SB203580对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的:探讨SB203580对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响.方法:将32只♀SD大鼠分为4组:正常组(N组)8只、肝纤维化组(HF组)8只、DMSO溶剂干预组(D组)8只、P38MAPK抑制剂SB203580干预组(SB组)8只.采用四氯化碳复合因素法复制肝纤维化模型,肝纤维化模型制作结束后,D组给予2‰DMSO溶液3 mL/(kg?d),SB组给予SB203580溶液10 mg/(kg?d),N组、HF组给予同等剂量0.9%生理盐水3 mL/(kg?d)腹腔注射,连续注射4 d.干预结束后,宰杀大鼠留取肝脏,行肝组织病理切片HE染色评价肝纤维化分期,行Masson染色观察胶原纤维沉积情况,采用SP免疫组织化学法检测肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达,应用逆转录PCR法检测肝脏中Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达.结果:正常对照组(N组)、肝纤维化组(H F组)、S B203580溶剂组(D M S O组)和P38MAPK通路特异性抑制剂组(SB203580组)的肝纤维化分期平均秩分别为4.50、22.50、24.00和15.00;SSS评分分别为2.750±0.707、15.875±0.835、16.000±0.926和11.625±0.9 1 6;Ⅰ型胶原显色指数分别为1.5 7 5±0.249、7.650±0.621、7.725±0.501和4.625±0.495;Ⅲ型胶原显色指数分别为2.375±0.518、4.025±0.446、4.075±0.544和3.375±0.167;Ⅰ型胶原mRNA表达分别为0.020±0.003、0.012±0.002、0.009±0.002和0.016±0.005;Ⅲ型胶原mRNA表达分别为0.412±0.772、0.773±0.137、0.799±0.116和0.572±0.862.HF组与N组相比,Ⅰ、Ⅲ型胶原及其mRNA表达升高(均P<0.001),与肝纤维化分期结果一致(P<0.001);D组与HF组无明显差异(均P>0.05);SB组与HF组相比,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达降低(Ⅰ型胶原显色指数P<0.001,Ⅲ型胶原显色指数P=0.041);Ⅰ型胶原mRNA表达降低(P=0.005),同时Ⅲ型胶原mRNA表达亦降低(P=0.005),肝纤维化分期下降(P=0.015).结论:P38MAPK抑制剂SB203580阻断P38MAPK通路具有降低肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的作用,能够延缓肝纤维化的发生发展.

SB203580和WP631对照射后肺成纤维细胞内Smad通路信号转导的影响

背景与目的:放射性肺纤维化以成纤维细胞增殖和细胞外基质过度沉积为特征。转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGFβ1)是放射性肺纤维化发生发展的"开关"性分子并被作为治疗的靶分子,因此阻断TGFβ1的信号转导可能减轻肺纤维化。本研究检测Smad通路抑制剂SB203580和WP631对照射后人肺成纤维细胞(human lung fibroblast,HLF)中信号转导的影响并探讨其效应。方法:将HLF用25"mol/LSB203580和5nmol/LWP631预处理后,再应用3Gy60Coγ射线照射和10"g/LTGFβ1刺激,通过凝胶阻滞电泳(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)、免疫印迹、免疫组织化学及细胞周期流式细胞仪检测等方法检测转录因子SP1和AP1活性的变化、Smad3,4,7和p-Smad3及Ⅰ型胶原和Ⅰ型组织纤溶酶原激活物抑制剂(type Ⅰ plasminogen activator inhibitor,PAI-1)的表达变化及细胞周期的变化。结果:经3Gyγ射线照射及TGFβ1刺激后,与未经预处理的HLF相比,应用SB203580或WP631预处理的HLF出现G2-M期阻滞,S期细胞显著减少。SB203580预处理可减少HLF中P21WAF1/CIP1和p-Smad3的表达,而WP631预处理可减少HLF表达PAI-1,抑制转录因子SP1和AP1的活化。结论:SB203580和WP631通过阻断TGFβ-Smad通路的信号转导,抑制#射线和TGF!1作用所导致的HLF过度增殖和P21WAF1/CIP1及PAI-1表达增多。

