Application of Ethylparaben in Quality Control of Favoring Agents and Fragrances Used for Cigarette Production

This study was conducted to evaluate the antimierobial activity of ethylparaben （ethyl para-hydroxybenzoate） in flavoring agents and fragrances used tot cigarette production. In brief, different levels of ethylparaben were added to Ziyun and Ruanzhen fragrance concentrates, and fermented with or without the additiorl of extra microbial strains. The aroma components in the fermented samples were detected via gas chromatography-mass spectrometry （GC/MS） assay. The results showed that ethylparaben had good antimicrobial activity on the microorganism in Ziyun and Ruanzhen fragrances, and as it significantly inhibited the growth of Sac- charomyces sp. Aeetobacter sp. , Agrobacterium sp. and Bacillus sp. , with an inhibition rate of 53%. Under natural fermentation condition, 91. 885% of the micro- organisms were inhibited by adding 0. 1 g/kg ethylparaben, 97.69% were inhibited by adding 0.3 g/kg ethylparaben, and 100% were inhibited by adding 0.5 g/kg ethylparaben. Moreover, the addition of ethylparaben had no obvious influence on the aroma components of the favoring agents and fragrances. So, it carl be used as a preservative for the quality control of favoring agents and fragrances for cigarette production.

HPLC法测定胃镜消泡剂中羟苯乙酯钠含量

采用高效液相色谱(HPLC)法测定胃镜消泡剂中羟苯乙酯钠的含量,色谱条件:采用Kromasil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-1%冰乙酸溶液(60∶40)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为256 nm,柱温为30℃。结果表明:羟苯乙酯钠在2.41~24.14μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=1.000 0),平均回收率为107.02%,RSD为1.37%。该方法简便、准确,可用于胃镜消泡剂中羟苯乙酯钠的含量控制。

对羟基苯甲酸乙酯暴露于雌性斑马鱼对子代胚胎发育的毒性效应

目的:探讨对羟基苯甲酸乙酯(EtP)暴露对子一代(F1)斑马鱼胚胎发育毒性的影响及其相关分子机制。方法:将四月龄的雌性斑马鱼持续暴露于文献报道相关浓度0.5 mg/L和2 mg/L中28 d,染毒结束后,将已暴露EtP的雌性斑马鱼与同周龄的雄性斑马鱼交配,观察F1代胚胎发育情况,采用转录组测序技术(RNA-seq),进一步阐释EtP暴露对F1代毒性效应的分子机制。结果:与对照组比较,EtP组F1代96 hpf孵化率明显降低;死亡率和畸形率明显增加(P<0.05),96 hpf卵黄囊面积和心率增加,24 hpf自发卷尾运动明显增加(P<0.05);96 hpf眼面积明显减小(P<0.05)。EtP组F1代144 hpf幼鱼运动距离和游泳速度均明显降低(P<0.05)。F1代96 hpf幼鱼RNA-seq测序结果表明,DEGs与神经系统发育调节、眼睛的视网膜发育有关,且RT-qPCR与RNA-seq结果一致。结论:EtP母源性暴露可导致无EtP直接暴露的F1代斑马鱼胚胎发育异常,特别是神经系统发育和视网膜发育。

超级微波消解-电感耦合等离子体质谱法同时检测羟苯乙酯中9种元素杂质

建立超级微波消解和电感耦合等离子体质谱的方法并严格按照法规要求进行方法学验证。参考ICH Q3D要求采用所建方法对多个厂家的多批次羟苯乙酯中的1类、2A类以及其他元素Fe和Zn共9种元素进行检测,以控制阈值方法评估羟苯乙酯用于口服制剂时元素杂质的残留风险。结果所建立方法线性、检测限、定量限、准确度、精密度均符合法规要求,各元素定量限均小于控制阈值,实测数据显4个厂家14批样品中Cd、Hg、Zn的含量均低于定量限,Pb、As、Co、V、Ni、Fe 6种元素均高于定量限,但均未超过控制阈值,表明羟苯乙酯用于口服制剂中元素杂质残留风险较低。

