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Mutations in pre-core and basic core promoter regions of hepatitis B virus in chronic hepatitis B patients 被引量:12
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作者 Xiao-Ling Wang Jian-Ping Ren +3 位作者 Xue-Qing Wang Xiao-Hong Wang Shao-Fang Yang Yi Xiong 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2016年第11期3268-3274,共7页
AIM: To investigate the frequency of mutations in pre-core (pre-C) and basic core promoter (BCP) regions of hepatitis B virus (HBV) from Shanxi Province, and the association between mutations and disease related index... AIM: To investigate the frequency of mutations in pre-core (pre-C) and basic core promoter (BCP) regions of hepatitis B virus (HBV) from Shanxi Province, and the association between mutations and disease related indexes.METHODS: One hundred chronic hepatitis B patients treated at Shanxi Province Hospital of Traditional Chinese Medicine were included in this study. PCR-reverse dot blot hybridization and mismatch amplification mutation assay (MAMA)-PCR were used to detect the mutations in the HBV pre-C and BCP regions. HBV DNA content and liver function were compared between patients with mutant HBV pre-C and BCP loci and those with wild-type loci. The consistency between PCR-reverse dot blot hybridization and MAMA-PCR for detecting mutations in the HBV pre-C and BCP regions was assessed.RESULTS: Of the 100 serum samples detected, 9.38% had single mutations in the pre-C region, 29.17% had single mutations in the BCP region, 41.67% had mutations in both BCP and pre-C regions, and 19.79% had wild-type loci. The rates of BCP and pre-C mutations were 65.7% and 34.3%, respectively, in hepatitis B e antigen (HBeAg) positive patients, and 84.6% and 96.2%, respectively, in HBeAg negative patients. The rate of pre-C mutations was significantly higher in HBeAg negative patients than in HBeAg positive patients (&#x003c7;<sup>2</sup> = 26.62, P = 0.00), but there was no significant difference in the distribution of mutations in the BCP region between HBeAg positive and negative patients (&#x003c7;<sup>2</sup> = 2.43, P = 0.12). The presence of mutations in the pre-C (Wilcoxon W = 1802.5, P = 0.00) and BCP regions (Wilcoxon W = 2906.5, P = 0.00) was more common in patients with low HBV DNA content. Both AST and GGT were significantly higher in patients with mutant pre-C and BCP loci than in those with wild-type loci (P &#x0003c; 0.05). PCR-reverse dot blot hybridization and MAMA-PCR for detection of mutations in the BCP and pre-C regions had good consistency, and the Kappa values obtained were 0.91 and 0.58, respectively.CONCLUSION: HBeAg negative patients tend to have HBV pre-C mutations. However, these mutations do not cause increased DNA copies, but associate with damage of liver function. 展开更多
