纳米及微米磁微粒磁性顺铂微球对肝癌细胞的影响及机理

目的 探讨用纳米及微米氧化铁磁核合成的磁性顺铂微球对人肝癌细胞BEL 740 2的影响及机理。方法 在肝癌细胞培养液中分别加入 0 .0 4～ 8μg/ml(按顺铂的含量计 )的顺铂 (CDDP)及含相应CDDP剂量的纳米磁微粒磁性顺铂微球 (nCDDPmm )和微米磁微粒磁性顺铂微球 (mCDDP mm ) ,并将 0 μg/mlCDDP与未包裹CDDP的磁性微球作为对照 ,采用MTT法、细胞计数法、流式细胞仪等观察肝癌细胞的活细胞数、杀伤率、生长曲线、细胞周期、增殖指数以及凋亡。结果 (1)随药物的浓度增加 ,肝癌细胞的活细胞数下降 ,杀伤率增加 ,呈明显的量效关系 (r值分别是 0 .95 ,0 .91,0 .89 ,P <0 .0 1) ;(2 )随药物的浓度增加 ,时间延长 ,肝癌细胞的生长曲线变低平 ,6～ 2 4h ,≤ 0 .8μg/ml时 ,nCDDPmm和mCDDPmm的细胞数高于CDDP (P <0 .0 5 ) ,nCDDPmm与mCDDPmm无明显差异(P >0 .0 5 ) ;(3 )随药物的浓度增加 ,肝癌细胞的凋亡率增加 ,nCDDPmm组的凋亡率高于mCDDPmm和CDDP组 (P <0 .0 1) ;(4 )CDDP ,nCDDPmm ,mCDDPmm均使肝癌细胞G0 /G1 期增加 ,S期及PI降低。结论 纳米及微米磁微粒磁性顺铂微球的抗肝癌细胞增殖作用取决于CDDP的浓度 ,其机理主要是诱导肝癌细胞凋亡。纳米磁微粒与微米磁微粒均有微弱促肝癌细胞增殖作用 。

木犀草素抗肿瘤细胞增殖及增敏抗肿瘤药物作用研究

目的:研究黄酮类化合物木犀草素(Luteolin)对体外抗肿瘤细胞增殖,以及其与抗肿瘤药联用的增敏作用。方法:选用5μmol/L或10μmol/L木犀草素与不同浓度抗肿瘤药联合作用肿瘤细胞24 h后,用MTS法检测其体外抗增殖作用。结果:5μmol/L木犀草素对人非小细胞肺癌细胞(A549)、人子宫颈癌细胞(Hela)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人胃腺癌细胞(AGS)、人胃癌细胞(MGC-803)的抗增殖作用均<20%,对人结肠癌细胞(Caco2)和人肝癌细胞(HepG2)的抗增殖作用约20%。Bexarotene单一用药时对Hela细胞抑制率达50%(IC50)的浓度约为2μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后IC50约0.2μmol/L,5μmol/L木犀草素与0.1μmol/L Bexarotene联用对Hela细胞的抗增殖作用达44%,Bexarotene与木犀草素联用在MGC-803、HepG2、A549细胞中增敏较小,在Caco2和MCF-7细胞中无增敏作用;顺铂单一用药时对Hela细胞的IC50>30μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后IC50约3μmol/L,联用后在MGC-803、HepG2和A549中增敏较小;博来霉素单一用药时对Hela细胞的IC50>100μmol/L,对A549细胞的IC50约为100μmol/L,与5μmol/L木犀草素联用后Hela细胞的IC50约为1μmol/L,与10μmol/L木犀草素联用后A549细胞的IC50约为10μmol/L。木犀草素与格列卫联用在MGC-803、HepG2、A549和AGS中增敏较小。结论:木犀草素在低于10μmol/L浓度时,对肿瘤细胞体外抗增殖作用较小。低浓度(5μmol/L^10μmol/L)的木犀草素在不同的肿瘤细胞中对抗肿瘤药的增敏作用强度不同,在Hela细胞中增敏作用最显著。