HPLC法梯度洗脱同时测定曲安奈德益康唑乳膏中4种抑菌剂的含量

目的:建立梯度洗脱HPLC法,以双波长同时测定不同厂家曲安奈德益康唑乳膏中4种抑菌剂含量。方法:采用Waters Symmetry C 18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇为流动相A,以甲醇-0.02 mol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液(95∶5)为流动相B,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温为35℃,检测波长为228 nm、254 nm。结果:本法可有效分离曲安奈德益康唑乳膏中各色谱峰,苯甲酸、羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯分别在0.010348~0.15522 mg·mL^(-1)、0.009876~0.148145 mg·mL^(-1)、0.010106~0.151588 mg·mL^(-1)、0.010259~0.153882 mg·mL^(-1)范围内与峰面积线性关系良好;平均回收率(n=9)分别为99.68%(RSD=2.35%)、100.21%(RSD=1.78%)、100.47%(RSD=1.59%)、100.06%(RSD=1.65%),检测限分别为3×10^(-5)mg·mL^(-1)、1.67×10^(-5)mg·mL^(-1)、1.67×10^(-5)mg·mL^(-1)、1.67×10^(-5)mg·mL^(-1)。结论:本研究建立的曲安奈德益康唑乳膏中抑菌剂的含量测定方法,方法灵敏、准确,色谱峰分离良好,为其质量控制提供了依据。

用替代对照品羟苯乙酯高效液相色谱方法测定大蒜辣素

大蒜辣素极不稳定,制备供含量测定用对照品非常困难。大蒜辣素在溶液中相对稳定,用高效制备液相色谱制备高纯度的大蒜辣素溶液(>99%),HPLC-ESI-MS/MS和NMR法鉴定该溶液中主成分大蒜辣素的结构,用衍生化紫外分光光度间接测定法和EP5.0收载的类似方法分别测定该溶液含量,确定该溶液中大蒜辣素的含量为0.719mg/mL。以此溶液为基准,在条件为:AlltechC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%甲酸(65∶35),流速为1.0mL/min,检测波长242nm,考察性质稳定而又易得的羟苯乙酯与大蒜辣素之间的校正因子。结果显示,测得1mg羟苯乙酯相当于4.71mg的大蒜辣素,该换算关系适用于大蒜辣素为0.018～2.9g/L的浓度范围,该方法与EP5.0的方法相比,分析时间明显缩短。

HPLC法测定盐酸丁卡因滴眼液中羟苯乙酯的含量

目的采用高效液相色谱法测定盐酸丁卡因滴眼液中抑菌剂羟苯乙酯的含量。方法色谱柱为Agilent HC-C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为0.005mol·L-1醋酸胺溶液（每1 000mL含三乙胺10mL;冰醋酸调pH5.0）-乙腈（55∶45）;检测波长为256nm;流速1.0mL·min^-1。结果羟苯乙酯质量浓度在14.31~143.12μg·mL-1范围内,与其峰面积呈良好的线性关系（r=1）,平均回收率为99.0%（RSD=1.36%）。结论该方法专属性强、测定结果准确、精密度高、线性好,适用于检测盐酸丁卡因滴眼液中羟苯乙酯的含量。

高效液相色谱法同时测定氯氟滴眼剂中氯霉素和地塞米松磷酸钠的含量

目的 :建立高效液相色谱法同时测定氯氟滴眼剂中氯霉素和地塞米松磷酸钠的含量。方法 :流动相为甲醇 0 .34%磷酸二氢钾 (5 5∶5 0 ) ,流速 1mL·min-1,SpherisorbC18色谱柱 ,检测波长 2 4 0nm。结果 :氯霉素和地塞米松磷酸钠分别在 12 5～10 0 0mg·L-1(r =0 .9992 )、2 5～ 2 0 0mg·L-1(r =0 .9998)内线性关系良好。加样回收率分别为 (10 1.5± 1.93) %、(10 1.0±1.5 9) % (n =3)。日内RSD分别为 0 .6 3% ,0 .5 8% (n =5 ) ,日间RSD分别为 0 .99% ,0 .86 % (n =3)。结论 :该法简单、迅速 ,结果准确可靠。

