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SNP Genotyping of Myostatin (MSTN) Gene through Taq Man Probe Assay and Association Study between MSTN Genotypes and Growth Traits of Tan Sheep
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作者 Ma Lina Li Yingkang +2 位作者 Yu Yang E-er Hehua Ma Qing 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2016年第6期333-335,共3页
To establish a rapid, accurate and economical real-time PCR assay system based on TaqMan probe technology for the detection of genetic variations of single nucleotide polymorphisms (SNPs) in myestatin (MSTN) gene,... To establish a rapid, accurate and economical real-time PCR assay system based on TaqMan probe technology for the detection of genetic variations of single nucleotide polymorphisms (SNPs) in myestatin (MSTN) gene, a pair of TaqMan probes were designed on the polymorphism loci of MSTN gene and used in PCR reaction system for SNP genotyping. Meanwhile, an association study was performed between MSTN genotypes and growth traits of Tan sheep, including birth weight, weaning weight, 3-month weight, and 6-month weight. The results showed that rs417816017 locus of MSTN gene in Tan sheep had two genotypes : YY and XY. The individuals with genotype XY had a growth advantage over the ones with genotype YY. The results indicate that TaqMan probe-based real-time PCR assay can be used to detect the genotype of MSTN gene, which will provide candidate genes for breeding of Tan sheep. 展开更多
关键词 Tan sheep Myestatin (MSTN) gene TaqMan probe Single nucleotide polymorphism (SNP) Growth trait Association
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The Construction of the Probe for Amylase n Gene Cloning from Bacillus halodurans Strain 38C1-1
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作者 QU Juan-juan YANG Guo-hui Aoki Ken-ji 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2005年第2期108-111,共4页
Primers and probes were established according to the sequences of the alpha-amylase genes of Bacillus. halodurans C-125, Therrnus sp. IM6501, B. stearothermophilus ET-1, and B, acidopullulytics. Primers were designed ... Primers and probes were established according to the sequences of the alpha-amylase genes of Bacillus. halodurans C-125, Therrnus sp. IM6501, B. stearothermophilus ET-1, and B, acidopullulytics. Primers were designed and a 0.2 kb DNA fragment was amplified, the fragment was successfully used for the detection of the amylase Ⅱ gene in a 2 842 bp region from Bacillus halodurans strain 38C1-1. 展开更多
关键词 probe amylase gene cloning
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VDR基因多态性与宫颈病变及HPV感染转归的相关性
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作者 杨佳琦 陈晓月 +2 位作者 高宇峰 李娟 李东燕 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第6期790-797,共8页
