双硫死亡基因BAK1在口腔鳞癌细胞中的表达及对细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:识别口腔鳞状细胞癌新标志物,探究双硫死亡在口腔鳞状细胞癌增殖、迁移和侵袭中潜在的生物学价值。方法:检索相关文献,汇总双硫死亡相关基因。基于TCGA数据库,利用生物信息学方法识别具有临床意义的双硫死亡相关基因,并通过细胞生物学实验探究该基因在肿瘤发生发展过程中具有的生物学价值。结果:细胞生物学实验显示,BAK1在口腔鳞状细胞癌中均高表达。此外,BAK1过表达或敲低对于细胞增殖、迁移和侵袭能力均产生较大影响。结论:BAK1可作为口腔鳞状细胞癌新标志物,具有临床意义。同时,双硫死亡在口腔鳞状细胞癌增殖、迁移和侵袭中具有一定的生物学价值。

NF-κB介导的促凋亡蛋白Bak表达在溃疡性结肠炎发病中的作用研究

目的:探讨核因子-κB(Nuclear factor kappa B,NF-κB)介导的促凋亡蛋白Bak(Bcl-2 associated K protein gene,Bak)及TNF-α的表达在溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)发病中的作用机制。方法:选购80只清洁级SD大鼠,分为模型组和对照组。UC大鼠模型制造采用"三硝基苯磺酸+乙醇"方法,模型制造成功后观察、评估结肠黏膜的大体形态及组织学变化。用免疫组织化学及RT-PCR法检测模型组与对照组中的NF-κB、Bak、TNF-α的表达水平,并分析相互之间关系。结果:UC大鼠模型制造成功率为97%。模型组固有层和黏膜层内炎性细胞浸润较对照组明显增多(P<0.01);NF-κB、TNF-α蛋白及mRNA表达水平模型组较对照组明显升高(P<0.01);Bak蛋白在模型组的炎细胞中表达明显低于对照组(P<0.01),而在结肠黏膜上皮细胞中的水平与对照组无明显差异(P>0.05)。NF-κB、TNF-α蛋白阳性细胞百分数及mRNA水平随模型组的组织学等级升高而增强,而Bak蛋白阳性细胞百分数是减弱的(P<0.05);且模型组中NF-κB与Bak蛋白的表达水平呈负相关(r=-0.793,P<0.01),NF-κB与TNF-α蛋白表达成正相关(r=0.892,P<0.01)。结论:NF-κB介导的促凋亡蛋白Bak的表达参与了UC的发生、发展。

Bak基因过表达诱导肝癌细胞凋亡

目的：本文旨在研究bcl-2基因家族促凋亡蛋白Bak在肝癌细胞凋亡中的作用，同时评价它作为肿瘤治疗的潜在靶基因的可能性。方法：免疫组织化学法研究Bak在HCC组织中的分布，并结合TUNEL染色，分析Bak在肝癌细胞凋亡中潜在的作用。采用MTⅡ调节系统，通过加锌离子(ZnSO4，100μmol/L）诱导Bak基因表达。HCC-9204肝癌细胞系作为靶细胞，获得表达Bak基因的稳定转染子。结果：在HCC组织中，Bak抗原的表达主要位于肝（癌）细胞的胞浆，呈细颗粒状均匀分布，在癌细胞中偶有核内表达。TUNELLI的分析结果显示，低TUNELLI组Bak表达的细胞阳性率显著低于高TUNELLI组的细胞阳性率(P<0.01)。可诱导性Bak基因过表达的HCC9204细胞显示广泛的细胞死亡。TUNEL染色证实细胞核的碎片化，Annexin-V实验证实细胞膜不对称丧失，从而提示这种细胞死亡是凋亡。流式细胞仪显示在诱导后24h，有19.29％的细胞发生凋亡。结论：肝癌细胞的凋亡与bcl2家族促凋亡成员Bak抗原的表达有关；Bak基因显著诱导HCC－9204细胞凋亡。因此Bak基因可能成为肿瘤基因治疗的靶基因。