氯霉素滴眼液中尼泊金乙酯含量合理性的探讨

目的:调研国产氯霉素滴眼液中尼泊金乙酯含量不同产品是否符合《中国药典》规定。方法:通过抑菌剂效力检查法测定含不同浓度尼泊金乙酯模拟产品的抑菌效力。结果:证明现行产品浓度尼泊金乙酯模拟产品的抑菌效力均符合药典规定。结论:现行产品中的尼泊金乙酯处方浓度偏高。而处方中作为辅料的硼酸/硼砂,除具有pH调节作用外,对抑菌效力也有贡献。

HPLC法测定倍他米松尿素乳膏中倍他米松和羟苯乙酯的含量

目的建立测定倍他米松尿素乳膏中倍他米松和羟苯乙酯含量的方法。方法色谱柱：PLATISILTMODS（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相：乙腈-水（30∶70）,检测波长：240 nm,流速：1.0 ml·min-1,柱温：45℃。结果倍他米松、羟苯乙酯分别在3.94~23.64μg·ml-1（r=0.9999）、4.78~28.68μg·ml-1（r=1.0000）范围内线性关系良好;回收率、RSD分别为倍他米松99.7%、0.92%,羟苯乙酯100.4%、0.40%。结论本方法简便、准确、重复性好,可用于该制剂中倍他米松和羟苯乙酯的含量测定。

高效液相色谱法测定盐酸丁卡因滴眼液中两组分含量

目的建立同时测定盐酸丁卡因滴眼液中盐酸丁卡因和羟苯乙酯含量的高效液相色谱法。方法采用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-三乙胺-冰醋酸(65:35:0.5:0.2),流速为1.0mL/min,检测波长为280nm。结果两组分完全分离,盐酸丁卡因和羟苯乙酯质量浓度线性范围分别是4.16～104.00μg/mL(r=0.9999)和0.1196～2.9900μg/mL(r=0.9998),平均回收率分别为100.89%和101.61%,RSD分别为0.58%和0.90%(n=9)。结论高效液相色谱法操作简便,结果准确,重现性好,可用于盐酸丁卡因滴眼液的质量控制。

短短芽胞杆菌产抗菌物质——羟苯乙酯发酵培养基的优化

羟苯乙酯是短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX的主要抑菌活性物质,为提高该菌株发酵液中羟苯乙酯的产量,本研究采用响应面法对其发酵培养基成分进行优化。首先通过单因素试验,对发酵培养基中的碳源、氮源和无机盐进行了优化,进一步通过Plackett-Burman设计对培养基的影响因素进行筛选,最后采用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,通过Box-Behnken设计,结合响应面分析,获得短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX发酵产生羟苯乙酯的最佳培养基配方。结果表明,培养基最佳碳源、氮源和无机盐分别为DL-苹果酸、蛋白胨和NaCl。影响显著的3个因素分别为DL-苹果酸、豆饼粉和NaCl。最佳培养基配方为可溶性淀粉8 g/L、DL-苹果酸29.68 g/L、豆饼粉25.18 g/L、蛋白胨2 g/L、NaCl 13.18 g/L,pH 7.0~7.2。采用此培养基配方进行短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX发酵,羟苯乙酯平均产量为8.15μg/mL,较基础发酵培养基提高了286.26%。

高效液相色谱法测定薇依霜中维生素E和羟苯乙酯含量

目的建立测定薇依霜中维生素E和羟苯乙酯含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),维生素E测定以甲醇为流动相,流速为2.0 mL/min,紫外检测波长为285 nm;羟苯乙酯测定以甲醇∶水(45∶55)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为258 nm。结果维生素E质量浓度在0.099 6～0.498 g/L范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 5(n=5),平均回收率为99.25%,RSD为1.21%(n=9);羟苯乙酯质量浓度在2.16～10.80μg/mL进样范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 7(n=5),平均回收率为100.31%,RSD为1.02%(n=9)。结论所建立的方法简便、专属性强,重现性好,可有效控制薇依霜的质量。

