RND3对雨蛙素诱导的大鼠AR42J细胞损伤的影响

目的:观察干预RND3对雨蛙素诱导的大鼠胰腺腺泡细胞AR42J损伤的影响,并探究RND3在急性胰腺炎(AP)中的调控机制。方法:分别构建RND3沉默和过表达的雨蛙素诱导的AR42J细胞AP模型,共6组(NC对照组、雨蛙素处理组、si-con阴性对照组、pcDNA阴性对照组、si-RND3沉默组和pcDNA-RND3过表达组)。qRT-PCR和Western blot分别在雨蛙素给药后的0 h、4 h、8 h、12 h和24 h检测AR42J细胞中RND3 mRNA、蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞的存活情况和LDH漏出量,流式细胞术检测AR42J细胞的凋亡率,qRT-PCR检测相关炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-18)的mRNA表达水平,Western blot检测AR42J细胞中凋亡相关蛋白(GSDMD、NLRP3、Cleaved caspase-1和caspase-1)表达。结果:雨蛙素诱导的AR42J细胞能抑制RND3 mRNA和蛋白表达,且随着雨蛙素处理时间延长,其对RND3的抑制作用越显著;相比NC对照组,siRND3组、雨蛙素处理组大鼠AR42J细胞中的相关炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-18表达上调(P<0.05),同时,凋亡相关蛋白GSDMD、NLRP3、Cleaved caspase-1和caspase-1表达升高(P<0.05);相反,pcDNA-RND3过表达组细胞炎症和凋亡水平显著降低(P<0.05)。结论:RND3可减轻大鼠胰腺腺泡细胞AR42J的炎症反应和细胞凋亡,其作用机制与NLRP3/caspase-1/GSDMD通路的活性有关。

RND家族外排泵及其与微生物群体感应系统的相互关系

抗生素耐药性一直是细菌病害防治的难题,药物外排泵过量表达是细菌耐药性形成的重要机制之一。在革兰氏阴性细菌中,RND(Resistance-nodulation-cell division)家族外排泵在耐药性中发挥着重要作用,近年来的研究表明,依赖于小分子信号物质进行调控的群体感应系统与RND外排泵家族之间存在紧密的相互作用关系。本文在介绍RND家族外排泵的结构、转运机理和群体感应系统的类型及调控方式的基础上,剖析了群体感应系统对RND外排泵的调控机理以及RND外排泵对群体感应系统信号分子转运的影响。深入研究RND家族外排泵与群体感应系统之间的相互依赖、相互制约关系有利于阐明RND家族外排泵的调控机理,并有可能为克服微生物耐药性问题提供新的思路。

铜绿假单胞菌主要RND外排泵表达与β-内酰胺类抗生素耐药性的相关性研究

目的探讨铜绿假单胞菌4种主要RND外排泵的表达水平与β-内酰胺类抗生素耐药性间关系。方法采用药敏实验检测临床菌株β-内酰胺类抗生素耐药性;构建转录融合报告基因mexA-lacZ、mexC-lacZ、mexE-lacZ和mexX-lacZ,通过测定β-半乳糖苷酶活力,分析和比较4种RND外排泵表达水平的差异,及其表达水平与菌株抗生素耐药性的相关性。结果共检测151株临床菌株,对羧苄西林、替卡西林、氨曲南和头孢他啶的耐药性分别为19.87%、9.93%、2.65%和26.49%。选择耐2种及以上抗生素的菌株23株和对4种抗生素全部敏感的菌株19株,测定β-半乳糖苷酶活力。耐药菌株的mexA、mexC和mexX基因的表达水平与敏感菌株之间的差异有统计学意义(P均<0.05)。多元线性回归分析发现,mexA、mexC和mexX基因的表达水平分别与羧苄西林、替卡西林和氨曲南的抑菌圈直径存在高度或中度负相关性;贝塔权重数据显示mexA基因表达水平是影响羧苄西林(-0.595)、替卡西林(-0.483)和氨曲南(-0.553)3种抗菌素耐药性的主要因素。结论外排泵MexAB-OprM、MexCD-OprJ和MexXY-OprM的表达水平与β-内酰胺类抗生素耐药性存在显著相关性,MexAB-OprM对临床菌株β-内酰胺类抗生素耐药性具有主要影响。

