环孢菌素A对多发性骨髓瘤患者Sorcin基因表达和临床疗效的影响

目的探讨环孢菌素A（CsA）对多发性骨髓瘤（MM）患者可溶性耐药相关钙结合蛋白（Sorcin）基因表达和临床疗效的影响。方法选择32例MM患者（MM组）和27例正常人（对照组）为研究对象。MM组均行联合化疗，其中临床耐药者（M亚组）在联合化疗前24h开始予CsA8～12mg／（kg·d）静滴或口服，3d后改半量用2d。治疗前后采用RT—PCR方法检测两组骨髓Sorcin基因表达率，观察临床疗效。结果治疗前Sorcin基因表达率MM组和对照组分别为31．25％和0．30％（P〈0．05），M亚组和非临床耐药者（UM亚组）分别为75．00％和16.670％（P〈0．05）；M亚组治疗前后Sorcin基因表达率分别为75．00％和62.50％（P〉0．05），完全缓解（CR）率和总有效率分别为25．00％和62．50％（P〈0．05）。结论CsA可逆转MM患者多药耐药．增强临床疗效，但其机制与Sorcin基因表达无关。

多发性骨髓瘤患者Sorcin基因表达与多药耐药的关系

应用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)技术 ,检测 32例多发性骨髓瘤 (MM)患者、2 7例非恶性血液病患者和健康人的 Sorcin基因表达水平。结果为 MM患者 Sorcin基因表达高于正常对照组 ,差异高度显著(P<0 .0 0 1) ;Sorcin基因阳性表达初诊组 4例 (2 2 .2 % )、缓解组 1例 (14 .3% )、复发难治组 5例 (71.4 % ) ,复发难治组高于初诊组和缓解组 ,差异显著 (分别为 P=0 .0 315 ,P=0 .0 4 89) ;临床耐药组 Sorcin基因阳性表达显著高于非临床耐药组 (P=0 .0 0 4 ) ;Sorcin基因阳性表达者缓解率为 2 0 .0 % ,阴性表达者为 86 .4 % ,差异高度显著 (P=0 .0 0 2 )。认为多发性骨髓瘤患者临床耐药与 Sorcin基因过度表达密切相关 ,Sorcin基因过度表达是影响预后的重要因素 。

LoVo/Adr细胞中sorcin基因的表达与细胞Ca^(2+)浓度的关系

目的:探讨在人结肠癌耐药株LoVo/Adr细胞中可溶性耐药相关钙结合蛋白(solubleresistancerelatedcalciumbindingprotein,sorcin)与Ca2+浓度的关系。方法:以Fluo3/AM标记细胞内Ca2+,用共聚焦显微镜观察其浓度变化;采用RTPCR和免疫组化的方法检测细胞中sorcin基因的mRNA水平和蛋白水平。结果:与亲本LoVo细胞相比,耐药LoVo/Adr细胞中Ca2+浓度显著增高(P<0.01);sorcin基因在LoVo细胞中几乎不表达,而在耐药LoVo/Adr细胞中,无论mRNA水平还是蛋白水平均显著高表达(P<0.01)。结论:耐药LoVo/Adr细胞中sorcin高表达没有引起细胞内Ca2+浓度的降低。

慢性粒细胞白血病患者sorcin基因表达及其临床意义

目的探讨慢性粒细胞白血病患者可溶性耐药相关钙结合蛋白(sorc in)基因表达与临床耐药和疗效的关系。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测31例慢性粒细胞白血病(CM L)患者(CM L组)和27例健康人(对照组)sorc in基因表达。结果CM L组sorc in基因阳性表达率明显高于对照组(P<0.01),其急变期患者阳性率高于慢性期和加速期患者(P分别为0.03和0.18);CM L临床耐药者sorc in基因表达显著高于非临床耐药者,疗效显著低于非临床耐药者。结论CM L患者sorc in基因呈高表达,与临床耐药和预后密切相关;sorc in表达可作为检测临床耐药和判断CM L患者预后的指标之一。

复发/难治AML患者sorcin基因表达及意义

目的研究复发/难治急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓可溶性耐药相关钙结合蛋白(sorcin)基因表达及意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测65例AML患者(观察组),27例非白血病患者和健康人(对照组)sorcin基因表达水平。结果观察组sorcin基因表达水平高于对照组(P<0.001),其中复发/难治者高于初诊者和完全缓解(CR)者;AML各亚型sorcin基因过度表达存在差异,以M5阳性表达率最高;观察组临床耐药者sorcin基因表达显著高于非临床耐药者(P<0.001),且CR率显著低于非临床耐药者(P<0.001)。结论sorcin基因过度表达与AML患者临床耐药密切相关,是影响预后的重要因素;sorcin可作为检测AML临床耐药和判断预后的指标之一。