Bax/Bak在抑制人颗粒细胞凋亡中的作用

目的探讨Bax、Bak等凋亡分子的小分子干扰RNA(siRNA)可否抑制人颗粒细胞凋亡。方法(1)用Western blotting检测Bax-siRNA、Bak-siRNA;(2)将Bax-siRNA、Bak-siRNA分别或同时转染入人颗粒细胞,观察基本形态,用流式细胞仪检测颗粒细胞的凋亡。结果(1)转染了Bax-siRNA和Bak-siRNA后的条带减弱,说明细胞内Bax、Bak含量降低。(2)空白对照组、Bak干扰组、Bak+Bax干扰组细胞形态正常;Bax干扰组细胞形态基本正常,胞质中有少数黑点;阳性对照组、阴性对照组细胞变圆,收缩,细胞间距大,胞质中有较多黑点。(3)流式细胞仪检测结果:Bak干扰组凋亡指数为3.44%,Bax+Bak联合干扰组凋亡指数为3.97%,明显低于阴性对照;Bax干扰组凋亡指数为19.98%,与阴性对照组相似。结论(1)干扰Bak等凋亡分子的表达,可以抑制颗粒细胞的凋亡。(2)Bak干扰组及Bax+Bak联合干扰组抗颗粒凋亡效果显著。(3)Bax干扰组抑制颗粒细胞凋亡的作用不明显。

BAK在颈椎前路手术中的应用

目的： 本文旨在探讨 Ｂ Ａ Ｋ 技术在颈前路手术中的应用价值。方法： 对４１ 例颈椎前路手术进行分析。其中 Ｂ Ａ Ｋ 手术２４ 例， 常规颈前路减压融合术１７ 例， 比较２ 组手术前后的颈椎生理曲线、椎间高度、手术时间、术中出血量、术后离床活动时间及改善率。结果： Ｂ Ａ Ｋ 手术组的颈椎生理曲线、椎间高度的改善优于常规手术组， 且手术时间明显缩短， 术中出血量减少， 术后起床活动时间早； 对手术后的改善率２ 组无明显差异。结论： Ｂ Ａ Ｋ 融合器是一种较为理想的颈前路植骨替代物。

BAK椎间融合技术治疗腰椎失稳的并发症分析

目的 :探讨BAK融合器治疗腰椎失稳的并发症原因 ,并提出相应的预防对策。方法 :分析采用BAK融合器治疗腰椎失稳的 34例所出现的并发症 ,并根据具体情况作相应的改进 (包括手术原则及操作 )。结果 :本组病例并发症的出现与术者的临床经验、手术技巧有关。结论 :使用BAK融合器要求术者充分了解其设计特点 ,有熟练的脊柱外科技术 。

双BAK椎间植骨融合术在治疗腰椎不稳症中的应用

目的:评价BAK椎间植骨融合对腰椎不稳症的治疗效果.方法:对38例腰椎不稳症患者采用前或后路BAK置入椎间单或多节段植骨融合,滑脱病例同时使用椎弓根钉复位固定,并经后路行椎管和神经根管减压.结果:36例随访8～32个月,平均15.8个月.滑脱复位率94.4%(34/36);BAK融合率91.7%(33/36).按O～9评分系统标准评定疗效:优11例,良21例,可4例,优良率88.9%.4例分别出现了伤口不愈合,窦道形成;滑脱复位不完全;假关节形成.结论:BAK能够提供节段稳定性及为椎间植骨融合创造良好的生物力学环境,但在临床应用中必须严格掌握手术适应证及术中操作技巧.

斜向单枚BAK植入后路腰椎椎体间融合术的生物力学及临床研究

目的 :对作者设计的单枚融合器后斜向植入后路腰椎椎体间融合术行生物力学评价及临床观察。方法 :生物力学研究 :12个小牛脊柱运动节段分为 2组 ,每组 6个。实验组行单侧小关节突、半椎板切除术 ,经侧后方斜向植入加长BAK融合器 1枚 ;对照组行常规后路双侧小关节突、全椎板切除术 ,后前向植入双枚融合器。分别测试两组的纵向压缩、屈曲、侧方弯曲、伸展及双向扭转刚度并进行比较。临床研究 :经后路斜向植入单枚融合器行腰椎椎体间融合术共 40例 ,平均随访 18个月 ,进行临床评价。结果 :生物力学研究显示实验组的垂直压缩刚度、左侧 (融合器植入侧 )弯曲刚度、双侧扭转刚度均较双枚融合器组增大 (P <0 0 5 )。临床随访结果显示 ,患者症状缓解率为 92 % ,术后 1年融合率 88% ,主观满意率 90 % ,所有患者均无融合器的移位。结论 :经侧后方斜向植入单枚融合器的腰椎椎体间融合术 ,能满足后路椎体间融合的生物力学要求 ,有损伤小、脊柱后柱稳定性好、可同时行椎管减压等优点 。