顺铂腹腔热灌注化疗的药代动力学实验研究

目的 :探讨顺铂 (DDP)腹腔热灌注化疗 (CHIP)的药代动力学特点。方法 :家兔 1 5只 ,平均分为 3组。组 A(CHIP组 )用 DDP2 0 0 mg/ m2 溶于 41～ 42℃生理盐水 1 0 0 0 ml,腹腔循环灌注6 0 min。组 B(腹腔化疗组 )用 DDP90 mg/ m2 溶于 41～ 42℃生理盐水 2 0 0 ml,一次性腹腔注入。组 C(静脉用药组 )用 DDP90 mg/ m2静脉注射。液相色谱分析 2 4h内腹腔液和血浆 DDP浓度变化。结果 :组 A之腹腔液 DDP峰值浓度和 AUC(药时曲线下面积 )分别为血浆峰值和 AUC之 1 0倍和2 .9倍。组 A与组 C相比 ,腹腔液峰值和 AUC分别为 1 0 .4倍和 7.8倍 ,差异均有高度显著性意义(P<0 .0 0 1 ) ,血浆峰值较低 (P<0 .0 5)而 AUC较高 (P>0 .0 5)。组 A与组 B比较 ,后者腹腔液峰值更高 (P<0 .0 5) ,但 AUC较低 (P>0 .0 5)。结论 :CHIP腹腔 DDP浓度高 ,血浆峰值较低 ,以及高温作用 ,有利于化疗药物在局部对肿瘤细胞发挥作用 。

顺铂热化疗对骨肉瘤细胞株细胞毒性的实验研究

目的 :研究顺铂热化疗对骨肉瘤细胞株 (OS- 732 )细胞毒性的影响 ,探讨热疗在骨肉瘤顺铂化疗中增效作用的机理。方法 :OS- 732细胞株分别经不同温度的热疗、不同浓度顺铂化疗、4 3℃热疗 +顺铂联合作用各 1h,采用体外细胞毒性试验 (MTT法 )、流式细胞仪 (FCM)分析及电子显微镜观察其对细胞毒性和细胞周期的影响 ,以及诱导细胞凋亡的情况。结果 :4 1℃、4 3℃、4 5℃热疗对 OS- 732细胞株有明显的细胞毒性作用。在 37℃恒温条件下 ,细胞株单独与不同浓度的顺铂作用 1h,随着顺铂浓度的升高 ,其细胞毒性作用明显增加。 4 3℃热疗 +顺铂共同作用 1h,其细胞毒性作用进一步增加 ,细胞毒性指数最高达 72 .37% ;FCM分析显示对细胞周期有明显的影响 ,S期细胞比例明显增加 ,G2 与 M期细胞比例明显减少。 4 3℃热疗、4 3℃热疗 +顺铂联合作用各 1h均出现凋亡细胞峰(亚 G1峰 ) ,细胞凋亡比例最高达 5 6 .4 7% ;透射电镜观察有典型的细胞凋亡特征性变化。结论 :顺铂热化疗有明显的增强 OS- 732细胞株的细胞毒性作用。 4 3℃热疗、4 3℃热疗 +顺铂均可诱导骨肉瘤细胞凋亡。 4 3℃热疗诱导骨肉瘤细胞凋亡可能是热疗在骨肉瘤顺铂化疗中增效作用的潜在机制之一。

顺铂壳聚糖微球肝动脉栓塞化疗的动物实验和治疗肝癌的临床研究

报道用国内首次研制的顺铂壳聚糖微球做的犬肝动脉栓塞化疗的实验和治疗肝癌的初步临床应用结果。顺铂壳聚糖微球能引起栓塞动脉分支减少，动物肝和病人肝癌组织坏死和出血，栓塞动脉直径为１００～５００μｍ，微球在动脉内有碎裂，病人对此微球的耐受性好。

