地黄低聚糖对快速老化模型小鼠造血功能的影响

目的：研究地黄低聚糖（ＲＧＯＳ）对快速老化模型小鼠（ＳＡＭＰ８）造血功能的影响。方法：采用造血祖细胞体外克隆培养等实验血液学方法。结果：ＲＧＯＳ１０，２０ｍｇ·ｋｇ－１可使ＳＡＭＰ８小鼠的ＣＦＵ－Ｓ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ明显增多，并可使外周血中降低的ＷＢＣ数明显增加。提示ＲＧＯＳ可刺激ＳＡＭＰ８小鼠造血干细胞、祖细胞的增殖分化。集落刺激活性实验显示ＲＧＯＳ可使小鼠体内的集落刺激因子产生明显增多。小鼠骨髓组织学研究结果也进一步证实了ＲＧＯＳ增强ＳＡＭＰ８小鼠造血功能的作用。结论：ＲＧＯＳ可以增强ＳＡＭＰ８小鼠的造血功能。

黄芪对辐射小鼠造血功能的影响

结果表明黄芪能促进造血干细胞的增殖和向红系与粒系细胞分化，但对外周血血小板却无明显影响。

低能量激光对人胎肝造血细胞的增殖作用

低能量激光对生物体具有刺激作用。经Ar^+激光波长514.5nm照射后的人胎肝造血细胞,可以在体外培养体系中分裂增殖,造血细胞集落明显增多。用激光照射产生集落刺激因子(CSF)的细胞,可以提高CSF的活性,在造血细胞体外培养体系中,使用该CSF,也能明显地提高造血细胞集落的形成率。用激光技术来处理造血细胞,可以成倍地提高细胞产率。这一技术不仅有理论意义而且有实用价值。

当归补血汤及其服药后血清对小鼠造血祖细胞的影响

当归补血汤煎液()对小鼠粒系—巨系造血祖细胞(CFU-GM)的生长有抑制作用,剂量越大,抑制作用越强。当归补血汤口饲小鼠后的含药血清()对CFU-GM的生长有明显的激活作用,剂量越大,CFU-GM集落生长的越多。药在相同含药血清浓度下,从时—效关系求出当归补血汤的药效动力学参数,Ke=0.3961/h,T1/2(Ke)=2.1602h,Ka=1.3422/h,T1/2(Ka)=1.6057h,Tp=1.5978h,Td=14.8019h。

Rhodamine123介导的光动力学疗法对小鼠淋巴细胞增殖及骨髓干祖细胞集落形成的影响

目的 探讨Rhodamine12 3(Rh12 3)介导的光动力学疗法对小鼠淋巴细胞增殖及骨髓干祖细胞集落形成的影响。方法 以C5 7B/ 6小鼠为供鼠 ,BALB/c小鼠为受鼠 ,脾脏淋巴细胞混合培养 ,比较单纯Rh12 3、单纯激光照射、光动力学疗法对小鼠混合淋巴细胞增殖 (MTT法 )及骨髓粒单核巨噬细胞集落形成 (CFU -GM)的影响 (甲基纤维素培养基法 ) ;流式细胞仪检测混合淋巴细胞中CD3+ CD6 9+ 阳性率。结果 Rh12 3组及单纯激光组对细胞增殖无显著影响 ,光动力学组 2 0mW/cm2 以下剂量激光对细胞增殖无明显影响 ,30mW/cm2 以上明显抑制细胞增殖 ;30mW/cm2 以下剂量对CFU -GM集落无明显影响。光动力学疗法后细胞培养 2 4h ,CD3+ CD6 9+ 表达明显下降。结论 光动力学疗法在 30mW/cm2 激光照射时可抑制淋巴细胞增殖 ,降低早期活化T细胞表达 ,但不影响骨髓CFU

