应用luzindole建立双足大鼠脊柱侧凸模型

目的:探讨应用褪黑素拮抗剂luzindole建立双足大鼠脊柱侧凸模型的可行性。方法:健康刚断乳SD大鼠30只,随机分为A、B、C、D、E共5组,每组6只。A、B、C、D四组通过截去双前肢和尾巴建立双足大鼠模型,A、B、C三组每天18:00～20:00点间腹腔注射褪黑素拮抗剂luzindole,剂量分别为0.2mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg;D组每天相同时间腹腔注射同体积的生理盐水;E组作为空白对照组。观察3个月,每只大鼠每天称重,每间隔1个月摄脊柱全长正位X线片,观察各组大鼠体重变化及侧凸发生情况。结果:A、B、C三组共有7只大鼠发生了脊柱侧凸,发生率为38.9%,其中A组有3只发生了脊柱侧凸,Cobb角为29°～34°,较B、C两组显著(P<0.05);D、E两组均未发生脊柱侧凸。不同时间点5组大鼠体重均有增加,体重增加最多的是注射褪黑素拮抗剂剂量最大的C组。结论:对双足大鼠使用0.2mg/kg褪黑素拮抗剂luzindole能成功建立脊柱侧凸模型;并且可促进大鼠的生长。

Neu-p11/Luzindole在胰岛素抵抗脂肪细胞模型中对脂联素/内脏脂肪素的影响

脂联素(adiponectin)在调节胰岛素敏感性和葡萄糖的内稳态方面发挥着至关重要的作用,与胰岛素抵抗密切相关;内脏脂肪素(visfatin)可与胰岛素受体相互作用,发挥类胰岛素或抗胰岛素样作用,从而降低血糖,其量的变化与胰岛素抵抗的发生也有着紧密的联系。通过"鸡尾酒"法培养并分化3T3-L1前脂肪细胞,油红O染色鉴定脂肪细胞的形态和分化情况,高糖高胰岛素作用于脂肪细胞,建立胰岛素抵抗细胞模型;葡萄糖氧化酶法测定培养基中的糖含量,计算糖消耗量,验证胰岛素抵抗模型的建立。葡萄糖氧化酶法检测药物作用前后培养基中的糖含量,计算糖消耗量;Western-blot检测药物作用前后脂联素和内脏脂肪素表达的变化,来研究Neu-P11改善高糖高胰岛素引起3T3-L1脂肪细胞发生胰岛素抵抗的机制,以及葡萄糖摄取和脂联素及内脏脂肪素的变化;探讨褪黑素受体拮抗剂Luzindole与Neu-P11联合作用后,对葡萄糖摄取及脂联素和内脏脂肪素表达的影响。结果表明,高糖高胰岛素作用于分化成熟的脂肪细胞24 h后,糖消耗量与正常对照组细胞相比明显降低,其胰岛素敏感性也随之下降;胰岛素抵抗组细胞用褪黑素和Neu-P11处理后,糖消耗量与未处理组相比明显升高,胰岛素敏感性也随之上升;脂联素表达明显增高,与未处理组相比,差异有统计学意义;内脏脂肪素表达变化不明显,与未处理组相比,差异没有统计学意义。褪黑素、Neu-P11分别与褪黑素受体拮抗剂Luzindole联合作用于细胞后,细胞的脂联素表达水平与未加拮抗剂Luzindole的褪黑素、Neu-P11组相比明显下降,差异具有统计学意义,与未处理组相比,没有明显变化,差异没有统计学意义。因此,褪黑素和Neu-P11都可提高胰岛素抵抗脂肪细胞的胰岛素敏感性,增加糖消耗量,使脂联素表达上调,而对内脏脂肪素表达没有明显影响;褪黑素和Neu-P11可能是通过与褪黑素受体2(Mel1b)结合发挥上述作用的;褪黑素受体拮抗剂Luzindole能够阻断褪黑素和Neu-P11与褪黑素受体2(Mel1b)的结合。以上结果说明,Neu-P11和脂联素在治疗糖尿病方面都有着非常大的发展前景。