咖啡因对Fischer344/N大鼠骨肉瘤化疗的增效作用

目的:通过对Fischer344/N荷瘤大鼠的体内试验,研究咖啡因(安钠咖)联合顺铂对骨肉瘤化疗的增效作用。方法:对皮下种植瘤成功生长的Fischer344/N大鼠分别以顺铂2.5mg/kg、咖啡因90mg/kg×2d以及两者联合的方案处理,对照组用等量的生理盐水。药物以0.5ml/h经腹腔由微量注射器注入。测量肿瘤的大小,换算成肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,作PCNA免疫组化染色,TUNEL染色。计算抑瘤率、PCNA指数和凋亡指数,记录生存时间。结果:给药后3d测量计算所得的抑瘤率分别为:对照组-0.5219±0.1429,单用顺铂组0.0362±0.0957,单用咖啡因组-0.4193±0.1345,咖啡因和顺铂联用组0.3646±0.1313,经方差分析P<0.01;PCNA指数(PI)为:对照组0.4587±0.1312,单用顺铂组0.1847±0.0535,单用咖啡因组0.4381±0.0706,咖啡因和顺铂联合使用组0.0314±0.0231,经方差分析P<0.01;凋亡指数(AI)为:对照组0.0008±0.0005,单用顺铂组0.0077±0.0060,单用咖啡因组0.0011±0.0003,咖啡因和顺铂联合使用组0.0295±0.0069,经方差分析P<0.01;生存时间:对照组(33.63±4.63)d,单用顺铂组(52.13±11.74)d,单用咖啡因组(35.63±5.15)d,以及咖啡因和顺铂联合使用组(55.13±16.23)d,经方差分析P<0.01。结论:联用咖啡因后,顺铂的抑瘤作用得到明显的提高。

康莱特注射液配合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的比较康莱特注射液加化疗与单独化疗治疗晚期非小细胞肺癌患者的疗效和毒副反应。方法将288例经病理组织学确诊的晚期非小细胞肺癌患者分成2组,每组144例。治疗组:NP方案(诺维本+顺铂)+康莱特注射液200 mL,每天1次,连用20天;对照组:单用NP方案。完成2周期后作疗效评价。结果治疗组有效率44.4%,对照组33.3%,两组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组血液毒副反应和消化道反应低于对照组,两组差异有统计学意义(P<0.05)。生活质量评分治疗组高于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.01)。治疗组化疗后较化疗前比较,CD 3比例略有上升,CD 4和CD 4/CD 8明显上升,CD 8明显下降(均P<0.05)。结论康莱特注射液与化疗联合治疗晚期非小细胞肺癌可降低化疗对患者的毒副反应,提高细胞免疫功能,改善患者的生活质量。

顺铂纳米载体体外抗肿瘤作用的比较研究

目的:比较顺铂脂质体和顺铂纳米粒细胞转运和抗肿瘤作用的差异,探讨载体种类对药物传递的影响。方法:制备得到粒径、电位、载药量、释放曲线相近的顺铂脂质体和明胶纳米粒,考察二者在A549细胞中的细胞摄取和消除动力学情况,通过内吞抑制剂研究颗粒入胞途径。利用MTT试验评价纳米载体的抗肿瘤活性。结果:两种载体主要通过clathrin介导的内吞途径和大胞饮入胞,顺铂纳米粒摄取水平显著高于脂质体。而后者的胞内滞留能力远高于前者,平均滞留时间(MRT)为纳米粒组的3倍,曲线下面积(AUC)约为纳米粒2倍。MTT结果表明,顺铂脂质体的抗肿瘤活性远高于明胶纳米粒,IC50分别为(2.94±0.21、20.70±1.05)μg/m l。结论:制剂参数相近的两种纳米粒在细胞摄取、消除的药物传递过程中有较大的区别,引起体外抗肿瘤活性的差异。与纳米粒相比,脂质体是更适合顺铂发挥疗效的纳米载体。