重组人血清白蛋白-粒细胞集落刺激因子融合蛋白单次给药对恒河猴造血细胞的动员作用

目的研究重组人血清白蛋白-粒细胞集落刺激因子融合蛋白(GW003)对造血细胞的动员作用。方法 7只健康成年恒河猴单次皮下注射GW003 150μg/kg,分别于给药前后不同时间检测外周血细胞数和进行造血细胞集落培养。结果 GW003对健康成年恒河猴造血祖细胞、白细胞、中性粒细胞、未成熟粒细胞及单核细胞均有明显的动员作用,给药后18 h呈现高峰。注射GW003后10 h,外周血粒-巨噬系细胞集落形成单位(CFU-GM)、混合系细胞集落形成单位(CFU-Mix)、巨核系细胞集落形成单位(CFU-MK)数分别增至药前的1.8、1.9、1.4倍,红系爆式形成单位(BFU-E)和红系集落形成单位(CFU-E)数则增至1.7和1.5倍。结论 GW003对正常猴外周血干/祖细胞(PBS/PC)有明显动员作用,有望成为一种新的、高效的造血细胞动员剂。

肺泡巨噬细胞培养上清液对小鼠粒-单系造血祖细胞和造血干细胞的影响

目的:观察肺泡巨噬细胞培养上清液(AM_(?)S)对粒-单系造血祖细胞(CTU-GM)和造血干细胞的影响。方法:采用脾集落形成和造血祖细胞体外培养技术。结果:AM__(?)S 对 CFU-GM 的增殖具有双向调控作用,即低浓度有促进作用,高浓度有抑制作用,但它对 CFU-S 无明显影响。结论:AM_(?)S 中含有粒-单系集落刺激因子(CSF-GM)和前列腺素样活性物质,这些物质浓度的变化可以调控 CFU-GM 的增殖,大肠杆菌脂多糖(LPS)可以促进肺泡巨噬细胞分泌这些生物活性物质。

BXSB狼疮鼠骨髓粒-巨噬细胞集落形成单位异常与发病的关系

目的 :研究 BXSB自发性狼疮鼠骨髓粒 -巨噬细胞系的增殖情况与狼疮发病的关系。方法 :雄性 BXSB小鼠按 4、 8、 12、 16及 2 0周龄分组 ,每组 6只 ,采用甲基纤维素半固体培养方法体外培养骨髓单个核细胞(BMMC) ,计数粒 -巨噬细胞集落形成单位 (CFU - GM)及小鼠外周血单核细胞 (PBMC) ,并检测尿蛋白。相同周龄的 C5 7BL小鼠作为正常对照组。结果 :12周龄雄性 BXSB小鼠尿蛋白 (+) ,2 0周龄时尿蛋白 ( ) ,4、 8周龄 BXSB小鼠及各周龄 C5 7BL小鼠尿蛋白 (- )。 8周龄雄性 BXSB小鼠骨髓 CFU - GM为 (96 .0 0± 18.11) / 2×10 5BMMC,PBMC计数为 (111.33± 10 .97)× 10 6· L- 1 ,均明显高于 4周龄 BXSB小鼠及正常 C5 7BL 小鼠(P<0 .0 5 ) ,随着周龄增加 ,CFU- GM和 PBMC进一步增多。结论 :BXSB小鼠粒 -巨噬细胞系造血异常及外周血单核细胞增多参与了自身免疫疾病的发病过程。

牛膝精对辐照小鼠粒-单系造血功能的影响

目的探讨牛膝精(Extract of Achynanthis Bidentatae,ABE)对辐照小鼠粒-单系造血功能的影响及作用机制。方法采用造血祖细胞体外培养和体内扩散盒植入技术,观察牛膝精对辐照小鼠外周血白细胞(white blood cell,WBC)、骨髓有核细胞(bone marrow cell,BMC)及其分裂指数和骨髓粒-单系造血祖细胞(colony forming unit-granulocyte/macrophage,CFU-GM)的影响。结果辐照用药组(50mg/l、100mg/l、200mg/l)的WBC、BMC总数均较辐照对照组(0mg/l)明显提高,体内培养的CFU-GM产率也明显高于辐照对照组,而体外培养未显示刺激活性。结论牛膝精可刺激体内粒-单系造血祖细胞的分化与增植。对骨髓具有保护作用。

