桑黄素和乙酰化白藜芦醇对沙奎那韦在大鼠体内药代动力学的影响

目的评估桑黄素和乙酰化白藜芦醇对大鼠体内沙奎那韦(P-gp作用底物)药物代谢动力学的影响。方法将SD大鼠分为4组,每组5只,即对照组、实验Ⅰ和Ⅱ组、阳性对照组,分别灌胃给予30 mg·kg-1沙奎那韦;30 mg·kg-1沙奎那韦联用40 mg·kg-1桑黄素;30 mg·kg-1沙奎那韦联用40 mg·kg-1乙酰化白藜芦醇和30 mg·kg-1沙奎那韦联用40 mg·kg-1维拉帕米。采用HPLC-MS/MS方法测定给药后不同时间沙奎那韦的血药浓度,计算药动学参数。结果 4组大鼠体内主要药动学参数分别为:AUC0-t:381.53μg·h·L^(-1),185.53μg·h·L^(-1),360.43μg·h·L^(-1),529.95μg·h·L^(-1);AUC0-∞:409.48μg·h·L^(-1),228.52μg·h·L^(-1),446.67μg·h·L^(-1),552.41μg·h·L^(-1);Cmax:110.80μg·L^(-1),86.44μg·L^(-1),139.84μg·L^(-1),423.60μg·L^(-1);Tmax:0.25 h,0.25 h,0.25 h,0.50 h;T1/2:5.72 h,5.94 h,6.78h,3.78 h;MRT0-∞:10.30 h,9.61 h,12.30 h,4.89 h;CL/F:7.59 m L·kg-1·h-1,13.88 m L·kg-1·h-1,7.28 m L·kg-1·h-1,5.52 m L·kg-1·h-1。结论沙奎那韦的药时曲线存在多峰现象;桑黄素可明显降低沙奎那韦的口服生物利用度并对其药动学参数产生影响,而乙酰化白藜芦醇对沙奎那韦的口服生物利用度和药动学参数没有明显影响。

乙酰化白藜芦醇保护海水淹溺型急性肺损伤的机制研究

目的观察海水淹溺型急性肺损伤（SWD—ALI）的发病机制，验证乙酰化白藜芦醇通过抑制核因子一KB（NF—KB）的表达减轻SWD—ALI。方法32只大鼠分为正常对照组、模型组、乙酰化白藜芦醇预处理组和乙酰化白藜芦醇对照组。模型组和乙酰化白藜芦醇预处理组气管内注入4mL／kg海水，4h后检测肺损伤指标，并用ELISA法检测肺组织中NF—KB的表达量。结果与正常对照相比，模型组大鼠出现明显肺损伤，并伴有炎性细胞浸润和炎性因子的分泌，同时肺组织中NF—KB表达量增高；乙酰化白藜芦醇预处理组吸入海水后肺部损伤明显减轻，NF—KB表达受到抑制。结论NF～KB的促炎机制参与SWD—ALI的发生，乙酰化白藜芦醇能够通过抑制NF—KB表达减轻SWD—ALI。

白藜芦醇对动物表观遗传学调控的作用机制

白藜芦醇是一种非黄酮类多酚物质,也是一种天然的植物抗毒素,广泛存在于多种植物中。白藜芦醇具有多种生物活性和药理作用,如抗氧化、抗肿瘤、神经及心血管保护和抗衰老等作用。新近研究表明白藜芦醇的这些作用与表观遗传学修饰调控基因的内在表达密切相关。本文总结了表观遗传学主要修饰机制以及白藜芦醇参与动物和人基因DNA甲基化、组蛋白乙酰化、微小RNA等方面的研究进展,从表观遗传学修饰水平方面综述了白藜芦醇在动物和人体内发挥作用的途径。

