DDSA酯化法制备胭脂虫红色素衍生物

以十二烯基丁二酸酐(DDSA)作酯化剂,对胭脂虫红色素的主要成分胭脂红酸分子进行改性修饰,制得了油溶性较好的胭脂虫红色素衍生物。通过单因素及响应曲面优化试验确定了反应的最佳条件:0.5 g原料,DDSA与胭脂虫红色素的质量比值为2.3,催化剂三乙胺(Et3N)的用量为1.8 mL,温度为67℃,反应时间为6 h,溶剂N,N-二甲基甲酰胺20 mL,此条件下,产物得率为41.59%。通过FT-IR及UV-Vis对目标产物的结构进行表征,表明DDSA与胭脂虫红色素发生了酯化反应,制得的胭脂虫红色素衍生物的λmax及颜色在碱性溶液中受pH值影响较大;其可溶于食用玉米油,有较好的染色效果且稳定性良好,溶解度(20℃)为6.53,有效改良了胭脂虫红色素的油溶性。

一种新型的基因定点突变方法及其在DdsA突变研究中的应用

为了发展基因突变技术,介绍一种新型的基因定点突变方法.该方法巧妙利用了基因序列中广泛存在的不完整的平端酶切位点.与传统方法相比,可以迅速地在全基因的任何部位替换核苷酸,并可以在突变实验过程中直接将目的基因克隆到T载体上,便于测序及进一步克隆.利用该方法成功地获得了DdsA(decaprenyl diphosphate synthase,十聚异戊二烯焦磷酸合成酶)在4个氨基酸位点上的19个变体酶.这些位点分布在基因的不同区域内.证明这种新方法的高效性.

弱氧化葡糖杆菌ddsA基因在大肠杆菌不同宿主菌中的表达

泛醌 (辅酶Q)在生物体氧化呼吸链中作为重要的质子和电子传递物质。聚十异戊烯焦磷酸合成酶催化辅酶Q10 的侧链的生物合成。为了获得高产辅酶Q10 的菌株 ,将选择了 10种不同大肠杆菌宿主菌用于弱氧化葡糖杆菌的聚十异戊烯焦磷酸合成酶基因ddsA的表达 ,通过产物分析证实该基因能在大肠杆菌中表达出有活性的聚十异戊烯焦磷酸合成酶 ,使大肠杆菌合成了辅酶Q10 。此外 ,还发现在EscherichiacoliHB10 1这一菌株中 ,ddsA的表达使辅酶Q10 的产量略超过了在野生型中占主导地位的辅酶Q8的产量。该结果证明了利用大肠杆菌大规模发酵生产辅酶Q10 的可能性。

氧化葡萄糖杆菌ddsA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

聚十异戊烯焦磷酸合成酶催化异戊烯二磷酸与丙烯基二磷酸发生连续的缩合反应生成聚十异戊烯焦磷酸 ,构成辅酶 Q1 0 的侧链。将氧化葡糖杆菌 ( Gluconobacter oxydans)的染色体 DNA用 Eco RI酶切 ,回收 5 .0 kb左右的片段为模板 ,通过 PCR扩增得到了聚十异戊烯焦磷酸合成酶基因 ( dds A)。测序分析表明该基因有一个 95 1 bp的开放型阅读框架 ,氨基酸序列与其他聚戊烯焦磷酸合成酶具有高度同源性 ( 30 %～ 5 0 %)。将 dds A基因克隆到 p UC1 9载体上得到 p UC- GZH表达质粒 ,将其转入大肠杆菌 JM83宿主 ,经 IPTG诱导表达融合蛋白 ,在聚丙烯酰胺凝胶电泳 ( SDS-PAGE)的

