2型糖尿病与脂蛋白脂酶基因HindⅢ酶切位点的多态性

为探讨 2型糖尿病与脂蛋白脂酶基因HindⅢ多态性是否有关联。采用限制性片段长度多态性分析方法 ,对中国成都地区 2 4 8名 (健康成人 1 35名 ,2型糖尿病患者 1 1 3名 )汉族人的脂蛋白脂酶基因内含子 8HindⅢ酶切位点多态性及其与血脂、载脂蛋白水平的关联进行了研究。结果显示 ,2型糖尿病组血清TG、TC、apoB1 0 0、apoCⅡ、apoCⅢ、apoE水平及TG HDL C比值较对照组显著升高 (P <0 0 0 1 ) ,同时HDL C、apoAⅠ水平显著降低 (P <0 0 0 1 )。 2型糖尿病组H +H +基因型和H +等位基因频率较对照组显著升高 (分别为 0 6 37vs0 31 8,P <0 0 1和 0 770vs 0 5 4 8,P <0 0 1 )。结果提示 ,2型糖尿病与脂蛋白脂酶基因HindⅢ酶切位点多态性有一定关联。

脂蛋白脂酶基因HindⅢ多态性与2型糖尿病合并冠心病和胰岛素抵抗的相关性研究

目的:探讨脂蛋白脂酶基因HindⅢ多态性与2型糖尿病(DM)合并冠心病及胰岛素抵抗的关系。方法:随机选择2型DM患者203例,其中合并冠心病(CHD)76例(A组),无CHD的2型DM患者127例(B组),健康对照93例(C组),相互间无血缘关系;采用PCR-RFLP方法检测所有受试者脂蛋白脂酶(LPL)基因HindⅢ限制性酶切位点多态性,测量其血脂、血糖水平、DM组空腹胰岛素水平并进行体格检查,用HOMA模型公式计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛细胞敏感指数(HOMA-IS)。结果:DM组及对照组3种基因型均检出,为纯合子H+H+型、H-H-型,杂合子H+H-型;两组间基因型和等位基因分布频率差异无统计学意义(P>0.05);A组H+H+型56例,非H+H+型(包括H+H-型、H-H-型)20例,与B组患者差异有统计学意义(P<0.01);A组患者LPL基因H+H+型HOMA-IR明显高于非H+H+型者(P<0.01),且高于B组H+H+型和非H+H+型者(P<0.01)。同时,A组血TG升高、HDL降低,与B组、健康对照相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:高TG、低HDL是DM合并CHD的危险因素,LPL基因H+H+型携带者是DM发生CHD的易感亚群,LPL基因H+H+型与DM合并CHD患者胰岛素抵抗相关。

BclⅠ和HindⅢ位点在家系性血友病A基因诊断的意义

本研究旨在探讨FⅧ基因内含子18的BclⅠ及内含子19的HindⅢ多态性位点在血友病A(haemophiliaA,HA)患者及家系成员的基因诊断与携带者检出中的应用价值。对8个HA患者及其家系成员45人运用聚合酶链反应-限制性片断多态性(polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法对X染色体FⅧ基因内含子18的BclⅠ及内含子19的HindⅢ位点进行多态性分析。应用中国遗传咨询网在线家系图绘制工具PediDraw软件绘制家系图。结果表明,联合检测BclⅠ及HindⅢ位点可对8个HA家系中的5个作出诊断,诊断率约为62.57%,且有2个家系同时伴有2个位点的突变。该8个家系11名可疑携带者中6名可作出携带者诊断,携带者的检出率为54.5%。结论:联合运用BclⅠ及HindⅢ位点进行HA患者家系分析可提高HA患者及携带者的诊断率。

