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基于SMRT测序技术的塔里木马鹿冬季肠道菌群多样性分析
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作者 祁程 姜李欢 +3 位作者 阿卜杜萨拉木·努尔麦麦提 王开彦 单文娟 钟林强 《野生动物学报》 北大核心 2024年第1期58-66,共9页
为探究塔里木河流域塔里木马鹿(Cervus elaphus yarkandensis)冬季肠道菌群群落结构、多样性与功能,采用PacBio平台的单分子实时测序技术(single molecule realtime sequencing,SMRT)对塔里木河上游湿地自然保护区采集并筛选的25份塔里... 为探究塔里木河流域塔里木马鹿(Cervus elaphus yarkandensis)冬季肠道菌群群落结构、多样性与功能,采用PacBio平台的单分子实时测序技术(single molecule realtime sequencing,SMRT)对塔里木河上游湿地自然保护区采集并筛选的25份塔里木马鹿粪便样本的16S rRNA基因全长进行测序,共获得298578个clean reads,clean reads聚类获得28026个OTU,包括25门684属。Alpha多样性分析结果显示,塔里木马鹿冬季肠道菌群Shannon指数为(7.764±0.044),Simpson指数为(0.015±0.001),Chao1指数为(12242.668±695.106),ACE指数为(9366.423±407.612)。塔里木马鹿优势菌门为厚壁菌门(Firmicutes,60.51%)、拟杆菌门(Bacteroidetes,26.02%)、变形菌门(Proteobacteria,3.61%)、疣微菌门(Verrucomicrobia,1.57%)和浮霉菌门(Planctomycetes,1.46%)。相对丰富度在前10的菌属为Papillibacter(5.48%)、拟杆菌属(Bacteroides,5.12%)、Muribaculum(4.69%)、Phocaeicola(4.49%)、Lawsonibacter(4.31%)、瘤胃球菌属(Ruminococcus,4.09%)、Intestinimonas(3.06%)、普氏菌属(Prevotella,2.87%)、克里斯滕森菌属(Christensenella,2.71%)和弯曲杆菌属(Campylobacter,2.54%)。PICRUSt 16S功能预测结果表明,塔里木马鹿肠道菌群基因功能主要富集于新陈代谢(48.58%)、遗传信息处理(19.04%)和环境信息处理(12.08%);其中新陈代谢主要以碳水化合物代谢(9.47%)、氨基酸代谢(9.93%)为主,并且环境信息处理的膜转运(9.96%)基因相对丰富度最高。研究揭示了野生塔里木马鹿冬季肠道菌群特征和功能,为塔里木马鹿野生种群的保护提供基础数据。 展开更多
关键词 塔里木马鹿 肠道菌群 单分子实时测序(smrt) PICRUSt功能预测
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SMRT sequencing and ddPCR reveal the complexity of developmental trajectories and temporal dynamics of gut bifidobacterial communities in infants
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作者 Xu Gao Tao Zhang +5 位作者 Xiaoye Bai Qiannan Wen Dongyu Li Lai-Yu Kwok Heping Zhang Zhihong Sun 《Food Science and Human Wellness》 SCIE CSCD 2023年第5期1743-1750,共8页
Infant intestinal microbiome is closely linked with health and risk of disease. Bifidobacterium are important components of the infant gut and are known to confer various health effects on the host. However, few studi... Infant intestinal microbiome is closely linked with health and risk of disease. Bifidobacterium are important components of the infant gut and are known to confer various health effects on the host. However, few studies have described the precise composition and dynamics of early infant gut bifidobacterial communities. Thus, this was a pilot study aiming to describe the developmental trajectories