铜绿假单胞菌RND型外排系统研究进展

主动外排是铜绿假单胞菌耐药的重要机制,在众多的主动外排系统中,以RND型最为常见。通过总结近年来发表的文献,现对铜绿假单胞菌RND型外排系统的结构、底物、流行病学、抑制主动外排等方面进行综述。

RhoE/Rnd3蛋白在乳腺癌组织中的表达及意义

目的:探讨RhoE/Rnd3蛋白在乳腺癌组织中的表达情况及意义。方法:采用免疫组化方法检测60例乳腺浸润性导管癌、30例正常乳腺组织中RhoE/Rnd3蛋白的表达情况。结果:RhoE/Rnd3蛋白在正常乳腺组织和乳腺癌中的表达率分别为73.3%和40.0%,二者的表达差异具有显著性意义(P<0.05)RhoE/Rnd3蛋白在乳腺癌中表达与恶性程度呈负相关(P<0.05)。RhoE/Rnd3的表达与与患者年龄和淋巴结转移呈负相关,与生育史呈正相关。结论:RhoE/Rnd3在乳腺癌的发生中呈负调控作用,RhoE/Rnd3可能通过抑制Cy-clinB1来抑制乳腺癌的发生;RhoE/Rnd3过表达与乳腺癌预后较好有关。

RhoE/Rnd3在肝癌组织中的表达及临床意义

通过观察RhoE/Rnd3在肝癌组织中的表达情况及其与临床病理分级的关系,为探索RhoE/Rnd3的生物学功能和临床意义提供依据。对166例组织标本(其中正常肝脏组织60例,原发性肝癌病人106例)利用免疫组化研究RhoE/Rnd3在组织中蛋白水平的表达变化。RhoE/Rnd3在正常肝脏组织中普遍表达,但在原发性肝癌组织中表达低下或缺失。免疫组化结果显示RhoE/Rnd3主要分布在细胞的胞浆中。RhoE/Rnd3在原发性肝癌组织中的表达(阳性率为78%,83/106),明显低于其在正常肝组织(阳性率为97%,58/60)。P<0.005。且RhoE/Rnd3的表达随肿瘤组织分化程度的降低染色强度有下降趋势(P<0.005)。RhoE/Rnd3在原发性肝癌组织中表达明显降低,表明其对肿瘤的发生发展起到负性调控作用,结合目前的研究结果,RhoE/Rnd3可能是一种新型的抑癌基因,参与肿瘤细胞的凋亡过程。

主动外排系统RND家族最新研究进展

我国是面临细菌耐药性威胁最为严重的国家之一。在所有耐药病原体中,粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和肠杆菌属细菌(ESKAPE)占医院感染的大多数,且耐药率持续增长[1]。根据2017年CHINET中国细菌耐药监测数据表明革兰阴性菌检出率约占70%[2],其耐药性日趋严重。

miR-27a-3p靶向Rnd3对氧糖剥夺/复氧诱导的神经细胞凋亡的影响

目的探讨miR-27a-3p调控Rho家族GTP酶3(Rnd3)在氧糖剥夺/复氧(OGD/R)神经细胞凋亡中的作用及机制。方法体外培养大鼠PC12神经细胞,氧糖剥夺2 h后分别复氧3、6、9和12 h,检测各时刻细胞活力、miR-27a-3p和Rnd3 mRNA的表达筛选最适复氧时间点。采用慢病毒分别转染miR-27a-3p Mimic、miR-27a-3p Inhibitor及二者的阴性对照、转染shRnd3及其阴性对照、或共转染shRnd3和miR-27a-3p Inhibitor入细胞后,CCK-8法检测细胞的活力;流式细胞术检测细胞的凋亡率;RT-qPCR检测miR-27a-3p和Rnd3 mRNA的表达;Western blot检测凋亡相关蛋白和Rnd3蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-27a-3p和Rnd3的靶向关系。结果上调miR-27a-3p提高了细胞活力,降低了细胞的总凋亡率、抑制了促凋亡蛋白Cleaved Caspase-3(C-caspase-3)、Bax和促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,差异有统计学意义(P<0.05);下调miR-27a-3p则出现相反的结果。双荧光素酶报告基因实验显示Rnd3是miR-27a-3p的靶基因。下调Rnd3提高了细胞活力,降低了细胞的总凋亡率、抑制了促凋亡蛋白C-caspase-3、Bax和促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。然而,miR-27a-3p Inhibitor逆转了shRnd3的保护作用。结论miR-27a-3p通过靶向抑制Rnd3抑制细胞凋亡减轻PC12神经细胞的OGD/R损伤。

