川芎嗪对青霉素致痫大鼠神经元内c-fos表达的影响

目的:用免疫组织化学方法观察川芎嗪（TM）对青霉素致痫大鼠大脑皮层神经元内c-fos表达的影响。方法:使用青霉素癫痫模型,采用BL-410生物机能实验系统记录双侧大脑皮层癫痫放电,观察腹腔注射TMP对大鼠癫痫放电大脑皮层神经元内c-fos表达的影响。结果:腹腔注射TMP（20-40mg/kg）后,大脑皮层神经元内c-fos表达较对照组明显降低。结论:TMP能明显抑制c-fos的表达,具有抗癫痫放电作用。

糖皮质激素对癫痫大鼠海马c-fos表达的影响

用免疫组织化学方法观察了糖皮质激素对马桑内酯致痫大鼠海马 c- fos的影响。侧脑室注射马桑内酯 2 h后 ,导致动物急性癫痫样发作。海马内出现 c- fos的高度表达。单纯向侧脑室注射糖皮质激素 10 0μg以后 ,动物不出现癫痫行为。海马内也几乎无 c- fos表达。但先向侧脑室注射糖皮质激素 10 0μg 1h,再向侧脑室内注射马桑内酯 2 h后 ,海马内 c- fos表达明显减少。摘除双侧肾上腺一周 ,再向侧脑室注射马桑内酯 2 h后 ,动物癫痫发作更明显 ,海马内 c- fos表达较单纯用马桑内酯致痫动物更强。结果提示 :糖皮质激素对马桑内酯致痫有明显的抑制作用 ,为临床应用糖皮质激素治疗癫痫提供了形态学参考。

miR-200c-3p靶向FOSL1增加乳腺癌细胞化疗敏感性

化疗耐受是乳腺癌复发转移率居高不下、综合治疗效果难以提高的主要瓶颈。前期研究证实,miR-200c-3p在乳腺癌敏感细胞MCF-7中的表达量显著高于耐药细胞MCF-7/5Fu,提示miR-200c-3p可能参与乳腺癌化疗增敏,但是具体机制不详。生物信息学预测联合双荧光素酶报告基因实验证实,miR-200c-3p靶向调控FOSL1,且在多种肿瘤中miR-200c-3p与FOSL1表达负相关。实时荧光定量PCR技术和Western印迹技术证实,FOSL1在耐药细胞MCF-7/5Fu中的表达量显著高于亲本细胞MCF-7。在MCF-7细胞中,过表达FOSL1能够显著提高该细胞对5-Fu的化疗耐受;在MCF-7/5Fu中,使用siRNA技术沉默FOSL1,将提高该细胞对5-Fu的化疗敏感性。此外,MTT实验还发现,miR-200c-3p抑制剂能够显著上调MCF-7细胞对5-Fu的耐受,但是在此细胞中干扰FOSL1的表达,又可以增加其对5-Fu的化疗敏感性;miR-200c-3p mimics显著增加MCF-7/5Fu细胞的化疗敏感性,上调FOSL1表达后又可逆转miR-200c-3p mimics的化疗增敏作用。总之,miR-200c-3p能够通过靶向FOSL1增加乳腺癌细胞对5-fluorouridine化疗敏感性。

体外神经细胞过表达Mex3C-1对诱导性Fos表达的影响

目的探讨Mex3C-1对卡巴胆碱诱导的Fos表达的影响。方法将具有可持续表达人Mex3C-1序列的质粒pLV-CMV-Mex3C(OE)在HEK293T细胞中包装成慢病毒载体,同时制备非特异性对照(NC)CmiR0001-MR03的慢病毒载体,分别感染人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,经嘌呤霉素筛选后得到稳定高表达Mex3C-1和阴性对照细胞系,用Real time PCR和Western blot方法检测Mex3C-1的基因和蛋白表达效果。之后用卡巴胆碱诱导Fos表达,在诱导0、30、60、90和120min后分别提取mRNA,采用Real time PCR方法检测Fos mRNA的相对表达量。结果Real time PCR检测结果显示,OE组的Mex3C-1 mRNA的相对表达量(21.11±0.60)高于NC组(1.03±0.13)(t=32.63,P=0.000)。Western blot结果显示,在82kDa处OE组的Mex3C-1蛋白表达量高于NC组(P<0.001)。Real time PCR检测不同干预时间两组Fos mRNA,除0min外各个时间点OE组均高于NC组,表明Mex3C-1的过表达可以明显上调Fos mRNA的表达;NC组于120min时已基本恢复至基础值,而OE组120min时Fos mRNA表达量仍然较高,Mex3C-1过表达可以延长Fos mRNA的半衰期,增强其稳定性,OE组与阴性对照NC组比较,Fos mRNA表达量差异有统计学意义(F=287.069,P=0.000)。结论持续过表达Mex3C-1的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系建立成功,且Mex3C-1过表达能够明显增强卡巴胆碱诱导的Fos表达程度并增强其稳定性。

电针刺激大鼠“肾俞”穴对下丘脑室旁核功能状态的影响

目的：为探讨ＰＶＮ 与“肾俞”穴针刺效应的关系提供形态学证据。方法：以大鼠为对象，采用免疫细胞化学ＡＢＣ法，探讨电针刺激大鼠右“肾俞”穴诱导的ｃ－ｆｏｓ 在ＰＶＮ 中的表达。结果：ＰＶＮ中ＦＬＮ 密度值组间、组内差异显著（Ｐ＜ ０．０１），电针组＞ 对照组＞ 空白组；电针组同侧＞ 对侧。结论：电针刺激右“肾俞”穴，对ＰＶＮ神经元具有激活作用；ＰＶＮ神经元对同一方法刺激单侧“肾俞”穴的这种反应上的同、对侧差异，可能是导致“肾俞”穴针刺效应两侧差异的重要环节之一。