关键词 Basic core promoter region Pre-core region Liver injury Reverse dot blot hybridization Mismatch amplification mutation assay
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Dissecting the key genomic regions underlying high yield potential in common wheat variety‘Kenong 9204’
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作者 ZHAO Chun-hua ZHANG Na +5 位作者 FAN Xiao-li JI Jun SHI Xiao-li CUI Fa LING Hong-qing LI Jun-ming 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2023年第9期2603-2616,共14页
The foundation parents play key roles in the genetic improvement of both yield potential and end-use quality in wheat.Characterizing the genetic basis that underlies certain beneficial traits in the foundation parents... The foundation parents play key roles in the genetic improvement of both yield potential and end-use quality in wheat.Characterizing the genetic basis that underlies certain beneficial traits in the foundation parents will provide theoretical reference for molecular breeding by a design approach.‘Kenong 9204’(KN9204)is a candidate foundation parent characterized by ideotype,high yield potential,and particularly high nitrogen fertilizer utilization.To better understand the genetic basis of its high yield potential,high throughput whole-genome re-sequencing(10×)was performed on KN9204,its parental lines and its derivatives.A high-resolution genetic composition map of KN9204 was constructed,which showed the parental origin of the favorable genomic segments based on the identification of excellent yield-related quantitative trait loci(QTL)from a bi-parental mapping population.Xiaoyan 693(XY693),a wheat–Thinopyrum ponticum partial amphidiploid,contributed a great deal to the high yield potential of KN9204,and three major stable QTLs from XY693 were fine mapped.The transmissibility of key genomic segments from KN9204 to its derivatives were delineated,indicating that haplotype blocks containing beneficial gene combinations were conserved along with directional selection by breeders.Evidence for selection sweeps in the breeding programs was identified.This study provides a theoretical reference for the breeding of high-yield wheat varieties by a molecular design approach. 展开更多
关键词 Kenong 9204 high-yielding potential quantitative trait locus genetic composition map key genomic regions
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地方保护政策对中国新能源汽车市场推广的影响分析 被引量:1
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作者 熊勇清 林予衡 《中南大学学报(社会科学版)》 CSSCI 北大核心 2024年第2期85-100,共16页