and temporal dynamics of bifidobacterial communities in infants before 6 months of age. A total of 28 fecal samples from 4 infants(GF, ZZ, QM, TN, respectively)were collected and analyzed after 5, 15, 30, 60, 90, 120, 150, and 180 days of birth by a bifidobacteria-target method(based on single-molecule real-time sequencing of partial bifidobacterial rpsK genes)in conjunction with droplet digital polymerase chain reaction(ddPCR). The infant fecal microbiota comprised a total of 11 bifidobacterial species, including 4 major species, i.e., B. dentium(37.35%), B. catenulatum(32.04%), B. breve(22.24%), and B. animalis(8.02%). The infant microbiota showed highly individualized developmental trajectories. The leading species for GF was B. catenulatum, with a relatively stable developmental trajectory. In ZZ, B. breve was enriched, and the developmental trajectory was rather fluctuating. The most abundant species for QM and TN was B. dentium. The developmental trajectory of B. dentium in QM showed a trend of gradual decrease, whereas an opposite trend was seen in samples of TN. The results of ddPCR confirmed large variations in quantities of bifidobacteria between infants and suggested discordances in temporal dynamics of bifidobacterial communities during the first half year of infancy. In conclusion, our results suggested that the early infant gut bifidobacterial microbiota was highly complex and temporal dynamics, with individualized developmental trajectories, which should be considered in future research of infant gut microbiota. 展开更多
关键词 INFANTS Gut microbiota BIFIDOBACTERIUM Diversity Single-molecule real-time(smrt)sequencing Droplet digital polymerase chain reaction
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人SMRT基因真核和原核表达载体的构建及鉴定
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作者 王春美 盛光耀 +5 位作者 卢洁 郝庆飞 谢垒 白松婷 许松涛 薛乐勋 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第6期914-917,共4页
目的:构建人SMRT基因真核和原核表达载体。方法:体外人工合成SMRT-C645bp对应的基因片段,克隆至pUC57载体,酶切,测序正确后,PCR扩增目的基因片段,酶切后亚克隆至pCMV-myc载体和pGEX-6p-1载体,并酶切和测序鉴定。结果:成功构建了人pCMV-m... 目的:构建人SMRT基因真核和原核表达载体。方法:体外人工合成SMRT-C645bp对应的基因片段,克隆至pUC57载体,酶切,测序正确后,PCR扩增目的基因片段,酶切后亚克隆至pCMV-myc载体和pGEX-6p-1载体,并酶切和测序鉴定。结果:成功构建了人pCMV-myc-SMRT真核表达载体和pGEX-6p-1-SMRT原核表达载体。结论:成功构建了人SMRT真核和原核表达载体,为下一步蛋白间相互作用的证实提供了基础。 展开更多
关键词 smrt 真核表达载体 原核表达载体
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基于PacBio SMRT技术的婴幼儿配方奶粉微生物安全性评价 被引量:3