HPLC法同时测定复方尼泊金乙酯醇溶液中二种组分的含量

目的 建立HPLC法同时测定复方尼泊金乙酯醇溶液中尼泊金乙酯及尼泊金甲酯含量的方法。方法 以ODSHypersil(5 μm ,2 0 0mm× 4 .6mm)为色谱柱 ,0 .0 1mol·L-1磷酸二氢钾 (KH2 PO4)溶液 -甲醇 -磷酸 (5 0∶5 0∶0 .4 )为流动相 ,检测波长 2 5 5nm。结果 一次进样即可完成两种组分的含量分析 ,线性范围 :尼泊金乙酯为 3.0 2 4～ 30 .2 4 μg·ml-1(r =0 .9999) ;尼泊金甲酯为1.0 2 2～ 10 .2 2 μg·ml-1(r=0 .9999)。平均回收率为 :尼泊金乙酯 99.4 5 % ,RSD =0 .4 8% (n =6 ) ;尼泊金甲酯 99.6 7% ,RSD=0 .72 % (n =6 )。结论 本方法快速、准确 ,分离度好。可用于该醇溶液中两种组份的含量测定。

甲基纤维素滴眼液使用和存放过程中的微生物监测分析

背景 目前大多数滴眼剂为多剂量包装,为保证滴眼液在使用中的安全性,对滴眼液瓶开启后使用过程中的微生物相关研究很有必要. 目的 研究甲基纤维素（MC）滴眼液开启后在社区常温、社区冷藏及病区常温3种环境下使用和存放时微生物污染情况及保持无菌的时间. 方法 将MC滴眼液按照模拟试验的温度、湿度和污染指数等环境的不同分为社区常温组、社区冷藏组和病区常温组,每个环境组取含或不含防腐剂尼泊金乙酯的MC滴眼液各200支,其中分为启封药物和不启封药物.由专业人员开启滴眼液瓶并标注开启时间,模拟点眼操作每次1滴,每日3次,每次药液空气中暴露时间为5～10s,用后分别在相应环境中存放.分别于药瓶开启后1、2、3、4、5、6、7、8、9和10 d的8：00取样,由同一检验员进行细菌培养和真菌培养,并通过全自动微生物分析系统进行菌种鉴定.结果 药瓶开启后社区常温组、社区冷藏组和病区常温组无防腐剂启封药细菌阳性率均在30％左右,而未启封药物未见微生物生长.药瓶开启后10 d,社区常温组、社区冷藏组和病区常温组无防腐剂的启封药细菌培养阳性率分别为30％、32％和36％,而含防腐剂药物的启封药细菌阳性率分别为15％、19％和23％,组内比较差异均有统计学意义（x2=6.452、4.448、4.063,均P＜0.05）;根据Scheffe法计算社区常温组与社区冷藏组、病区常温组与社区冷藏组以及病区常温组与社区常温组间无防腐剂启封药细菌阳性率差值的95％可信区间（CI）分别为-0.166 ～ 0.126、-0.110 ～0.190和-0.088 ～0.208,而含防腐剂启封药物细菌阳性率差值的95％ CI分别为-0.159～0.079、-0.089～0.169和-0.043 ～0.203,尚不能认为不同环境间差异有统计学意义.培养的微生物经鉴定分别为藤黄微球菌、鲁氏不动杆菌、枯草芽孢杆菌、抗辐射不动杆菌、香味菌和木糖葡萄球菌.结论 防腐剂尼泊金乙酯可以降低MC滴眼液使用过程中的微生物污染率;滴眼液的常见使用环境对MC滴眼液的微生物污染情况无明显影响.MC滴眼液污染的菌群均属于大气、土壤等环境菌种,并非眼部常见致病菌。