加快建设全国统一大市场对推动中国新能源汽车产业发展具有重要意义,而各地频发的地方保护现象却成为阻碍新能源汽车市场推广的主要因素。以2010—2021年中国28个省(市、区)新能源汽车推广数量的面板数据作为研究样本,分析了地方保护政... 加快建设全国统一大市场对推动中国新能源汽车产业发展具有重要意义,而各地频发的地方保护现象却成为阻碍新能源汽车市场推广的主要因素。以2010—2021年中国28个省(市、区)新能源汽车推广数量的面板数据作为研究样本,分析了地方保护政策对新能源汽车市场规模和市场占比的影响,以及产品市场发育程度在其中的调节和门槛效应。研究结果表明,地方保护政策对新能源汽车市场规模扩大和市场占比提升均有显著的抑制作用,产品市场发育程度在该影响过程中具有调节性作用,地方保护政策对市场规模的作用受到产品市场发育程度单一门槛效应的影响,而对市场占比的作用则受双重门槛效应的影响,呈现出先促进后抑制的倒“U”型特征。进一步研究显示,地方保护政策通过加深能源市场分割阻碍了新能源汽车市场推广。区域异质性表明,东部地区的地方保护政策对新能源汽车市场推广有显著的抑制作用,而中西部地区的保护政策则有助于市场规模的扩大;在有新能源汽车上市企业母公司的地区,地方保护政策的抑制作用更为明显;而在没有此类企业的地区,其抑制作用相对较弱。研究结论为打破中国新能源汽车产业中的地方保护主义、推动产业可持续发展提供了决策参考。 展开更多
关键词 新能源汽车 市场推广 地方保护主义 产品市场发育程度 区域异质性
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鄂尔多斯地区妊娠早期女性MTHFR C677T基因多态性与同型半胱氨酸的关系分析
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作者 牛瑞兵 郭利平 +3 位作者 段宝生 郑华 魏建平 秦莉 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第13期1575-1579,共5页
目的 通过对鄂尔多斯地区妊娠早期女性MTHFR C677T基因多态性与同型半胱氨酸进行分析,明确MTHFR C677T基因多态性分布特点及二者之间的相关性,为科学指导妊娠期叶酸补充及预防出生缺陷提供遗传学依据。方法 选取2022年9月至2023年9月在... 目的 通过对鄂尔多斯地区妊娠早期女性MTHFR C677T基因多态性与同型半胱氨酸进行分析,明确MTHFR C677T基因多态性分布特点及二者之间的相关性,为科学指导妊娠期叶酸补充及预防出生缺陷提供遗传学依据。方法 选取2022年9月至2023年9月在鄂尔多斯市中心医院妇科门诊建档并进行妊娠早期检查的602例汉族妊娠早期女性作为研究对象,所有患者采集血液标本,采用PCR芯片杂交法检测MTHFR C677T基因多态性、生化酶循环法检测同型半胱氨酸水平,统计分析MTHFR C677T位点基因型与等位基因频率及与同型半胱氨酸的关系。结果 MTHFR C677T基因多态性CC、CT和TT型的检出频率分别为23.6%、47.5%、28.9%,等位基因C、T的检出频率分别为47.3%和52.7%,与上海、温州、眉山、南宁等地区汉族女性相比差异均有统计学意义(P<0.05),但与西安地区汉族女性相比差异均无统计学意义(P>0.05)。TT基因型孕妇血清同型半胱氨酸水平均高于CC和CT基因型孕妇,CT基因型孕妇血清同型半胱氨酸水平高于CC基因型孕妇(P<0.05)。MTHFR C677 T位点CT和TT基因型均为该地区妊娠早期女性发生高同型半胱氨酸血症的危险因素,分别为CC基因型的2.80倍和8.07倍,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 鄂尔多斯汉族妊娠早期女性MTHFR C677T基因多态性分布具有地区特点,且与同型半胱氨酸水平有一定联系,妊娠期根据不同基因型制订个性化的叶酸补充方案对于预防出生缺陷具有重要意义。 展开更多
关键词 鄂尔多斯地区 基因多态性 同型半胱氨酸 相关性分析
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植物遗传转化中体细胞再生的分子机制及应用研究进展
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作者 李玉珠 余江弟 +3 位作者 丁菲菲 苗佳敏 白小明 师尚礼 《草业学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期198-211,共14页
植物遗传转化是转基因技术及以此为基础的基因组编辑、功能基因组学研究和分子育种的关键。其中,物种和基因型差异往往是限制遗传转化效率和基因编辑技术广泛应用的主要瓶颈。随着再生芽发生和体胚发生的分子机制被逐渐探明,在愈伤组织... 植物遗传转化是转基因技术及以此为基础的基因组编辑、功能基因组学研究和分子育种的关键。其中,物种和基因型差异往往是限制遗传转化效率和基因编辑技术广泛应用的主要瓶颈。随着再生芽发生和体胚发生的分子机制被逐渐探明,在愈伤组织形成、增殖和再生过程中涉及生长素和细胞分裂素合成、响应和信号转导的生长及发育调节基因被用于提高遗传转化效率。本研究首先综述了植物遗传转化过程中体细胞再生的不同途径和方式,以及转化细胞以间接的器官发生方式和体胚发生方式再生的分子机制。然后重点讨论了与生长素和细胞分裂素有关的再生促进基因在提高再生效率,缩短转化时间,以及实现执拗型物种和基因型的遗传转化等方面的应用。最后总结了再生促进基因在转基因和基因编辑中的应用潜力和研究方向。 展开更多
关键词 遗传转化 再生 再生芽发生 体胚发生 再生促进基因
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miR-214-5p通过DNMT1介导的AXIN2基因DNA甲基化修饰在皮肤基底细胞癌中的作用机制
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作者 熊斯颖 邵蕾 +2 位作者 杨艳 高爱莉 揭丽云 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第1期27-32,共6页