脂蛋白脂酶基因HindⅢ多态性与冠心病及血脂的关系

目的 研究上海地区脂蛋白脂酶 (LPL)基因HindⅢ多态性与冠心病及血脂的关联。方法 采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)检测了 10 3例冠心病人和 12 8例正常对照者的HindⅢ多态性 ,并测定了血脂水平。结果 在正常对照组中 ,H 等位基因频率为 0 188,在冠心病组中 ,H 等位基因频率为 0 15 5 ,冠心病组H 等位基因频率略低于对照组 ,但无显著差异。在冠心病组女性中 ,H 等位基因频率低于对照组 ,差异接近显著 (P =0 .0 5 8)。在总研究组中 ,H 等位基因携带者的Trig、HDL、TC、LDL、LP(a)浓度与非携带者相比无显著差异。但在女性中 ,H 等位基因携带者的Trig显著低于非携带者 (P <0 .0 5 )。结论 LPL的HindⅢ基因多态性可能在特定性别中显示与冠心病或脂质水平的关联 ,在整个人群的水平 。

吉林省地区朝鲜族和汉族健康人群LPL基因HindⅢ酶切位点多态性分布的研究

目的分析我国吉林省地区朝鲜族和汉族健康人群脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)基因HindⅢ酶切位点多态性的分布。方法应用聚合酶链反应(polimerase chain reaction,PCR)等技术检测66例朝鲜族和90例汉族LPL基因多态性,并将其基因型和等位基因在两族人群中的分布进行统计学分析。结果朝鲜族人群LPL基因P+P+基因型,P+P-基因型和P-P-基因型频率分别为57.58%,33.33%和9.09%;汉族人群分别为73.33%,24.44%和2.22%,两组基因型的分布差异具有显著性(P=0.049)。朝鲜族人群P+等位基因和P-等位基因频率分别为74.24%和25.76%;汉族人群分别为85.56%和14.44%,两组等位基因的分布差异具有显著性(P=0.012)。结论 LPL基因HindⅢ酶切位点多态性在中国吉林省地区朝鲜族和汉族人群中的分布差异有显著性。

中国人内源性高甘油三酯血症与脂蛋白脂酶基因HindⅢ多态性的关系

为了解中国人内源性高甘油三酯血症与脂蛋白脂酶基因多态性是否相关 ,用聚合酶链反应—限制片长多态性方法对成都地区 2 0 0例内源性高甘油三酯血症患者及 2 0 2例血脂正常者脂蛋白脂酶基因HindⅢ酶切位点的多态性及其血脂、载脂蛋白水平进行了研究。结果发现 ,内源性高甘油三酯血症患者和正常人均以H2H2纯合子基因型为主 ,内源性高甘油三酯血症组H2等位基因频率较对照组增加 (0 .85 5比 0 .745 ,P <0 .0 1) ;而H1等位基因频率内源性高甘油三酯血症组则明显低于对照组 (0 .145比 0 .2 5 5 ,P <0 .0 1)。H2H2基因型者血浆甘油三酯、载脂蛋白CⅡ、CⅢ水平、甘油三酯与高密度脂蛋白的比值均显著高于H1H1基因型者 (P <0 .0 1) ,比H1H2基因型者也明显增加 (P <0 .0 5 )。此结果提示 ,脂蛋白脂酶基因内含子 8HindⅢ酶切位点的多态性与中国人内源性高甘油三酯血症有一定的相关性。

骨钙素基因HindⅢ多态性与体质量指数变异的相关联性:南昌地区绝经前女性390例调查(英文)

背景:体质量指数(BMI)是研究肥胖的常用表型,它是由多基因决定的复杂性状。目的:验证骨钙素基因HindⅢ多态性是否与体质量指数的变异相关联。方法:征集南昌当地绝经前女性390例,并测量身高和体质量。用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法对所有个体的骨钙素基因HindⅢ位点进行基因分型。结果与结论:骨钙素HH,Hh和hh基因型频率分别为0.077,0.408和0.515。骨钙素基因型分布符合哈的温格尔平衡(P>0.05)。骨钙素基因HindⅢ与体质量指数存在显著的关联(P=0.002),它可以解释大约5.47%体质量指数的变异。HH基因型个体的体质量指数最高[(22.81±0.73)kg/m2],Hh基因型个体的体质量指数居中[(21.50±0.53)kg/m2],而hh基因型个体的体质量指数最低[(20.23±0.63)kg/m2]。因此,HH和Hh基因型个体的体质量指数比hh基因型个体的体质量指数分别高大约12.75%和6.28%。文章首次在健康绝经前女性中报道骨钙素基因HindⅢ多态性与体质量指数的变异相关联。