Rnd函数在VB图形图像技术中的应用

简要分析了Rnd函数的语法格式、功能特点和使用方法;通过列举典型实例,从绘制图形与处理图片、制作动画、实现艺术效果三方面说明Rnd函数在VB图形图像技术中的应用。

癫痫发病中Rnd1-2蛋白的表达情况及意义

目的探讨Rnd1-2蛋白在癫痫患者脑组织中的表达情况。方法选择癫痫手术患者36例作为研究组,同时选取12例颅脑创伤患者作为对照组。应用免疫荧光、免疫组化以及Western-blot法检测2组脑组织中Rnd1-2蛋白表达情况。结果研究组颞叶脑组织中Rnd1-2蛋白的平均灰度显著低于对照组(P<0.05),阳性细胞数、光密度值均显著高于对照组(P均<0.05);免疫荧光检测显示,研究组Rnd1-2蛋白的阳性表达区域同神经元特异性烯醇化酶阳性区域基本重叠。结论 Rnd1-2蛋白表达集中于神经元,在癫痫的形成过程中有重要作用,对Rnd1-2蛋白的研究有助于阐明癫痫发病机制,有应用及推广价值。

miR-128a在肝细胞癌中表达上调并通过靶向调控RND3促进肝癌细胞增殖

目的检测MicroRNA-128a(miR-128a)在肝细胞癌中的表达情况并探讨其在肝癌细胞中的生物学功能及机制。方法收集19例肝细胞癌及对应癌旁组织,运用qRT-PCR技术检测miR-128a在肝细胞癌和对应癌旁组织及肝癌细胞株中的表达;应用miR-128a mimics或inhibitor转染人肝癌细胞,MTT检测转染后细胞增殖活力变化;软件预测miR-128a的潜在靶点RND3,并用双荧光素酶报告实验证实miR-128a与RND3 3'UTR结合,qRT-PCR和Western blot检测miR-128a潜在靶点RND3的表达变化;Western blot检测细胞周期蛋白变化。结果在肝细胞癌组织中miR-128a的表达显著高于对应的癌旁组织(P<0.05);miR-128a促进肝癌细胞增殖(P<0.05);在肝癌细胞中miR-128a通过与RND3 3'URT结合下调RND3 mRNA和蛋白的表达(P<0.05);抑制miR-128a的表达可以导致cyclin B1、cyclin D1和CDK4表达下调。结论 miR-128a在肝细胞癌中表达上调并通过靶向调控RND3促进肝癌细胞增殖。

Rnd2介导的生命活动及其作用机制

Rnd2是Rho GTPase超家族下的Rnd亚家族中非典型成员之一,且Rnd2主要以活性鸟苷三磷酸结合态存在。研究表明,Rnd2通过调节细胞骨架,可在影响细胞的运动与突起的生长在神经元发育以及妊娠的维持等过程中发挥着重要作用。主要概述了Rnd亚家族成员Rnd2通过与上下游信号分子相互作用调节其相关生理学活性,并影响下游信号的通路的转导,进而调控细胞骨架的重塑等过程影响的一系列生理活动及其相关作用机制。

鲍曼不动杆菌RND主动外排泵的表达与耐药性的关系

目的检测鲍曼不动杆菌耐药结节分化家族(RND)外排系统的分布,探索其表达与耐药性的关系。方法对南昌大学第一附属医院临床标本分离的59株多重耐药鲍曼不动杆菌进行细菌的鉴定与药敏分析,采用PCR技术检测鲍曼不动杆菌中RND主动外排系统的分布情况,比较不同耐药表型的鲍曼不动杆菌间外排泵基因的表达情况,分析其表达量与耐药的关系,并对RND外排系统的扩增产物进行测序。结果鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星耐药率高达93.2%、94.9%、88.1%、96.6%、52.5%。59株鲍曼不动杆菌经外排泵及整合子基因PCR扩增检测,adeR、adeS、adeB、adeJ、adeG基因的携带率分别为81.4%、91.5%、93.2%、100.0%、61.0%。不同菌株外排泵基因的表达均不相同,其中庆大霉素、亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦耐药组与非耐药组鲍曼不动杆菌adeB、adeJ基因的表达量相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。adeABC外排泵的调控基因adeR、adeS的碱基序列未出现基因突变或插入序列。结论 RND外排系统在鲍曼不动杆菌中普遍存在,RND外排系统中adeB、adeJ基因的表达水平升高与细菌对庆大霉素、亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦的耐药性有关。

