛋白。