Sorcin表达受抑乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/A02对化疗药物敏感性的观察

目的观察可溶性耐药相关钙结合蛋白基因(Sorcin)表达受抑乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/A02对化疗药物敏感性的影响,并探讨其机制。方法将MCF-7/A02细胞分为两组,观察组转染针对Sorcin基因的siRNA,对照组不转染。MTT法检测细胞对阿霉素(ADR)、依托泊苷(VP-16)、高三尖杉酯碱(HHT)、长春新碱(VCR)的敏感性,用流式细胞仪检测细胞对碱性蕊香红-123(Rho-123)的外排功能及VP16处理后的细胞凋亡率,Western blot法检测细胞中的Bcl-2、Bax蛋白。结果观察组ADR、VP-16、HHT、VCR的IC50分别为(19.92±1.29)(、31.47±2.36)(、4.19±0.27)(、2.96±0.23)μg/ml,对照组分别为(111.57±5.60)(、144.77±20.43)(、24.30±0.43)、(5.89±0.28)μg/ml,两组比较,P均<0.01。观察组细胞凋亡率为9.15%±0.25%,对照组为4.10%±0.12%,两组比较,P<0.01。观察组细胞内Rho-123的荧光强度为6.34±0.86,对照组为5.42±0.73,两组比较,P>0.05。观察组细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达量为0.59±0.0321、.80±0.03,对照组分别为0.69±0.025、1.94±0.04,两组比较,P均<0.05。结论抑制Sorcin表达可显著增强MCF-7/A02细胞对化疗药物的敏感性;这种作用可能与其调节Bcl-2/Bax通路促进MCF-7/A02细胞凋亡有关。

Sorcin基因和mdr1基因的相关性及临床意义

目的 探讨急性髓细胞系白血病 (AML)患者可溶性耐药相关钙结合蛋白基因 (sorcin)和多药耐药基因 (mdr1)的相关性表达及其与临床耐药和疗效的关系。方法 Northernblot检测K5 6 2 /A0 2细胞株sorcin和mdr1基因的表达 ,用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 6 5例AML患者、2 7例非白血病患者和健康人的sorcin基因和mdr1基因表达 ,并分析sorcin基因和mdr1基因表达的相关性及其临床意义。结果 AML患者中 ,sorcin和mdr1基因表达明显高于正常对照组 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 0 1) ;在AML和对照组中 ,sorcin和mdr1基因的表达有较好的相关性 ;sorcin和mdr1基因的共表达与AML患者的临床耐药和预后具有较高的符合率。Sorcin+ 和mdr1+ 组患者临床耐药发生率为 92 .9% ,完全缓解 (CR)率为 7.1% ;sorcin-和mdr1-组患者临床耐药发生率为 8.6 % ,CR率为91.4 %。结论 白血病患者的sorcin和mdr1基因共表达与其临床耐药和预后密切相关 ,可作为检测临床耐药和判断预后的有效手段之一。

β-淀粉样蛋白对原代培养大鼠海马神经细胞Sorcin、RyR2mRNA基因表达的影响

目的研究β-淀粉样蛋白（Aβ）对原代培养的大鼠脑海马神经细胞内钙稳态相关蛋白Sorcin、RyR2mRNA的影响。方法新生1-3天的Wistar大鼠，取其海马组织，原代培养8d后，用已老化过的Aβ25-35对海马神经细胞进行1μmol／L，10μmol／L和20μmol／L剂量的染毒，培养24和48h后分别观察海马神经细胞形态、和海马神经细胞内钙调节相关蛋白Sorcin、RyR2mRNA的基因表达水平。结果随着Aβ25-35剂量的增加和染毒时间的延长，可发现随着Aβ25-35剂量的增加和染毒时间的延长，海马细胞出现细胞凋亡的比例增加，其中Aβ25-35 20μmol／L染毒48h培养海马细胞中出现了大量早期凋亡细胞和少量中期凋亡细胞。实时定量PCR结果显示，10μLmol／LAβ25-35在对原代细胞染毒24和48h后SorcinmRNA的相对表达量为（1．42±0．03）和（1．63±0．02），与对照组相比，表达增加（P〈0．05）；20μmol／L Aβ25-35在对原代细胞染毒24h和48h后SorcinmRNA的相对表达量（2．11±0．05）和（2．23±0．05），与对照组相比，表达增加（P〈0．05）；20μmol／L Aβ25-35在对原代细胞染毒24和48h后RyR2mRNA的相对表达量为（1．64±0．03）和（1．95±0．03），表达显著高于对照组相（P〈0．05）。结论Aβ具有神经毒性，可抑制海马神经细胞的生长，可通过作用于钙调节相关蛋白的表达，诱发阿尔茨海默氏病（AD）的发生。

海马内注射淀粉样蛋白对大鼠海马细胞内钙稳态的影响

目的研究海马内注射β-淀粉样蛋白(Aβ)对大鼠海马细胞内钙稳态的影响。方法将30只成年清洁级SD雄性大鼠按体重随机分为6组,每组5只。采用海马内注射方式染毒Aβ25～35,剂量分别为10、5、1μg/只,设立生理盐水组、假手术组和正常对照组。于术后14 d,检测大鼠海马Ca2+-ATPase的活力及海马细胞内游离钙离子的浓度和海马内Sorcin、Ryr2 mRNA的表达水平。结果与生理盐水组相比,各Aβ25～35染毒组大鼠海马Ca2+-ATPase活力均降低,5、10μg Aβ25～35染毒组大鼠海马细胞内游离钙离子浓度和各Aβ25～35染毒组大鼠海马细胞内Sorcin、Ryr2 mRNA的表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);且随着Aβ25～35染毒量的升高,大鼠海马Ca2+-ATPase活力呈下降趋势,海马细胞内游离钙离子的浓度和海马内Sorcin、Ryr2 mRNA的表达水平均呈上升趋势。而假手术组、生理盐水组与正常对照组大鼠海马以上4个指标间比较,差异均无统计学意义。结论 Aβ25～35可以通过破坏大鼠海马细胞内钙稳态而发挥神经毒性作用。