目的探讨皮肤基底细胞癌中轴抑制蛋白2(Axis inhibition protein 2,AXIN2)基因启动子甲基化对基因转录的影响及miR-214-5p通过靶向DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase1,DNMT1)对AXIN2甲基化率的调控机制。方法收集2022年1月-2023年6... 目的探讨皮肤基底细胞癌中轴抑制蛋白2(Axis inhibition protein 2,AXIN2)基因启动子甲基化对基因转录的影响及miR-214-5p通过靶向DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase1,DNMT1)对AXIN2甲基化率的调控机制。方法收集2022年1月-2023年6月在广州市皮肤病防治所就诊治疗的102例皮肤基底细胞癌(Cutaneous basal cell carcinoma,BCC)患者作为研究对象,提取癌组织和癌旁正常组织标本及基线资料。焦磷酸测序法检测AXIN2基因启动子区甲基化率。实时荧光定量PCR检测AXIN2、DNMT1基因mRNA和miR-214-5p的表达水平。将miR-214-5p模拟物(mimic)、抑制物(inhibitor)及其阴性对照(mimic NC和inhibitor NC)分别对基底细胞癌A431细胞进行转染,48 h后检测DNMT1基因mRNA表达水平和AXIN2基因甲基化率。结果BCC癌组织的AXIN2基因甲基化率显著高于癌旁正常组织(t=5.128,P<0.001),AXIN2基因mRNA相对表达水平显著低于癌旁正常组织(t=7.826,P<0.001),DNMT1基因mRNA表达水平显著高于癌旁正常组织(t=4.838,P<0.001),miR-214-5p表达水平显著低于癌旁正常组织(t=5.426,P<0.001)。BCC癌组织的AXIN2基因甲基化率与其mRNA表达水平呈负相关(r=-0.793,P<0.001),DNMT1基因mRNA水平与AXIN2基因甲基化率呈正相关(r=0.814,P<0.001),miR-214-5p表达水平与DNMT1基因mRNA水平呈负相关(r=-0.747,P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验结果证实,DNMT1是miR-214-5p的靶基因。细胞转染后,与mimic NC、inhibitor和inhibitor NC比较,mimic的DNMT1基因mRNA水平、AXIN2基因甲基化率显著降低(P<0.001);而inhibitor的DNMT1基因mRNA水平和AXIN2基因甲基化率相较于其他三组明显上升(P<0.001)。结论miR-214-5p可通过调控下游靶蛋白DNMT1表达,影响AXIN2基因的DNA甲基化率,调控AXIN2基因的表达水平,参与皮肤基底细胞癌的发生机制。 展开更多
关键词 基底细胞癌 miR-214-5p DNA甲基化转移酶1 轴抑制蛋白2 启动子区甲基化
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苏州—无锡—常州地区地面沉降及地裂缝防控研究
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作者 朱锦旗 龚绪龙 +11 位作者 于军 张云 张岩 叶淑君 王彩会 许书刚 武健强 王光亚 刘明遥 顾春生 闵望 龚亚兵 《地质力学学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期811-833,共23页
苏州—无锡—常州(苏锡常)地区曾是中国地面沉降灾害最严重的地区之一,从20世纪70年代开始发生地面沉降,随之因差异沉降诱发地裂缝灾害,21世纪以来沉降速率逐年趋缓,部分地区出现区域性的地面回弹,独特的地面沉降发展历程为全面解读地... 苏州—无锡—常州(苏锡常)地区曾是中国地面沉降灾害最严重的地区之一,从20世纪70年代开始发生地面沉降,随之因差异沉降诱发地裂缝灾害,21世纪以来沉降速率逐年趋缓,部分地区出现区域性的地面回弹,独特的地面沉降发展历程为全面解读地面沉降提供了理想的窗口。为揭示苏锡常地区地面沉降生命周期过程及其驱动机制,利用长时间序列、大区域尺度的三维渗流、应力、应变多场监测数据以及物理试验模型、数值模拟等技术对区域地面沉降与地裂缝宏观演变规律、成因机理进行综合分析。研究结果显示:苏锡常地区地面沉降经历了发生、快速发展、趋缓、滞后和反弹5个阶段;地面沉降与地下水开采密切相关,其地层变形主要来自于地下水开采导致的含水层和弱透水层的压密释水,主采含水砂层及相邻隔水层为沉降主要贡献层,并识别了地层压缩、回弹的时空演变特征及其对地面沉降的贡献;地裂缝是地面沉降发展到一定阶段后所产生的次生地质灾害,其空间展布及成灾时间与地下水水位、地面沉降、基岩起伏变化以及土层结构差异等因素密切相关,提出了驱动地裂缝演化的压—拉—剪—弹物理过程,识别出了地裂缝发生的触发机制和临界条件。同时建立了以地质钻孔全断面光纤监测为特色、多种技术方法融合的“天-空-地”立体化、地下水-地面沉降-地裂缝协同的监测体系,为地面沉降防控提供科学、详细的数据支撑;并创新区域-场地双尺度有限元耦合界面元法,成功实现了三维复杂地质环境条件下地层形变特征及地裂缝生成和扩展的力学机制模拟,为地面沉降、地裂缝易发区精准圈定与防控提供了解决路径;通过总结基于技术创新支撑政府实施的地下水限采、禁采等地面沉降防控实践及其成效,为中国其他省/市地面沉降防控与地下水资源管理起到示范作用。 展开更多
关键词 苏锡常地区 地面沉降 地裂缝 机理 模拟 防控
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陕南生态产品价值实现的区域合作困境与突破策略
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作者 石林 张欢 龙志祥 《陕西理工大学学报(社会科学版)》 2024年第5期86-92,共7页
陕南作为我国“南水北调”中线工程水源涵养地和秦巴生物资源多样性保护区,是重要的生态产品价值实现试验示范区。当前,区域合作对陕南生态产品价值实现十分必要。面对地方政府合作意愿与能力不足、生态产品相关标准体系残缺混乱、区域... 陕南作为我国“南水北调”中线工程水源涵养地和秦巴生物资源多样性保护区,是重要的生态产品价值实现试验示范区。当前,区域合作对陕南生态产品价值实现十分必要。面对地方政府合作意愿与能力不足、生态产品相关标准体系残缺混乱、区域生态资本化运营能力薄弱、产品经营开发机制碎片化等现实困境,陕南生态产品价值实现应以生态资源区域化整合打造产品稀缺性、以区域生态资本化运营推动产品价值转化增值、以体制机制创新提升区域合作动力、以系统经营开发提升区域运营效率。针对当前所面临的困境,从生态产品价值实现的路径出发,提高地方政府合作意愿与能力,健全完善生态产品价值实现相关标准体系,提高生态资本化运营的整体能力,系统构建价值实现的经营开发机制将是推进陕南地区生态产品价值实现区域合作的努力方向。 展开更多