硫化氢在SB203580影响肝星状细胞增殖、凋亡中的作用

目的探讨H2S在P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)阻断剂SB203580影响大鼠肝星状细胞(HSC)-T6增殖、凋亡中的作用及对Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法设对照组(HSC加含10%胎牛血清的DMEM培养液)、二甲基亚砜(DMSO)组(对照组基础上加DMSO)、NaHS组(对照组基础上加NaHS至最适浓度)、SB组(DMSO组基础上加SB203580至最适浓度)、SB+NaHS组。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定SB203580及H2S对HSC的增殖抑制率(IR);Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术(FCM)检测HSC凋亡率;逆转录PCR法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达。结果 SB组(7.64±2.46)、SB+NaHS组(12.71±2.73)细胞凋亡率高于对照组(1.70±0.88),且SB+NaHS组高于SB组(均P<0.05);DMSO组(2.07±1.18)、NaHS组(2.56±1.23)与对照组差异无统计学意义。Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA在各组细胞中均表达,其中NaHS组表达高于对照组(P<0.05),且表达量最多,条带最亮、最宽,SB组与SB+NaHS组表达低于对照组和NaHS组(P<0.05),表达量较少,条带较暗。结论 H2S激活P38MAPK信号通路,且SB203580特异性阻断P38MAPK信号通路后,H2S刺激的HSC增殖受到抑制,凋亡得到促进。

p38蛋白激酶抑制剂SB203580对支气管哮喘小鼠气道炎症和Th2类细胞因子的影响

目的观察特异性p38蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂SB203580对哮喘小鼠气道炎症和Th2类细胞因子的影响。方法BALB/c小鼠30只随机分成3组,即正常对照组、哮喘模型组和SB203580干预组。通过原位分子杂交和酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织IL-4、IL-5 mRNA和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL-4、IL-5)含量的变化,并观察BALF中炎症细胞和肺组织病理学改变。结果哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数和IL-4、IL-5含量以及肺组织IL-4、IL-5mRNA的表达较正常对照组明显升高,差异具有显著性(P<0.01);SB203580干预组小鼠上述指标较哮喘模型组小鼠明显降低,差异亦具有显著性(P<0.01),肺组织病理学改变明显减轻。结论SB203580能降低气道炎症细胞的聚集和炎症介质的表达。抑制p38 MAPK的活性可能成为哮喘治疗的新途径。