目的 分析维生素D受体(vitamin D receptor, VDR)基因多态性与宫颈病变的关系,并探讨其对高危型人乳头瘤病毒(high risk-human papillomavirus, HR-HPV)感染转归的影响。方法 选取2020年9月至2021年10月于山西医科大学第二医院行阴道镜... 目的 分析维生素D受体(vitamin D receptor, VDR)基因多态性与宫颈病变的关系,并探讨其对高危型人乳头瘤病毒(high risk-human papillomavirus, HR-HPV)感染转归的影响。方法 选取2020年9月至2021年10月于山西医科大学第二医院行阴道镜检查的患者376例,将病理结果示慢性宫颈炎和宫颈上皮内瘤变Ⅰ级者设为对照组(188例),宫颈上皮内瘤变Ⅱ级及以上者(CINⅡ+)为病例组(188例)。收集患者外周静脉血行VDR基因多态性检测,包括FOKI、BsmL、Apal和Taql的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)位点,分析VDR基因多态性与宫颈病变的关系。对选择行宫颈锥形切除术进行治疗的142例CINⅡ-Ⅲ级患者的HPV转归情况进行6个月的随访,根据随访结果分为HPV转阴者和同一型别HPV持续感染者,即转阴组和持续感染组,分析VDR基因多态性是否影响HPV感染的转归。结果 随访结果显示,104例患者的HPV感染呈转阴状态,33例患者持续感染同一型别的HPV,而另外5例患者则感染了其他型别的HPV。VDR基因多态性检测结果表明,FOKI SNPs ff基因型及f等位基因与CINⅡ+发生显著相关(P<0.05),并且与HR-HPV持续感染相关(P<0.05);TaqI SNPs tt及Tt基因型均增加CINⅡ+发生的风险(P<0.05),t等位基因与CINⅡ+发生风险增加有关(P<0.05),但与HPV持续感染未见相关性(P>0.05)。结论 VDR基因多态性与宫颈病变及HR-HPV感染转归相关,其中FOKI SNPs ff基因型及f等位基因和TaqI SNPs tt、Tt基因型及t等位基因与宫颈病变的发生存在关联,并且FOKI SNPs ff基因型及f等位基因可能影响HR-HPV感染的转归结果。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 维生素D受体 基因多态性 宫颈病变 Taqman基因探针 单核苷酸多态性
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禽腺病毒血清4型实时荧光RAA检测方法的建立
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作者 张宗淑 李会会 +6 位作者 陈曦 李静 张子闯 时国强 翟向和 王春光 张铁 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第20期69-74,共6页
为了快速准确地诊断禽心包积液-肝炎综合征(hydropericardium-hepatitis syndrome,HHS),试验根据禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype-4,FAdV-4)的六邻体(Hexon)基因保守序列设计特异性引物和探针,将重组酶介导等温核酸扩增技术(r... 为了快速准确地诊断禽心包积液-肝炎综合征(hydropericardium-hepatitis syndrome,HHS),试验根据禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype-4,FAdV-4)的六邻体(Hexon)基因保守序列设计特异性引物和探针,将重组酶介导等温核酸扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)与荧光探针结合,通过对反应条件(温度和时间)进化优化建立一种用于检测FAdV-4的实时荧光RAA方法,对该方法进行特异性、敏感性、重复性试验,并分别采用该方法、普通PCR方法和实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RFQ-PCR)方法检测56份鸡肝脏样本,并计算该方法与其他两种方法的符合率。结果表明:建立的实时荧光RAA方法在40℃条件下反应15 min即可完成检测;仅可检测出FAdV-4,与禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)、新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)、传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)、鸡贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)和传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)均无交叉反应,特异性较强;对FAdV-4的最低检测限为1×10~1拷贝/μL,是普通PCR方法的100倍,与RFQ-PCR方法相当,敏感性较高;重复性试验中的组内重复性试验和组间重复性试验的变异系数(coefficient of variation,CV)均小于10%,重复性良好;对56份临床样品进行检测,该方法与RFQ-PCR方法和普通PCR方法的符合率分别为100%、96.43%。说明成功建立了FAdV-4的实时荧光RAA检测方法,该方法操作简便、快速,特异性较强,敏感性较高,重复性良好,可用于HHS的早期诊断。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 心包积液-肝炎综合征 重组酶介导等温核酸扩增 荧光探针 六邻体基因
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115462例新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查及基因突变分析
