锌对骨发育影响的体外研究

目的 研究锌对骨发育的影响。方法 将 1 6 d孕龄的小鼠 (每组 1 2只 )脱颈椎处死 ,无菌条件下切下胎鼠的前肢分 5组 ,分别在基础培养基 (Zn2 + 浓度为 2 0 μmol/L)及基础培养基中加终浓度为 2 0 μmol/L的 Zn2 +络合剂 (TPEN) ,及基础培养基中加 Zn SO4 至 Zn2 +浓度分别为45 μmol/L、70 μmol/L、1 2 0 μmol/L的培养基中培养 6 d。结果 1 .培养后的胎鼠右肢与未培养左肢相比 ,其长骨长度、骨组织密度均有所增加 ;组织学分析显示 :骨组织呈活跃增殖分化相 ,骨小梁增加 ,骨基质深染。2 .生化指标及 4 5Ca示踪显示 :培养基中缺锌和在培养基中补充 Zn2 + 至 Zn2 + 浓度1 2 0μmol/L时 ,骨组织中骨钙素 (OC)和 4 5Ca含量减少 ,碱性磷酸酶 (AKP)活性降低 (P<0 .0 5 ) ;当在培养基中补充 Zn2 + 至 Zn2 + 浓度 45μmol/L、70μmol/L时 OC合成量 ,骨组织对钙的吸收及AKP活性增加 (P<0 .0 5 )。 3 .形态学指标 :X- ray显示 ,培养液中缺锌和锌浓度为 1 2 0 μmol/L时 ,长骨长度和密度与对照组相比 ,长骨长度较短 ,骨密度降低 ;当在培养液中 Zn2 +浓度分别为 45μmol/L和 70 μmol/L时 ,与对照组相比 ,长骨长度及其骨密度有所增加。结论 锌参与骨组织发育的生理和生化过程 ,锌缺乏

代用蛋壳培养体系对鸡胚骨组织中碱性磷酸酶活性的影响

以双黄鸡蛋的蛋壳为代用蛋壳，将正常孵化７２ｈ的鸡胚转移至其中进行孵化，取孵化至１０、１２、１４、１６、１８和２０ｄ的鸡胚，测定其骨中碱性磷酸酶（ＡＬＰ）的活性。同时分析正常孵化鸡胚骨中ＡＬＰ的活性做为对照。结果表明：（１）对照组和实验组的ＡＬＰ活性均随着胚胎日龄的增加而升高，尤其是１６ｄ后上升得很快；（２）１４日龄以前的鸡胚，实验组与对照组相比，ＡＬＰ活性无明显差异；（３）孵化后期同日龄鸡胚相比，实验组ＡＬＰ活性高于对照组的ＡＬＰ活性，差异显著。上述结果表明，在代用蛋壳中培养的鸡胚。

先天性显性脊椎裂胎鼠宫内干细胞移植新方法的建立

目的建立一种先天性显性脊椎裂胎鼠宫内干细胞移植的新方法。方法选择孕16、17、18天的雌性大鼠各30、30、26只,制备先天性显性脊椎裂胎鼠模型。采用胎仔外科、显微外科和显微注射技术,将转染绿色荧光蛋白基因的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植到脊椎裂胎鼠脊髓中。大鼠孕20天时剖腹、取胎,计算胎鼠成活率;制作胎鼠脊髓切片,荧光显微镜下观察胎鼠脊髓干细胞移植情况。结果接受手术的孕鼠86只,孕20天成活81只,成活率为94.2%。行干细胞移植的先天性显性脊椎裂胎鼠258只,共取出198只,成活率为76.7%(198/258),其中胎龄为16、17、18天的胎鼠成活率分别为72.1%(80/111)、77.3%(78/101)、87.0%(40/46)。荧光显微镜下观察胎鼠脊髓切片,可见呈现绿色荧光的MSCs;干细胞移植成活的胎鼠195只,成活率为98.5%(195/198)。结论成功建立先天性显性脊椎裂胎鼠宫内干细胞移植的新方法;该方法干细胞成活率较高,可用于神经管畸形治疗。

胚胎大鼠颅盖骨分离细胞早期体外培养的组织化学观察

本实验采用胚胎后期Sprague-Dawley大鼠颅盖骨(连同骨膜)分离细胞进行体外培养。并以活体相差、HE染色及组织化学染色等技术进行早期观察。发现骨外膜再生层骨生成细胞和骨髓区未分化间充质细胞在体外培养条件下,都可发育成为细胞体积很大的鳞片形细胞,具有许多突起,并以突起与相邻细胞连接。鳞片形细胞的胞浆Sirius red染色呈淡红色,偏光显微镜下无双折射,表明细胞已开始形成胶原的前体。细胞碱性磷酸酶反应呈阴性,表明细胞仍然处于骨生成细胞阶段。