白藜芦醇联合SB203580对宫颈癌细胞凋亡迁移的影响及机制

目的探讨白藜芦醇联合SB203580对宫颈癌细胞凋亡迁移的影响及机制。方法培养人宫颈癌HeLa细胞,CCK8实验检测不同浓度白藜芦醇作用于细胞48 h后对细胞增殖影响,挑选最佳作用浓度。将细胞分为四组,即对照组(A组):不做处理;SB203580组(B组),加10μmol/L SB203580;白藜芦醇组(C组),加60μmol/L白藜芦醇;白藜芦醇组+SB203580组(D组),加60μmol/L白藜芦醇和10μmol/L SB203580。流式细胞仪、Transwell小室检测四组细胞的凋亡率和迁移数,Western blot检测p38、p-p38、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase3)、B型白细胞/2型淋巴细胞样蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果白藜芦醇能显著抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖,60μmol/L白藜芦醇抑制了一半的细胞增殖(P<0.001);B组(14.83±1.23)%细胞凋亡率显著低于A组(3.42±0.78)%,细胞迁移数(189.20±7.93)显著高于A组(135.40±7.23);C组(35.57±1.86)%和D组(23.45±1.45)%细胞凋亡率显著高于A组,C组(51.30±5.49)和D组(97.60±6.88)细胞迁移数显著低于A组;D组细胞凋亡率显著高于B组,低于C组,细胞迁移数显著低于B组,高于C组(P<0.001);B组p-p38[(0.087±0.011比0.152±0.014)]、Cleaved-caspase3 [(0.162±0.011比0.093±0.009)]、Bax蛋白表达[(0.191±0.013)比(0.154±0.012)]显著低于A组,Bcl-2蛋白表达[(0.208±0.014)比(0.347±0.015)]显著高于A组;C组和D组p-p38[(0.282±0.016)、(0.201±0.015)]、Cleaved-caspase3[(0.315±0.013)、(0.223±0.012)]、Bax蛋白表达[(0.441±0.015)、(0.294±0.014)]显著高于A组,C组和D组Bcl-2蛋白表达[(0.071±0.010)、(0.156±0.012)]显著低于A组;D组p-p38、Cleaved-caspase3、Bax蛋白表达显著高于B组,低于C组,Bcl-2蛋白表达显著低于B组,高于C组(P<0.001)。p38蛋白表达在各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论白藜芦醇通过调控p38MAPK信号通路抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖和迁移,并通过调节Cleaved-caspase3、Bax、Bcl-2促进细胞凋亡。

SB203580与雷帕霉素联合对人子宫内膜癌Ishikawa细胞的体外抗肿瘤作用

目的观察体外P38MAPK信号通路抑制剂SB203580单独及SB203580联合mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)信号通路抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)对Ishikawa细胞生长、细胞凋亡以及细胞侵袭能力的作用。方法一定浓度梯度的SB203580单独或联合运用雷帕霉素,MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测细胞抑制率、软琼脂克隆形成实验检测肿瘤细胞体外成瘤性、流式细胞仪检测细胞凋亡、Transwell法检测Ishikawa细胞体外侵袭力的改变。结果SB203580对Ishikawa细胞有抑制生长、降低体外成瘤性、诱导凋亡和降低细胞侵袭能力的作用;在相同条件下,SB203580与雷帕霉素联合的抗肿瘤作用要明显优于SB203580单用。结论SB203580与雷帕霉素可协同抑制人子宫内膜癌细胞Ishikawa的生长、诱导细胞凋亡,并同时抑制Ishikawa细胞的侵袭性,具有良好抗肿瘤前景。

p38蛋白激酶抑制剂SB203580对重症胰腺炎大鼠急性肺损伤的保护作用

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)抑制剂SB203580对重症胰腺炎大鼠急性肺损伤的保护作用。方法健康雄性SD大鼠60只,随机均分为3组:假手术组、重症胰腺炎组(模型组)、p38MAPK抑制剂SB203580+重症胰腺炎组(抑制剂组),12 h后取左肺下叶测组织湿/干重比,用Western印迹法检测右肺上叶环氧合酶(COX)-2、基质金属蛋白酶(MMP)9、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和磷酸化p38(p-p38)蛋白的表达,右肺下叶行病理学观察。结果与假手术组比较,模型组肺组织湿/干重比明显增加(P<0.05),肺组织p-p38、i NOS、MMP9、COX-2蛋白表达明显增高(P<0.05),与模型组比较,抑制剂组肺组织湿/干重比明显降低(P<0.05),p-p38、i NOS、MMP9、COX-2蛋白表达量明显(P<0.05)。结论 P38抑制剂SB203580通过减轻肺组织中p-p38、MMP9、i NOS和COX-2的表达,从而减轻肺组织的损伤。