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作者 张禾璇 杨雪 +4 位作者 王侣金 李林洁 张晓怡 刘兴宇 余蕾 《罕少疾病杂志》 2024年第2期115-117,共3页
目的了解贵阳地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症发病情况和基因突变特点,为贵阳地区G6PD缺乏症的防治提供科学参考。方法募集该地区2020年8月至2023年1月出生的新生儿,应用荧光分析法对其血斑样... 目的了解贵阳地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症发病情况和基因突变特点,为贵阳地区G6PD缺乏症的防治提供科学参考。方法募集该地区2020年8月至2023年1月出生的新生儿,应用荧光分析法对其血斑样本进行G6PD酶活性筛查,召回初筛阳性儿,完成G6PD酶活性诊断及多色探针荧光PCR熔解曲线法(Multicolor probe melting curve analysis method,MMCA)基因突变分析。结果共募集115462例新生儿,G6PD酶活性筛查血斑样本共筛出阳性1606例,筛查阳性率为1.39%(1606/115462),其中男性为1.83%(1130/61801)、女性0.89%(476/53661),男女新生儿G6PD酶活性初筛阳性率差异有统计学意义(P<0.01);召回初筛阳性患儿,G6PD基因突变检出率87.07%(909/1044),其中男性为90.09%(764/848),女性为73.98%(145/196),男女间G6PD基因突变检出率差异有统计学意义(P<0.01)。本研究共检出13种类型G6PD基因单一突变型(c.1024 G>T、c.1388 G>A、c.95 A>G、c.1376 G>T、c.592C>T、c.871 G>A、c.519 C>T、c.392G>T、c.493 A>G、c.1004C>A、c.1360C>T、c.383T>C、c.517T>C)和6种复合突变型(c.1376 G>T杂合复合c.95A>G杂合突变、c.1024 G>T杂合复合c.95A>G杂合突变、c.1024 C>T杂合复合c.1388 G>A杂合突变、c.1024 C>T杂合复合c.519C>T杂合突变、c.1376 G>T杂合复合c.1024 C>T杂合突变、c.95A>G杂合复合c.1388 G>A杂合突变)。贵阳地区G6PD缺乏症基因突变类型复杂多样,G6PD突变常见类型为c.1024 C>T、c.1388G>A、c.95 A>G、c.1376G>T这四种类型。结论贵阳地区G6PD基因突变位点具有明显地域性特征,开展G6PD酶活性筛查及相关诊断检测,有利于本地区G6PD缺乏症的筛查、确诊、治疗和防控,有效提高出生人口素质。 展开更多
关键词 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 G6PD基因型 基因突变 多色探针熔解曲线分析法
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荧光探针法金黄色葡萄球菌核酸检测方法的建立
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作者 任宝红 姬建生 +3 位作者 郭瑞 韩小改 曾小宇 赵林萍 《质量安全与检验检测》 2024年第5期1-7,共7页
基于荧光探针法建立一种快速、灵敏的金黄色葡萄球菌核酸检测方法。针对金黄色葡萄球菌nuc基因设计特异性引物和探针,制备质粒标准品和菌液核酸标准品,完成方法建立。然后,对该方法的特异性、敏感性、重复性、实用性等性能进行评价。结... 基于荧光探针法建立一种快速、灵敏的金黄色葡萄球菌核酸检测方法。针对金黄色葡萄球菌nuc基因设计特异性引物和探针,制备质粒标准品和菌液核酸标准品,完成方法建立。然后,对该方法的特异性、敏感性、重复性、实用性等性能进行评价。结果显示,该方法特异性100%;质粒标准品敏感性为1 copy/μL;菌液标准品敏感性为1000 CFU/mL;重复性变异系数为0.69%;多种基质加标样品均能有效检出。成功建立了一种快速、灵敏的金黄色葡萄球菌核酸检测方法,可用于疑似金黄色葡萄球菌污染样品的快速核酸检测。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 nuc基因 荧光探针
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L型滑液囊支原体实时荧光定量PCR方法的建立与应用
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作者 刘子卿 任豆豆 +5 位作者 孙丽红 王娟娟 孟晨晨 周守长 刘冠慧 许金朋 《中国家禽》 北大核心 2024年第7期44-50,共7页
为建立一种快速、灵敏的检测我国优势基因型(L型)滑液囊支原体(MS)的方法,试验针对L型MS vlh A基因核苷酸序列保守区设计引物及Taq Man-MGB探针,将PCR扩增的vlh A基因克隆至p MD19-T载体,构建重组质粒vlh A-L作为阳性质粒标准品,建立实... 为建立一种快速、灵敏的检测我国优势基因型(L型)滑液囊支原体(MS)的方法,试验针对L型MS vlh A基因核苷酸序列保守区设计引物及Taq Man-MGB探针,将PCR扩增的vlh A基因克隆至p MD19-T载体,构建重组质粒vlh A-L作为阳性质粒标准品,建立实时荧光定量PCR(q PCR)方法,并检验该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示:该方法特异性良好,与C型MS-H株及其他鸡常见病原不发生交叉反应;重组质粒vlh A-L最小检出浓度为1.94×10^(1) copies/μL;组内和组间重复性变异系数均小于1%;临床样品检测结果与PCR测序结果吻合。研究表明,建立的q PCR方法特异性强、灵敏性高、重复性好,适用于检测我国L型MS感染情况,还可满足监测免疫MS-H株疫苗鸡群L型MS感染的要求。 展开更多
关键词 滑液囊支原体 vlhA基因 L型 TAQMAN-MGB探针 实时荧光定量PCR