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作者 边燕飞 席晓霞 +3 位作者 郑艺 侯强川 孙天松 孙志宏 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期212-220,共9页
目的:婴幼儿配方奶粉中的大量细菌已被灭活,然而灭活微生物仍影响产品品质和货架期。现行纯培养技术只能对食品基质中活菌进行检测,无法全面评估污染微生物组成,而基于宏基因组学策略能够对婴幼儿配方奶粉加工过程中污染微生物进行全面... 目的:婴幼儿配方奶粉中的大量细菌已被灭活,然而灭活微生物仍影响产品品质和货架期。现行纯培养技术只能对食品基质中活菌进行检测,无法全面评估污染微生物组成,而基于宏基因组学策略能够对婴幼儿配方奶粉加工过程中污染微生物进行全面客观的评价。方法:采集6份婴幼儿配方奶粉,使用细菌纯培养、单分子实时测序技术(PacBio SMRT)和微滴式数字PCR(ddPCR)联用技术对其污染微生物组成进行评价。结果:采用纯培养技术在样品中均未检测到大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、阪崎肠杆菌和芽孢。使用PacBio SMRT测序技术,在婴幼儿配方奶粉中共鉴定出14个细菌门、138个细菌属和255个细菌种。其中6份样品均存在过嗜冷菌蜡样芽孢杆菌,其平均相对含量高达23.54%,这一灭活的细菌也会影响产品货架期。此外,在IF3、IF4、IF5和IF6样品中,检测到相对含量较低的致病菌大肠杆菌,其相对含量分别为0.06%,0.01%,0.15%和0.05%。采用ddPCR技术对SMRT测序方法检测到的致病菌蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌进行定量分析,发现每克奶粉样品中蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌的平均拷贝数取对数后分别为5.45和4.89。结论:在6份婴幼儿配方奶粉中均未检出致病菌,符合食品安全国家标准,然而奶粉中被灭活的蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌可能增加产品腐败的风险,影响产品的货架期。本研究结合多个技术全面评价婴幼儿配方奶粉的微生物污染情况,初步建立婴幼儿配方奶粉的微生物检测技术。 展开更多
关键词 婴幼儿配方奶粉 污染微生物 纯培养 ddPCR PacBio smrt测序
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交直流大电网混合实时仿真(SMRT)平台研发与工程应用 被引量:8
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作者 郭琦 曾勇刚 +4 位作者 李伟 祁达才 饶宏 韩伟强 韩英铎 《南方电网技术》 北大核心 2015年第1期33-38,共6页
为更准确、高效地研究南方电网受端多回直流换相失败、交直流复杂电网交直流相互影响、受端电网电压稳定和交直流电网稳定控制等问题,提出了研发基于RTDS实时仿真器与并行计算机联合闭环运行的电磁暂态-机电暂态混合实时仿真平台(super ... 为更准确、高效地研究南方电网受端多回直流换相失败、交直流复杂电网交直流相互影响、受端电网电压稳定和交直流电网稳定控制等问题,提出了研发基于RTDS实时仿真器与并行计算机联合闭环运行的电磁暂态-机电暂态混合实时仿真平台(super mixed real-time simulation,SMRT)。系统阐述了SMRT平台的架构和关键技术,即大规模电网实时机电暂态仿真技术、电磁与机电暂态全序量交互技术、RTDS与计算机仿真接口的数字化高速通信技术等。介绍了其在南方交直流互联大电网复杂系统运行分析、控制研究及运行人员培训中的应用。 展开更多
关键词 交直流电网 混合实时仿真平台 smrt 平台架构 应用前景
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利用SMRT英语互联网教学平台构建大学英语听说新模式
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作者 杨玉茹 《山东商业职业技术学院学报》 2019年第2期47-50,共4页
英语听说能力是大学英语的重要能力。在互联网+时代,传统的听说教学模式已经不适合现代学生发展的需要智能手机的普及,利用网络教学平台进行学生英语听说训练,对提高学生英语听说能力起到重要作用。主要从SMRT英语互联网教学平台的基本... 英语听说能力是大学英语的重要能力。在互联网+时代,传统的听说教学模式已经不适合现代学生发展的需要智能手机的普及,利用网络教学平台进行学生英语听说训练,对提高学生英语听说能力起到重要作用。主要从SMRT英语互联网教学平台的基本结构及应用优势、建立大学英语听说新模式的要点、利用SMRT英语互联网教学平台构建大学英语听说新模式阐述利用SMRT英语互联网教学平台构建大学英语听说新模式。 展开更多
关键词 smrt英语 互联网教学平台 大学英语听说新模式
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输出理论驱动下的Smrt英语听说实践新模式