脑梗死患者脂蛋白脂酶基因HindⅢ多态性分析

目的:探讨脑梗死与脂蛋白脂酶基因HindⅢ多态性是否有关联。方法:用PCR-RFLP法来检测脂蛋白脂酶基因HindⅢ多态性,其中健康对照者60例,脑梗死患者79例,测定所有样本的血脂水平。结果:①脑梗死患者组H+/+基因型和H+等位基因频率较对照组升高;②脑梗死患者组血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)水平较对照组升高(P<0.05);同时HDL、载脂蛋白(Apo)AⅠ水平降低(P<0.05)。结论:脑梗死与脂蛋白脂酶基因HindⅢ多态性有一定关联。

鲫鱼HindⅢ高重复DNA序列的分子克隆(英文)

基因组DNA高重复序列的研究有助于解释许多重要的生命现象 ,如基因调节、基因转座、基因进化等 ,还可以用于进行种群的遗传分析。鱼类的DNA高重复序列研究资料较少 ,曾在鲤科鱼类发现HindⅢ高重复序列家族。本研究用HindⅢ内切酶消化 ,从鲫鱼 (Carassiusauratusauratus)基因组DNA也克隆出一种独特的高重复序列。序列测定揭示该重复序列长度为 175bp ,在单倍体基因组的拷贝数为 1× 10 5。鲫鱼HindⅢ高重复序列与鲫鱼属 (Carassius)其它同类已知的高重复序列存在某种程度的变异 。

中国人汉族群体Ⅷ因子基因HindⅢ多态性位点研究

用PCR法扩增207个无亲缘关系的X染色体Ⅷ因子基因19内含子，用HindⅢ酶切进行Amp－RFLPs分析，查明中国人HindⅢ多态性位点频率为0．29．妇女杂合于频率为0．365，表明这个指数对检测甲型血友病携带者和产前基因诊断有足够高级的信息量，可应用于临床。

新疆塔吉克族健康人群脂蛋白脂酶Hind Ⅲ基因多态性研究

目的探讨脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)基因HindⅢ酶切位点多态性在塔吉克族健康人群中的分布及其在不同民族间的分布差异。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术检测91例塔吉克族(男性36人,女性55人)LPL基因型并计算出其基因型频率及等位基因频率,并通过查阅文献[10-17]结合统计学软件进行了不同种族间的基因型分布差异比较。结果塔吉克族91例正常人群中H+H+,H+H-,H-H-基因型频率分别为62.64%,31.87%,5.49%,H+,H-等位基因频率分别为78.57%,21.43%。两组男女人群在基因型频率和等位基因频率上均无显著的统计学差异(P=0.652,P=0.187)。而与美国,法国,英国,韩国,印度等人群间比较,基因型和等位基因频率均存在极显著和显著差异(P<0.01,P<0.05),与广西和吉林人群比较差异无显著(P>0.05)。结论新疆塔吉克族人群中存在LPL基因HindⅢ酶切位点多态性在同族男女间无显著性差异,可在不同种族间存在着较大的差异,这种差异可能是导致某些疾病在不同种族间的发现率和临床表现存在显著不同的因素之一。