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B型禽偏肺病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立及应用
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作者 沈海强 车艳杰 +3 位作者 宋新宇 高冉 付旭彬 金天明 《中国家禽》 北大核心 2024年第9期121-127,共7页
试验旨在开发一种特异性检测B亚型禽偏肺病毒(aMPV-B)的方法。研究参照GenBank中的aMPV-G基因序列设计一对特异性引物,建立aMPV-B TaqMan荧光定量PCR方法,优化该方法的反应条件,建立标准曲线,进行特异性、重复性和敏感性试验,并将该方... 试验旨在开发一种特异性检测B亚型禽偏肺病毒(aMPV-B)的方法。研究参照GenBank中的aMPV-G基因序列设计一对特异性引物,建立aMPV-B TaqMan荧光定量PCR方法,优化该方法的反应条件,建立标准曲线,进行特异性、重复性和敏感性试验,并将该方法用于临床样品的检测。结果显示:建立的TaqMan荧光定量PCR方法只能检测出B亚型aMPV,其敏感性能达到1.34×10^(1) copies/µL,斜率为-3.346,截距为40.01,相关系数(R2)为1.00,循环阈值(Ct)与模板拷贝数之间呈现良好的相关性;临床样品检测结果显示,该方法检测出18份样品阳性,而普通PCR仅检测出10份阳性。综上所述,建立的aMPV-B TaqMan荧光定量PCR方法在样品检测中表现出良好的特异性和较高的敏感性,适用于临床样品的aMPV-B检测。 展开更多
关键词 B型禽偏肺病毒 G基因 实时荧光定量PCR TapMan荧光探针
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GeneXpert MTB/RIF阳性RNA聚合酶β亚基基因突变的结核病患者中利福平耐药决定区突变特征研究 被引量:9
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作者 孙晴 廖鑫磊 +6 位作者 王晨倩 姜广路 董玲玲 王芬 赵立平 黄海荣 王桂荣 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2022年第4期349-353,共5页
目的:通过分析GeneXpert MTB/RIF(简称“Xpert”)阳性RNA聚合酶β亚基(rpoB)基因突变的结核病患者中rpoB基因探针的突变分布与频率,阐述利福平耐药决定区的突变特征。方法:连续纳入2019年6月至2020年6月就诊于首都医科大学附属北京胸科... 目的:通过分析GeneXpert MTB/RIF(简称“Xpert”)阳性RNA聚合酶β亚基(rpoB)基因突变的结核病患者中rpoB基因探针的突变分布与频率,阐述利福平耐药决定区的突变特征。方法:连续纳入2019年6月至2020年6月就诊于首都医科大学附属北京胸科医院的Xpert检测阳性且rpoB基因突变的682例结核病患者,其中肺结核618例,肺外结核64例。收集患者临床检测标本,其中痰液465份,支气管肺泡灌洗液153份,脓液37份,胸腔积液19份,便标本7份,脑脊液1份。分析所有Xpert阳性标本中结核分枝杆菌(MTB)的半定量结果及rpoB基因探针的突变分布情况。结果:682份标本中,MTB含量半定量水平为高占6.45%(44/682),中占25.07%(171/682),低占25.51%(174/682),极低占42.96%(293/682)。肺外结核标本中MTB含量半定量极低水平高于肺结核标本[分别为64.06%(41/64)和40.78%(252/618)],差异有统计学意义(χ^(2)=12.83,P<0.001)。标本涂阳率在MTB含量半定量水平为高、中、低和极低水平的标本中分别为84.62%(33/39),64.02%(105/164),27.27%(42/154)和7.84%(20/255)。rpoB基因单探针突变率为92.82%(633/682),双探针突变率为6.89%(47/682),三探针突变率为0.29%(2/682)。单探针突变的标本中,突变率最高的为探针E(74.34%,507/682),其次为探针D(8.80%,60/682);双探针突变的标本中,突变率最高的为探针D+E(4.25%,29/682),其次为探针A+B(1.76%,12/682);2例三探针突变均为探针A+D+E。结论:Xpert阳性rpoB基因突变MTB中以单探针突变为主,在肺结核和肺外结核中最常见的突变探针均为探针E和探针D。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 核酸扩增技术 基因 细菌 突变 核酸探针
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aCGH应用于产前诊断意外发现DMD基因缺失或重复病例分析
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作者 吴秋华 石凤蕊 +3 位作者 刘瑗 王林 翟文 强荣 《中国妇幼健康研究》 2024年第5期47-54,共8页
目的 探讨微阵列比较基因组杂交(aCGH)技术应用在产前诊断中发现抗肌萎缩蛋白基因(又称DMD基因)缺失或重复的重要价值。方法 收集2019年9月至2020年7月在西北妇女儿童医院因高危因素(高龄、血清学筛查高风险、无创筛查高风险或超声软指... 目的 探讨微阵列比较基因组杂交(aCGH)技术应用在产前诊断中发现抗肌萎缩蛋白基因(又称DMD基因)缺失或重复的重要价值。方法 收集2019年9月至2020年7月在西北妇女儿童医院因高危因素(高龄、血清学筛查高风险、无创筛查高风险或超声软指标异常等)选择aCGH技术进行产前诊断的851例孕妇的羊水样本进行检测,并进一步采用多重连接探针扩增(MLPA)方法对DMD基因变异样本进行验证。结果 在851例孕妇的羊水样本中,经aCGH产前诊断时意外发现4例羊水样本存在DMD基因缺失或重复,同时MLPA检测验证了上述变异。胎儿1:男胎,arr[GRCh37]Xp21.1(31691172-31766673)×0,DMD基因E52-53缺失;胎儿2:男胎,arr[GRCh37]Xp21.2(31016983-31351900)×2,DMD基因E61-79重复;胎儿3:女胎,arr[GRCh37]Xp21.2(31182699-31474949)×3,DMD基因E58-74重复;胎儿4:男胎,arr[GRCh37]Xp21.1(31777925-32152126)×2,DMD基因E45-51重复。4例变异均遗传自母亲。结论 产前诊断是防止DMD患者出生的重要手段,aCGH技术用于产前诊断不仅可以检测染色体微缺失和微重复综合征,还有助于检测由基因缺失或重复引起的单基因疾病,从而为临床诊断及遗传咨询提供了理论依据。 展开更多