关键词 陕南 区域合作 生态产品价值 基本路径 推进对策
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利用遗传算法实现低倾角卫星星座优化设计
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作者 赵文策 舒传华 王盛玺 《航天控制》 CSCD 2024年第5期76-82,共7页
针对热点区域的多重覆盖问题,采用回归圆轨道的共星下点轨迹星座方案,提出基于遗传算法求解单颗卫星轨道参数、利用简单解析公式求解星座轨道参数的方法。首先,建立了回归轨道热点区域多重覆盖模型;其次,以卫星一个回归周期内覆盖时间... 针对热点区域的多重覆盖问题,采用回归圆轨道的共星下点轨迹星座方案,提出基于遗传算法求解单颗卫星轨道参数、利用简单解析公式求解星座轨道参数的方法。首先,建立了回归轨道热点区域多重覆盖模型;其次,以卫星一个回归周期内覆盖时间最长为性能指标,首颗卫星轨道根数利用遗传算法可优化求取;最后,根据星下点轨迹重合这一约束条件设计星座构型,并利用各卫星间几何关系求解各卫星的轨道根数。理论分析和仿真结果表明,该方法简单且易于实现,设计结果正确,可实现回归周期内同一卫星星下点轨迹多次覆盖目标,星座使用卫星少、覆盖频率高,具有较好的工程应用价值。 展开更多
关键词 热点区域 近地轨道 多重覆盖 遗传算法 星座 星下点轨迹
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地区劳动力市场晋升激励对股价崩盘风险的影响研究
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作者 胡增芳 《安徽商贸职业技术学院学报》 2024年第3期41-47,共7页
在地区劳动力市场竞争所引发的锦标赛效应的驱动之下,公司CEO可能为了提升其在地区劳动力市场晋升的机会,而故意掩饰公司的坏消息,进而可能会提高公司股价崩盘风险。运用2006—2022年中国上市公司数据,考察了地区劳动力市场的晋升激励... 在地区劳动力市场竞争所引发的锦标赛效应的驱动之下,公司CEO可能为了提升其在地区劳动力市场晋升的机会,而故意掩饰公司的坏消息,进而可能会提高公司股价崩盘风险。运用2006—2022年中国上市公司数据,考察了地区劳动力市场的晋升激励与公司股价崩盘风险之间的关系,研究结果表明,地区劳动力市场的晋升激励对公司股价崩盘风险产生显著的正向影响。研究为高管地区劳动力市场晋升激励影响公司股价崩盘风险提供了经验证据,并为维护资本市场稳定提供重要的启示。 展开更多
关键词 地区劳动力市场晋升激励 股价崩盘风险 坏消息
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黄河流域文旅产业高质量发展研究:基础、短板及路径——以山东省为例
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作者 李继伟 王爽 《文化产业研究》 2024年第1期249-259,共11页
黄河从菏泽市东明县入鲁,在东营市垦利区流入渤海。山东沿黄地区区位优势优越、自然景观钟灵毓秀、文化底蕴悠久深厚、民俗资源多姿多彩、基础设施优势突出、文化服务日臻完善,具备发展文旅产业的良好基础。但与优越独特的资源禀赋和文... 黄河从菏泽市东明县入鲁,在东营市垦利区流入渤海。山东沿黄地区区位优势优越、自然景观钟灵毓秀、文化底蕴悠久深厚、民俗资源多姿多彩、基础设施优势突出、文化服务日臻完善,具备发展文旅产业的良好基础。但与优越独特的资源禀赋和文旅产业的高质量发展要求相比,山东省黄河流域文化旅游产业发展还存在一些短板问题,亟需做好开展重点资源保护、促进产业创新发展、提升交通设施水平、强化旅游产品供给、推动文旅深度融合、实现宣传推广创新、强化重点要素保障、完善工作推进机制等方面的工作,加快推动黄河流域文旅产业实现高质量发展。 展开更多
关键词 黄河流域 文旅产业 高质量发展 推进路径
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高校遗传学课程思政教学提升研究与探索实践 被引量:2
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作者 王雁伟 任亚娟 +1 位作者 李振侠 艾鹏飞 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1317-1328,共12页
理工科专业课程思政的实施需要密切关注思政元素的融入与专业课程内容的有机结合。遗传学课程专业性较强,课程思政的开展有其独特的方式方法,本文首先对当代大学生的特点进行探讨,并指出思政理念在当代大学教学中的必要性。针对遗传学... 理工科专业课程思政的实施需要密切关注思政元素的融入与专业课程内容的有机结合。遗传学课程专业性较强,课程思政的开展有其独特的方式方法,本文首先对当代大学生的特点进行探讨,并指出思政理念在当代大学教学中的必要性。针对遗传学课程特点以及遗传学课程思政建设现状,从教学团队建设、教学设计优化、思政元素挖掘和思政素材在课程内容有机融入四个方面对课程思政教学提升策略进行探究,并以笔者所在教学团队的实际教学情况为例,进行后续的教学评价和反思,收到了较为良好的效果,80%以上的学生认为,遗传学课程思政的实施提高了他们的学习兴趣和综合能力,且促进了专业课程的学习,学生总成绩平均提高约5.5%。以此抛砖引玉,为其他相关课程的课程思政建设提供启示,让课程思政为学生能力的提升和品格的优化保驾护航。 展开更多
关键词 遗传学 课程思政 教学提升 人才培养
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基于BP神经网络模型优化Fe_(1-x)O基氨合成催化剂 被引量:1
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作者 张书铭 刘化章 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1302-1308,共7页