光卟啉-光照选择性杀灭白血病细胞株K_(562)的研究

为研究光卟啉（ＹＨＰＤ）加光照对白血病细胞株Ｋ５６２的杀伤作用及对正常造血祖细胞的影响，通过细胞体外液体培养活细胞计数、体外半固体培养集落测定，以探讨该法用于体外净化自体移植骨髓中残留的白血病细胞的可能性。观察不同光敏剂剂量和光照时间的变化对杀伤白血病细胞作用的影响，结果表明，单用ＹＨＰＤ或单独日光荧光照射对Ｋ５６２细胞和正常人造血祖细胞均无明显杀伤作用。二者联合使用表现光敏效应。细胞存活率的对数与ＹＨＰＤ剂量、光照时间呈线性相关。ＹＨＰＤ加光照对Ｋ５６２细胞具有强大杀伤作用，对正常造血祖细胞影响较小，在能够杀伤白血病细胞大于５个对数级，其体外已不能形成集落的情况下，正常人骨髓－巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）尚有１５．９７％。

重组血小板生成素对再生障碍性贫血患者巨核祖细胞的作用

应用重组血小板生成素(rTpo)对17例再生障碍性贫血(AA)患者进行CFU-MK和CFU-GM培养。研究结果表明:①Tpo 10ng/ml为CFU-MK培养的最佳浓度;②AA患者CFU-GM和CFU-MK增殖均明显低于正常人,P<0.001;③AA患者CFU-MK增殖较CFU-GM更低(CFU-MKx 3.2,CFU-GMx 17.5);④Tpo对骨髓小剂量照射后CFU-MK的增殖有促进恢复,对血小板的减少起到积极预防作用。

rhIL-2对人骨髓CFU-GM与CFU-E和BFU-E的影响

目的:为了探索rhIL-2对人骨髓造血干祖细胞体外增殖的影响。方法:本文采用甲基纤维素体外半固体培养法。结果:证明了50～1000U/ml rhIL-2单用时对人骨髓造血祖细胞的CFU-GM、CFU-E及BFU-E无直接刺激增生作用,当与GM-CSF联合应用时,100～400U/ml rhIL-2其CFU-GM集落形成率明显高于单用GM-CSF(100U/ml)的对照组(P<0.05),当与EPO(2U/mi)联合应用时其CFU-E,及BFU-E集落形成率也明显高于单用EPO对照组(P<0.05),而1000U/ml rhIL-2其三种集落形成数目呈下降趋势,可能有抑制作用。结论:以上结果说明100～400U/ml rhIL-2可应用于协同GM-CSF及EPO体外扩增骨髓干/祖细胞来进行骨髓移植。

Rituximab减少SLE患者B淋巴细胞对骨髓粒巨噬细胞集落的抑制作用

目的 :了解不同浓度Rituximab对SLE患者B淋巴细胞、对正常人及SLE患者骨髓粒 巨噬细胞集落形成单位(GM CFU)抑制作用的影响及其机制。方法 :体外用终浓度为 0 1、0 5、1、3、6、9μg ml的Rituximab与SLE患者B淋巴细胞共同加入SLE患者及正常人骨髓GM CFU的培养体系中 ,观察它们对SLE患者及正常人骨髓GM CFU形成的影响 ,用流式细胞仪检测经不同浓度Rituximab处理前后SLE患者B淋巴细胞上的CD2 0表达水平 ,逆转录PCR法检测与终浓度为 9μg mlRitux imab共同孵育前后SLE患者B淋巴细胞的IL 10mRNA与β actin的比值。 结果 :加入终浓度为 0 1、0 5、1、3、6、9μg ml的Ritux imab和SLE患者B淋巴细胞后 ,正常人骨髓GM CFU产率分别为 180± 37、2 0 0± 5 4、2 2 6± 4 5、2 4 8± 71、2 5 1± 5 6、2 5 8± 6 6个 10 5细胞 ,与不加Rituximab和SLE患者B淋巴细胞的正常人骨髓GM CFU产率 (2 5 6± 80个 10 5细胞 )比较 ,前二组P <0 0 5 ,后四组P >0 0 5 ,与仅加入SLE患者B淋巴细胞的正常人骨髓GM CFU产率 (199± 92个 10 5细胞 )对比 ,前二组P >0 0 5 ,后四组P <0 0 5。加入以上 6种相同浓度的Rituximab和SLE患者B淋巴细胞后 ,SLE患者骨髓GM CFU产率分别为 119± 71、116±78、177± 6 8、2 0 2± 4 9、