关键词 微阵列比较基因组杂交 抗肌萎缩蛋白基因 产前诊断 多重连接探针扩增
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Preliminary Report of Molecular Detection of Retinoblastoma Gene Mutations
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作者 Ruiping Zeng, Xiaoling Jiang, Qingjiong Zhang Bing Hu, Youzhao Chen,Depatrment of Medical Genetics, Sun Yat-sen University of Medical Sciences Guangzhou 510089, ChinaZhongshan Ophathalmic Center, Sun Yat-sen University of Medical Sciences Guangzhou 510060, ChinaNational Ophthalmological Laboratories, Ministry of Public health , China Guangzhou 510060, ChinaNanjing Medical Schoool, Nanjing 210000, China 《眼科学报》 1994年第1期1-5,共5页
To develop gene diagnosis for retinoblastoma predisposition, it is necessary to disclose the retinoblastoma gene mutations or deletions in detail. Genomic DNA from tumor and peripheral white blood cells in 33 patients... To develop gene diagnosis for retinoblastoma predisposition, it is necessary to disclose the retinoblastoma gene mutations or deletions in detail. Genomic DNA from tumor and peripheral white blood cells in 33 patients with retinoblastoma was detected with 3.8kb probe derived from 3' end of retinoblastoma gene cDNA. The gene abnormalities, including deletion, partial deletion and rearrangement, were found in 18 patients. Further research will be aimed at microdeletions or mutations for those patients wti... 展开更多
关键词 RETINOBLASTOMA Rb gene probe Southern blot hybridization
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塔什库尔干羊FecB基因非探针法高分辨率熔解曲线分型方法的研究 被引量:2
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作者 李浩 郭涛 +4 位作者 陈童 张璐 张云生 郑新宝 阿依努尔·亚森 《中国畜禽种业》 2023年第9期20-25,共6页
建立塔什库尔干羊FecB基因非探针法高分辨率熔解曲线分型方法,为塔什库尔干羊多胎类型选育奠定基础。试验选取塔什库尔干羊产双羔(多羔)母羊67只,双羔(多羔)羔羊136只,采集静脉血后,采用非探针法高分辨率熔解曲线对探究塔什库尔干羊Fec... 建立塔什库尔干羊FecB基因非探针法高分辨率熔解曲线分型方法,为塔什库尔干羊多胎类型选育奠定基础。试验选取塔什库尔干羊产双羔(多羔)母羊67只,双羔(多羔)羔羊136只,采集静脉血后,采用非探针法高分辨率熔解曲线对探究塔什库尔干羊FecB基因进行分型的条件。结果表明,115bp扩增引物聚合性以及温度的一致性较好,适合SNP位点的分型,且引物添加量为0.6μL时扩增效率较较好。镁离子浓度在2.4~3.2mmol/L时,扩增曲线和熔解曲线聚合性较好,反应模板浓度在50ng时,扩增曲线、熔解曲线和熔解温度差异曲线较符合塔什库尔干羊FecB基因分型的要求。通过使用优化路线,进行塔什库尔干羊FecB基因分型发现,母羊和羔羊不携带纯合型(BB),携带杂合型(B+)母羊占31.3%,羔羊占25.7%;携带野生型的母羊占68.7%,羔羊占74.3%。。可见,通过建立FecB基因非探针法高分辨率熔解曲线分型方法,筛选较优反应条件,可提高塔什库尔干羊多胎新品系培育的选种效率和选种准确性。 展开更多
关键词 塔什库尔干羊 FECB基因 非探针法 基因分型
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APC gene mutations in Chinese familial adenomatous polyposis patients 被引量:11
