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转蚕丝芯蛋白基因获得高强纤维棉花植株 被引量:14
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作者 张震林 陈松 +2 位作者 刘正銮 周宝良 张香桂 《江西农业学报》 CAS 2004年第1期15-19,共5页
采用花粉管通道技术,将棉纤维细胞特异表达启动子(E6)驱动的蚕丝芯蛋白基因导入陆地棉品种"泗棉3号"。共注射600朵花,收获497粒种子。通过GUS报告基因组化检测筛选,获得5株GUS阳性棉株。又经卡那霉素涂叶法鉴定,其中4株具有... 采用花粉管通道技术,将棉纤维细胞特异表达启动子(E6)驱动的蚕丝芯蛋白基因导入陆地棉品种"泗棉3号"。共注射600朵花,收获497粒种子。通过GUS报告基因组化检测筛选,获得5株GUS阳性棉株。又经卡那霉素涂叶法鉴定,其中4株具有良好的卡那霉素抗性。用依据E6启动子序列和蚕丝芯蛋白基因序列设计的两对引物,对这5株棉花进行PCR扩增,获得1株转蚕丝芯蛋白基因棉株。纤维品质测定结果表明,这株转蚕丝芯蛋白基因棉花T1代纤维比强度达到34.6cN/tex,比对照"泗棉3号"(比强度为28.6cN/tex)提高了21.0%,T2代纤维比强度比对照平均增高23.3%。 展开更多
关键词 蚕丝芯蛋白基因 转基因 高强纤维 棉花 花粉管通道技术 品质育种
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柞蚕丝素基因5′端部分序列的克隆及结构分析 被引量:3
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作者 李文利 金礼吉 +1 位作者 范琦 安利佳 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期218-221,共4页
利用PCR技术从中国柞蚕品种 74 1中扩增并克隆出柞蚕丝素基因 5′端部分片段 ,它由CAAT盒、TATA盒 (Hognessbox)、primtranscript、丝素蛋白的起始密码子ATG和部分结构基因及内含子组成。通过与天蚕丝素基因的 5′端序列进行比较 ,发现 ... 利用PCR技术从中国柞蚕品种 74 1中扩增并克隆出柞蚕丝素基因 5′端部分片段 ,它由CAAT盒、TATA盒 (Hognessbox)、primtranscript、丝素蛋白的起始密码子ATG和部分结构基因及内含子组成。通过与天蚕丝素基因的 5′端序列进行比较 ,发现 12 4~ 5 0 6bp、796~ 1194bp、12 16~ 12 98bp同源性高 ,同源率分别为91.6 %、95 %、95 %。将柞蚕丝素基因 5′端的CAAT盒、TATA盒、primtranscript序列与KikuchiY所测家蚕、HuiCC所测家蚕及家蚕P2 5蛋白、天蚕丝素基因相应序列进行比较 ,发现柞蚕与天蚕相应序列的同源率远高于家蚕。从序列中可以看出 :若转录起始点第一个核苷酸标为 +1,则TATA盒位于 - 2 5处 ;CAAT盒位于 - 70处。 展开更多
关键词 柞蚕丝 丝素基因 柞蚕 序列分析 启动子 5′端序列 结构 克隆
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对转蚕丝芯蛋白轻链基因棉花的分析 被引量:12
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作者 上官小霞 王凌健 +2 位作者 李燕娥 梁运生 吴霞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期697-702,共6页
利用根癌农杆菌介导转化法,将棉纤维特异表达启动子GAE6-3A驱动的蚕丝芯蛋白轻链基因(FBN)转入陆地棉R15中。T0代转基因再生株FBN基因PCR检测阳性率达70%。随机选取4个转基因株系T1代材料的Southern杂交显示,3个为双拷贝插入、1个为单... 利用根癌农杆菌介导转化法,将棉纤维特异表达启动子GAE6-3A驱动的蚕丝芯蛋白轻链基因(FBN)转入陆地棉R15中。T0代转基因再生株FBN基因PCR检测阳性率达70%。随机选取4个转基因株系T1代材料的Southern杂交显示,3个为双拷贝插入、1个为单拷贝插入;Northern分析结果证实FBN基因在转基因棉纤维中表达。转基因后代的纯合选育主要以田间卡那霉素检测结合实验室内GUS组织化学检测进行,其中4个株系已获得了T3代转基因材料,其他若干个转化子也获得T1代和T2代的不同材料。对6个转基因棉花株系后代纤维检测结果表明,蚕丝芯蛋白轻链基因对棉花纤维品质的影响主要体现于对纤维强度的改良。H18、H32、H34株系转基因棉花后代纤维强度较对照显著提高,其中H18纤维强度提高12.3%。 展开更多
关键词 蚕丝芯蛋白轻链基因 转基因棉花 纤维品质
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家蚕丝素基因的研究进展 被引量:4
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作者 翁宏飚 牛宝龙 +1 位作者 孟智启 徐孟奎 《蚕桑通报》 2002年第4期5-8,共4页
家蚕丝素蛋白基因不仅高度专一地在后部丝腺中表达,而且在家蚕胚胎发育及幼虫发育过程中,丝素蛋白基因的表达在时间和空间上受到精细的调控,因此研究丝素蛋白基因的调控方式,能使我们了解生物体如何利用遗传信息,对基因进行时间和空间... 家蚕丝素蛋白基因不仅高度专一地在后部丝腺中表达,而且在家蚕胚胎发育及幼虫发育过程中,丝素蛋白基因的表达在时间和空间上受到精细的调控,因此研究丝素蛋白基因的调控方式,能使我们了解生物体如何利用遗传信息,对基因进行时间和空间上的表达调控。调控丝素蛋白基因表达专一性的启动子/增强子结构相对较为简单,也更利于研究。本文就近年来在家蚕丝索蛋白基因研究中取得的成果进行综述。 展开更多
关键词 家蚕丝素基因 基因调控 启动子 增强子 调控子 结构