褪黑素对胃肠运动的影响

目的:研究不同浓度褪黑素(melatonin)对小鼠胃肠运动的影响。方法:雄性C57BL小鼠腹腔内注射1 mg/kg、5 mg/kg、50 mg/kg和75 mg/kg浓度的褪黑素,分别在15 min和45 min后,检测结肠排出玻璃珠的变化;同时,在注射褪黑素75 mg/kg前腹腔内注射褪黑素拮抗剂luzindole(5 mg/kg),研究其对褪黑素作用的影响。另外,通过全胃肠道运输实验(伊文斯蓝排出实验)检测腹腔内注射不同浓度褪黑素(1 mg/kg、5 mg/kg、25 mg/kg和75 mg/kg)时胃肠运动的变化。结果:腹腔内注射褪黑素后15 min,在低剂量组(1 mg/kg)结肠排出玻璃珠的时间缩短,与对照组比较差异显著(P<0.01);在高剂量组(75 mg/kg)结肠排出玻璃珠的时间明显延长(P<0.01),该抑制作用可被褪黑素拮抗剂luzindole有效拮抗(P<0.01)。腹腔内注射褪黑素后45 min,在5 mg/kg剂量时,结肠排出玻璃珠的时间明显缩短(P<0.01);而在1 mg/kg和50 mg/kg时,与对照组比较并无显著差异;在高剂量组(75 mg/kg)结果同上,即结肠排出玻璃珠的时间延长(P<0.05)。在胃肠道运输实验中,腹腔内注射褪黑素1 mg/kg和5 mg/kg后,运输时间缩短,排出伊文斯蓝粪粒所需时间减少,与对照组比较差异显著(均P<0.01);大剂量褪黑素(75 mg/kg)也明显延长胃肠道运输时间(P<0.01)。结论:低剂量褪黑素促进胃肠运动,高剂量褪黑素降低胃肠运动,后者作用可被褪黑素受体拮抗剂luzindole阻断。

褪黑素及其受体拮抗剂对哮喘小鼠模型气道炎症和气道重构的调节作用

目的观察褪黑素(MT)与褪黑素受体拮抗剂Luzindole(LUZ)对小鼠慢性哮喘模型中气道炎症和气道重构的影响。方法95只BALB/c小鼠随机分为对照组(NS组)、哮喘组(OVA组)、褪黑素治疗组(MT组)、激素治疗组(DXM组)及褪黑素受体拮抗剂Luzindole组(LUZ组)。OVA组、MT组和DXM组卵蛋白(OVA)致敏并反复雾化吸入OVA 2周、4周及8周,造成慢性哮喘模型,LUZ组OVA致敏后雾化吸入OVA 2周;MT组、DXM组和LUZ组分别腹腔注射MT、DXM和LUZ。测定单位气道面积炎症细胞数目、基底膜周径(Pbm)、上皮黏膜层面积(WAmuc)、平滑肌面积(WAm)、气管内壁面积(WAi)、胶原面积(Wcol)、杯状细胞比例和气管基底膜(/1 mm)上BrdU阳性细胞数目。结果OVA组、MT组及DXM组炎症细胞计数高于NS组,OVA组高于MT组和DXM组,LUZ组高于OVA 2周组(P均<0.05);MT组和DXM组之间以及各组2、4和8周之间炎症细胞计数差异无显著性。OVA组WAmuc/Pbm、WAm/Pbm、WAi/Pbm及Wcol/Pbm较NS组、MT组和DXM组增加,MT组和DXM组高于NS组(P均<0.05),各组2、4和8周之间差异无显著性。OVA组杯状细胞积分高于MT组和DXM组,LUZ组明显高于OVA 2周组(P均<0.05),MT组和DXM组间无差异,随着雾化时间延长杯状细胞积分逐渐降低。OVA组、MT组和DXM组气管基底膜上(/1 mm)BrdU阳性细胞数目高于NS组,OVA组高于MT组和DXM组,LUZ组高于OVA 2周组(P均<0.05),MT组和DXM组间无差异。在OVA组、MT组和DXM组,雾化吸入4和8周后BrdU阳性细胞数目高于雾化吸入2周后(P均<0.05)。结论早期使用MT可抑制气道炎症、细胞增生,部分抑制气道重构,其作用与地塞米松相当。

褪黑激素对青霉素所致癎样发作的预防作用(英文)