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作者 Sheng, Jian-Qiu Cui, Wei-Jia +7 位作者 Fu, Lei Jin, Peng Han, Ying Li, Shu-Jun Fan, Ru-Ying Li, Ai-Qin Zhang, Ming-Zhi Li, Shi-Rong 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2010年第12期1522-1526,共5页
AIM:To study the characteristics of APC(adenomatous polyposis coli)gene germline mutation in Chinese patients with familial adenomatous polyposis(FAP).METHODS:APC gene from 14 FAP families was amplified by polymerase ... AIM:To study the characteristics of APC(adenomatous polyposis coli)gene germline mutation in Chinese patients with familial adenomatous polyposis(FAP).METHODS:APC gene from 14 FAP families was amplified by polymerase chain reaction(PCR)and underwent direct sequencing to determine the micromutation type.For the samples without micromutation,the large fragment deletion of APC gene was examined by multiplex ligation-dependent probe amplification(MLPA).RESULTS:There were gene micromutations in 9 families with a micromutation detection rate of 64.3%(9/14),including 6 frameshift mutations(66.7%),1 nonsense mutation(11.1%)and 2 splicing mutations(22.2%).Large fragment deletions were detected by MLPA in 2 families.The total mutation detection rate of micromutations and large fragment deletions was 78.6%(11/14).CONCLUSION:The detection rate of APC gene germline mutation can be improved by direct sequencing combined with MLPA large fragment deletion detection. 展开更多
关键词 Adenomatous polyposis coli gene Familial adenomatous polyposis Large fragment deletion Multiplex ligation-dependent probe amplification MUTATION
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4种荧光原位杂交探针检测隐匿易位急性早幼粒细胞白血病的比较 被引量:1
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作者 杨慧 姜润秋 +5 位作者 郭睿 时雨 乔纯 钱思轩 李建勇 仇海荣 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2023年第1期57-62,共6页
目的:比较4种临床常用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)探针对罕见隐匿PML-RARα插入易位急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia, APL)的检测能力。方法:联合FISH、RT-PCR及常规染色体核型分析技... 目的:比较4种临床常用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)探针对罕见隐匿PML-RARα插入易位急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia, APL)的检测能力。方法:联合FISH、RT-PCR及常规染色体核型分析技术检测3例罕见APL病例相关融合基因及染色体异常,其中FISH技术采用4家不同公司PML-RARα探针进行检测。结果:FISH方法检测罕见插入易位PML-RARα融合时,由于片段短小极易出现假阴性的情况。4家不同探针FISH检测结果显示,美国Abbott公司探针3例PML-RARα融合基因检测均为阴性;英国Cytocell公司探针检测到2例阳性,1例阴性;武汉康录和广州安必平公司探针在3例中均成功检测到融合信号。结论:康录和安必平公司探针PML-RARα检出率高,是FISH检测此类罕见PML-RARα融合基因时的更优选择。 展开更多
关键词 急性早幼粒细胞白血病 PML-RARΑ融合基因 荧光原位杂交 FISH探针 隐匿易位
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甘宁黄土高原阿拉善黄鼠鼠疫疫源地鼠疫菌耐链霉素rpsL基因突变位点的检测
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作者 辛有全 李胜 +7 位作者 靳娟 张琪 杨晓艳 辛文媛 柏吉祥 彭文轩 代瑞霞 何建 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2023年第2期153-156,共4页