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作者 杨玉茹 李喜微 《青年与社会》 2019年第5期87-87,共1页
现在应用型本科学生英语水平普遍不高,尤其学生英语听说能力更弱,但现在应用型本科人才培养目标是培养应用型高级技术人才,现在很多职业岗位对学生的英语能力有一定要求,尤其英语的听说能力。在互联网+时代,为smrt英语在高校英语教学中... 现在应用型本科学生英语水平普遍不高,尤其学生英语听说能力更弱,但现在应用型本科人才培养目标是培养应用型高级技术人才,现在很多职业岗位对学生的英语能力有一定要求,尤其英语的听说能力。在互联网+时代,为smrt英语在高校英语教学中实施提供了基本保障,教师采用输出理论在Smrt英语听说实践中的英语,对提高学生的英语听说能力起到重要作用。本论文从不同方面阐述输出理论驱动下的Smrt英语听说实践新模式,希望为研究应用型本科院校学生英语听说实践模式的专家和学者提供理论参考依据。 展开更多
关键词 输出理论 smrt英语 听说实践
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自然发酵酸马奶对人体肠道菌群的影响——基于PacBio SMRT测序技术 被引量:6
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作者 温永平 侯强川 张和平 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期4-7,共4页
采用PacBio SMRT测序技术研究了内蒙古锡林郭勒盟地区一名健康志愿者在连续饮用酸马奶60 d前后肠道菌群的变化。结果表明,连续饮用酸马奶可以增加志愿者肠道菌群的丰度和多样性,使志愿者肠道菌群更加趋于健康化。此外,志愿者肠道中存在... 采用PacBio SMRT测序技术研究了内蒙古锡林郭勒盟地区一名健康志愿者在连续饮用酸马奶60 d前后肠道菌群的变化。结果表明,连续饮用酸马奶可以增加志愿者肠道菌群的丰度和多样性,使志愿者肠道菌群更加趋于健康化。此外,志愿者肠道中存在大量的"肠道核心微生物群",饮用酸马奶会使志愿者肠道中硬壁菌门的相对含量升高。在种的水平上,饮用酸马奶可以促进部分有益生菌如柔嫩梭菌群、多形拟杆菌的生长,这可能是酸马奶具有众多益生作用的原因之一。 展开更多
关键词 酸马奶 肠道菌群 PacBiosmrt测序技术
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SMRT英语教学平台下大学英语教学改革的体系构建
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作者 林虹 《佳木斯职业学院学报》 2018年第2期289-290,共2页
国内高校对大学英语的学科建设日趋重视,但是我国现行的大学英语教学体系仍然存在很大不足。教师和学生都习惯于传统的教学模式,想要做出全面的改革有很大困难。一些高校虽然提出了大学英语教学的改革方法,侧重点也多放在听说训练方面,... 国内高校对大学英语的学科建设日趋重视,但是我国现行的大学英语教学体系仍然存在很大不足。教师和学生都习惯于传统的教学模式,想要做出全面的改革有很大困难。一些高校虽然提出了大学英语教学的改革方法,侧重点也多放在听说训练方面,而传统的听说课程设计并不能很好地提高学生的语言应用能力。哈尔滨广厦学院作为国内唯一一所将加拿大SMRT英语教学平台应用于大学英语课堂教学的高校,用全新的教学理念和课堂模式进行大学英语教学改革,旨在全面提高学生口语水平及实践应用能力,成效显著。 展开更多
关键词 大学英语 smrt教学平台 教学改革
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Smrt英语教学项目特色——以哈尔滨广厦学院为例
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作者 韩笑 《佳木斯职业学院学报》 2019年第9期154-154,156,共2页
Smrt教学法首创于加拿大,是一种基于互联网的、整合电脑与手机等多种终端的英语学习软件。Smrt对学习者英语学习的技能和语言掌握发挥了积极的推进作用。目前,Smrt已经被应用到世界多个国家的培训机构及学校,并受到师生们的广泛欢迎。2... Smrt教学法首创于加拿大,是一种基于互联网的、整合电脑与手机等多种终端的英语学习软件。Smrt对学习者英语学习的技能和语言掌握发挥了积极的推进作用。目前,Smrt已经被应用到世界多个国家的培训机构及学校,并受到师生们的广泛欢迎。2016年7月,Smrt教育公司委派教师Elana Palmer和Steve Castle来到广厦学院,揭开了广厦学院大学英语教学改革尝试的新篇章。尤其是结合Smrt英语教学改革提出了基于Smrt英语教学平台的大学英语课程模式的设计,不但推动了大学英语教学改革的新方式还能有效提高学生的学习积极性,尤其是对学生听说能力的提高有着重要的促进作用。 展开更多
关键词 smrt英语教学 支架式教学法 多为交互 大学课程模式设计
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基于SMRT技术的水杉全长转录组分析及基因功能注释 被引量:2
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作者 刘小红 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期27-32,共6页