运用BP神经网络建立了助催化剂含量与催化剂活性之间的预测模型,对Fe_(1-x)O基氨合成催化剂的助催化剂进行优化。首先将前期实验数据整理归纳为含有3、4、5、6和7个助催化剂等5类催化剂,以助催化剂含量(体积分数)为输入变量,以425℃反... 运用BP神经网络建立了助催化剂含量与催化剂活性之间的预测模型,对Fe_(1-x)O基氨合成催化剂的助催化剂进行优化。首先将前期实验数据整理归纳为含有3、4、5、6和7个助催化剂等5类催化剂,以助催化剂含量(体积分数)为输入变量,以425℃反应器出口氨浓度(活性)为输出变量,对助催化剂进行优化。结果表明,BP神经网络预测模型拟合值均方误差最高为0.2784,预测值均方误差最高为0.1592,构建的BP神经网络模型准确度较高。在该模型的基础上,运用多种群遗传算法进行极值寻优,求解最优的催化剂配方,并进行实验验证。结果表明,根据优化结果制备5个样品的实验测定值与预测值的相对误差最高为2.88%,优化结果较为准确;含有7个助催化剂的催化剂活性最高为18.83%,比原样本的统计平均活性值(17.52%)高1.31%,相对提高7.48%,助催化剂含量优化取得满意的结果。 展开更多
关键词 Fe_(1-x)O 催化剂 助催化剂 神经网络 遗传算法 优化
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绵羊清道夫受体A基因启动子克隆及序列分析
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作者 曹鑫艳 魏立翔 +8 位作者 高之煜 刘良波 张辉 闫卫疆 肖非 孙雪梅 盛金良 孙延鸣 张彦兵 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第4期49-53,共5页
为了分析绵羊清道夫受体A(scavenger receptor A,SRA)基因的启动子序列特征,试验根据UCSC数据库和NCBI数据库预测的绵羊SRA基因启动子序列设计特异性引物,以绵羊肺组织基因组DNA为模板进行SRA基因启动子序列PCR扩增、测序,然后对序列进... 为了分析绵羊清道夫受体A(scavenger receptor A,SRA)基因的启动子序列特征,试验根据UCSC数据库和NCBI数据库预测的绵羊SRA基因启动子序列设计特异性引物,以绵羊肺组织基因组DNA为模板进行SRA基因启动子序列PCR扩增、测序,然后对序列进行生物信息学分析,包括预测启动子活性区域、转录因子结合位点、TATA box及CpG岛。结果表明:利用根据UCSC数据库预测的SRA基因启动子序列设计的引物未扩增出目的片段,利用NCBI数据库预测的SRA基因启动子序列设计的引物扩增得到了绵羊SRA基因启动子序列,大小约为1200 bp,与NCBI预测序列的相似性为99%,其中第577位碱基发生了突变(G→A);含有1个潜在活性区域(aaaaatgagctcacattcattttttttttcttaactggc);存在干扰素调节因子(interferon regulatory factor,IRF)1、IRF2、c-Jun、CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT enhancer binding protein,C/EBP)、活化蛋白1(activator protein 1,AP-1)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)转录因子结合位点,其中IRF1和c-Jun的结合位点出现频率较高;不存在TATA box和CpG岛,只存在3个CpG位点。说明SRA基因的表达可能受IRF1和c-Jun等相关转录因子的调控,不受甲基化的影响。 展开更多
关键词 清道夫受体A 启动子 生物信息学分析 启动子活性区域 转录因子 CPG岛
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牙鲆GHR基因Promoter区微卫星序列多态性与生长性状关系的初步研究 被引量:10
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作者 倪静 尤锋 +5 位作者 于深辉 张培军 徐冬冬 吴志昊 文爱韵 徐永立 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期719-725,共7页
采用牙鲆GHR基因5’端Promoter区的1个微卫星标记,对胶南和日照2个牙鲆养殖群体进行了群体遗传多样性的研究,并探索该基因多态性位点与牙鲆生长性状之间的相关性。结果表明,2个群体在该座位的等位基因数为12和9个,有效等位基因数为6.26... 采用牙鲆GHR基因5’端Promoter区的1个微卫星标记,对胶南和日照2个牙鲆养殖群体进行了群体遗传多样性的研究,并探索该基因多态性位点与牙鲆生长性状之间的相关性。结果表明,2个群体在该座位的等位基因数为12和9个,有效等位基因数为6.26和5.04个,多态信息含量为0.84和0.80。2个群体该座位的Hardy-Weinberg遗传偏离指数均为正值,并没有显示出杂合子缺失,但各基因型分布频率都在一定程度上偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.01)。连锁分析中发现,在胶南群体中,IM基因型对应的个体在全重、全长、体长、头长、体高和眼径形态学数据中均是最大的;在日照群体中,BC基因型对应的个体在全重、全长、体高、尾柄高、尾柄长和眼径数据中均是最大的;而CJ基因型对应的个体在体长和头长这两组数据中是最大的。该结果为研究GHR基因的变异对鱼类生长发育的影响及探索将该基因作为生长遗传标记的可行性奠定了实验基础。 展开更多
关键词 牙鲆 GHR基因5’端promoter 微卫星 遗传多样性 性状连锁分析
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小黑杨Rubisco小亚基基因启动子的克隆及表达活性分析
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作者 曹佳玉 曹丽娜 +7 位作者 张俏艺 张双 胡志宝 赵唐锐 许志茹 李春明 全先奎 刘关君 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期625-633,共9页