目的 通过检测甘宁黄土高原阿拉善黄鼠鼠疫疫源地鼠疫菌耐链霉素rpsL基因位点,掌握该地区鼠疫菌对链霉素的敏感性,以期为今后该地区鼠疫的治疗及临床用药提供参考依据。方法 根据鼠疫菌rpsL基因序列及我国发现的耐链霉素菌株(S19960127... 目的 通过检测甘宁黄土高原阿拉善黄鼠鼠疫疫源地鼠疫菌耐链霉素rpsL基因位点,掌握该地区鼠疫菌对链霉素的敏感性,以期为今后该地区鼠疫的治疗及临床用药提供参考依据。方法 根据鼠疫菌rpsL基因序列及我国发现的耐链霉素菌株(S19960127)突变位点分别设计非突变菌株FAM(128∶A)和突变菌株VIC(128∶G)两种MGB探针,通过TaqMan-MGB探针法对1962—1991年分离自甘宁黄土高原阿拉善黄鼠鼠疫自然疫源地的49株代表性鼠疫菌进行耐链霉素rpsL基因突变位点检测。结果 被试菌株对应检测rpsL(128∶A),49株FAM染料RFU峰值均为阳性,其RFU峰值>2 000,阴性<200;对应检测rpsL(128∶G)未检测到VIC染料RFU峰值阳性菌株,RFU峰值均<200,阳性对照>1 000,该疫源地分离的鼠疫菌未发现耐链霉素菌株。结论 甘宁黄土高原阿拉善黄鼠鼠疫疫源地49株鼠疫菌对链霉素均敏感。TaqMan-MGB探针荧光定量PCR体系具有较高灵敏性、特异性,可应用于鼠疫菌耐药性监测。 展开更多
关键词 甘宁黄土高原 鼠疫菌 耐链霉素 RPSL基因 qRT-PCR TAQMAN-MGB探针
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GENE EXPRESSION OF GROWTH FACTOR RECEPTORS AND NEURONAL MARKERS IN NEURO BLASTOMA CELL LINES
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作者 陈杰 刘彤华 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1993年第1期46-50,共5页
Gene expression of nerve growth factor receptor (NGFR), epidermal growth factor receptor (EGFR), chromogranin A (CGA) and neuropetide Y (NPY)in 4 aeuroblsstoma cell lines without N-myc amplification was studied by win... Gene expression of nerve growth factor receptor (NGFR), epidermal growth factor receptor (EGFR), chromogranin A (CGA) and neuropetide Y (NPY)in 4 aeuroblsstoma cell lines without N-myc amplification was studied by wins Northern blot technique, N type cells expressed more NGFR mRNA than S type cells and have only little or no EGFR expression. S type cells had stronger expression of EGFR mRNA than that of N type cells accompanying with only less or even no NGFR expression. The results Indicated that difference of gene expression of theae growth factor receptors might be due to the various of tumor cell differetiation. Celli differentiating toward neurons gave more NGFR expression and cells prepared to be differentiating toward other direction might give more EGFR gene expression.Various gene expression of CGA and NPY In neuroblsstoma cell lines might be due to the presence of different stages of tumor cell differentiation and NGF only Induced differentiation of those neuroblastoma cells ready to be differentiation to neurons afterwards. 展开更多
关键词 Nerve growth tector receptor Epidermal growth tactor receptor Chromogranin A Neuropeptide Y gene expression Neuroblastoma cen line DNA probes.
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鸡滑液囊支原体TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立及应用 被引量:3
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作者 李梅 王柏林 +6 位作者 岳筠 杨美 宋春 朱二鹏 单春兰 文明 程振涛 《动物医学进展》 北大核心 2023年第3期15-20,共6页