白藜芦醇对SIRT1的调节作用及SIRT家族对代谢综合征的防治意义

代谢综合征是由一系列代谢紊乱所导致的心血管疾病和Ⅱ型糖尿病等疾病的统称,是饮食紊乱和不正确的生活方式所造成的。随着人们年龄的增长发病率逐渐升高,并且在全球呈现流行趋势。二氢尿嘧啶脱氢酶(NAD+)依赖的SIRT家族调节细胞和器官的代谢,对代谢综合征具有明显的调节作用。本文重点从分子水平阐述白藜芦醇介导的SIRT1,以及SIRT家族其他成员对代谢的调节作用,为开发白藜芦醇类的功能性食品提供科学依据。SIRT家族的乙酰化调节也为由于代谢和饮食紊乱所导致的代谢综合征和癌症治疗方法的发展提供新的途径。

白藜芦醇调控高雄激素诱导卵巢细胞乙酰化的研究进展

多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)是一种以高雄激素表现为典型特征的育龄女性常见内分泌疾病,发病率高,异质性高,病因不明,现阶段临床仍采取对症治疗为主的策略。近年研究显示,PCOS患者卵巢细胞中组蛋白乙酰化修饰异常,与多种组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰化酶的失衡有关。其中沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)属组蛋白去乙酰化酶,可被白藜芦醇激活而降低相应组蛋白的乙酰化水平;且白藜芦醇可借助对抗氧化应激、调节雄激素和雌激素水平等途径缓解PCOS相关症状。综述去乙酰化酶SIRT1的激动剂白藜芦醇对高雄诱导的PCOS卵巢异常乙酰化的调控机制,以及白藜芦醇对卵巢功能的修复机制,展望白藜芦醇在PCOS临床治疗的潜在应用前景。

白藜芦醇通过降低NF-κB p65乙酰化缓解大鼠神经病理性疼痛

目的观察白藜芦醇对腰5脊神经结扎(L5spinal nerve ligation,SNL)大鼠的镇痛作用及其相关机制。方法90只♂SD大鼠随机分为6组(n=15)。正常组;假手术组;疼痛组;高、中和低剂量白藜芦醇组。正常组不做处理,假手术组仅暴露腰5脊神经,其余各组行SNL。高、中、低剂量组分别将300、30、3μg白藜芦醇溶于10μL的100%二甲基亚砜溶剂中,于SNL术后d 4经鞘内导管给药,每天1次,连续给药4 d。术后1、3、5、7、9、11、14 d测定各组大鼠热缩足潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)。行为学测试结束后处死大鼠,取腰段脊髓。Western blot检测沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)和乙酰化p65蛋白的表达水平,采用免疫荧光法测定脊髓背角活化的核因子κB(NF-κB)表达。结果与假手术组比较,疼痛组大鼠术后PWL明显降低(P<0.05),SIRT1蛋白含量明显减少(P<0.05),乙酰化p65蛋白含量和活化的NF-κB表达明显增多(P<0.05)。与疼痛组比较,高、中剂量组大鼠给药后PWL和SIRT1蛋白含量明显升高(P<0.05),乙酰化p65蛋白含量和活化的NF-κB表达明显减少(P<0.05)。结论鞘内注射白藜芦醇可缓解神经病理性疼痛,其机制可能与激活SIRT1,促进p65去乙酰化,从而抑制NF-κB活化有关。