姜黄素对HaCaT增殖的抑制作用及对Notch-1,Bax和Bak表达的影响

目的研究姜黄素对HaCaT细胞抑制增殖的作用及其作用机制。方法倒置显微镜下观察不同浓度姜黄素作用后HaCaT细胞的形态学改变;MTT法检测不同浓度姜黄素对HaCaT细胞抑制增殖的作用;Western blot法检测Notch-1,Bax和Bak蛋白的表达情况。结果 0.01μmol/L姜黄素处理HaCaT细胞后的细胞活性与正常组的差异无统计学意义(P>0.05),>0.1μmol/L的姜黄素处理HaCaT细胞后,其增殖受到抑制,且均与姜黄素有浓度依赖关系(P均<0.05)。Western bolt法检测结果显示,Notch-1的表达逐渐降低,Bak和Bax的表达逐渐升高。结论姜黄素对HaCaT细胞的增殖具有抑制作用,并可诱导细胞凋亡。推测姜黄素可能通过下调Notch-1受体的表达而改变细胞凋亡蛋白的表达,从而发挥抑制角质形成细胞增殖的作用.

姜黄素在急性髓性白血病HL-60细胞中对凋亡调控蛋白Bax、Bak、Mcl-1的影响

为了探讨姜黄素在诱导急性髓性白血病 HL- 6 0细胞凋亡时 ,Bcl- 2基因家族成员是否参与了其调控过程。选用 Bcl- 2基因家族成员 Mcl- 1、Bax、Bak蛋白为研究对象 ,SABC法检测其表达状况 ;用流式细胞术测定 DNA直方图中 Sub- G1 峰值、末端 Td T酶标技术检测 TUNEL 细胞阳性率。发现当 2 5 μmol/ L 姜黄素分别处理 HL- 6 0细胞 2 4h、 36h、 48h后 ,可使 Mcl- 1表达下调 ,Bax和 Bak上调 ,呈时间依赖性。在各处理组 ,Mcl- 1、 Bax、 Bak表达同对照组相比有显著差异 (F值分别为 3.44 3、 8.32 8;P值分别为 0 .0 40、 0 .0 0 1)。结果表明 :Bcl- 2基因家族成员确实参与了姜黄素诱导 HL- 6

应用RF-Ⅱ复位固定加BAK椎间融合治疗腰椎滑脱症

目的:观察RF-Ⅱ复位固定、神经根通道减压、颗粒骨椎间植骨融合治疗腰椎滑脱症的疗效。方法:31例腰椎滑脱症患者术前按Meyerding分类,Ⅰ度9例,Ⅱ度19例,Ⅲ度3例,手术彻底切除卡压神经根的致病因素后采用RF-Ⅱ椎弓根系统复位固定,椎间隙内填充自体骨颗粒,再放入一枚BAK行椎间融合。结果:31例获得11～51个月,平均24个月的随访,滑脱复位率100%,椎间融合率100%,无滑脱丢失。未发现器械本身引起的并发症。22例临床症状接近或完全缓解,7例大部分缓解,1例无变化。按LBOS标准评分,疗效优良率为73.5%。结论:用RF-Ⅱ复位固定加BAK椎间融合治疗腰椎滑脱症复位满意,效果良好。

Caspase-3、Bcl-2和Bak在胃癌中的表达及意义

目的 研究Caspase-3、Bcl-2、Bak等凋亡相关基因蛋白在胃癌中的表达，与胃癌临床病理特征和预后的相关性。方法 将100例无术前放化疗史的胃癌手术标本和30例对照组胃粘膜制成组织芯片，取样针直径2．0mm。用免疫组化方法分别检测Caspase-3、Bcl-2、Bak的表达；用原位末端标记法进行细胞凋亡指数检测。对随访14个月～13年的47例作生存分析。结果 获得2个组织芯片蜡块，分别含114和116个位点。Caspase-3在正常粘膜的表达（90％）显著高于胃癌组织（56％）（P〈0．01），其表达与胃癌组织学分化、血管神经侵犯相关（P〈0．05），与淋巴结转移和国际抗癌联盟（UICC）临床分期及预后无关。Bcl-2和Bak在胃癌中的表达分别为42％和47％，表达均与组织学分化相关（P〈0．05），与淋巴结转移、血管神经侵犯、UICC分期及预后无关。结论 Caspase-3、Bcl-2和Bak均参与细胞凋亡调控和胃癌生物学进程，但其表达与胃癌预后无关。UICC分期仍然是胃癌的独立预后指标。