SB203580对肾缺血/再灌注损伤时细胞凋亡及p38MAPK影响的实验研究

目的 探讨不同时间及不同浓度p38MAPK特异性抑制剂SB2 0 35 80对肾缺血 /再灌注损伤过程中肾功能、细胞凋亡及 p38MAPK活性、表达量、p38MAPK底物的影响。 方法 4 9只大鼠按缺血 /再灌注及给药时间的不同 ,随机分为 7组 ,每组7只大鼠按正交拉丁方表的顺序 ,经尾静脉注射相同体积、不同剂量的SB ,使其在大鼠体内达到不同的浓度。测定BUN和Scr;用TUNEL试剂盒检测细胞凋亡情况 ;Westernblot技术用于蛋白定性及半定量分析。结果 SB可显著减轻大鼠肾缺血 /再灌注损伤造成的Scr和BUN的升高、肾小管上皮细胞的凋亡及 p38MAPK的激活 ,但存在模型、剂量及给药时机的差异 (P<0 .0 5 ) ,缺血前 3h之前给药 ,使其体内血药浓度达到 5 μmol/L左右可取得较好的效果。 结论 SB可显著减轻大鼠肾缺血 /再灌注损伤 ,在缺血前 3h之前给药 ,同时使其血药浓度达到 5 μmol/L左右可取得最佳效果。

P38抑制剂SB203580对大鼠脑缺血再灌注后AQP4表达及脑水肿的影响

目的探讨P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580对大鼠脑缺血再灌注后脑组织水通道蛋白4(AQP4)表达及脑水肿的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠54只,随机分为假手术组(sham组)、模型组(I/R组)和P38抑制剂组(SB203580组)。用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。模型组与P38抑制剂组分别于造模前15 min舌下静脉注射10%二甲基亚砜(DMSO,400μg/kg)和P38抑制剂(SB203580,400μg/kg)。缺血2 h再灌注24 h后对大鼠进行神经功能缺损评分,采用HE染色观察大鼠脑组织病理改变,干湿比重法测定缺血半球的脑含水量,Western blot检测磷酸化P38(p-P38)和AQP4蛋白的表达、RT-PCR法检测AQP4 mRNA的表达。结果与I/R组相比,SB203580组大鼠神经功能缺损症状明显改善,缺血侧半球脑含水量明显降低(P<0.05)。I/R组大鼠缺血周边区脑组织p-P38、AQP4蛋白及mRNA的表达分别为2.463±0.138、2.660±0.130及1.065±0.125,高于SB203580组的1.653±0.105、1.771±0.092及0.552±0.069(P<0.05)。结论 P38抑制剂SB203580减轻大鼠脑缺血再灌注后AQP4表达及脑水肿,其机制可能与SB203580抑制P38信号通路的激活降低了下游AQP4的表达有关。

苦参煎与SB203580对p38MAPK信号传导通路的调控影响

目的:探讨苦参煎与SB203580对p38MAPK信号传导通路的调控影响。利用苦参煎与SB203580抑制p38 MAPK信号传导通路,来证明中药对基因转录表达具有一定的调控作用。方法:模拟血管内膜损伤术,采用ELISA方法检测188只Webster大鼠血清中P38MAPK的水平含量。将其随机平均分为正常对照组、假手术组、生理盐水组、苦参煎组和SB203580组。结果与结论:中药苦参煎有着与SB203580相同的功效,即对P38MAPK的显著抑制作用。所以对血管内皮有比较明确的保护作用,能干扰MAPK信号传导通路,既能减轻内皮损伤后的炎性细胞释放反应,也能使再生的内皮某些功能得到恢复,有利于内皮细胞结构和功能恢复,防止炎性因子对细胞的损害。