为了快速、准确检测鸡滑液囊支原体(MS),对MS标准株vlhA基因进行分析,设计并合成特异性引物和探针,优化反应条件,构建了基于vlhA基因的TaqMan实时荧光定量PCR快速检测方法。结果显示,所构建方法标准曲线所对应的相关系数R^(2)=1.000,斜... 为了快速、准确检测鸡滑液囊支原体(MS),对MS标准株vlhA基因进行分析,设计并合成特异性引物和探针,优化反应条件,构建了基于vlhA基因的TaqMan实时荧光定量PCR快速检测方法。结果显示,所构建方法标准曲线所对应的相关系数R^(2)=1.000,斜率S=-3.452,截距I=43.950,表明标准质粒浓度与Ct值的线性关系良好;该方法除MS外,其他参考菌(毒)株均无目的基因扩增,其最小检测浓度为1×10^(1)copies/μL,组内重复及组间重复的变异系数均低于0.1;运用所建立方法与普通PCR方法对4份疑似MS临床样本进行检测,检测结果完全相符合;应用该方法对贵州省7个地区107份疑似MS样本进行检测,发现总体阳性率为26.17%。说明建立的方法具有较好的特异性、敏感性和重复性,可应用于临床检测。 展开更多
关键词 鸡滑液囊支原体 vlhA基因 TAQMAN探针 实时荧光定量PCR
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微生物检测技术在食品检验中的应用 被引量:1
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作者 黄娟 《食品安全导刊》 2023年第8期174-176,共3页
微生物会导致食物腐坏变质,引起食品安全问题,因此加强食品微生物检测对确保人们的饮食安全有重要意义。传统的食品微生物检验耗时长、工序繁杂,已无法满足当前食品微生物检验的需要,免疫学技术、PCR技术、电阻抗技术等多种检测技术的... 微生物会导致食物腐坏变质,引起食品安全问题,因此加强食品微生物检测对确保人们的饮食安全有重要意义。传统的食品微生物检验耗时长、工序繁杂,已无法满足当前食品微生物检验的需要,免疫学技术、PCR技术、电阻抗技术等多种检测技术的投入应用,有效保障了食品安全。本文从食品微生物检验的内涵入手,详细阐述了微生物检测技术在食品检验中的应用,提出了食品微生物检验质量的控制举措,以供食品生产、监管单位相关人士参考。 展开更多
关键词 食品安全 微生物 检测技术 基因探针检测法 表面等离子体共振检测法
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深圳地区孕产前人群脊髓性肌萎缩症基因检测及产前诊断 被引量:3
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作者 王丽娟 宋雅琴 +6 位作者 高慧 胡芷洋 王英兰 马迪 许曼 聂锐 郭辉 《现代妇产科进展》 北大核心 2023年第5期360-364,共5页
目的:调查深圳地区孕产前人群脊髓性肌萎缩症(SMA)携带率,研究SMA基因型分布频率并分析携带者SMN1拷贝数减少的遗传学机理,探讨临床实践中SMA产前诊断指征。方法:采用多重连接探针扩增(MLPA)技术检测3162例深圳孕产前个体以及384例胎儿... 目的:调查深圳地区孕产前人群脊髓性肌萎缩症(SMA)携带率,研究SMA基因型分布频率并分析携带者SMN1拷贝数减少的遗传学机理,探讨临床实践中SMA产前诊断指征。方法:采用多重连接探针扩增(MLPA)技术检测3162例深圳孕产前个体以及384例胎儿的SMN1和SMN2外显子7、外显子8(SMN1-E7,SMN1-E8,SMN2-E7,SMN2-E8)拷贝数。对疑似“2+0”家系个体额外分析单核苷酸多态性(SNP)位点g.27134T>G、g.27706-27707delAT。结果:孕产前人群共检出66例缺失型携带者,携带率为2.09%。根据“SMN1-E7_SMN1-E8_SMN2-E7_SMN2-E8”拷贝数进行基因分型,携带者中共发现6种基因型,可归于基因缺失或转换等4类遗传学原因,其中最常见的原因是SMN1缺失。本研究产前诊断样本中未检出SMA患儿,但夫妇双方或单方为携带者的产前诊断样本中均检出SMA缺失型携带胎儿。疑似“2+0”家系个体未检出相关SNP,尚不能确定“2+0”特殊携带存在与否。结论:本研究首次报道了深圳地区孕产前人群SMA携带率(缺失型变异);揭示了研究群体SMN1、SMN2基因型分布;并通过分析携带者遗传学原因,为认识疾病机制提供了理论基础。临床实践中,建议产前夫妇先明确SMA基因信息,夫妇同为携带者按标准流程产前诊断;其他情况需详细告知检测残余风险,知情同意后行产前诊断。 展开更多
关键词 脊髓性肌萎缩症 携带者筛查 产前诊断 多重连接探针扩增 基因转换
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SMA基因筛查和诊断技术的应用研究
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作者 李乐 周鑫 +1 位作者 戴翔 曹翠 《中国计划生育学杂志》 2023年第10期2488-2490,共3页
目的:对10例中国人脊髓性肌萎缩症(SMA)家系进行基因诊断与产前诊断,为临床筛查、诊断SMA方法提供参考。方法:收集SMA家系患者及父母的临床资料、外周血和羊水样本,并提取DNA。应用荧光定量PCR(qPCR)检测基因突变型,应用多重连接探针扩... 目的:对10例中国人脊髓性肌萎缩症(SMA)家系进行基因诊断与产前诊断,为临床筛查、诊断SMA方法提供参考。方法:收集SMA家系患者及父母的临床资料、外周血和羊水样本,并提取DNA。应用荧光定量PCR(qPCR)检测基因突变型,应用多重连接探针扩增技术(MLPA)对其结果进行验证。结果:qPCR结果显示患者均为SMN1基因外显子7纯合缺失,父母均为7号外显子杂合缺失。MLPA结果显示患者均为SMN1基因7、8外显子纯合缺失,父母均为7、8外显子杂合缺失。羊水样本中,1例SMN1基因7、8外显子纯合缺失,2例SMN1基因7、8外显子杂合缺失,1例SMN1基因7、8外显子未见缺失。结论:qPCR检测方法简单、快速、经济,且结果稳定适合SMA的初步诊断和大规模人群筛查,结合MLPA,是临床的高效、经济且稳定的SMA基因诊断方法。 展开更多
关键词 脊髓性肌萎缩症 基因 荧光定量PCR 多重连接探针扩增技术
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