算法与几何概型的一个结合点——随机函数RND

人教A版必修3第三章《概率》中介绍了蒙特卡罗(Monte Carlo)方法,即计算机(和计算器)模拟试验法.这种方法就是利用随机函数RND的均匀分布的性质,模拟实际情景进行试验,并对模拟试验的结果进行观察、分析和总结,从而解决某些实际问题.……

不动杆菌属RND主动外排系统研究进展

不动杆菌属(Acinetobacter spp.)在临床的检出率日益增高,特别是鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii),耐药性日趋严重,出现了多重耐药(multiple-drug resistance,MDR),广泛耐药(extensively drug resistance,XDR)以及泛耐药(pan-drug resistance,PDR)的菌株。不动杆菌耐药性复杂,由多种耐药机制参与,而药物主动外排系统的过度表达是主要耐药机制之一,其中耐药结节细胞分化(resistance-nodulation-cell-division,RND)家族,具有广泛的底物外排性,与不动杆菌多重耐药性密切相关,因此研究RND外排泵耐药及其表达调控机制对防治临床不动杆菌感染有一定的理论和现实意义。本文就对不动杆菌RND外排泵的结构特点、耐药性等方面进行详细综述。

鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶和RND外排泵相关耐药基因的研究

目的分析鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶和RND外排泵基因的携带情况,并进一步探讨外排泵过表达与菌株耐药性形成的关系。方法采用PCR技术扩增分离鲍曼不动杆菌的B类金属酶(blaNDM-1、blaVIM、blaIMP)、D类苯唑西林酶(blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-51、blaOXA-58)以及RND外排泵基因(adeB、adeJ、adeG),再采用qPCR对6株多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)和4株非多重耐药鲍曼不动杆菌(NMDRAB)菌株的adeB、adeJ和adeG水平进行检测。结果71株MDRAB中blaNDM-1(26.8%,19/71)、blaIMP(88.7%,63/71)和blaOXA-23(84.5%,60/71)的检出率明显高于30株NMDRAB中blaNDM-1(0.0%,0/30)、blaIMP(0.0%,0/30)和blaOXA-23(10.0%,3/30)的检出率,差异均有统计学意义(P<0.05)。blaOXA-51的检出率为100.0%,未检测到blaVIM、blaOXA-24和blaOXA-58。71株MDRAB中adeB(98.6%,70/71)和adeG(100.0%,71/71)的检出率显著高于30株NMDRAB中adeB(20.0%,6/30)和adeG(90.0%,27/30)的检出率,差异均有统计学意义(P<0.05);adeJ的检出率为100.0%;同时MDRAB菌株的adeB和adeG基因表达量明显高于NMDRAB菌株(P<0.05)。结论碳青霉烯酶基因NDM-1、IMP和OXA-23和外排泵adeABC、adeFGH的高表达与鲍曼不动杆菌多重耐药的形成关系密切。

某船Sulzer RND型柴油机扫气箱着火原因分析

目前Sulzer6 RND76型柴油机在老龄船中使用较为广泛,扫气箱着火是该机型易发生的故障之一,若应对措施不当可能引发更大的事故。分析引起该机型扫气箱着火的原因、相应的预防手段以及着火后的应急处理措施,为保证柴油机正常工作、船舶安全营运提供参考。