P38MAPK抑制剂SB203580对高糖诱导HK-2细胞转分化的影响

目的探讨不同浓度P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)抑制剂SB203580在高糖诱导肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中的机制及其较佳作用浓度。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞(HK-2)并分为对照组(5.5 mmol/L GS)、DMSO组(5.5 mmol/L GS+30μmol/L SB203580等体积的DMSO)、高糖组(30mmol/L GS),以及30 mmol/L GS+5、10、20、30μmol/LSB203580处理的S5、S10、S20及S30组,干预48 h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,计算半数抑制浓度(IC50);选取对照组、高糖组、S30组,Western blot法检测P38MAPK、P-P38MAPK及α-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达、免疫荧光法检测α-SMA的表达。结果 (1)与对照组相比,DMSO对HK-2细胞增殖无显著抑制作用(P>0.05);高糖组、S5组HK-2细胞增殖增多(P<0.05);S20、S30组HK-2细胞增殖减少(P<0.05)。与高糖组相比,S5、S10、S20、S30组细胞增殖均受到抑制(P<0.05)。(2)与对照组相比,高糖组、S30组P-P38MAPK表达量增高(P<0.05)。与高糖组相比,S30组P-P38MAPK的表达量降低(P<0.05)。3组P38MAPK表达量无显著差异(P>0.05)。(3)与对照组相比,高糖组、S30组α-SMA表达量增高(P<0.05)。与高糖组相比,S30组α-SMA表达量降低(P<0.05)。结论 30 mmol/L GS可以诱导HK-2细胞TEMT;30μmol/L SB203580是抑制HK-2细胞TEMT的较佳抑制浓度,SB203580可能通过下调P-P38MAPK表达,从而抑制HK-2细胞增殖及胞浆中α-SMA的表达,延缓TEMT进程。

SB203580对大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响

目的:探讨SB203580对大鼠隐睾所致生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠随机分为隐睾组、隐睾+SB203580(p38MAPK抑制剂)组、隐睾+溶媒组、假手术组。复制单侧隐睾模型,术后分别腹腔内注射溶媒或SB203580。7 d后快速断颈椎处死,TUNEL原位末端标记法结合流式细胞术(FCM)检测各组右侧睾丸生精细胞凋亡,免疫组化观察各组右侧睾丸磷酸化p38MAPK蛋白表达的变化。结果:FCM及TUNEL法均显示隐睾+ SB203580组生精细胞凋亡指数低于隐睾组和隐睾+溶媒组,同时磷酸化p38MAPK蛋白表达减少。结论:SB203580能降低p-p38MAPK蛋白表达并抑制热压诱导的生精细胞凋亡。

SB203580对IR鼠模型脑组织中神经元凋亡的影响

将120只大鼠随机分为四组。A组12只为对照组,B组12只为假手术组,C、D组各48例均行脑缺血再灌注(IR)。D组于造模前30 min腹腔注射p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580。TUNEL法测定再灌注后2、6、24 h及2 d各组海马CA1区凋亡神经元,免疫组化法检测再灌注后2、6、24 h及2 d各组脑组织中的p38MAPK。C组再灌注后2、6、24 h及2 d缺血侧海马CA1区神经元凋亡数分别为(18.83±3.81)、(53.33±5.28)、(106.83±7.39)、(41.17±4.07)个/HP,D组分别为(10.31±2.18)、(26.33±4.18)、(51.67±4.84)、(19.67±3.34)个/HP,两组各时间点凋亡神经元数相比,P均≤0.05;C组2、6、24 h及2 d脑组织中p38MAPK的OD值分别为0.209±0.031、0.484±0.052、0.364±0.024、0.356±0.036,D组分别为0.101±0.021、0.293±0.018、0.163±0.017、0.143±0.013,两组各时间点OD值相比,P均≤0.05。认为SB203580具有一定的抗神经元凋亡作用,其机制是抑制神经元细胞p38MAPK的降解。