大肠杆菌链长控制基因ddsA原位替换及多基因共表达对辅酶Q_(10)合成能力的影响

目的强化大肠杆菌合成辅酶Q10(CoQ10)的能力。方法利用途径工程的基本原理,对大肠杆菌辅酶Q生物合成途径中链长控制基因ispB进行遗传操作,并强化表达该途径中多个功能基因。结果首次成功用来自Gluconobacter suboxydans的十聚异戊二烯焦磷酸合成酶基因ddsA原位替换大肠杆菌染色体上ispB基因,构建得到原位替换株JKL;同时强化表达CoQ生物合成途径的相关基因,发现在ubiCA和ddsA协同表达的重组菌pDCA/JKL中CoQ的合成能力比JKL提高了2.3倍,CoQ10合成量提高了2.5倍。检测该重组菌中ubiA的转录水平,发现其mRNA相对拷贝数是对照JKL的125倍。结论成功获得的重组大肠杆菌在降低内源性CoQ8合成能力的同时具备合成较长侧链CoQ10的能力,且通过强化表达相关基因使合成CoQ10的能力得到了提高。

氟化钾催化DDSA缩合螺双内酯化合物

以氟化钾为催化剂 ,催化十二烯基琥珀酸酐 (DDSA)缩合成螺双内酯化合物。考察了催化剂用量、反应温度、反应时间等因素对缩合反应的影响。通过正交实验设计 ,找到了最佳反应条件 :反应温度为 2 4 0℃ ,反应时间为 4 .5h ,催化剂用量为十二烯基琥珀酸酐质量的 0 .8%。实验结果表明 ,在此条件下螺双内酯化合物转化率可达到 93%。通过与其他催化剂的催化活性进行比较 ,氟化钾 >氢氧化钾 >碳酸钠 >氢氧化钠 ,证明了氟化钾具有较好的催化活性。并对缩合成的产品通过酸值测定 ,经红外光谱进行了表征。

产辅酶Q_(10)大肠杆菌工程菌的构建

克隆放射型根瘤菌ddsA基因,用于构建red重组的打靶片段,通过同源重组替换大肠杆菌基因组上的ispB基因,使合成辅酶Q8的大肠杆菌具备合成辅酶Q10的能力.通过强化辅酶Q合成过程中的ddsA、ubiA、ispA、idi等关键酶基因,可使大肠杆菌辅酶Q10的合成能力提高126.9%.综合分析表明,ddsA与ubiA为辅酶Q10合成的关键基因,ispA与idi为辅酶Q10合成的次关键基因.

320排动态容积CT脑血管4D DSA成像的初步讨论

目的：评价320排CT在脑血管4D DSA成像技术的初步应用。方法：应用东芝320排动态容积CT,对临床32例患者进行宽探测器平台下动态容积扫描,并对图像结果进行评价,与常规脑血管DSA造影（使用造影剂剂量24~36mL,检查时间10~20min）对比。结果：32例患者均一次成像获得满意效果,无阶段伪影,平均射线剂量ED为（5.46±0.63）mSv,低于文献报道常规DSA脑血管造影诊断剂量ED（10.01±6.85）mSv。结论：320排动态容积CT脑血管4DDSA成像图像质量高,检查时间缩短,320排冠状动脉成像的剂量远远低于常规脑血管DSA造影的剂量。

基于彩色分量双重鉴别相似性的人脸特征提取

针对当前人脸彩色图像鉴别特征提取方法存在特征鉴别能力低、识别效果差等问题,提出基于彩色分量特征层双重鉴别相似性分析的人脸图像鉴别特征提取方法.通过使用人脸彩色图像中各个彩色分量数据和不同彩色分量数据集之间的相关性进行特征层鉴别相似性分析,并设计了R、G和B三个彩色分量图像数据集鉴别特征提取流程.仿真结果表明:CM-DDSA方法保留了三个彩色分量特征之间的平均相似性,同时在很大程度上提升了特征鉴别能力以及识别效果.

高黏度蜡质玉米十二烯基琥珀酸酯淀粉的合成

在碱性条件下,蜡质玉米淀粉与十二烯基琥珀酸酐(DDSA)反应可制得较高黏度、适宜取代度(DS)的酯化淀粉。经单因素实验得出最佳的工艺条件为:酸酐用量12%,pH值8.5,酯化反应温度35℃,酯化反应时间5 h。采用红外光谱对其结构进行表征,结果表明酯化反应后蜡质玉米淀粉分子上的确引入了十二烯基琥珀酸酐基团;X-射线衍射实验的结果表明,蜡质玉米淀粉的A型晶体结构在经过酯化反应后并未发生改变。