以水杉原生种为材料,提取其幼嫩植株的根、茎和叶的总RNA,经mRNA纯化、反转录、全长转录组文库构建等过程,再采用SMRT技术测定其全长转录本序列,运用生物信息学对获得的原始转录组数据进行分析。结果显示:提取的总RNA符合建库要求;全长... 以水杉原生种为材料,提取其幼嫩植株的根、茎和叶的总RNA,经mRNA纯化、反转录、全长转录组文库构建等过程,再采用SMRT技术测定其全长转录本序列,运用生物信息学对获得的原始转录组数据进行分析。结果显示:提取的总RNA符合建库要求;全长转录组测序共获得了包含5914711个亚读段(subreads)的14.0 Gb的数据,质量控制处理后包括236130个全长非嵌合读段(reads)和97626个一致性reads;转录本经去冗余处理后共获得61057个全长一致性读段(unigenes),其中有54099个被成功注释到7个数据库中,注释比达88.60%;对水杉unigenes作CDS(coding sequence)长度分布及转录因子分析,其CDS长度范围为144~6477 nt,平均长度约为679 nt;共检测到2386个转录因子,这些转录因子可以归类为29个家族。 展开更多
关键词 水杉 单分子测序技术 全长转录组 基因 功能注释
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SMRT测序技术及其在微生物研究中的应用 被引量:8
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作者 唐勇 刘旭 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期48-53,共6页
高通量测序技术的发展为研究者深入探索微生物世界提供可能。随着以Pacific Bio Sciences(PacBio)公司的单分子实时测序(Single molecule real time sequencing,SMRT)为代表的第三代测序(Third generation sequencing,TGS)技术逐渐发展... 高通量测序技术的发展为研究者深入探索微生物世界提供可能。随着以Pacific Bio Sciences(PacBio)公司的单分子实时测序(Single molecule real time sequencing,SMRT)为代表的第三代测序(Third generation sequencing,TGS)技术逐渐发展成熟,微生物研究方法正面临又一次新的变革。SMRT测序技术凭借其特殊建库方式(SMRTbell)和超长的测序读长等特点,为微生物16S rRNA基因全长测序提供新的选择。同时,为组装完整可靠的宏基因组和微生物全基因组提供新方法。随着PacBio测序平台的成本大幅下降,SMRT测序技术的PacBio系列平台开始逐渐被应用于微生物16S rRNA基因测序、宏基因组测序和全基因组测序研究中。综述了SMRT测序技术的技术原理和特点及其在微生物16S rRNA基因全长测序、宏基因组测序等方面的应用,并分析了目前SMRT测序技术在微生物各方面研究中的优势和存在的问题,提出基于SMRT测序技术获得的长片段在后期分析中存在的问题。SMRT测序技术将越来越多地引入到微生物研究中,期望为将要选择使用SMRT测序技术研究微生物的研究人员提供一定参考。 展开更多
关键词 第三代测序 单分子实时测序 微生物
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采用SMRT测序技术考察莲子的真菌群落多样性
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作者 张寅 陈恒文 何轩辉 《中南药学》 CAS 2022年第11期2527-2532,共6页
目的 考察莲子中真菌群落的多样性。方法 采用单分子实时(SMRT)测序技术对莲子(红莲和白莲)中真菌的ITS全长扩增片段进行测序分析。通过评估测序数据、分析其α和β多样性,剖析真菌的组成、考察组间差异及菌属间的相关关系,剖析莲子的... 目的 考察莲子中真菌群落的多样性。方法 采用单分子实时(SMRT)测序技术对莲子(红莲和白莲)中真菌的ITS全长扩增片段进行测序分析。通过评估测序数据、分析其α和β多样性,剖析真菌的组成、考察组间差异及菌属间的相关关系,剖析莲子的真菌群落结构。结果 共检测到1界、10门、30纲、75目、158科、247属和342种真菌,优势菌为Botryosphaeria wangensis(0~79.57%)、Lasiodiplodia laeliocattleyae(0.32%~49.18%)和Colletotrichum aenigma(0~31.76%)和Wallemia canadensis(0~22.86%)。有潜在致病风险的真菌为Colletotrichum aenigma、Aspergillus vitricola、Rhizomucor pusillus,存在产毒风险的真菌为Fusarium pernambucanum。红莲和白莲样品的真菌组成在组间存在显著性差异,差异菌主要是Botryosphaeria wangensis和Wallemia canadensis。结论 SMRT测序技术对研究莲子中真菌的多样性具有较好的适用性,并可通过分析产毒真菌的种类为莲子的安全使用提供风险预警。 展开更多
关键词 莲子 单分子实时测序(smrt)技术 ITS全长序列 真菌群落 多样性