SB203580对急性肺栓塞后肺动脉高压及MCP-1表达的影响

目的:观察单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)与急性肺栓塞(pulmonary thromboembolism,PTE)后肺动脉高压形成的关系;探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)特异性抑制剂SB203580对急性PTE后肺动脉高压及MCP-1表达的影响。方法:采用自体血栓回输法复制Sprague-Dawley大鼠急性PTE模型;将大鼠随机分成5组,每组观察1 h、4 h和8 h 3个时点;急性PTE模型复制前1 h,分别对MCP-1中和抗体C1142组及SB203580组进行药物预处理;在1 h、4 h和8 h检测各组肺动脉平均压力(mean pulmonary artery pressure,MPAP)和MCP-1 mRNA及蛋白表达。结果:(1)在相同时点,急性PTE组MPAP和MCP-1 mRNA及蛋白表达均较溶剂对照组显著升高(P<0.05);(2)在相同时点,C1142组及SB203580组MPAP和MCP-1 mRNA及蛋白表达均较急性PTE组显著降低(P<0.05)。结论:(1)急性PTE后MCP-1的大量表达参与急性PTE性肺动脉高压的形成;(2)SB203580可能通过p38 MAPK信号转导通路,下调MCP-1表达,降低急性PTE肺动脉压力。

SB203580减轻体外循环肺组织炎症介质产生的实验研究

目的研究体外循环肺组织中P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)的变化对肺组织炎症反应的作用及其机制。方法54只SD大鼠随机分为3组:全麻开胸组(S组)、体外循环组(CPB组)、体外循环+SB203580组(SB组)。不同时间段处死动物,留取标本,Western blotting检测肺组织中P38MAPK、磷酸化P38MAPK,EMSA检测核因子(NF)-κB的DNA结合活性变化,ELIASA分别检测TNF-α和IL-1β产量。结果CPB组磷酸化P38MAPK较S组增加,NF-κB活性水平也较S组明显增加,肺组织中TNF-α和IL-1β产量增加。SB203580减轻了肺组织中磷酸化P38MAPK活性水平,减少了肺组织中炎症因子的产生。结论(1)P38MAPK通过影响NF-κB的激活而参与体外循环术后肺组织炎症因子的产生;(2)SB203580通过阻断P38MAPK的激活而减轻体外循环术后肺炎症因子的产生。

SB203580对小鼠造血组织辐射损伤的保护作用

目的观察SB203580对接受γ射线照射的C57BL/6小鼠造血组织损伤的保护作用。方法小鼠随机分为对照(Ctr)组、照射(IR)组及SB203580给药(SB)组,以6.0 Gy 137Csγ射线全身均匀照射SB组和IR组的C57BL/6小鼠。收集并计数外周血红细胞、白细胞和血小板,以及单侧股骨骨髓有核细胞(BMMNC);骨髓细胞半固体培养法检测BMMNC增殖能力。另外收集小鼠BMMNC,同样分组,IR组与SB组细胞进行1 Gy体外照射,照射之后孵育过夜,酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果 SB组外周血白细胞、血小板的数量分别比IR组高111.8%和157.7%(P<0.05);SB组BMMNC较IR组高135.4%,CFU-GM高188.5%(P<0.05);SB组BMMNC内ROS较IR组低56.2%(P<0.05)。结论 SB203580对照射造成的小鼠造血组织损伤具有一定的保护作用,这种保护作用可能与其降低照射后细胞内ROS水平有关。

SB203580对大鼠再灌注损伤肺细胞凋亡的干预

目的:探讨P38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)特异性抑制剂SB203580对再灌注损伤肺细胞凋亡的影响。方法:30只SD大鼠随机分为3组:假手术对照(control,C)组,肺缺血/再灌注(I/R)组,肺缺血/再灌注+SB203580(S组);TUNEL法检测肺组织细胞凋亡的改变;免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达;电镜观察肺组织形态学改变。结果:I/R组与C组比较,Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达均明显上调(均P<0.01),Bcl-2/Bax比值显著下降(P<0.01),凋亡指数(AI)显著增高(P<0.01),肺组织超微结构明显异常;使用SB203580后,Bcl-2蛋白表达上调(P<0.01),Bax蛋白表达下调(P<0.01),Bcl-2/Bax比值上升(P<0.01),AI显著下降(P<0.01),肺组织超微结构异常改变不同程度减轻。结论:SB203580可通过上调Bcl-2蛋白的表达、下调Bax蛋白的表达、调控Bcl-2/Bax蛋白之间的平衡而减轻细胞凋亡,对肺缺血/再灌注损伤发挥积极的防治作用。