骨髓内皮细胞产物对 CFU-F、CFU-GM和WEHI-3细胞生长的作用

为了研究骨髓内皮细胞的造血调控功能 ,采用串联超滤技术从小鼠骨髓内皮细胞无血清条件培养液 ( m BMEC- CM)中制备出不同相对分子质量 ( Mr)范围的超滤组分 ,进行细胞集落形成实验 ,检测了 m BMEC- CM及其超滤组分对骨髓成纤维祖细胞 ( CFU- F)、粒巨噬系造血祖细胞 ( CFU- GM)和小鼠粒单系白血病细胞系 WEHI- 3细胞生长的作用 .结果显示 :m BMEC- CM抑制 CFU- F的生长 ,对 CFU- GM和 WEHI- 3细胞的生长却未见明显影响 ;Mr>1 0 4 组分对 CFU- F的生长无明显作用 ,但促进 CFU- GM的生长和抑制 WEHI- 3细胞的生长 ;Mr<3× 1 0 3组分对这 3种细胞的集落形成均有抑制作用 .

低能量激光对造血细胞的增殖作用

激光能刺激造血细胞增殖,促使粒-巨噬细胞集落形成单位(GM—CFUc)增多。从人脐带血中分离制备的有核细胞,加入集落刺激因子(CSF)后,形成的GM—CFUc为18.6±12.6/10~4;如果加入的CSF是经激光照射后的细胞制成的,其GM—CFUc为40.5±20.2/10~4;若先用激光照射脐带血的有核细胞,在培养时加入的是未经激光处理细胞制成的CSF,也有增殖效应,GM—CFUc为36.5±18.5/10~4;如果脐带血有核细胞和制备CSF的细胞都用低能激光照射,就可以见到GM—CFUc明显地增多,其值为57.4±41.2/10~4是未经激光处理者的三倍。表明激光照射脐带血有核细胞及制备CSF的细胞均可使GM—CFUc增殖。

集落刺激因子促进豚鼠体内造血的研究

给11只Harty豚鼠腹腔内注射胎盘条件培养液(HPCM)0.5ml/d,共10天,周围血白细胞总数明显升高,以中性粒细胞升高为主.6只BALB/C小鼠腹腔内注射HPCMOo.3ml/d,共7天,粒-巨噬祖细胞(granulocy-macrophage colng-formung unit,CFU-GM)产率明显升高,是对照组给的2.l倍.结果提示,胎盘条件培养液来源的集落刺激因子,在体内能促进CFU-GM增殖,担升周围血白细胞和中性粒细胞.

特发性血小板减少性紫癜骨髓造血干细胞的功能及与疗效的关系

目的:探讨特发性血小板减少性紫癜(idiopathicthrombocytopenicpurpura,ITP)患者骨髓造血干细胞的增殖分化功能,并从巨核细胞集落形成单位的数量和血小板上升的幅度探讨两者之间的疗效关系。方法:用甲基纤维素半固体培养ITP患者粒-巨噬细胞集落形成单位、红系集落形成单位、巨核细胞集落形成单位,观察巨核细胞集落形成单位与血小板上升平均值的关系。结果:ITP患者骨髓粒-巨噬细胞集落、红系集落形成单位、巨核细胞集落形成单位集落数低于正常对照组,粒-巨噬细胞集落数及丛落数高于正常对照组,巨核细胞数大于5/高倍视野的ITP患者其巨核细胞数与血小板上升无关,巨核细胞集落形成单位与血小板上升平均值有关。结论:ITP患者骨髓造血干细胞增殖分化功能异常,提示ITP可能是造血干细胞异常的疾病。ITP的巨核细胞集落形成单位与血小板上升幅度有关,巨核细胞集落形成单位可以预测ITP的治疗效果。