核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Rubisco)是光合作用中决定碳同化速率的关键酶,其中小亚基(rbcS)是由核基因编码,并且主要在叶片中表达。利用RT-qPCR技术确定了小黑杨(Populus×xiaohei)叶片中高表达的Rubisco小亚基基因PxrbcS1和P... 核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Rubisco)是光合作用中决定碳同化速率的关键酶,其中小亚基(rbcS)是由核基因编码,并且主要在叶片中表达。利用RT-qPCR技术确定了小黑杨(Populus×xiaohei)叶片中高表达的Rubisco小亚基基因PxrbcS1和PxrbcS2基因,并克隆了其上游2 240、2 174 bp的启动子。对其进行启动子元件分析结果表明,PxrbcS1和PxrbcS2的启动子具有多个与光诱导表达相关的元件,例如G-box、MRE和Box4等元件。构建pBI-121-p PxrbcS1::GUS和pBI-121-p PxrbcS2::GUS植物表达载体并遗传转化84K杨(P. alba×P. glandulosa)。GUS组织化学染色以及qPCR表达分析表明PxrbcS1和PxrbcS2的启动子能够驱动GUS基因在84K杨叶片特异性高表达。总之,上述结果表明该研究成功地从小黑杨中克隆了具有叶片高表达活性的PxrbcS1和PxrbcS2的启动子,该启动子可应用到包括杨树在内的植物光合作用相关的基因功能研究以及提高植物光合作用的遗传操作中。 展开更多
关键词 杨树 Rubisco小亚基启动子 克隆 调控元件 遗传转化 GUS染色
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基于真核CMV启动子构建猪瘟病毒感染性cDNA克隆与病毒拯救
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作者 关飞虎 王静 +6 位作者 宋亚芬 温立佳 田野 蒋颖 杨承槐 张辉 张乾义 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期561-567,607,共8页
为建立猪瘟病毒(CSFV)反向遗传操作系统,本研究将CSFV石门株(SM)全基因组克隆至pBAC11载体中,并采用重叠延伸PCR方法在病毒基因组5'端和3'端分别加入CMV真核启动子序列和RzBGH序列,并将其基因组nt2809的碱基C突变为T,将原有的Af... 为建立猪瘟病毒(CSFV)反向遗传操作系统,本研究将CSFV石门株(SM)全基因组克隆至pBAC11载体中,并采用重叠延伸PCR方法在病毒基因组5'端和3'端分别加入CMV真核启动子序列和RzBGH序列,并将其基因组nt2809的碱基C突变为T,将原有的AfeⅠ酶切位点突变消失作为拯救病毒的遗传标记。将构建的质粒转染PK-15细胞培养后,收集细胞上清盲传3代后通过RT-PCR扩增蛋白编码基因,并经间接免疫荧光试验(IFA)鉴定。RT-PCR鉴定结果显示扩增到CSFV特异性基因;IFA结果显示接种病毒的细胞出现绿色荧光。表明病毒拯救成功,将其命名为BAC-rSM。将BAC-rSM株在PK-15细胞中连续传18代,将第18代病毒经RT-PCR扩增E2基因,并对遗传标记的位点经Afe I酶切和鉴定,分析BAC-rSM病毒的遗传稳定性,结果显示第18代BAC-rSM株遗传标记稳定存在,表明拯救的病毒具有遗传稳定性。将BAC-rSM和SM株病毒分别以MOI 1感染PK-15细胞,在感染后不同时间点收获病毒并测定病毒滴度,结果显示BAC-rSM和SM株生长动力学特征基本一致。对第18代BAC-rSM株与SM株进行全基因组序列比对分析,利用在线软件npsa-prabi.ibcp.fr/对Erns和E2蛋白二级结构预测,采用荧光定量PCR(qPCR)对BAC-rSM和SM株感染PK-15细胞中IFN-βmRNA的转录水平。全基因测序比对分析结果显示,BAC-rSM株基因组共存在46个碱基突变,经预测其Erns和E2的突变导致各自的二级结构改变;qPCR检测结果显示,相对SM感染的PK-15细胞,BAC-rSM感染后8 h和24 h PK-15细胞中IFN-βmRNA的转录水平显著或极显著降低(P<0.05、P<0.01)。本研究建立了一种简单、操作方便的CSFV反向遗传操作系统的方法,为进一步开展CSFV的分子生物学、毒力决定因素、分子发病机制、疫苗开发和病毒与宿主相互作用的研究提供了新的技术方法。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 CMV启动子 感染性克隆 反向遗传操作系统
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西南麦区骨干亲本川麦42重要基因组区段的确定及其对衍生品种的遗传贡献
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作者 刘泽厚 万洪深 +5 位作者 杨凡 王琴 唐豪 杨宁 杨武云 李俊 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期897-912,共16页