热疗和顺铂对放射治疗人卵巢癌细胞的增强作用研究

目的 观察热疗和顺铂对放射治疗的增强作用，以探索一种临床更为有效的肿瘤治疗方法。方法 采用Ｘ线照射前或后的人卵巢癌细胞Ａ２７８０Ｓ（ 对顺铂敏感） 和Ａ２７８０ＣＰ（ 抗顺铂） 用顺铂和热疗处理，观察两者对亚致死剂量辐射损伤修复（ＳＬＤＲ） 的抑制作用。结果 热疗（４０℃，１ 小时） 或顺铂处理１ 小时均不能抑制这一修复，但两者联合应用则对两个细胞系均有明显效果。ＳＬＤＲ 的受抑程度取决于处理的时机。对于抗顺铂的Ａ２７８０ＣＰ，可观察到ＳＬＤＲ的抑制，而在敏感细胞Ａ２７８０Ｓ，除此之外还能观察到放疗敏感性的提高。结论 单独应用作用有限的热疗和低浓度顺铂联合应用可明显增强放疗疗效。

胆囊癌GBC-SD细胞经顺铂处理后的survivin表达及意义

目的探讨经顺铂(DDP)处理胆囊癌细胞后survivin表达及其与肿瘤细胞耐药之间的关系。方法采用MTT比色法测定胆囊癌细胞对4种化疗药物的敏感性。RT-PCR检测survivin mRNA的表达。Westernblot检测survivin蛋白表达的变化。结果GBC-SD细胞对化疗药物的敏感性从高到低依次为DDP>ADM>5-FU>MMC。化学药物处理后的第1天,3组胆囊癌细胞的survivin mRNA表达水平均降低;其中0.5μg/mL DDP+GBC-SD组下降了10%,3μg/mL DDP+GBC-SD组下降36%,6μg/mL DDP+GBC-SD组下降了28%。第3天,0.5μg/mL DDP组和3μg/mL DDP组GBC-SD细胞的survivin mRNA表达与第1天比较,分别上升22%和64%,但6μg/mL DDP组仍持续降低,仅为第1天的66%。0.5μg/mL DDP组和3μg/mL DDP组作用3d后的GBC-SD细胞中survivin蛋白含量分别升高了15%和12%,而6μg/mL DDP组则下降了80%。结论低浓度的DDP即能诱导胆囊癌细胞内survivin的表达增加,这可能是胆囊癌细胞对化疗药物产生耐药性的因素之一。

电化学疗法治疗中晚期食管癌和贲门癌42例

目的探讨应用电化学疗法治疗中晚期食管癌和贲门癌的临床疗效。方法电化学疗法治疗中晚期食管癌和贲门癌４２例，对其治疗前后的疗效进行比较。结果通过对比电化学治疗前后食管Ｘ线钡餐检查及进食改善情况显示，８８％的患者在接受电化学治疗后进食明显改善，８９％的患者食管狭窄扩大在０．５ｃｍ以上。结论电化学疗法治疗食管癌和贲门癌解除食管梗阻见效快，疗效显著，能恢复患者饮食，可为实施其他治疗创造条件，使其远期生存率提高。

健择联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的 观察健择 (gemcitabine)联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的疗效及毒性反应。方法 经病理细胞学证实的 46例晚期非小细胞肺癌患者采用健择 +顺铂方案 :健择 10 0 0mg/m2 ,第 1,8天 ;顺铂 80mg/m2 ,第 1天或分 3d应用 ,2 1d为 1个周期。结果 完全缓解 (CR) 1例 ,部分缓解 (PR) 2 0例 ,稳定 (SD) 19例 ,进展 (PD) 6例 ,总有效率 45.7%。初治 2 4例中 ,CR +PR 14例 ,有效率58.3 % ;复治 2 2例中 ,CR +PR 7例 ,有效率 3 1.8% ,两组差异有显著性 (P <0 .0 5)。毒副反应以白细胞及血小板下降为常见 ,但均可耐受。结论 健择联合顺铂对晚期非小细胞肺癌有较好疗效 。