假单胞菌M18菌株的PltR因子特异性正调控藤黄绿菌素合成

经生物信息学分析,在假单胞菌M18(Pseudomonas sp.M18)菌株的藤黄绿菌素(pyolute-orin,Plt)生物合成基因簇上游定位了一个属于LysR家族的调控因子编码基因pltR.运用同源重组技术,构建了pltR失活的突变菌株M18TRG,在King’sB培养基中,与野生型菌株相比,Plt合成能力下降了70%,而吩嗪-1-羧酸(phenazine-1-carboxylic acid,PCA)的合成能力不受影响.反式互补pltR的突变株能回复Plt的合成能力达到野生型水平.在菌株M18中过表达pltR,Plt产量提高13倍,PCA产量没有改变.这些结果表明pltR基因表达产物是Plt生物合成的特异性正调控因子.在野生型菌株M18和不产Plt的突变株M18T中,pltR基因表达量无显著差异,表明pltR基因的表达不受Plt调控.与野生株相比,突变株M18TRG中的转录融合plt-lacZ表达量显著降低,表明PltR对Plt的正调控作用主要发生在转录水平上.对pltR基因在gacA突变株M18G和rsmA突变株M18R中的表达量的进一步研究发现,PltR参与了gacA基因对Plt的合成的正调控,但不参与rsmA基因对Plt合成的负调控.