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油茶基因组SMRT数据的统计分析 被引量:9
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作者 赵松子 《南方林业科学》 2018年第2期1-3,共3页
利用PacBio SMRT技术对普通油茶(Camellia oleifera)良种"赣无1号"进行全基因组测序,获得40.1 G的酶读段数据,共计3 862 324条酶读段。亚读段的数据量为40.06 G,共计4 730 681条亚读段。对亚读段数据及茶树(C.sinensis)基因... 利用PacBio SMRT技术对普通油茶(Camellia oleifera)良种"赣无1号"进行全基因组测序,获得40.1 G的酶读段数据,共计3 862 324条酶读段。亚读段的数据量为40.06 G,共计4 730 681条亚读段。对亚读段数据及茶树(C.sinensis)基因组进行比对分析,结果表明,测序正确率为91.41%,普通油茶与茶树基因组序列的相似度为93.38%。 展开更多
关键词 油茶 单分子实时测序 基因组 茶树
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单分子测序技术(SMRT)在微生物研究领域中的应用 被引量:1
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作者 刘梦 庄蕾 +1 位作者 余忠祥 吴森 《科技与创新》 2022年第14期166-170,共5页
近年来测序技术不断革新,获得了突飞猛进的发展。第三代测序技术又被称为单分子测序技术,能够在单分子水平上读取核苷酸序列,主要以Nanopore、PacBio等为代表。与传统第一代和第二代测序技术相比,第三代测序可以产生更长的reads,无需逆... 近年来测序技术不断革新,获得了突飞猛进的发展。第三代测序技术又被称为单分子测序技术,能够在单分子水平上读取核苷酸序列,主要以Nanopore、PacBio等为代表。与传统第一代和第二代测序技术相比,第三代测序可以产生更长的reads,无需逆转录就可以直接进行核酸测序,测序速度也大大提高,一些相关技术设备使用起来也更加方便。对第三代测序技术的基础理论研究和生物医学的临床实践已被广泛应用。阐述了第三代测序SMRT在微生物基因组、转录组等组学中的应用,以期为微生物相关研究提供理论参考。 展开更多
关键词 微生物 smrt 微生物基因组 微生物转录组
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基于语言应用的基层院校SMRT英语教学模式建构
16
作者 关爱华 《山西农经》 2017年第22期117-117,共1页
本文针对大学英语教学现状,试图以语言输入输出理论为指导,借助于SMRT英语教学系统,在语言多媒体教室,创立九个步骤的英语语言应用教学模式,通过大量、多形式演练,达到全面提高大学生语言综合应用能力的目标。
关键词 大学英语 smrt英语 语言应用 教学模式
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表面机械滚压处理(SMRT)316L不锈钢梯度纳米层在腐蚀介质下的摩擦学行为研究 被引量:7
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作者 沈明学 容康杰 +3 位作者 刘德佳 熊光耀 李春红 王效贵 《摩擦学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第6期746-753,共8页
采用表面机械滚压处理(surface mechanical rolling treatment,SMRT)技术在316L奥氏体不锈钢表面构筑了梯度纳米结构层.利用透射电子显微镜(TEM)和纳米压痕仪等分析其微观组织、力学性能等基础上,重点探讨了SMRT前后316L在1 mol/L HCl溶... 采用表面机械滚压处理(surface mechanical rolling treatment,SMRT)技术在316L奥氏体不锈钢表面构筑了梯度纳米结构层.利用透射电子显微镜(TEM)和纳米压痕仪等分析其微观组织、力学性能等基础上,重点探讨了SMRT前后316L在1 mol/L HCl溶液(以纯水环境作为对比组)中的摩擦学行为.结果表明:经SMRT加工后316L表面梯度纳米晶层厚度达200μm以上,表面硬化层厚度超过1.5 mm,表面硬度提升至基体近2倍;SMRT大大减缓了材料磨损,与基体试样相比,SMRT试样在腐蚀介质下减摩效果比纯水环境更明显,且在腐蚀环境下表现出优异的耐腐蚀性能,其磨损机制由处理前伴随严重剥落特征的疲劳磨损和磨粒磨损转变为轻微疲劳磨损.因此,316L不锈钢机械滚压梯度纳米层在腐蚀服役环境下具有较高的潜在工程应用价值. 展开更多
关键词 表面机械滚压处理 腐蚀磨损 摩擦学行为 梯度纳米化结构 316L不锈钢
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免疫共沉淀检测人p65和SMRT蛋白间相互作用 被引量:1
18
作者 王春美 盛光耀 +4 位作者 卢洁 邹湘 方营旗 白松婷 谢垒 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第10期51-55,共5页