SB203580对脑缺血再灌注损伤后基质金属蛋白酶9表达的影响

目的:通过检测抑制剂SB203580对缺血侧大脑皮质p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响,探讨p38MAPK是否可以影响MMP-9的表达而参与高血脂加重脑缺血再灌注损伤。方法:喂食高脂饲料建立高脂血症动物模型,模型成功后随机分为抑制剂SB203580预处理的脑缺血2h再灌注24h组(SB组)、DMSO组、sham+SB组和sham+DMSO组,然后采用线栓法建立脑缺血再灌注模型。神经行为学评分观察神经行为损伤症状,TTC染色检测梗死灶体积,伊文思蓝染色检测血脑屏障通透性,免疫印迹检测p38MAPK和MMP-9表达水平,反转录PCR检测MMP-9mRNA水平。结果:与假手术组比较,SB组和DMSO组p38MAPK和MMP-9表达均明显增高。与DMSO组比较,SB组p38MAPK和MMP-9表达明显降低,差异有统计学意义。且SB组MMP-9mRNA水平较DMSO组明显降低,神经行为损伤程度、梗死灶体积和血脑屏障通透性亦明显降低,差异均有统计学意义。结论:高脂血症脑缺血再灌注损伤中,p38MAPK可上调MMP-9表达,促进细胞凋亡的发生及增加血脑屏障通透性,进而加重脑缺血再灌注损伤。

SB203580对大鼠肝星状细胞凋亡及bcl-2蛋白表达影响

目的:通过观察P38MAPK信号传导通路特异抑制剂SB203580对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSCs)凋亡和bcl-2蛋白表达的影响,探讨P38MAPK信号传导通路与bcl-2蛋白在HSCs中的作用,为肝纤维化的治疗提供理论依据。方法:不同浓度SB203580处理乙醛刺激的HSC-T6,利用MTT法检测SB203580对细胞的抑制作用,ELISA酶联法检测细胞凋亡情况,Western blot法观察bcl-2蛋白表达水平。结果:SB203580抑制乙醛刺激的HSC-T6存活和诱导其凋亡,呈剂量依赖性(F=13.388和F=155.351,P<0.01);随着SB203580浓度增加,bcl-2蛋白表达逐渐降低(F=691.470,P<0.01)。结论:不同浓度SB203580能诱导乙醛刺激的HSC-T6凋亡,其作用机制可能与下调bcl-2蛋白表达有关。

p38MAPK信号途径抑制剂SB203580对大鼠重症急性胰腺炎胰腺组织中TNF-α表达的调控作用

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号转导通路在大鼠重症急性胰腺炎(SAP)胰腺组织中的变化规律,探讨p38 MAPK特异性抑制剂SB203580对SAP发展和胰腺组织中TNF-α表达水平的影响。方法采用胰胆管内注射牛磺胆酸钠的方法诱导大鼠重症急性胰腺炎模型,使用SB203580抑制P38MAPK信号传导通路,通过监测大鼠血清淀粉酶(Serum amylase,AMS)和TNF-α的表达检测,观察P38MAPK抑制剂SB203580对大鼠SAP发展和TNF-α表达水平的影响。结果 SAP组TNF-α的表达明显高于对照组。胰腺组织TNF-α的表达水平随胰腺炎病情的进展而升高(P<0.05),使用p38MAPK抑制剂可以显著降低TNF-α的表达(P<0.05)。结论 SB203580可能通过抑制胰腺组织p38 MAPK信号通路进而降低TNF-α的活性,减少炎症介质的释放,达到减轻胰腺损伤,治疗急性胰腺炎的目的。