以往报道表明 ,褪黑激素 (melatonin ,MEL)对癫活动有作用 ,但结果并不一致。有实验表明MEL有抗作用 ,也有证据支持MEL有促作用。本文用海马内微量注射的方法 ,观察了MEL对青霉素所致样发作 (penicillin inducedseizures ,PIS)的影响 ,并对其与受体的可能作用作了探讨。发现 ,预先给予MEL对PIS有抑制作用 ,且该效应具有剂量依赖性。褪黑激素的作用可被Ⅰ型受体拮抗剂luzindole部分阻断 ,而Ⅱ型受体拮抗剂prazosine对此无影响。结果表明 ,MEL对PIS有预防作用 。

褪黑素对大鼠下丘脑视交叉上核神经元放电的影响

目的 观察内源性和外源性褪黑素对大鼠下丘脑视交叉上核神经元自发放电的影响。方法 在昼夜周期的不同时相 (主观白天的CT4～ 8和主观黑夜的CT16～ 2 0 ) ,采用松果腺摘除 (PINX)和氨甲蝶呤 (MTX)抑制褪黑素 (MEL)合成的方法 ,分别去除内源性MEL的主要来源后 ,观察大鼠SCN神经元自发放电的变化以及侧脑室注射外源性MEL的作用。结果 (1)不管是主观白天还是主观黑夜 ,SCN神经元存在规则放电、不规则放电和簇状放电 3种形式的自发放电 ,摘除松果腺和抑制MEL合成 ,对这 3种放电形式未见明显影响 ;(2 )SCN神经元的自发放电频率在主观白天高 ,在主观黑夜低。摘除松果腺和抑制MEL合成后 ,放电频率昼高夜低的节律性消失 ,放电频率有所提高 ;(3)SCN神经元对外源性MEL起抑制反应 ,高亲和力 (ML - 1)受体拮抗剂luzindole能阻断这种抑制效应 ,而低亲和力 (ML - 2 )受体拮抗剂哌唑嗪 (prazosin)则不能 ,提示MEL的抑制作用是由ML - 1受体介导的。结论 松果腺作为大鼠昼夜节律组构中的一个调整器 ,分泌MEL并由ML - 1受体介导 ,对SCN神经元自发放电有抑制性的调节作用。

褪黑素受体激动剂Neu-P11对3T3-L1小鼠脂肪细胞蛋白激酶B及其磷酸化的影响

糖尿病（diabetes mellitus,DM）特征性病理生理改变是高血糖、碳水化合物和脂肪代谢紊乱导致的胰岛素抵抗或胰岛素分泌的绝对或相对不足以2型糖尿病（type 2diabetes mellitus,T2DM）为主。T2DM发病原因主要是胰岛素信号转导通路破坏,产生胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）。

ATGL／HSL角度下解析Neu-p11改善胰岛素抵抗作用机制

目的探讨脂肪组织甘油三酯酶(adipose triglyceridelipase,ATGL)及激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive lipase,HSL)在褪黑素非选择性受体激动剂Neu-p11改善高糖高胰岛素(high glucose and insulin,HGI)诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)中的作用及机制。方法培养3T3-L1脂肪细胞,HGI诱导IR模型。以葡萄糖消耗量及细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)定量测定作为检测指标,Western blot检测蛋白水平的表达情况。结果 HGI孵育减少脂肪细胞葡萄糖摄取,促进细胞内TG积聚,同时伴有ATGL及HSL的蛋白表达下调。Neu-p11干预逆转了HGI对脂肪细胞的作用效应,而MT2竞争性拮抗剂luzindole却拮抗了Neu-p11的上述效应。结论 Neu-p11以MT2受体依赖性方式抑制IR脂肪细胞TG沉积,可能与其上调AT-GL、HSL蛋白的表达,促进TG水解相关。

Neu-P11在胰岛素抵抗脂肪细胞模型中对胰岛素受体后信号通路的影响

2型糖尿病为影响人类生存质量的主要病因之一,在过去十年里,2型糖尿病在全球范围的发病率显著增加[1]。其主要特征是胰岛素相对不足和存在胰岛素抵抗。2型糖尿病的胰岛素抵抗作用和人体肝脏、骨骼肌及脂肪组织中的胰岛素信号转导通路紊乱关系密切[2]。经典的胰岛素信号转导有胰岛素受体底物1（insulin receptor substrate 1,IRS-1）/磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K）和丝裂原激活蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）两条途径,但主要是通过胰岛素受体后IRS-1/PI3K途径来调节其代谢.