喉癌手术切缘Bcl-2、Bax及Bak蛋白的表达

①目的探讨喉癌手术安全切缘的范围.②方法采用免疫组化SP法,检测60例喉鳞状细胞癌病人的癌组织、距离癌组织边缘2、5、10 mm组织和20例声带息肉黏膜对照组织切片中Bcl-2、Bax和Bak蛋白的表达.③结果 3种癌基因蛋白产物阳性表达按正常黏膜,距癌灶10、5、2 mm,癌组织顺序依次增高,越靠近癌组织蛋白表达越强,差异有极显著性(χ2=11.87～34.29,P<0.01).④结论喉癌手术可以距肿瘤5 mm作为安全切缘的参考标准.

鼻咽癌细胞放射敏感性与Bcl-2及Bak表达的关系

目的:探讨鼻咽癌细胞株放射敏感性与Bcl-2及Bak蛋白表达的关系。方法:利用免疫荧光技术及流式细胞仪检测Bcl-2及Bak蛋白在两株鼻咽癌细胞株中的表达,并检测照射后Bcl-2、Bak的阳性表达率以及细胞凋亡率。结果:免疫荧光显示两株鼻咽癌细胞中均存在Bcl-2及Bak蛋白的表达,并主要定位于细胞浆中;照射前两株鼻咽癌细胞Bcl-2的表达率分别为CNE-1(87.6±1.2)%,CNE-2(87.7±0.8)%,Bak的表达率分别为CNE-1(11.5±0.8)%,CNE-2(13.5±0.9)%;照射后两株鼻咽癌细胞的凋亡率及Bak的表达随时间变化呈上升趋势,二者呈正相关,而Bcl-2的表达变化与细胞凋亡率的变化无明显相关。结论:在鼻咽癌细胞株CNE-1及CNE-2中,细胞的内在放射敏感性与Bak的表达相关,而与Bcl-2的表达无明显相关。

侧后方斜向植入单枚BAK的腰椎椎体间融合术:临床初步报告

目的：设计侧后方斜向植入单枚多孔螺纹状椎间融合器（ＢＡＫ）行后路腰椎体间融合术的术式，观察该方法治疗２０例下腰痛患者的初步临床疗效。方法：对２０ 例严重下腰痛（１８ 例伴下肢神经症状）的患者，采用本研究设计的术式共融合２８个椎间隙（Ｌ４～５ 间隙１６ 个，Ｌ５ ～Ｓ１ 间隙１２个），其中４例行２ 个椎节融合术的患者附加行Ｓｔｅｆｆｅｅ 钢板内固定术。结果：本组平均随访１２．５个月，除１ 例外，皆达到临床融合，均无融合器移位，患者主观满意率９０％ 。结论：侧后方斜向植入单枚多孔螺纹状椎间融合器行腰椎椎体间融合术，既能尽可能多地保留脊柱后部结构，又能充分完成后路减压，还能保证可靠的融合，不失为一种比较理想的后路腰椎椎体间融合术式。

柔红霉素对培养人视网膜色素上皮细胞BAK和BCL-XL表达的影响

目的 观察BAK和BCL-XL在正常培养和经柔红霉素处理后的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞中的表达。方法 人RPE细胞培养液中加入终浓度为200μg·L^(-1)柔红霉素作用12h,更换新鲜培养液继续培养24h后,运用抗BAK和BCL-XL的多克隆抗体进行免疫细胞化学染色,观察2种基因在RPE细胞中表达的变化。结果 BAK和BCL-XL在正常RPE细胞中均存在表达,但前者的染色强度大于后者(P<0.05),2者光密度分别为56.4±5.7和32.4±4.7,经柔红霉素处理后,RPE细胞BAK的染色强度增加(P<0.05),而BCL-XL的染色强度不变(P>0.05),其光密度值分别为79.2±6.5和34.7±3.9。结论 BAK和BCL-XL在人RPE细胞中存在表达。柔红霉素可以促进BAK的表达,这可能是其诱导RPE细胞凋亡的机理之一。