【目的】川麦42是利用人工合成六倍体小麦选育出的高产、广适的优异小麦品种,是西南麦区重要的骨干亲本,本研究通过明确川麦42重要基因组区段及其对衍生品种的遗传贡献,为西南麦区突破性品种培育提供分子设计依据。【方法】利用170个SSR... 【目的】川麦42是利用人工合成六倍体小麦选育出的高产、广适的优异小麦品种,是西南麦区重要的骨干亲本,本研究通过明确川麦42重要基因组区段及其对衍生品种的遗传贡献,为西南麦区突破性品种培育提供分子设计依据。【方法】利用170个SSR和2268个DArT标记分析川麦42遗传组分在7个衍生品种中的分布与传递情况;根据已构建的遗传图谱和定位到的产量性状QTL,明确川麦42遗传组分对各个衍生品种的遗传贡献。【结果】川麦42遗传组分在7个一代衍生品种中分布与传递频率不同,其中川麦56、川麦58、川麦64、川麦104、川麦90和川麦91继承了50%以上的川麦42的遗传组分,平均为64%,高于理论值,而川麦92则低于25%。17条小麦染色体上的92个等位位点在川麦42衍生品种中具有较高的分布频率,得到稳定传递;对比已构建的川麦42遗传连锁图谱及其定位到的QTLs,发现位于2A、2B、4A、4D、5B、5D、5A、6D、7A和7D染色体上11个基因组区段与重要农艺性状QTL紧密连锁,其中4A、4D、5B、5D和7D染色体上川麦42单倍型可提高衍生品种的穗粒数、千粒重和小区产量;位于5B染色体Xgwm234~Xgwm371区段携带千粒重QTL,川麦42单倍型最高可增加千粒重2.21 g;位于4D、5D和7D染色体区段携带小区产量QTL,川麦42单倍型最高增产率分别为8.92%、6.33%、4.79%。【结论】携带产量性状增效QTL并且在衍生品种中能够高频传递的基因组区段是川麦42能够成为西南麦区骨干亲本的重要遗传基础,川麦42重要基因组区段的确定为西南麦区小麦骨干亲本选择及突破性品种的培育提供了重要的理论参考。 展开更多
关键词 川麦42 骨干亲本 重要基因组区段 遗传贡献
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应用STR荧光标记分析烟台地区草莓种质资源遗传多样性 被引量:1
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作者 李恺睿 史庆瑶 +2 位作者 樊铭玺 谭浩然 陈晓峰 《山东农业科学》 北大核心 2024年第1期43-49,共7页
本研究以烟台地区1份野生草莓种质和6份常规栽培品种为试材,选取已发表具有扩增多态性的11对STR荧光标记引物进行扩增,采用多重荧光毛细管电泳检测,分析了该地区草莓种质的遗传多样性,并构建了其分子身份证.结果表明,用这11对引物从7份... 本研究以烟台地区1份野生草莓种质和6份常规栽培品种为试材,选取已发表具有扩增多态性的11对STR荧光标记引物进行扩增,采用多重荧光毛细管电泳检测,分析了该地区草莓种质的遗传多样性,并构建了其分子身份证.结果表明,用这11对引物从7份草莓种质中共检测到60个STR等位基因位点,平均每对引物5.45个,扩增片段长度在90~270 bp之间,多态信息含量平均为0.676,可用于草莓种质的多态性检测.聚类分析显示7份草莓种质间的遗传相似系数为0.077~0.842,在遗传相似系数为0.257时,7份种质被分为3个类群,W1(野生草莓)与S2(丰香种质)同源性较高.对7份草莓种质进行不同等位基因编码,构建了分子身份证.本研究结果可为烟台地区草莓种质资源鉴定、保护和开发利用提供重要依据. 展开更多
关键词 STR荧光标记 草莓 遗传多样性 聚类分析 分子身份证 烟台地区
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表达增强型绿色荧光蛋白的C型禽偏肺病毒反向遗传系统的构建及优化
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作者 郭禹 程晶 +2 位作者 左玉柱 范京惠 姜海军 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2091-2100,共10页
【目的】禽偏肺病毒(Avian metapneumovrus,aMPV)是副黏病毒科偏肺病毒属成员,其所造成的鸡肿头症和产蛋率下降对养殖业造成严重危害。为更好地预防aMPV并研究其发病机制,本研究将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protei... 【目的】禽偏肺病毒(Avian metapneumovrus,aMPV)是副黏病毒科偏肺病毒属成员,其所造成的鸡肿头症和产蛋率下降对养殖业造成严重危害。为更好地预防aMPV并研究其发病机制,本研究将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)插入C型aMPV(aMPV/C)基因组中,构建表达EGFP的重组aMPV,并使用不同的载体及启动子构建aMPV迷你基因组,来优化aMPV反向遗传操作系统(reverse genetic system,RGS)的构建。【方法】将EGFP插入pBluescript-aMPV RGS的P和M蛋白之间非编码区并进行拯救,观察绿色荧光蛋白的表达情况,同时测定重组病毒滴度及遗传稳定性。为优化RGS的构建,采用含有T7启动子的pBluescript SK(+)和含有T7、CMV启动子的pcDNA3.1两种载体构建aMPV迷你基因组。首先将aMPV/C基因组两端的先导区(leader)和尾随区(trailer)与EGFP的cDNA进行PCR扩增,并切胶回收;其次将各胶回收片段按照leader-EGFP-trailer的顺序进行无缝克隆连接,并测序验证;最后将连接完整的迷你基因组反向插入两个载体中,构建aMPV/C的迷你基因组(pBR-aMPV/C和pc-aMPV/C)。在拯救迷你基因组的试验中,将两个aMPV/C迷你基因组与3个表达N、P和L蛋白的质粒共转染到BHK-21细胞中,观察绿色荧光蛋白的表达情况。【结果】拯救的aMPV-EGFP重组病毒测序结果显示,EGFP已成功插入aMPV基因组中,并在前3代aMPV-EGFP重组病毒中稳定表达。aMPV-EGFP重组病毒滴度在感染96 h后达到105.5 TCID 50/mL。而pBR-aMPV/C和pc-aMPV/C两个重组质粒的测序结果也证明了含有EGFP的aMPV迷你基因组构建完成。将3个重组质粒分别与辅助质粒共转染至BHK-21细胞中,转染24 h后观察到细胞中绿色荧光蛋白表达,证明aMPV-EGFP重组病毒及pBR-aMPV/C和pc-aMPV/C两个aMPV迷你基因均都成功表达了EGFP。【结论】本研究成功构建了两个aMPV迷你基因组并拯救了aMPV-EGFP重组病毒,重组病毒具有良好的遗传稳定性。而CMV和T7作为aMPV/C RGS中的启动子时,二者的拯救效率相同。pBluescript SK(+)和pcDNA3.1均可用于aMPV/C RGS的构建,本研究为aMPV/C RGS的构建提供了多种方法。 展开更多
关键词 C型禽偏肺病毒 迷你基因组 反向遗传系统 CMV启动子 增强绿色荧光蛋白 T7启动子
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