白藜芦醇对高糖诱导肾小球内皮细胞损伤的调节作用及分子机制

目的 研究白藜芦醇(Res)对高糖诱导肾小球内皮细胞损伤的调节作用及分子机制。方法 培养人肾小球内皮细胞(HRGEC)并随机分为含有5.5 mmol/L葡萄糖培养基处理的对照组,含有30 mmol/L葡萄糖培养基处理的高糖组,含有不同浓度Res(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)及30 mmol/L葡萄糖培养基处理的Res-L组、Res-M组、Res-H组。检测细胞活力A水平、细胞凋亡率、细胞中沉默信息调节因子1(Sirt1)、cleaved caspase-3、乙酰化p53、乙酰化NF-κB表达水平及培养基中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6的含量。结果 高糖组的A水平、细胞中Sirt1表达水平低于对照组,凋亡率、cleaved caspase-3、乙酰化p53、乙酰化NF-κB表达水平及TNF-α、IL-1β、IL-6高于对照组(P<0.05);Res-L组、Res-M组、Res-H组的A水平、细胞中Sirt1表达水平高于高糖组,凋亡率、cleaved caspase-3、乙酰化p53、乙酰化NF-κB表达水平及TNF-α、IL-1β、IL-6低于高糖组(P<0.05),且Res剂量越高,上述变化越显著。结论 Res对高糖诱导HRGEC损伤具有保护作用,促进p53及NF-κB去乙酰化、抑制凋亡及炎症反应是与之相关的分子机制。

白皮杉醇和乙酰化白藜芦醇对小鼠辐射损伤的防护作用

目的探讨白藜芦醇(resveratrol)衍生物白皮杉醇(piceatannol)和乙酰化白藜芦醇(acetylated resveratrol)对小鼠辐射损伤的防护作用。方法将昆明小鼠随机分为8组:正常对照组、照射对照组、白皮杉醇低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组和乙酰化白藜芦醇低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)组,每组6只。小鼠经5.5 Gy 60Coγ射线一次性全身照射前2 h灌胃给药,对照组均灌服含2%DMSO的生理盐水溶液。照射后24 h,观察小鼠脾脏和胸腺系数、外周血淋巴细胞数量和百分率、血浆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力及骨髓嗜多染红细胞微核率的变化。结果与正常对照组相比,照射对照组小鼠脾脏和胸腺系数、外周血淋巴细胞数量和百分率及血浆SOD活力均显著降低(P<0.05或P<0.01),骨髓嗜多染红细胞微核率显著升高(P<0.01)。与照射对照组相比,白皮杉醇和乙酰化白藜芦醇各剂量组脾脏系数均显著增高(P<0.05或P<0.01),但胸腺系数差异无统计学意义(P>0.05);乙酰化白藜芦醇中、高剂量组外周血淋巴细胞数量和淋巴细胞百分率均显著升高(P<0.05或P<0.01);白皮杉醇中、高剂量组以及乙酰化白藜芦醇各剂量组血浆SOD活力均显著升高(P<0.05或P<0.01);白皮杉醇及乙酰化白藜芦醇各剂量组骨髓嗜多染红细胞微核率均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论白藜芦醇衍生物白皮杉醇和乙酰化白藜芦醇均对小鼠具有一定的辐射损伤防护作用,其作用机制与提高机体免疫能力、清除活性氧(reactive oxygen species,ROS)、保护造血组织免于辐射诱发的损伤有关。

乙酰化白藜芦醇通过调节缝隙连接蛋白43表达减轻海水淹溺型急性肺损伤

目的观察海水淹溺肺损伤大鼠肺组织中缝隙连接蛋白43(Cx43)的表达变化及乙酰化白藜芦醇对其的干预作用。方法 32只大鼠完全随机分为空白对照组、模型组、乙酰化白藜芦醇预处理组和乙酰化白藜芦醇组,每组8只。采用气管内滴注海水(4 ml/kg)的方法制作海水淹溺型急性肺损伤大鼠模型,用ELISA法检测肺组织中TNF-α和IL-10的含量,实时定量PCR及免疫组化的方法检测肺组织中Cx43的表达变化。结果吸入海水4 h后,大鼠肺部损伤明显,TNF-α和IL-10的含量增高,Cx43在基因水平表达量增高,而蛋白水平表达降低;乙酰化白藜芦醇预处理明显减轻海水吸入导致的急性肺损伤,减少炎症因子分泌并且在基因水平和蛋白水平增加Cx43的表达。结论 Cx43参与海水淹溺型急性肺损伤的发生与发展,乙酰化白藜芦醇能够通过增加Cx43的表达减轻肺损伤。