鸡早期胚染色体畸变及其微核研究

研究了“星杂 2 88”和“京白 90 4”两品种鸡 .提出了各种染色体畸变类型的百分率 ,并对产生机制进行了初步探讨 .雏鸡骨髓细胞的观察 ,得出了两品种鸡微核的自然发生率分别是2 74‰和 2 98‰。

B超监护下宫腔镜治疗胎骨残留及术后激素治疗

目的:探讨B超监护下宫腔镜取出残留胎骨的手术方法及术后药物处理的必要性。方法:回顾性分析本院1999年～2007年11月21例胎骨残留患者的临床资料、手术方法、术后服药情况。结果:21例均在B超监视下通过宫腔镜取出残留胎骨,均一次取净。术后口服倍美力+安宫黄体酮片,3个月后停药,复查宫腔镜检查发现子宫内膜恢复,13例患者术后1年内受孕分娩,2例患者已妊娠但尚未分娩,2例患者无妊娠要求,4例患者失访。结论:联合B超和宫腔镜是诊断和治疗宫内胎骨残留的有效方法,同时术后口服倍美力+安宫黄体酮片利于子宫内膜的修复。

胚胎与成人骨髓CD34^+细胞RUNX1相关基因及Notch信号通路的比较研究

目的了解引产儿胚胎与成人骨髓CD34+细胞生物学活性,寻找新的造血干细胞来源RUNX1相关基因和Notch信号通路差异。方法RT-PCR检测引产儿胚胎和成人骨髓CD34+细胞RUNX1、Hes-1、SLC9A3R1、Notch1、Notch2、HLA-C、PD-CD1、PKC-βI的mRNA表达水平。结果引产儿胚胎骨髓CD34+细胞RUNX1、Hes-1、SLC9A3R1、Notch1、Notch2、HLA-C、PDCD1和PKC-βI的mRNA表达水平与成人组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论引产儿胚胎骨髓CD34+细胞具有与成人骨髓CD34+细胞相似的生物学活性,可以作为实验中正常对照使用,满足实验需要。

人胎股骨微量元素的研究

采用火焰原子吸收法测定了60例5～8月胎尸股骨中的铜、铁、锌、锰、锂五种微量元素的含量.其结果表明;股骨中各元素的含量依次为铁、锌、锂、锰、铜.在胚胎期各元素的含量有各自的变化曲线.

小鼠胚胎肢芽器官培养中锌对骨形成的影响

目的 通过研究锌缺乏 /过量在骨形成过程中骨密度的变化 ,探讨锌影响骨代谢的机制 ,为发挥锌在骨质疏松中的治疗作用提供科学依据。 方法 应用自制浸没式一次通气旋转装置对 16天孕龄小鼠胚胎肢芽器官进行培养 ,采用钼钯 X- ray乳腺机分析骨密度的变化。 结果 锌缺乏组和过量补锌组 与对照组相比 ,骨质较薄 ,长骨长度较短 ,骨密度降低 ;补锌组 、 与对照组相比 ,骨密度明显升高 ,长骨长度较长 ,骨质较厚。 结论 提示适量补锌有促进骨形成、提高骨密度的潜在作用。

一种灵魂附体的言说:也论翻译之“夺胎换骨”

翻译应让原作在译入语中"投胎转世"。而欲得原作之胎,必须复活原作者的精神,让其灵魂附体于译文。在原作之骨的再造中,应坚持语言好客性原则,能直译则直译,若必须意译,则应尽量异化,并将源语表达形式适当引入目标语。译者应关注其"代人立言者"的角色,而不是与作者争地位。把翻译占有原作者精神灵魂的过程,变为译者与原作者灵魂同体合一的过程,使翻译成为灵魂附体的言说。

骨保护素对鸭胚破骨细胞分化与活化的影响

为研究骨保护素(Osteoprogerin,OPG)对体外培养鸭胚破骨细胞(Osteoclast,OC)分化与活化的影响,收集23日胚龄鸭胚骨髓细胞,体外培养过程中分组加入0 ng/mL(A组)、30 ng/mL(B组)、100 ng/mL(C组)OPG进行处理。通过抗酒石酸酸性磷酸酶染色(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP),骨吸收陷窝分析技术,检测TRAP阳性细胞数量及OC的骨吸收活性。结果显示,3个试验组TRAP阳性细胞数、OC的骨吸收活性均在OPG处理7 d后达到最高水平。与A组相比,OPG处理组OC数目及其骨吸收活性均显著减弱(P<0.05),每个时间段骨吸收陷窝净增长面积与OC数目变化趋势一致。表明OPG能够抑制OC细胞前体分化,促进成熟OC发生凋亡,抑制成熟OC的骨吸收活性。