慢性高原病患者骨髓组织Bak和Bax蛋白的表达水平研究

目的:了解Bak和Bax在慢性高原病(CMS)骨髓组织中的表达,探讨细胞凋亡在CMS发生发展的作用。方法:用免疫组织化学SABC法检测15例CMS男性患者(CMS组)及15例长期居住西宁地区健康男性(对照组)骨髓组织中Bak和Bax表达情况并进行比较分析。结果:CMS组Bak蛋白表达低于对照组Bak表达,CMS组Bax表达低于对照组,CMS患者血液中Hb浓度与骨髓组织中Bak和Bax水平均成负相关。结论:CMS患者骨髓组织Bax和Bak蛋白表达水平降低,Bax和Bak蛋白表达水平积分与外周血Hb浓度之间均呈负相关,提示CMS患者骨髓组织Bcl-2家族蛋白表达异常,异常表达的Bcl-2家族蛋白对造血细胞凋亡的病理性调控可能在CMS红细胞增多机制中发挥作用。

双歧杆菌的完整肽聚糖对实验性大肠癌bak和bax基因表达的影响

目的 :探讨青春型双歧杆菌的完整肽聚糖 (whole peptidoglycan,WPG)的抑瘤机制。方法 :以免疫组化法检测大肠癌裸鼠移植瘤 bak和 bax基因的蛋白表达水平。结果 :WPG注射组大肠癌移植瘤 bak和 bax的阳性细胞密度、阳性表达率和表达强度均显著高于肿瘤对照组。结论 :WPG的抑瘤机制之一是通过增强 bak和 bax基因的蛋白表达 ,最终诱导肿瘤细胞的凋亡。

Bcl-2、Bcl-XL、Bax、Bak在急性白血病细胞中的表达及其临床意义

目的 观察凋亡调节蛋白的表达与急性白血病化疗效果的关系。方法 用免疫细胞化学法对 36例急性白血病患者 (初治敏感组 11例 ,复发难治组 2 5例 )白血病细胞中凋亡调节蛋白Bcl 2、Bcl XL、Bax、Bak的表达进行分析。结果 抗凋亡蛋白Bcl 2、Bcl XL 的平均阳性细胞率复发难治组为 (4 1.6 8± 14.39) %和 (35 .96±9.95 ) % ,初治敏感组为 (15 .6 4± 8.5 1) %和 (12 .91± 8.6 3) % ,两组间差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。促凋亡蛋白Bax、Bak的平均阳性细胞率复发难治组为 (2 5 .2 8± 15 .49) %和 (15 .5 3± 10 .6 4) % ,初治敏感组为 (2 1.5 5±12 .5 8) %和 (13 .2 3± 8.36 ) % ,两组间差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。Bcl 2、Bcl XL、Bax、Bak对 36例急性白血病缓解率影响的Logistic回归分析表明 ,Bcl XL 是其中降低急性白血病缓解率的最重要因素。结论 Bcl 2、Bcl XL在急性白血病MDR发生中起调节作用 ,并且Bcl XL 可能比Bcl

2型猪圆环病毒感染对小鼠组织中Caspase3、Bak及Bcl-2基因表达的影响

Caspase3、Bcl-2、Bak是细胞凋亡过程中3种重要的调节蛋白,为研究感染猪圆环2型病毒(PCV2)后体内细胞的凋亡情况,本实验以BALB/c小鼠为实验模型,建立了SYBR Green I实时定量PCR检测细胞凋亡的方法。结果表明实验组Caspase3的表达在各时间段里与对照组相比均呈上升趋势,提示了PCV2感染可以上调Caspase3水平,从而增加被病毒感染组织的细胞凋亡,而小鼠心、脑、脾等组织Bak基因表达明显上调,Bcl-2基因表达水平也伴随Bak基因而升高。这些结果揭示了PCV2感染BALB/c小鼠后,相关细胞凋亡基因在体内的作用与机制,同时为今后细胞凋亡的检测提供了新的方法。