铜绿假单胞菌RND外排泵研究进展

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA），是一种广泛分布于自然界的革兰阴性非发酵菌，也是临床上常见的、引起院内获得性感染的重要条件致病菌，尤其是来自 ICU 重症、气管插管等侵袭性操作、长期使用抗生素的感染患者［1］。1990年初Poole 等人在铜绿假单胞菌野生株中发现编码外排泵 MexAB-OprM的操纵子，以及其在固有耐药中发挥的作用。在2013年，美国疾病预防与控制中心［2］列出当前的耐药危机，其中包括假单胞菌属。国内已有多项大型流行病学调查显示我国 PA 感染的严重性［3］，以及外排泵机制在抗药性方面发挥了重要作用［4］。铜绿假单胞菌药物外排泵介导了具有临床重要意义的多重耐药性（包括天然耐药和获得性耐药）。本文主要对铜绿假单胞菌常见外排泵的特点、底物谱、调控机制等进行综述。

类叶升麻苷调控Rnd3/NF-κB通路对缺氧/复氧诱导心肌细胞损伤的影响

目的探讨类叶升麻苷调控Rho家族GTP酶3(Rnd3)/核因子κB(NF-κB)通路对缺氧/复氧(H/R)诱导心肌细胞损伤的影响。方法本实验将H9c2心肌细胞分为对照组(不给药、不造模)、H/R组(仅造模)、H/R+AS-L组、H/R+AS-M组、H/R+AS-H组(以上3组先分别给予10、30、90μmol/L类叶升麻苷,再造模)、H/R+pcDNA组[先转染pcDNA(空载体),再造模]、H/R+pcDNA-Rnd3组[先转染pcDNA-Rnd3(Rnd3过表达载体)使Rnd3过表达,再造模]、H/R+AS-H+si-NC组[先转染si-NC(阴性对照),然后给予90μmol/L类叶升麻苷,再造模]、H/R+AS-H+si-Rnd3组[先转染si-Rnd3(Rnd3小分子干扰RNA)抑制Rnd3过表达,然后给予90μmol/L类叶升麻苷,再造模]。各组经相应处理后,检测细胞凋亡率和细胞中乳酸脱氢酶(LDH)释放量、丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、白细胞介素1β(IL-1β)水平、IL-6水平、Rnd3和NF-κB亚基p65(NF-κB p65)mRNA及蛋白的表达、活化胱天蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)和Cleaved Caspase-9蛋白表达的变化。结果给予不同浓度类叶升麻苷均可降低H/R诱导H9c2心肌细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9蛋白表达水平、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平、LDH释放量和MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,升高SOD活性和Rnd3 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),且呈剂量依赖性。Rnd3过表达可使H/R诱导H9c2心肌细胞凋亡率,NF-κB p65、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平,LDH释放量和MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低,使Rnd3蛋白表达水平和SOD活性升高(P<0.05);而抑制Rnd3过表达,可减弱类叶升麻苷对H/R诱导H9c2心肌细胞的凋亡、氧化应激及炎症反应的抑制作用(P<0.05)。结论类叶升麻苷可通过促进Rnd3表达、抑制NF-κB p65表达来调控Rnd3/NF-κB通路,进而抑制心肌细胞凋亡、氧化应激及炎症反应,从而减轻H/R诱导的心肌细胞损伤。

RhoE/Rnd3及CyclinB1蛋白在人乳腺癌中的表达及相关性

目的:探讨RhoE/Rnd3及CyclinB1蛋白在乳腺癌中的表达情况及其相关性。方法:采用免疫组化方法检测60例乳腺浸润性导管癌、30例正常乳腺组织中RhoE/Rnd3及CyclinB1蛋白的表达情况。结果:RhoE/Rnd3及Cyclin B1蛋白在正常乳腺中的表达率分别为73.3%和43.3%,二者的表达差异具有显著性意义(P<0.05);在乳腺癌中的表达率分别为40.0%和70.0%,二者的表达差异具有显著性意义(P<0.05)。RhoE/Rnd3及CyclinB1蛋白表达呈负相关(P<0.05)。RhoE/Rnd3的表达与患者年龄和淋巴结转移呈负相关,与生育史呈正相关;CyclinB1表达与患者年龄和ER状态呈正相关。结论:RhoE/Rnd3在乳腺癌的发生中呈负调控作用,CyclinB1在乳腺癌发生中呈正调控作用,RhoE/Rnd3可能通过抑制CyclinB1来抑制乳腺癌的发生;RhoE/Rnd3过表达与乳腺癌预后较好有关,CyclinB1过表达与乳腺癌预后不良有关。