孕鼠被动吸烟对胎鼠骨骼发育的影响

①目的 观察孕鼠被动吸烟对胎鼠骨骼发育的影响。②方法 实验组孕鼠被动吸烟 ,然后取胎鼠进行茜素红染色 ,观察全身骨骼发育情况。其中 36只胎鼠进行图像分析 ,观察其骨骼密度 ,并与对照组进行比较。③结果 实验组胎鼠骨骼发育明显迟缓 ,骨龄明显落后 ,并且出现了一些脊柱裂并露脑、脊柱侧弯、肋骨缺失等骨骼畸形。实验组胎鼠体长明显短于对照组 (t=4 .6 74 ,P <0 .0 0 1) ,骨密度低于对照组 (t=2 .4 6 1,P <0 .0 5 )。④结论 孕鼠被动吸烟能致胎鼠骨骼发育明显迟缓和骨骼畸形。

正常与血管内膜损伤后骨髓液的促血管生成作用

目的探讨正常骨髓液和血管内膜损伤后骨髓液是否具有促进血管生成的作用。方法损伤后血清及损伤后骨髓液组分别为新西兰大白兔腹主动脉球囊导管损伤7d后的血清及骨髓液。种蛋在(37.5±0.5)℃条件下孵育,第7天开窗,第8天在鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上放一直径为5mm的滤膜作为载体,分别加入5μL0.9%氯化钠溶液(对照组)、5μL20mg/L血管内皮生长因子(VEGF,VEGF组)、正常血清(正常血清组)、正常骨髓液(正常骨髓液组)、损伤后血清(损伤后血清组)和损伤后骨髓液(损伤后骨髓液组),每日1次,连续3d,第11天取CAM,拍照并计数载体边缘的血管数目。每组10枚鸡胚。结果正常血清组的血管总数略多于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);正常骨髓液组的血管总数为(47.90±3.21)支,显著多于正常血清组的(28.40±3.75)支(P<0.01);损伤后血清组的血管总数为(47.30±3.27)支,也显著多于正常血清组(P<0.01);损伤后骨髓液组的血管总数虽与正常骨髓液组的差异无统计学意义(P>0.05),但大血管计数显著增加(P<0.05)。结论正常骨髓液具有明显促血管生成的作用,血管内膜损伤后的血清和骨髓液的血管生成作用强于血管内膜未损伤时。

食用骨粉对大鼠致畸作用的研究

目的探讨食用骨粉对大鼠的致畸作用。方法采用大鼠致畸试验,将孕鼠随机分为5组,实验组剂量分别为0.25g/kg(体重)、2.5g/kg(体重)、5g/kg(体重),阴性对照组给予等量去离子水。在孕7～16d,各剂量组及阴性对照组均按1.5ml/100g(体重)经口灌胃,阳性对照组于孕12d腹腔注射环磷酰胺1.0ml/100g(体重)。孕21d处死孕鼠,检查母体妊娠与胎鼠畸形情况。结果各实验组母鼠体重、胚胎毒性、致畸毒性与阴性对照组比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论食用骨粉在0.25～5g/kg(体重)剂量下未显示致畸作用。

冷藏胚胎骨的组织结构及BMP的免疫组化观察

用免疫组织化学及组织学方法，观察了－２０℃冷藏６～８个月的人胚胎长骨的组织结构与骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）的保存情况，并与同体胚胎新鲜骨进行了对比。发现－２０℃冷藏６～８个月的胚胎骨中，骨髓细胞大部分失活、死亡，骨细胞部分死亡、消失，但破骨细胞、成骨细胞保存较好，ＢＭＰ保存良好。认为用－２０℃冷藏半年以上的胚胎骨作骨移植，既可避免活的免疫原性细胞所激发的强烈的免疫反应。

TGF-β及其受体对胚胎着床的影响

TGF-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一类在结构上相对保守的生长因子,是细胞增殖、分化、细胞外基质合成和细胞凋亡的主要调节因子之一。近年来也发现,该家族成员的部分因子如TGF-β、骨形态形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)/生长分化因子(growth and differentiation factor,GDF)、激活素/抑制素(Activin/Inhibin)也参与胚胎着床过程,且这些生长因子的表达表现出时空特异性。