人参茎叶皂苷对体外条件下小鼠骨髓间充质干细胞和粒-巨噬系祖细胞增殖的影响

目的:探讨人参茎叶皂苷(GSL)在体外培养条件下对小鼠骨髓间充质干细胞(MSC)和粒-巨噬系祖细胞(CFU-GM)生长的影响。方法:在小鼠骨髓细胞液体培养体系和半固体培养体系中加入不同浓度的GSL,应用体外集落形成法检测GSL对小鼠MSC和CFU-GM增殖的影响。结果:在培养体系中GSL浓度为25μg/ml时,MSC和CFU-GM集落产率与对照组无明显差异(P>0.05);50～200μg/ml的范围内,MSC和CFU-GM集落产率显著高于对照组(P<0.05),其中浓度为100μg/ml时效应最明显;但在400μg/ml时,MSC和CFU-GM集落产率却低于对照组(P<0.05)。结论:GSL在一定浓度范围内对体外培养条件下的小鼠骨髓MSC具有生长促进作用,而在高浓度时表现出生长抑制作用。

鹿龙再生汤对重型再生障碍性贫血小鼠模型BFU-E和CFU-GM的影响

目的 :研究鹿龙再生汤对重型再生障碍性贫血(severe aplastic anemia,SAA)小鼠模型外周血象及红系爆式集落形成单位(burst-forming unit-erythroid,BFU-E)和粒单系集落形成单位(colony-forming unit-granulocyte macrophage,CFU-GM)的影响,探讨鹿龙再生汤促进造血作用的机制。方法 :BALB/c小鼠40只通过干扰素(interferon,IFN-γ)腹腔注射联合白消安灌胃,连续用药10 d,成功诱导建立了SAA模型,然后被随机分为4组(n=10),分别设为SAA组、SAA中药小剂量组(一般浓度)、SAA中药中剂量组(正常剂量的5倍浓度)、SAA中药大剂量组(正常剂量的10倍浓度),并分别予以生理盐水及3个不同剂量的鹿龙再生汤灌胃;另取10只正常BALB/c小鼠作为正常组,予以生理盐水灌胃和腹腔注射。5 d后收集各组小鼠眼眶血检测外周血象,取小鼠骨髓单个核细胞用甲基纤维素培养,培养7 d后观察并计数的BFU-E、CFU-GM。结果 :造模后SAA小鼠外周血的白细胞、血红蛋白、血小板、网织红细胞均有降低(P<0.05),经过不同剂量的鹿龙再生汤治疗后SAA小鼠的外周血均有不同程度升高,其中中剂量的鹿龙再生汤可以明显升高SAA模型小鼠外周血白细胞和网织红细胞的计数(P<0.05)。SAA组BFU-E和CFU-GM的集落形成较正常组明显下降(P<0.05),而SAA中药中剂量组BFU-E和CFU-GM的集落形成较SAA组明显上升(P<0.05)。结论 :中剂量的鹿龙再生汤可能通过促进SAA小鼠骨髓单个核细胞BFU-E、CFU-GM的生成,从而改善外周血象,相关实验结果可能为SAA的中药治疗提供理论依据。

创伤后急性呼吸窘迫综合征患者IL-33、Ang-2、GM-CSF水平的动态变化及其临床意义

目的探讨重症医学科(ICU)创伤后急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者白细胞介素-33(IL-33)、血管生成素-2(Ang-2)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平的动态变化及其临床意义。方法选取2018年5月—2021年8月ICU收治的创伤后ARDS患者108例作为观察组,另选取60例同期健康体检者作为对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测IL-33、Ang-2、GM-CSF的水平。结果(1)观察组的IL-33、Ang-2、GM-CSF水平均高于对照组,差别有统计学意义(P<0.05)。(2)入ICU 48、72 h时,病死患者的IL-33、Ang-2、GM-CSF水平高于生存患者,差别有统计学意义(P<0.05)。(3)ROC曲线显示,IL-33、Ang-2、GM-CSF水平对入ICU 72 h的ARDS患者预后的预测价值更大,其受试者工作曲线下面积(AUC)为0.939,最佳敏感度为86.84%,特异度为91.43%。(4)创伤后ARDS患者入ICU 72 h时,IL-33、Ang-2、GM-CSF的截断值分别为284.52、255.49和49.98 ng/L。以各指标截断值为界,≤截断值为低水平患者,>截断值为高水平患者。入ICU 72 h时,IL-33、Ang-2、GM-CSF高水平患者的28 d累积生存率低于低水平患者(P<0.05)。结论ICU创伤后ARDS患者的IL-33、Ang-2、GM-CSF水平明显升高,临床动态监测其水平有助于评估病情和预测预后。