脂蛋白脂肪酶基因HindⅢ多态性与糖尿病关联性的Meta分析

目的对脂蛋白脂肪酶(LPL)基因HindⅢ多态性与糖尿病(DM)研究的新进展进行Meta分析。方法检索PubMed、OvidSP、Web of Science、CBM、中国知网和万方数据中有关LPL HindⅢ多态性与DM的病例-对照研究,由2位研究者独立按筛选标准分析文献、提取资料并进行质量评价,采用Stata14.0软件完成Meta分析。结果纳入20篇文献的21组数据,共计DM患者2 634例,对照组3 375例。Meta分析结果显示,G等位基因(OR=0.83,95%CI:0.69~0.99,P=0.04)和显性模型[(TG+GG)vs.TT:OR=0.79,95%CI:0.63~0.99,P=0.04]与DM发病风险降低具有相关性。与TT基因型相比,TG+GG基因型和GG基因型DM患者血浆三酰甘油水平明显降低,TG+GG基因型DM患者总胆固醇水平显著降低,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显升高。结论 LPL HindⅢ多态性G等位基因和TG+GG基因型可能是DM的保护因素,可通过改善脂代谢异常,降低DM的发病风险,但仍需大规模、高质量的临床研究进一步明确。

应用PCR技术对凝血因子Ⅷ基因内HindⅢ和BelⅠ多态性的研究

在甲型血友病携带者诊断和产前诊断中．目前多采用PCR／RFLPs分析，酶解彻底性问题是酶谱分析的关键。在本研究中，我们应用PCR技术选择扩增凝血因子Ⅷ（FⅧ）基因内含HindⅢ和BclⅠ多态性酶切位点的特异片段，酶解后分析它们的多态信息量（PIC）。结果HindⅢ的PIC为0．385，BclⅠ为0．365，而且两者存在高度连锁不平衡关系。其中HindⅢ扩增片段中含两个酶切位点，一个是固定的，可作为内参照，另一个是多态性，因有自身对照，酶解就不存在不彻底问题，结果准确可靠。在30名受检女性中，HindⅢ杂合率为43．3％，Bcll为40％；15个家系中有4个既可用Bcll又可以用HindⅢ多态位点进行分析，对其中8名可疑携带者进行基因分析诊断出基因携带者3个。我们的研究表明，HindⅢ多态性酶切位点是PCR／RFLPs方法中值得首先考虑的一个酶切位点。

基于3A组装的多拷贝基因策略优化重组水蛭素变体Ⅲ的生产

水蛭素变体Ⅲ(Hirudin varidantⅢ,Hv3)是一种从水蛭中提取的活性成分,在预防和治疗白内障方面具有潜在作用。为了制备足量Hv3用于进一步的临床前应用研究,该研究开发了一种在谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)中高效、稳定表达重组水蛭素变体Ⅲ(recombinant Hirudin varidantⅢ,Rhv3)的办法。首先,在C.glutamicum中构建含Ptac启动子和CspA信号肽的Rhv3分泌表达菌株,比较其在不同培养基中的表达情况。结果表明在BHI培养基中Rhv3活性最高,达到3.02×10^(3) ATU/L。为进一步提升Rhv3产量,通过核糖体结合位点(ribosome binding site,RBS)筛选,选用RBS1应用于Rhv3多拷贝菌株构建和表达。然后利用3A组装技术构建含不同信号肽和不同拷贝数的Rhv3分泌表达菌株进一步优化其产量。通过放大发酵培养,Rhv3产量达到1.89 g/L,活性达到10.91×10^(3) ATU/L。最后利用镍柱对Rhv3进行简单纯化,其纯度达到90%。该异源表达策略有效提高Rhv3表达量,为Rhv3的重组生产提供了一种质量可靠、低成本的表达体系。

铽（Ⅲ）探针法研究一些金属离子与DNA的作用

本文首次选用Ｔｂ（Ⅲ）作为荧光探针，研究了ｃｄ（Ⅱ）、Ｚｎ（Ⅱ）、Ｃａ（Ⅱ）、Ｍｇ（Ⅱ）与ＤＮＡ反应的结合部位。结果表明：Ｃｄ（Ⅱ）、Ｚｎ（Ⅱ）在ＤＮＡ上有两种结合部位，即ＤＮＡ双螺旋外侧的磷酸基和内侧的碱基鸟漂呤上的Ｎ－Ｔ。而ｃａ（Ⅱ）、Ｍｇ（Ⅱ）在ＤＮＡ上只有一个结合部位即磷酸基。说明Ｔｂ（Ⅲ）不仅可以作为ＤＮＡ构象及ＤＮＡ单链成分、不配对碱基残余的探针，而且可以用它探测一些金属离子与ＤＮＡ反应的结合部位。