维生素D介导鸡BMSCs和BMMs共培养体系中破骨细胞的形成

为探究1α, 25-(OH)2D3对鸡骨髓间充质干细胞(BMSCs)和骨髓单核巨噬细胞(BMMs)体外共培养体系中破骨细胞(OC)形成的影响,笔者对1α, 25-(OH)2D3处理后的细胞进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)、骨吸收功能鉴定、OC标志基因mRNA和蛋白表达的检测。结果表明:1α, 25-(OH)2D3能够上调BMSCs中核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的表达,下调骨保护素(OPG)的表达。1α, 25-(OH)2D3处理共培养细胞5 d,OC数目较对照组明显增多,骨吸收活性较对照组极显著增强,基质金属蛋白酶9(MMP-9)、Ⅱ型碳酸酐酶(CAⅡ)、组织蛋白酶K(CtsK)及TRAP等标志性蛋白的mRNA和蛋白表达极显著高于对照组(P<0.01),其中10-8 mol·L^-1 1α, 25-(OH)2D3效果最明显。结果表明,10-8 mol·L^-1 1α, 25-(OH)2D3能够介导鸡BMSCs和BMMs共培养体系中OC的形成,该OC具有骨吸收活性,为进一步研究OC在家禽骨骼及钙磷代谢紊乱性疾病中的作用机制奠定基础。

两种条件培养基促进鼠胚胎干细胞分化为造血干细胞(英文)

目的:从鼠胚胎干细胞获得具有造血重建功能的造血干细胞。方法:将ES-D3细胞形成4天拟胚体(4dEBs),再用骨髓内皮细胞条件培养液(mBMEC-CM)和/或胎肝基质细胞条件培养液(FLSC-CM)诱导4dEBs生成造血干细胞。实验为mBMEC-CM+FLSC-CM组、mBMEC-CM组、FLSC-CM组,对照组。检测诱导生成的细胞造血干细胞特异抗原表达、造血相关基因表达、造血集落的形成以及造血重建能力。结果:从诱导ES-D3细胞生成造血干/祖细胞的数量和生成的集落总数看,mBMEC-CM+FLSC-CM组诱导效率显著高于其他3组。mBMEC-CM+FLSC-CM组诱导生成的细胞能重建照射鼠的造血系统。结论:骨髓内皮细胞条件培养液联合胎肝基质细胞条件培养液可促进鼠胚胎干细胞分化为具有造血重建能力的造血干细胞。

胚胎干细胞标志CD31、SSEA-1在小鼠胚胎发育和成体组织中表达的初步研究

目的观察胚胎干细胞表面标志CD31、SSEA-1在小鼠胚胎发育过程中不同阶段的表达及在新生鼠、成体骨髓、睾丸中的表达情况,为进一步利用它们作为分子标志从胚胎及成体组织中分离多潜能性干细胞奠定基础。方法本实验选用129/SV系小鼠。孕10.5天、14.5天、18.5天的胚胎各取3例,新生鼠、6周龄成年鼠骨髓、成体睾丸各取3例,0.3%胶原酶消化获得单细胞悬液,经抗体染色标记后,通过流式细胞仪分析CD31、SSEA-1的表达情况。结果胚胎第10.5天、14.5天、18.5天和新生鼠中均有CD31、SSEA-1的表达,阳性细胞量随胚胎发育呈下降趋势。成年鼠骨髓和睾丸组织中也有CD31、SSEA-1阳性细胞存在,含量低于胚胎中的数量。结论 CD31、SSEA-1在小鼠个体发育过程以及成体组织中都有不同程度的表达,阳性细胞比率随个体发育而降低。

胚胎干细胞来源的树突状细胞骨髓瘤疫苗抗瘤功能的观察

目的:探讨胚胎干细胞(ESC)来源的树突状细胞(DCs)骨髓瘤融合疫苗的抗肿瘤功能。方法:1)对骨髓瘤疫苗进行安全性检测,并观察其体外针对SP2/0的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应;2)融合疫苗的免疫保护实验和免疫治疗实验。结果:1)接种裸鼠未见致瘤情况初步证实该疫苗安全可靠,体外特异性CTL杀伤实验表明该融合疫苗具有较强的杀伤活性。2)ESC-DCs融合疫苗免疫组和BMC-DCs融合疫苗免疫组小鼠受到SP2/0攻击后,连续观察60d未见肿瘤形成。3)ESC-DCs融合疫苗治疗组小鼠中位生存时间为47d,BMC-DCs融合疫苗治疗组小鼠中位生存时间为46d,而PBS组小鼠中位生存时间仅为21d。结论:ESC-DCs与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合制备得到的融合疫苗具有较强的抗肿瘤功能,与BMC-DCs来源的同类疫苗相比具有相似的生物学特性及功能性。