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家蚕丝蛋白基因在不同发育时期表达量的变化 被引量:3
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作者 王桂花 李娟 +2 位作者 徐欣 张升祥 崔为正 《北方蚕业》 2011年第4期17-20,23,共5页
本文采用半定量RT-PCR方法,检测了家蚕4~5龄期丝腺中5个丝蛋白基因(Fib-H、Fib-L、Ser-2短片段、Ser-2长片段、Ser-3)在不同发育时期表达量的变化。结果表明,Fib-H、FIB-L及Ser-3基因的表达规律相似,总体上4龄期表达量明显低于5龄,但4... 本文采用半定量RT-PCR方法,检测了家蚕4~5龄期丝腺中5个丝蛋白基因(Fib-H、Fib-L、Ser-2短片段、Ser-2长片段、Ser-3)在不同发育时期表达量的变化。结果表明,Fib-H、FIB-L及Ser-3基因的表达规律相似,总体上4龄期表达量明显低于5龄,但4龄眠期均有明显表达,从5龄起蚕以后表达量逐渐上升,至熟蚕或熟蚕后2d达到高峰,此后迅速下降;Ser-2基因两个转录本的表达规律基本一致,与以上3个基因相比,Ser-2基因在4龄期存在相对较高的表达量,但在4龄眠期表达量明显降低,从5龄起蚕以后表达量逐渐上升,Ser-2短片段和长片段分别从5龄96h和144h之后表达量开始降低,到熟蚕期基本达到最低值。 展开更多
关键词 家蚕 丝蛋白基因 表达 发育时期
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靶向家蚕丝素重链基因的锌指蛋白结构域的人工构建
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作者 刘婷婷 梁梓强 +3 位作者 梁安文 郭技星 李广宏 王方海 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期1-4,共4页
将多个可特异识别并结合DNA的锌指单体串联在一起即可构成锌指蛋白结构域,若将其与不同的功能域因子融合,则会构建出有很多用途的人工蛋白分子,从而实现对基因组的各种定点修饰或调控。以家蚕丝素重链基因为研究对象,首先利用Zinc Finge... 将多个可特异识别并结合DNA的锌指单体串联在一起即可构成锌指蛋白结构域,若将其与不同的功能域因子融合,则会构建出有很多用途的人工蛋白分子,从而实现对基因组的各种定点修饰或调控。以家蚕丝素重链基因为研究对象,首先利用Zinc Finger Tools软件筛选到了一个合适的靶标位点,再采用模块组装技术,通过酶切、片段回收、连接、转化等步骤成功将多个锌指单体串联在一起,构建出一对靶向家蚕丝素重链基因特定位点的由4个锌指单体组成的锌指蛋白结构域,这为将来定点修饰或改造家蚕丝素基因,进一步提高蚕丝质量和产量,以及大幅度提升家蚕生物反应器对外源蛋白的表达能力打下了良好的基础。 展开更多
关键词 家蚕 丝素重链基因 锌指蛋白
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Study on fibroin heavy chain of the silkworm Bombyx mori by fluorescence in situ hybridization (FISH) 被引量:2
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作者 宋方洲 张平波 +5 位作者 易发平 洪锡钧 鲁成 Yutaka Banno Hiroshi Fujii Katsumi Koga 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2002年第6期663-668,共7页
The sericulture industry plays a very important role in our national economy. Silkworm (Bombyx mori) is always regarded as a model animal and biological reactor. There have been detailed studies on the structure, expr... The sericulture industry plays a very important role in our national economy. Silkworm (Bombyx mori) is always regarded as a model animal and biological reactor. There have been detailed studies on the structure, expression and control and molecular evolution of silk genes. However, few, if any, reports are available on the localization of structural genes in silkworm by molecular cytogenetics. The present experiment has tentatively localized the Fib-H gene at the distal end of the 25th linkage group, namely at the 25-0.0 position, and verified that Fib-H has only one locus, thus providing a temporary solution to the problem about its localization. 展开更多
关键词 silkworm Bombyx mori fibroin gene fluorescence in SITU hybridization gene localization.
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