背部供皮区修复儿童大面积Ⅲ度烧伤创面

目的:在儿童大面积Ⅲ度烧伤创面修复困难,文中探讨应用背部供皮区修复儿童大面积Ⅲ度烧伤创面的优点。方法:选择15例儿童大面积烧伤病例,其中年龄最小18个月,最大11岁,平均年龄7.6岁。平均Ⅲ度烧伤面积12.6%总体表面积(TBSA)。均采用背部作为主要供皮区。如背部供皮区不足于修复全部创面,则优先修复关节等功能部位。结果:移植皮片绝大部分成活,供皮区一期愈合。经6个月到3年随访,移植皮片柔软,外观满意,局部功能恢复好。供皮区瘢痕增生轻微,外观影响不大。结论:背部供皮区面积大,真皮层厚,皮片质量好,取皮后愈合快,愈合后能平卧加压,疤痕增生轻,且部位隐蔽,不影响外观,是修复儿童大面积Ⅲ度烧伤创面的良好选择。

人及小鼠肝细胞膜载脂蛋白 CⅢ受体的研究

用^(125)I 标记载脂蛋白 CⅢ (apoCⅢ)为配体,采用聚乙二醇沉淀分离法,建立了小鼠肝细胞膜 apoCⅢ 受体(结合位点)放射分析法,并对人及小鼠肝细胞膜 apoCⅢ结合位点的特性进行了研究.

Eu(Ⅲ)离子光谱探针配合物Eu(DMBM)(TPPO)_2(NO_3)_2中Eu(Ⅲ)的格位

77K下测得的激光激发光谱和发光光谱表明,配合物Eu(DMBM)(TPPO)_2(NO_3)_2(DMBM:二对甲氧基苯甲酰甲烷;TPPO:三苯基氧化膦)中的Eu(Ⅲ)离子具有两种晶格格位。~5D_0→~7F_I(0～2)跃迁光谱说明这两种铕(Ⅲ)格位的点群对称性分别是C_(2v)和C_1(或C_2或C_5)。有较高对称性(C_(2v))的格位在配合物中占优势。

Eu(Ⅲ)离子发光探针——Eu(MFA)_3phen配合物的合成和荧光光谱

首次合成 Eu(MFA)_3 phen(MFA:对甲氧基苯甲酰基-呋喃甲酰基甲烷;phen:1,10-二氮杂菲)配合物,并以元素分析、IR 和~1HNMR 进行表征.在77K 测定了配合物的高分辨光谱.仔细分析配合物的荧光光谱,可以认为由于配位体的易变性而形成了2种 Eu(Ⅲ)格位.利用 Eu(Ⅲ)发光探针确定了 Eu(Ⅲ)离子的亚能级并讨论了格位对称性.

嗜热酸性Ⅲ型普鲁兰多糖水解酶TK-PUL保守基序中关键氨基酸残基对其催化性质的影响

对嗜热酸性Ⅲ型普鲁兰水解酶TK-PUL保守基序中非保守氨基酸残基进行定点突变,通过比较TK-PUL与突变体的酶学性质,确定保守基序中关键氨基酸残基对其催化性质的影响。TK-PUL保守基序Ⅱ中I500W位点变化不影响其最适反应pH值、pH值稳定性、最适反应温度、热稳定性,但使其α-淀粉酶活性和普鲁兰酶活性均明显降低。动力学常数测定结果显示,突变体I500W以麦芽三糖为底物的k_(cat)/K_(m)值基本不变,以异潘糖为底物的k_(cat)/K_(m)值约为TK-PUL的64.78%。结果表明,TK-PUL保守基序II中第500位氨基酸残基Ile对其水解糖苷键的偏好性起到重要作用。TK-PUL中I500W位点变化不影响其α-1,4-糖苷键水解活性,但使其α-1,6-糖苷键水解活性明显降低。本研究有助于深入理解TK-PUL的双功能催化机制,也可为TK-PUL的分子改造提供理论依据和设计思路。