目的使用免疫共沉淀技术法检测人p65和SMRT蛋白在儿童急性髓细胞白血病(AML)细胞株THP-1中相互作用。方法体外人工合成p65基因CDS区碱基序列和SMRT-C645bp对应的基因片段,分别克隆至pUC57载体,经酶切、测序正确后,PCR扩增目的基因片段,... 目的使用免疫共沉淀技术法检测人p65和SMRT蛋白在儿童急性髓细胞白血病(AML)细胞株THP-1中相互作用。方法体外人工合成p65基因CDS区碱基序列和SMRT-C645bp对应的基因片段,分别克隆至pUC57载体,经酶切、测序正确后,PCR扩增目的基因片段,酶切后亚克隆至带有HA标签和Myc标签的真核表达载体pCMV-HA和pCMV-Myc,测序、酶切鉴定正确后,共转染THP-1细胞,免疫共沉淀法检测二者间相互作用。结果成功构建了人p65和SMRT蛋白真核表达载体pCMV-HA-p65和pCMV-Myc-SMRT,共转染THP-1细胞,抗HA和Myc多克隆抗体分别沉淀细胞裂解液,用抗Myc和HA单克隆抗体分别进行Western Blotting检测,可以检测到HA-p65和Myc-SMRT蛋白的表达。结论成功构建了人p65和SMRT蛋白重组真核表达载体,在THP-1细胞株中表达后,免疫共沉淀证实p65和SMRT蛋白间存在相互作用,为进一步探讨儿童AML发病机制和白血病的靶向治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 免疫共沉淀 P65 smrt 髓细胞白血病
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基于PacBio SMRT测序技术评估妊娠期糖尿病人的肠道菌群 被引量:10
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作者 舒明月 付爱思 +5 位作者 张洁 陈佳 郭静 丁琼 徐焱成 刘天罡 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1823-1839,共17页
【目的】肠道菌群是位于人体肠道内的微生物菌群,其组成与人类多种疾病相关。例如,已有研究表明肠道菌群的变化与妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的发病密切相关。因此本研究基于PacBio SMRT测序技术评估及比较了不同... 【目的】肠道菌群是位于人体肠道内的微生物菌群,其组成与人类多种疾病相关。例如,已有研究表明肠道菌群的变化与妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)的发病密切相关。因此本研究基于PacBio SMRT测序技术评估及比较了不同民族(汉族和蒙族)及是否患GDM的孕妇的肠道菌群。【方法】本研究利用PacBio SMRT测序技术对97例患有GDM及健康的汉族和蒙族孕妇粪便样本进行了全长16S rRNA测序及分析。【结果】总体来说,处于相同孕期的4组孕妇肠道菌群的组成相似,不同核心菌群展现出不同强弱的相关性。本研究在种的水平上共鉴定到了44个种。在汉族人中,患有妊娠期糖尿病的孕妇肠道菌群中Akkermansia muciniphila菌的相对丰度要显著低于健康孕妇;而在蒙族人中,健康孕妇与GDM孕妇间差异并不明显。在健康对照中发现汉族孕妇肠道菌群中Bacteroides uniformis菌的相对丰度显著高于蒙族孕妇;但在患有GDM组中未找到不同民族分组间的差异。另外,功能预测结果发现四组样本菌群功能组成高度相似,大多数功能基因都与能量代谢有关。汉族GDM患者与健康对照组间没有发现显著差异,但在蒙族GDM患者中发现无机离子运输等功能相对丰度显著高于与蒙族正常孕妇。【结论】在相同的孕期,妊娠期孕妇的核心肠道菌群结构与功能是相对稳定的,而民族差异也不会对妊娠期菌群产生显著性影响。但在四组间可以检测到一些低丰度的差异菌群,如Akkermansia muciniphila,其丰度的变化可能导致了肠道中一些与肠道营养吸收等有关的代谢发生变化,而这些变化可能与妊娠期糖尿病的发生密切相关。本研究将有助于探究肠道菌群在GDM发病机制中的作用。 展开更多
关键词 PacBio smrt测序技术 妊娠期糖尿病 肠道菌群 微生物多样性 16S RRNA
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基于Smrt英语教学平台的“多维交互层级式大学英语教学体系”构建——以哈尔滨广厦学院为例
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作者 李喜微 林虹 《学园》 2018年第2期18-18,20,共2页
随着大学英语教学改革的深入以及移动学习的推崇,如何利用互联网技术和资源,创设新的教学理念、构建新型的大学英语课堂,成为我们亟待解决的问题。通过近两年来Smrt英语教学平台的使用以及不断的探索和实践,本文来探讨'多维交互层... 随着大学英语教学改革的深入以及移动学习的推崇,如何利用互联网技术和资源,创设新的教学理念、构建新型的大学英语课堂,成为我们亟待解决的问题。通过近两年来Smrt英语教学平台的使用以及不断的探索和实践,本文来探讨'多维交互层级式大学英语教学体系'的构建。 展开更多
关键词 smrt英语教学平台 多维交互层级式 教学体系
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