高效液相色谱法测定复方庆大霉素合剂中4种主要成分

目的：建立测定复方庆大霉素合剂中盐酸普鲁卡因、盐酸麻黄碱、对羟基苯甲酸乙酯和硫酸庆大霉素的高效液相色谱法。方法：前３ 种药物用反相色谱－ 波长和灵敏度切换法同时测定，硫酸庆大霉素用柱前衍生化色谱法测定。结果：质控结果显示药物浓度与峰高响应值线性关系良好，相关系数分别０－９９９５，０－９９７８，０－９９６６ 和０－９９９２；４ 种药物的加样回收率分别平均为９５－５±５－６％ ，９６－２±４－５％ ，９６－０±４－７％ ，９２－５±６－２％ ；日内ＲＳＤ 均＜ ６－０ ％ （ ｎ ＝５），连续测定５ｄ 的日间ＲＳＤ ＜ ７－２ ％（ ｎ ＝５），精密度和重现性良好。

尼泊金乙酯分子印迹膜电化学传感器的制备

以邻苯二胺为功能单体，尼泊金乙酯为模板分子，通过电化学聚合在玻碳电极表面制备了尼泊金乙酯分子印迹膜，采用循环伏安法及方波伏安法，以K3EFe（CN）6]为电活性探针，建立了间接测定尼泊金乙酯的分析方法。实验结果表明，制备的分子印迹膜电化学传感器对尼泊金乙酯具有较高的选择性和灵敏度，测定尼泊金乙脂的线性范围为2．5×10-6^～1．0×10-mol／L，检出限为8．61×10mol／L。

HPLC法测定加替沙星滴眼液中抑菌剂羟苯乙酯的含量

目的建立HPLC法测定加替沙星滴眼液中抑菌剂羟苯乙酯的含量。方法采用Agilent Zorbax SB C18色谱柱;流动相为0.005 m ol.L-1醋酸胺溶液（每1 000 m l中含三乙胺10 m l,冰醋酸调节pH值至5.0）-乙腈（60∶40）;流速：1.0 m l·m in-1;检测波长：256 nm;柱温：35℃。结果羟苯乙酯在3.06~30.55 mg·L-1范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均加样回收率为100.38%,RSD为0.7%（n=9）。结论该方法简便、准确、重复性好,适用于检测加替沙星滴眼液中抑菌剂羟苯乙酯的含量测定。

HPLC法测定己烯雌酚乳膏中己烯雌酚和羟苯乙酯的含量

目的建立测定己烯雌酚乳膏中己烯雌酚和羟苯乙酯含量的方法。方法采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇-水（75：25）；流速0．8mL／min；检测波长241nm；柱温35℃；进样量20μl。结果该方法不受处方中基质干扰，己烯雌酚的线性范围为10～20μg·ml^-1，r=0．9999（n=5）；平均回收率为99．68％，RSD为0．81％；羟苯乙酯的线性范围为10～20μg·ml^-1，r=0．9999（n=5）；平均回收率为100．1％，RSD为0．72％。结论该法操作简便、灵敏度高，重复性好，可用于己烯雌酚乳膏中己烯雌酚和羟苯乙酯的含量测定。

双通道尼泊金乙酯分子印迹传感器的研制与应用

以尼泊金乙酯(EP)为模板分子,邻苯二胺(o-PD)为功能单体,利用循环伏安法在玻碳电极(GCE)表面制备分子印迹膜,对分子印迹聚合条件进行了优化,并进一步在双通道丝网印刷碳电极(SPCE)表面进行电聚合,制得双通道尼泊金乙酯分子印迹膜电极(EP-MIP/SPCE)。利用循环伏安法、方波伏安法和电流-时间曲线法对分子印迹传感器的电化学性能进行评价。EP在双通道EP-MIP/SPCE上的氧化电流与EP在低浓度区(3.2×10^(-7) mol/L^3.2×10^(-6) mol/L)和高浓度区(2.7×10^(-5) mol/L^5.6×10^(-4) mol/L)分别呈良好的线性关系,检出限为9.7×10^(-8) mol/L。运用建立的方法对市售酱油中的EP进行了测定,加标回收率为97.2%~106.6%,实验结果表明,该双通道分子印迹传感器可对酱油等食品样品中的尼泊金酯类进行快速测定。