白藜芦醇二聚体δ-viniferin及其乙酰化物对小鼠耳廓微循环的影响

目的研究白藜芦醇、白藜芦醇二聚体δ-viniferin及其乙酰化物对微循环的改善作用。方法采用腹腔内给药的方式,记录血流速度、输入管径、输出管径、每秒血流量及毛细血管开放量,对比前后差值。结果白藜芦醇二聚体δ-viniferin及其乙酰化物能明显增大正常小鼠耳廓微细动静脉口径,增加毛细血管开放量,增加血流速度。结论白藜芦醇二聚体δ-viniferin及其乙酰化物能明显改善微循环,对微循环障碍可发挥积极的治疗作用。

乙酰化白藜芦醇对长波紫外线照射后HaCaT细胞内NRF2活化及活性氧水平的影响

目的探讨乙酰化白藜芦醇对长波紫外线(UVA)照射后人永生化角质形成细胞HaCaT内核转录相关因子NRF2(NF-E2-related factors 2)活化和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的影响。方法用CCK-8试剂盒检测不同剂量(0、5、10、20、30、40、60、80 J/cm^2)UVA照射后24 h,及不同浓度(0、0.5、1、2μmol/L)乙酰化白藜芦醇干预24 h后再经20 J/cm^2 UVA照射后24 h HaCaT细胞的存活率;Western blot检测20 J/cm^2 UVA照射HaCaT细胞后不同时间点(0、3、6、12、24、48 h)及2μmol/L乙酰化白藜芦醇干预24 h后再经20 J/cm^2 UVA照射后6 h细胞核内NRF2蛋白表达的变化;Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测2μmol/L乙酰化白藜芦醇干预HaCaT细胞24 h后再经20 J/cm^2 UVA照射后24 h细胞的凋亡率和死亡率;二氯荧光黄二乙酸酯(dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针标记细胞检测HaCaT细胞中ROS水平的变化。结果 10~80 J/cm^2 UVA照射后24 h,HaCaT细胞存活率随照射剂量的增加逐渐降低(P<0.05);20 J/cm^2 UVA照射HaCaT细胞后0 h,细胞核内NRF2的表达急剧增强(P<0.01),照射后3~48 h又逐渐减弱(P<0.05)。乙酰化白藜芦醇预处理能显著提高UVA照射后细胞的存活率(P<0.05),降低其凋亡率和死亡率(P<0.05),促进细胞核内NRF2蛋白的表达(P<0.01),并降低细胞内ROS水平(P<0.01)。结论乙酰化白藜芦醇能减轻UVA照射引起的HaCaT细胞增殖抑制、凋亡和死亡,其机制可能与其促进NRF2蛋白活化,降低细胞内ROS水平,从而减轻UVA照射对细胞的氧化损伤有关。

乙酰化白藜芦醇和白藜芦醇在大鼠体内的药代动力学比较研究

目的:建立测定大鼠血浆中白藜芦醇的高效液相色谱法,并比较研究乙酰化白藜芦醇和白藜芦醇在大鼠体内的药代动力学。方法:色谱柱为UltimateAQ-C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈-水(32∶68),流速为1.0mL/min,检测波长306nm:血浆样品用乙酸乙酯萃取法预处理。结果:线性范围0.1～10.0μg/mL,相关系数r=0.9995。日内RSD<10%,日间RSD<15%,回收率98.0%～102.0%。结论:该方法灵敏度高,操作方便,适用于白藜芦醇在大鼠体内的药代动力学研究:SD大鼠灌服等摩尔的白藜芦醇或乙酰化白藜芦醇,后者的半衰期t1/2是前者的1.34倍,AUC(0-∞)为前者的1.15倍,后者的t1/2比前者延长,生物利用度增加,药代动力学性质有明显改善。